Histological Study on Reproductive Organ of Rana Temporaria Chensinesis David

The experiment was designed to study the histology of reproductive organ of Rana temporaria chensinesis David in reproductive season and dereproductive season, The results displayed that the sexual gland weight and oviduct weight of the Rana temporaria chensinesis David were significantly different between reproductive season and dereproductive season.

哈蟆油动物基原问题探讨

目的 :根据历史文献及现代在中国林蛙分类方面研究成果 ,确定哈蟆油的正品动物基原。方法 :查阅历代本草著作及相关历史文献资料与近代国内外对中国林蛙有关研究报道 ,进行整理、分析、总结。结果 :本草著作中记载的山蛤原动物为中国林蛙 ;中国林蛙是独立的种 ,而不是欧洲林蛙的一个亚种 ;中国林蛙有 4个亚种 ,分别为中国林蛙指名、兰州、康定、长白山亚种 ;哈什蟆的原动物为中国林蛙长白山亚种。结论 :中国林蛙长白山亚种为哈蟆油正品动物基原。

中国林蛙卵油的中枢抑制作用

目的揭示CO2 超临界萃取的中国林蛙卵油 (eggoilofRanatemporariachensinensisDavid ,EORTCD)的镇静和抗惊厥作用。方法通过自主活动监测、协同巴比妥催眠和士的宁诱发惊厥等实验 ,探索中国林蛙卵油的药效和最大效能 ,并与安定、佳静安定进行比较。结果EORTCD对小鼠自主活动有明显的抑制作用 ,对戊巴比妥钠诱导的睡眠有协同效果 ,显著对抗士的宁引起的小鼠惊厥反应 ,通过最大效能比较EORTCD的抗惊厥潜伏期长于安定和佳静安定 ,最大效能三者在同一水平。结论EORTCD具有显著的中枢抑制作用 ,对惊厥动物产生保护作用。

哈士蟆卵油化学成分研究

Three compounds were isolated from the ovum oil of Rana temporaria chensinensis David. by column chromatography,and they were i dentif ied by examining their physical and chemical properties and spectroscopic analys is as cholesterol,palmitote and palmitic acid.The fatty acids in the ovum oil of Rana temporaria chensinensis David. have been analyzed qualitat ively by GC-MS and 21 kinds of the compounds were identified.

中国林蛙卵油的抗焦虑作用

目的研究中国林蛙卵油 (eggoilofRanatemporariachensinensisDavid ,EORTCD)的抗焦虑作用。方法应用高架十字迷路和小鼠爬梯实验评价中国林蛙卵油的抗焦虑活性及其量效、时效关系。结果与对照组比较 ,EORTCD 2 0、4 0 g·kg-1能显著延长大鼠在十字迷路开放通路连续停留时间 ,增加大鼠进入开放通路次数 ,而对封闭通路连续停留时间和进入封闭通路次数无明显影响 ;小鼠爬梯实验中 ,EORTCD 1 4～5 6g·kg-1组小鼠站立数明显减少而爬梯数无显著差异 ;EORTCD抗焦虑时效实验表明在给药后 3 0、60min抗焦虑活性较强 ;γ 氨基丁酸 (γ aminobutyricacid ,GABA) 5 0、1 0 0mg·kg-1分别与EORTCD 1 2 g·kg-1联合给药组的小鼠站立数显著降低而爬梯数无显著减少 ,且比单独给予EORTCD组小鼠站立数少。结论中国林蛙卵油有明显抗焦虑作用。

性激素对中国林蛙性腺分化的影响

在我国林蛙养殖地区，性别比例失调问题十分严重，部分地区雌蛙和雄蛙的比例只有３∶７，严重影响养殖效益，制约养蛙业的发展．为调整林蛙性别比例，分别在实验室内和抚松林蛙养殖场采用在蝌蚪饵料中添加性激素的方法，诱导性腺分化，达到了调整林蛙性别的目的，并对激素诱导的合适浓度和最佳时期进行了研究．为促进林蛙养殖业的发展提供了切实可行的诱导技术．

哈士蟆卵油化学成分研究(Ⅱ)

目的分离鉴定哈士蟆卵油化学成分。方法硅胶、LH 2 0柱色谱分离 ,通过IR、NMR及MS光谱分析法确定结构。结果分得 6个化合物 ,分别鉴定为 (Ⅰ )棕榈酸 α 单甘油酯、(Ⅱ )棕榈酸 α,α′ 甘油二酯、(Ⅲ )油酸 α 单甘油酯、(Ⅳ )硬脂酸、(Ⅴ )棕榈酰胺和 (Ⅵ )棕榈酸乙酯及硬脂酸乙酯。结论 6个化合物均为首次从哈士蟆卵中分离得到。

