茶多酚对心脏骤停大鼠复苏后海马神经元损伤及凋亡的影响

目的:观察茶多酚对心脏骤停大鼠复苏后海马神经元损伤及凋亡的影响。方法:选择SD大鼠18只,随机分为3组:假手术组(n=6)、盐水组(n=6)、茶多酚组(n=6)。盐水组及茶多酚组大鼠麻醉、插管后经食道起搏诱导心脏骤停,常规心肺复苏,自主循环恢复即刻分别给予静脉泵入生理盐水2mL/kg、茶多酚10mg/kg,监测大鼠1h后结扎血管放入笼内饲养。假手术组大鼠仅行麻醉、插管,未诱导心脏骤停,监测1h后结扎血管放入笼内饲养。自主循环恢复后48h处死大鼠取出海马组织,行HE染色观察病理形态学改变及TUNEL方法测定神经元凋亡情况。结果:茶多酚组大鼠海马区病理损伤及神经元凋亡程度均低于盐水组,盐水组的凋亡指数为(27.1±11.9)%,茶多酚组的凋亡指数为(4.9±2.2)%,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:茶多酚可减轻复苏后大鼠海马区病理损伤及凋亡程度,对神经元有一定保护作用。

茶多酚对窒息大鼠心肺复苏后远期存活及神经功能的影响

目的 观察茶多酚对窒息大鼠心肺复苏后远期存活及神经功能的影响.方法 健康雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠32只,经呼气末夹闭气管插管诱导窒息性心脏骤停,8 min后给予胸外心脏按压及机械通气.按压1 min时给予肾上腺素0.04 mg/kg,恢复自主循环的大鼠经静脉即刻随机给予盐水（n=16）或茶多酚（10 mg/kg,n=16）,观察自主循环恢复后72 h内复苏大鼠的存活时间及进行神经缺失评分.结果 茶多酚组存活时间显著长于盐水组[（44.88±20.58）h vs（29.38±18.01）h,P〈0.05],且72 h内神经缺失评分好于盐水组.结论 茶多酚可显著延长窒息大鼠心肺复苏后的远期存活时间,减轻复苏后神经功能损伤程度.

自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏后大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏(CA/CPR)后大鼠海马神经元凋亡的影响。方法将40只大鼠随机分为假手术组(sham)、CA/CPR模型组(model)、雷帕霉素(Rapa)组(CA/CPR+Rapa)及3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(CA/CPR+3-MA)。采用呼气末夹闭气管窒息法复制大鼠CA/CPR动物模型,分别给予自噬激动剂Rapa 0.2 mg/kg及自噬抑制剂3-MA 10 mg/kg进行干预。采用神经功能缺陷评分(NDS)评价CA/CPR大鼠神经功能;用TUNEL染色法检测大鼠海马神经元的凋亡变化;用RT-PCR和Western blotting法检测大鼠海马内微管蛋白轻链3(LC3)、Beclin-1、Bax、Bcl-2及Caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,CA/CPR模型组大鼠NDS评分明显降低;海马神经元TUNEL染色阳性细胞数明显增多,凋亡率显著升高;海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达上调,Bcl-2表达下调(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,CA/CPR+Rapa大鼠NDS评分明显降低,而海马神经元凋亡率明显有所增加,海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显上调,而Bcl-2表达则明显有所下降;CA/CPR+3-MA大鼠NDS评分明显升高,而海马神经元凋亡率下降,海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显下调,而Bcl-2表达则有所升高(P<0.05,P<0.01)。结论 CA/CPR后自噬水平升高促进海马神经元凋亡,自噬水平降低抑制海马神经凋亡,两者相互作用共同参与CA/CPR的病理过程。

