GC-TEA法测定卷烟主流烟气TSNAs前处理方法的改进

为改进气相色谱-热能分析联用法（GC-TEA）法测定卷烟主流烟气TSNAs的前处理方法,依托改良的索氏提取器将原方法中的提取、浓缩、柱层析净化、再浓缩四步有机结合,然后对卷烟主流烟气中的TSNAs进行测定。结果表明：1在10-4000 ng/m L的浓度范围内,4种TSNAs回归曲线的线性相关系数均大于0.999,该方法检测限在0.12-0.15 ng/cig之间,回收率在92.0%-102.3%之间,日内相对标准偏差在3.06%-5.80%之间,日间相对标准偏差在3.40%-6.93%之间;2将本方法与CORESTA N°63方法进行比较,两者结果无显著性差异。本方法采用改良的索氏提取器进行样品前处理可避免多次转移、浓缩,简化了操作步骤,缩短了前处理时间,有效减少分析误差,且有机溶剂用量大大减少,减少了对环境的污染,结果准确可靠,适用于主流烟气中TSNAs的分析检测。

N-2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖-茶多酚防龋齿漱口液的制备及评价

制备一种以N-2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖(N-2-hydroxypropyl trimethyl ammonium chloride chitosan,N-2-HACC)为主要成分、对致龋菌—变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)生长有抑制作用的新型漱口液。从10种具有抑菌活性的天然产物中筛选出抑菌效果最佳的物质,确定新型漱口液的最优组成成分,通过细胞毒性试验、生物相容性试验、急性毒性试验和口腔黏膜刺激试验评价漱口液的生物安全性。确定抑菌效果最优的天然产物为N-2-HACC和茶多酚,N-2-HACC和茶多酚的最低抑菌浓度分别为0.625和0.750 mg·mL^(-1)。以N-2-HACC和茶多酚为主要成分,制备了一种新型漱口液,漱口液中含1.2 mg·mL^(-1)N-2-HACC和1.0 mg·mL^(-1)茶多酚。该漱口液能够抑制S.mutans的生长,无细胞毒性,具有良好的安全性和血液相容性,溶血率符合要求。

利用^(15)N自然丰度法鉴别有机茶的可行性分析

由于缺少相应的检测技术,市场上常有用无公害农产品充当有机农产品销售的情况发生。有机茶在我国是最大的有机认证产品,同样面临这一问题,导致有机茶无法实现现质优价。根据δ15N在土壤、肥料及植物领域的最新研究结果及平衡原理,结合有机茶生产肥料使用要求,本文提出了一种鉴别有机茶是否施用过化肥的最新方法———δ15N分析法,并对其原理及可行性作了详细的分析说明。

天然无咖啡碱茶叶N-甲基转移酶基因克隆与序列分析

本研究以天然无咖啡碱南昆山毛叶茶为主要研究材料,以不同咖啡碱含量的英红9号茶树品种和红山茶等山茶属植物为对照,采用RT-PCR技术,克隆获得南昆山毛叶茶、英红9号和福云6号茶树品种的NMT基因全长,分别编码365、369和369个氨基酸。序列比较分析表明南昆山毛叶茶NMT基因与其它茶树NMT基因的核苷酸序列同源性高于86.5%,氨基酸序列同源性高于86.3%,并包含了六个保守序列、三个SAM结合区A、B’、C及一个保守域VFFF。基于同源性比较,推测核苷酸序列的差异可能是导致南昆山毛叶茶NMT基因活性改变、影响茶树体内咖啡碱代谢的原因之一。

合成茶树咖啡碱相关的N-甲基转移酶基因家族的克隆及序列分析

咖啡碱是茶叶中重要的功能成分,它以黄苷为底物,以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体,通过N-甲基转移酶(NMT)类催化的一系列甲基化反应合成的产物。根据NMT基因高度相似的特性,利用长片段PCR法和侧翼序列克隆技术分离了白叶一号6种NMTs的基因组DNA全长,其中有2种为已报道的茶树咖啡碱合成酶基因TCS1、TCS2,1种为假基因,另3种基因分别被命名为TCS3、TCS4、TCS5,基因结构分析发现这6种基因均由4个外显子和3个内含子组成。山茶属植物的NMTs可聚为5类,其中TCS4和TCS5为与其他基因的相似性相对较低的一类。这些结果为今后更好地从基因组水平上剖析茶树咖啡碱的遗传机制提供有用参考。

