端粒酶和p53及PCNA蛋白过度表达与胃癌临床病理特征的关系

目的:观察端粒酶活性、p53蛋白和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)在胃癌组织中的表达及其与胃癌分化、浸润和转移的关系。方法:端粒重复序列扩增(telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP)法检测58例胃癌和35例癌旁正常组织中端粒酶活性;采用免疫组化SABC法检测40例胃癌和35例癌旁正常组织中p53和PCNA的表达,并对端粒酶活性与临床病理特征以及p53和PCNA的表达的关系进行分析。结果:胃癌组织端粒酶活性、p53和PCNA阳性率分别为89%(49/55)、77.5%(31/40)和80%(32/40);癌旁正常组织端粒酶活性、p53和PCNA阳性率分别为11.4%(4/35)、8.5%(3/35)和14.2%(5/35),胃癌组织与正常组织相比差异有统计学意义,P=0.0256;胃癌不同分期及分化程度之间端粒酶活性的差异无统计学意义,P值分别为0.1741和0.0852,而且端粒酶活性与p53、PCNA表达之间无相关性,P=0.0859。结论:端粒酶活化、p53和PCNA表达均参与胃癌的发生和发展;端粒酶、p53和PCNA在胃癌分化、浸润中各自起着独立的作用;端粒酶、p53和PCNA同时高表达的患者具有较高的淋巴结转移率。

hTERT启动子调控的PUMA重组腺病毒的构建与鉴定

目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)及带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA-EGFP)。方法采用一系列的分子生物学技术将p53正向凋亡调控因子PUMA基因插入hTERT的启动子下游,再将EGFP为分子标记插入到PUMA基因下游,最终将构建好的载体装入腺病毒。双酶切实验证明重组腺病毒载体Ad-hTERT-PUMA和Ad-hTERT-PUMA-EGFP构建是否成功。结果载体均成功转配腺病毒。转染12h后,部分HEK293细胞出现了绿色荧光,可维持到72h。结论成功构建重组腺病毒载体Ad-hTERT-PUMA和Ad-hTERT-PUMA-EGFP。

胰液端粒酶活性检测在胰腺疾病鉴别诊断中的价值

目的 :探讨端粒酶活性推测在胰腺癌早期诊断中的价值。方法 :4 0例胰腺癌和 31例慢性胰腺炎患者均行ERCP抽取胰液 ,采用TRAP PCR SSCP和TRAP PCR ELISA两种方法分别进行定性、定量分析 ,同时检测胰腺癌细胞株 4株 ,正常胰液和正常胰腺组织测定其端粒酶活性做为对照。结果 :端粒酶定性分析 :胰腺癌组胰液中阳性率 67 5 0 % ( 2 7/40 ) ;慢性胰腺炎组 4 1 93% ( 13/31) ;胰腺癌细胞株全部为阳性 ,阳性率 10 0 % ( 4 /4) ;正常胰腺和胰腺组织均呈阴性 ( 0 /5 )。端粒酶定量测定 :胰腺癌组为1 4 75± 0 4 67;慢性胰腺炎组为 0 35 8± 0 4 79。胰腺癌细胞株为 1 84 2± 0 2 5 6。胰腺癌组胰液中端粒酶阳性率明显高于慢性胰腺炎组 ,P <0 0 5 ;胰腺癌患者组 ,高于慢性胰腺炎组 ,P <0 0 1。结论 :胰液中端粒酶活性测定可作为胰腺良恶性疾病鉴别诊断的重要依据 。

端粒酶和erbB4基因在非小细胞肺癌中表达的研究

目的研究端粒酶和erbB4基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与肺癌临床、病理的关系。方法应用TRAP法测定56例肺癌组织标本中端粒酶的表达。同时应用免疫组化法检测56例肺癌石蜡组织中erbB4的表达。记录56例肺癌患者5年生存情况。结果NSCLC组织中端粒酶和erbB4阳性表达率分别为75%(42/56)及89.3%(50/56)。端粒酶、erbB4表达与不表达在临床分期组间的差异有统计学意义(P=0.004、0.005),端粒酶表达与不表达患者5年生存率差异有统计学意义(P=0.0005)。结论检测端粒酶及erbB4表达有助于判断NSCLC临床特点及预后。