茶多酚对心脏骤停/心肺复苏大鼠模型脑组织SOD表达及Caspase3/TUNEL阳性的影响

目的研究观察茶多酚对心脏骤停/心肺复苏大鼠模型脑组织过氧化物歧化酶(SOD)表达及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3/细胞凋亡(Caspase3/TUNEL)阳性的影响。方法选取SD大鼠90只,分为实验组(80只)和空白组(10只),两组大鼠均使用交流电对食管进行刺激。实验组在此基础上继续诱导大鼠发生心室颤动,并建立心脏骤停/心肺复苏大鼠模型。根据随机数字表法,将实验组大鼠分为茶多酚组和对照组两组,各40只大鼠。茶多酚组给予10 mg/kg茶多酚,对照组给予等量0.9%氯化钠溶液,于12 h、24 h、48 h、72 h,每个时间点对10只大鼠检测。采取免疫荧光标记法和Caspase3/TUNEL法分别对心脏骤停/心肺复苏大鼠模型脑组织SOD荧光密度和阳性率进行检测。结果心肺复苏后的12 h、24 h、48 h、72 h四个时间点,对照组大鼠模型脑组织和茶多酚组大鼠模型脑组织SOD荧光密度均显著低于空白组,差异具有统计学意义(P<0.01)。茶多酚组心脏骤停/心肺复苏大鼠模型脑组织的SOD荧光密度均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。心肺复苏后的12 h、24 h、48 h,两组心脏骤停/心肺复苏大鼠模型脑组织的Caspase3/TUNEL阳性率均无显著差异(P>0.05)。心肺复苏后的72 h,茶多酚组心脏骤停/心肺复苏大鼠模型脑组织的Caspase3/TUNEL阳性率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论采用茶多酚能增强心脏骤停/心肺复苏大鼠模型脑组织SOD的表达并降低Caspase3/TUNEL阳性率。

茶多酚通过下调JNK磷酸化抑制心搏骤停大鼠的神经细胞凋亡

目的探讨茶多酚（TP）对心搏骤停（CA）大鼠心肺复苏（CPR）后脑组织c-Jun氨基末端激酶1/2（JNK1/2）磷酸化和凋亡相关因子表达的影响。方法按随机数字表法将健康雄性SD大鼠分为假手术（Sham）组（n=6）、CA组（n=12）、TP组（n=12）。CA组和TP组经食道交流电刺激诱发心室纤颤（室颤），CA 5 min后行CPR，待自主循环恢复（ROSC）后即刻分别静脉注射10 mg/kg生理盐水（CA组）或TP（TP组），于ROSC后12、72 h各取6只大鼠脑皮质备检；Sham组不诱导室颤，于72 h取脑皮质备检。采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测脑组织磷酸化JNK1/2（p-JNK1/2）、JNK1/2、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）及凋亡基因Bax、Bcl-2的表达；原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测细胞凋亡情况；免疫荧光双染检测p-JNK/TUNEL双阳性细胞数。结果与Sham组比较，CA组脑组织JNK磷酸化水平增高，caspase-3、Bax表达增加，Bcl-2表达降低，ROSC 72 h镜下观察凋亡细胞明显增多。与CA组比较，TP组ROSC后12、72 h JNK磷酸化水平明显下降（p-JNK1/2与JNK1/2比值：3.200±0.060比5.700±0.210，1.400±0.060比5.400±0.090，均P〈0.05），caspase-3、Bax表达明显下调〔caspase-3（灰度值）：42.00±5.23比54.00±7.84，38.74±4.60比58.68±7.19；Bax（灰度值）：38.04±6.21比68.76±6.08，58.84±7.99比70.03±7.36，均P〈0.05〕，Bcl-2表达明显上调（灰度值：37.36±3.11比28.47±7.46，48.78±6.55比29.54±3.13，均P〈0.05），72 h细胞凋亡率明显降低〔（31.14±4.51）%比（45.87±3.95）%，P〈0.01〕，p-JNK/TUNEL双阳性细胞与TUNEL细胞比值明显降低（10.00±0.85比52.70±3.05，P〈0.01）。结论TP抑制CA大鼠CPR后的神经细胞凋亡与其抑制JNK1/2磷酸化有关。