国内外主要品牌卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的对比分析

本文采用气相色谱-热能分析仪(GC-TEA)对卷烟主流烟气中主要4种烟草特有N-亚硝胺(TSNAs)进行了分析;优化了 前处理过程及仪器分析条件;建立了使用经抗坏血酸处理的玻璃纤维滤片收集卷烟主流烟气,用二氯甲烷萃取卷烟主流烟气中的 TSNAs,萃取液经碱性氧化铝层析柱纯化,TSNAs通过GC-TEA定量检测的分析方法;并对国内外较有代表性的98种卷烟样品 中的TSNAs进行了系统的分析测定。结果表明,混合型卷烟主流烟气中TSNAs的含量显著高于烤烟型卷烟;国外混合型卷烟中 NNK的含量高于国内混合型卷烟。这些研究结果为制定我国卷烟烟气中TSNAs含量限量标准、建立技术壁垒提供了可靠的技术 基础。

利用N^+离子诱变选育茶树良种初报

7个茶树品种无性系种子经N+离子注入诱变,M1代个别单株在叶面积、叶型、叶色、叶面隆起性及萌芽期、抗寒性等重要农艺性状上发生明显变异,说明N+离子注入对茶树种子有较为明显的诱变作用,在育种工作中可作为创造突变的一条重要途径。

不同土壤N_2O排放的研究

以森林和蔬菜土壤作对照,采用实验室培养研究了高产、中产和低产等三种茶园土壤N2O的排放水平,试验设不加氮(对照)与加氮[200mg/kg,(NH4)2SO4]二处理,在25℃恒温培养0、1、3、7和14d时分别取样检测N2O释放量。另外,选择两种茶园土壤研究了土壤含水量与加氮对N2O排放影响的交互作用。结果表明,对于不加氮的对照土壤组,高产茶园具有较高的N2O排放量,14d内平均日排放量高达11.26mg/(kg·d)(以纯氮计),显著高于其它四种土壤;但对于加氮处理组,以菜园土壤的N2O排放水平最高,极显著高于茶园和林地土壤;所有五种土壤加氮后,N2O排放量均有明显提高。茶园土壤N2O排放水平随着土壤含水量的提高而增加,并与施氮存在显著的正交互作用,当土壤含水量较高时施氮具有刺激N2O排放的作用。文章根据土壤培养期间NH4+和NO3-含量的变化就N2O形成机理进行了讨论。

硝酸盐、亚硝酸盐和烟碱对卷烟主流烟气中烟草特有N-亚硝胺的影响

研究了卷烟主流烟气中烟草特有N亚硝胺及其前体的相互关系,通过在卷烟烟支中分别加入硝酸盐、亚硝酸盐、烟碱,采用标准方法对烟气总粒相物进行捕集,捕集后的样品进行前处理,采用内标法对烟草特有N亚硝胺(TSNAs)进行气相热能分析仪(GCTEA)定量分析,分别研究了4种烟草特有N亚硝胺(NNN、NAT、NAB、NNK)及其总量与硝酸盐、亚硝酸盐和烟碱的相互关系。研究结果表明:硝酸盐、亚硝酸盐、烟碱均是烟草特有N亚硝胺的重要前体物质,随着这些前体物质含量的增加,卷烟主流烟气中的烟草特有N亚硝胺含量也增加,表现出显著的相关关系。

茶多酚早期干预对N-甲基亚硝基脲诱发膀胱肿瘤影响的实验研究

目的研究茶多酚早期干预是否能够抑制或拮抗N-甲基亚硝基脲诱发膀胱肿瘤的发生。方法将72只雌性Wistar大鼠随机分为对照组、实验组各36只,两组采用膀胱灌注法给予N-甲基亚硝基脲,对照组同时给予0.9%NaCl溶液灌胃,实验组予茶多酚灌胃;分别于实验后第3、5、7、9、11、13周处死6只大鼠获取膀胱标本,观察两组急慢性炎症、不典型增生和癌肿的发生率。结果对照组从第3周起发生膀胱黏膜不典型增生,第9周逐步出现膀胱癌,第13周癌变率100%;实验组未见膀胱癌发生;组间病理学分类情况比较,第13周癌变情况差异有统计学意义(P<0.05)。两组病理计分情况同期比较,除第3周外,其余观察时点差异均有统计学意义(P<0.05)。结论茶多酚可有效拮抗、抑制N-甲基亚硝基脲诱发膀胱肿瘤的发生。

茶叶阻断胃癌高发区人体内源性N-亚硝基脯氨酸合成

本文观察了绿茶水提取物对胃癌高发区人群体内N-亚硝基辅氨酸合成的影响。结果显示4.65g绿茶提取物(含维生素C75mg)可完全阻断高危人群体内过高的N-亚硝基脯氨酸合成(P<0.01),其效果强于同量维生素C(P<0.01)。受试者不同程度的胃粘膜病变对上述阻断作用无明显影响(P>0.05)。

茶叶对N-甲基苄基亚硝胺致DNA烷基化的影响

本实验给大鼠一次静脉注射144C-甲基苄基亚硝胺(14C-NMBzA,2.5mg/kg)后3～4小时处死,用高效液相色谱仪及液体闪烁计数器分离和测定大鼠食道等组织的DNA烷基化程度。结果发现饮乌龙茶和茉莉花茶2～3周的大鼠,食道上皮细胞DNA中的O6-甲基鸟嘌呤（O6-meG）含量呈不同程度的下降,为茶叶防癌作用机理的探讨提供了依据。

N-甲基PAM树脂的合成及其对水溶液中茶多酚的吸附性能研究

以大孔交联聚丙烯酰胺树脂(PAM树脂)为载体,合成了N-甲基PAM改性树脂并测定了其在水中的溶胀性能及对水溶液中茶多酚的吸附等温线。实验结果表明,改性树脂与载体树脂相比,亲水性减弱,对茶多酚的吸附能力增强。还探讨了改性树脂的吸附机理和吸附热力学,研究结果表明N-甲基PAM树脂对茶多酚的吸附属于氢键吸附,疏水作用也是吸附的推动力之一。所研究的吸附过程是一个吸热的、自发的、熵增加的过程。

应用GC/TEA法测定天然胶乳橡胶避孕套中可迁移亚硝胺

目的：验证国际标准ISO29941（（天然胶乳橡胶避孕套中可迁移亚硝胺的测定》中步骤B的方法“利用气相色谱／热能分析仪（GC／TEA）测定天然胶乳橡胶避孕套中可迁移亚硝胺含量”在我国的适用度。方法：抽样选取我国市场上销售的10个厂家20个批次的天然胶乳橡胶避孕套，根据国际标准ISO29941方法中的步骤B，将避孕套在水中浸提10min后，用二氯甲烷萃取，再经干燥和浓缩后利用GC／TEA检测从避孕套中迁移出的亚硝胺含量，内标法定量。结果：在检测的20批避孕套中，共6种亚硝胺被检出，迁移量分别为：N-亚硝基二甲胺，1．4～10．2ng／g，检出率55％；N-亚硝基二乙胺，1．3～6．7ng／g，检出率80％；N-亚硝基二丁胺，O．8～6．9ng／g，检出率20％；N-亚硝基哌啶，5．7ng／g，检出率5％；N-亚硝基吡咯烷，2．3ng／g，检出率5％；N-亚硝胺甲乙胺，2．5～9．7ng／g，检出率65％。总亚硝胺迁移量为4．6～18．2ng／g。结论：本方法简便、快速、准确，可以满足天然胶乳橡胶避孕套中可迁移亚硝胺的测定要求。

茶树N-甲基转移酶基因启动子克隆及功能分析

咖啡碱是茶叶中重要的功能物质,N-甲基转移酶(NMT)是其生物合成的关键酶。本研究以英红9号茶树新梢为材料,利用hiTAIL-PCR克隆NMT1基因启动子,并采用PlantCARE等在线软件分析其顺式作用元件。根据其元件组成,设计5'递减的启动子与GUS基因一起组建了融合载体转入烟草,利用GUS染色和定量PCR方法,分析了克隆的启动子功能及其对环境因子的响应。结果表明,克隆的NMT1基因启动子长767 bp,含有TATA-box、CAAT-box等真核生物启动子基本元件及多个与植物非生物胁迫相关的响应元件。以5'递减的NMT1启动子替换pBI121中的CaMV35S启动子,构建出与GUS融合的pA、pB、pC、pD载体。在烟草叶片中进行瞬时表达,不同长度的NMT1启动子均具驱动GUS表达功能,且长度越长驱动能力越强。以含全长NMT1启动子载体pA对烟草转基因,转基因烟草各组织均检测到GUS基因的表达且表达量叶>茎>根,叶片中的表达量为根部的3倍。对转基因烟草进行不同程度光照、温度、模拟干旱和脱落酸处理后,除40℃温度条件外,其他处理的叶片中GUS基因表达在处理前后均存在显著变化,表明NMT1启动子功能受外界环境因子的胁迫影响。

婴幼儿安抚奶嘴中N-亚硝胺和N-亚硝基物质释放量的测定不确定度评估

依据GB 28482-2012《婴幼儿安抚奶嘴安全要求》中对N-亚硝胺和N-亚硝基物质释放量的检测要求,用人工唾液模拟物对安抚奶嘴进行处理,以二氯甲烷作为溶剂,运用气相色谱-热能分析仪测定婴幼儿安抚奶嘴中N-亚硝胺和N-亚硝基物质释放量,并对该方法进行不确定度评估,依据《测量不确定度评定与表示指南》建立数学模型,进行不确定度的计算并合成不确定度。结果表明检测不确定度主要来源于标准曲线、样品重复性和标样纯度,11种标准物质的不确定度介于(0.116±0.023)mg/kg与(0.305±0.033)mg/kg之间,评定程序和方法符合规范要求,适用于同类型实验的不确定度评定。

博物馆“体验教育”理念的探索和实践——中茶博“茶+N”活动

本文通过中国茶叶博物馆开创"茶+N"的理念,设置各种与社会各阶层的相匹配的活动内容,增加博物馆的趣味性和开拓性,从而达到新形势下新型博物馆的新定位。

绿茶萃取物对N-亚硝基二乙胺体外合成的影响

目的研究绿茶萃取物对N-亚硝基二乙胺体外合成的影响。方法采用分级萃取法获得绿茶二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水提物,利用高效液相色谱法研究各萃取物主要成分,并在模拟胃液条件(37℃,pH 3)下萃取物与20 mmol/L亚硝酸钠、40 mmol/L二乙胺进行反应,分析其体外对N-亚硝基二乙胺(N-nitrosodiethylamine,NDEA)合成和NO_2^-清除的影响。结果二氯甲烷萃取物主要成分为咖啡碱,剩余水相中主要成分为多糖、蛋白质和氨基酸,2种萃取物对NDEA的合成无显著影响;乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物主要成分为茶多酚,能有效阻断NDEA的合成,在4 mg/mL条件下阻断率分别为51.9%和45.7%,其中EGCG含量与其阻断率呈显著正相关,酸性降低和温度升高有利于其阻断作用;乙酸乙酯萃取物在浓度低于1.6 mg/mL时可促进NDEA生成。结论绿茶萃取物的主要有效成分为茶多酚,能有效阻断NDEA合成,在高浓度、强酸性环境和升温条件下阻断作用更强。

茶叶对N—甲基苄基亚硝胺致DNA烷基化的影响

本实验给大鼠一次静脉注射~(14)C-甲基苄基亚硝胺(~(14)C-NMBzA,2.5mg/kg)后3～4小时处死,用高效液相色谱仪及液体闪烁计数器分离和测定大鼠食道等组织的DNA烷基化程度。结果发现饮乌龙茶和茉莉花茶2～3周的大鼠,食道上皮细胞DNA中的O~6-甲基鸟嘌呤(O~6-meG)含量呈不同程度的下降,为茶叶防癌作用机理的探讨提供了依据。

n型碲化铋基材料的制备及其热电性能研究

以Bi_2Te_(2.7)Se_(0.3)为基础配比,99.99%的高纯Te、Bi、Se为原料,通过高温真空熔炼合金化-无氧环境机械粉碎-精密筛分制粉-独创热压装置快速热压工艺,制备出块体n型碲化铋基热电材料。采用粒度分析仪、扫描电镜、氧氮分析仪对合金粉末的粒度和氧含量进行了测定,用X射线衍射仪对合金粉末的物相结构进行了表征,并对热压块体样品的抗弯强度进行测试。热电性能测试结果显示,所制备热压块体样品不同方向的Seebeck系数和ZT值(热电优值系数)基本相同,但电阻率和热导率有不同程度的取向,但与市购区熔热电材料相比取向度明显降低。热压块体样品的相对密度高达99%,抗弯强度达到87 MPa,最高ZT值约为0.7。该工艺的生产设备简单可靠,生产成本低,工作效率高,适合产业化。