林蛙皮胶原/壳聚糖复合海绵的制备及性质

背景:林蛙是中国珍稀的药用动物,林蛙皮是林蛙取油后的废弃物,其胶原蛋白含量丰富且量大、无污染和疫病危险,具有开发成为胶原海绵的潜力,但目前尚未见林蛙皮胶原海绵制备工艺方面的研究。目的:对林蛙皮胶原海绵的制备工艺进行优化,考察林蛙皮胶原海绵的物理性质及体外细胞相容性。方法:利用壳聚糖和戊二醛对林蛙皮胶原蛋白海绵进行改性,以壳聚糖与胶原蛋白质量比(1∶1、1∶2、1∶4)、戊二醛浓度(1%、1.5%、2%)为实验因子,以具有显著性差异的吸水倍数、机械性能和热变性温度为指标,采用正交实验设计对林蛙皮胶原蛋白海绵的制备工艺进行优化,观察林蛙皮胶原蛋白海绵表观形貌。将9种林蛙皮胶原蛋白海绵分别与人包皮成纤维细胞共培养,检测细胞增殖。结果与结论:(1)确定林蛙皮胶原海绵的最佳工艺条件为:壳聚糖与林蛙胶原蛋白质量为1∶1,戊二醛浓度为1%,在该条件下,林蛙皮胶原海绵的吸水倍数为5.22,断裂伸长率为10.96%,热变性温度为81.24℃;此条件下的林蛙皮胶原海绵孔径200-400μm,网孔大小基本一致,排列有序;(2)除壳聚糖与胶原蛋白为1∶4、戊二醛浓度为1%或5%的林蛙皮胶原海绵外,其他林蛙皮胶原海绵对人包皮成纤维细胞的细胞活性均有促进作用,有利于细胞的活性和生长;(3)结果表明,林蛙皮胶原海绵具有良好的生物相容性。

林蛙头多糖抗凝血活性的研究

目的探讨林蛙头多糖对凝血系统的影响。方法体外实验分别测定林蛙头多糖对复钙凝血时间、凝血酶原时间、凝血酶生成时间、凝血酶活性、水解纤维蛋白,激活纤溶酶原和对血凝块的影响。体内实验采用断尾法测定出血时间,玻片法测定凝血时间。结果林蛙头多糖在体外表现出显著的抗凝血效果,其作用随着浓度的增加而增强,但没有表现出溶栓作用。在体内能延长凝血时间和出血时间。结论林蛙头多糖在体内外均有抗凝血活性。

长白山区中国林蛙资源及其保护与增殖

中国林蛙主要产于我国的长白山区，具有较高的经济价值。本文根据近年来的生产实践和调查研究资料，着重介绍了吉林省长白山区的中国林蛙养殖生物学特征。

长白山区中国林蛙野外封沟养殖技术

对东北长白山区中国林蛙野外封沟养殖技术进行了阐述。内容包括 :养殖场地的选择与基本建设、蛙卵的收集及其野外孵化、蝌蚪与变态蝌蚪的饲养、变态幼蛙的管理、林中生活管理。

中国林蛙输卵管上皮细胞的培养及其生物学特性研究

本实验对中国林蛙(RanatemporariachensinesisDavid)的输卵管上皮细胞,成功地进行了原代及传代体外培养,并对输卵管上皮细胞的生物学特性进行观察、鉴定研究,建立了一种稳定的林蛙输卵管上皮细胞体外培养方法,为进一步研究其生物活性物质奠定了实验基础。

中国林蛙卵油抗士的宁惊厥的机制

目的揭示CO2超临界萃取的中国林蛙卵油(Rana temporaria chensinensis Davidegg oil,EORTCD)抗士的宁惊厥作用的机制。方法以士的宁为致惊剂,评价中国林蛙卵油抗惊厥活性的时效和量效关系。通过利血平耗竭单胺神经递质和奥单西隆阻断5-HT3受体,在士的宁致惊厥的小鼠模型中探讨中国林蛙卵油抗惊厥作用机制。结果中国林蛙卵油给予动物30 min,其抗惊厥作用效果最好。中国林蛙卵油抗惊厥作用呈现良好的剂量-效应关系;利血平耗竭单胺递质后,EORTCD对抗士的宁惊厥的效应消失;奥丹西隆阻断5-HT3受体后,再给EORTCD 1.4 g.kg-1,EOTCD的抗士的宁惊厥作用也被阻断。而高剂量组EORTCD未受奥丹西隆阻断。结论高、低剂量EORTCD抗惊厥作用可能启动不同的通路。低剂量EORTCD抗士的宁惊厥可能与5-HT3受体有关。

哈蟆油基原物种DNA分子鉴定研究

目的建立一种简单、可行的蛤蟆油基原物种DNA分子鉴定方法,并为其鉴定提供有效的手段。方法以COI作为条形码序列,对蛤蟆油基原物种中国林蛙和黑龙江林蛙进行DNA提取,PCR扩增和双向测序,用CodonCode Aligner V 4.2.7校对拼接,并用MEGA6.0对其样品进行种内分析。结果实验样品可以获得蛤蟆油基原物种的序列,中国林蛙有34个碱基变异位点,种内平均K2P距离为0.042,种内最大K2P距离为0.058。黑龙江林蛙有3个碱基变异位点,种内平均K2P距离为0.003,种内最大K2P距离为0.005。结论运用COI条形码序列能够准确鉴定蛤蟆油基原物种,为其鉴定提供新方法。

醇和酚类污染物对欧洲林蛙蝌蚪及梨形四膜虫毒性的定量结构-活性模型

醇和酚类等有机化合物作为重要的工业原料,广泛应用于医药卫生、有机合成、食品工业等领域,但生产中排放于环境的这些物质,会对生物造成一定的毒性作用。为建立包含醇和酚类有机污染物对欧洲林蛙蝌蚪及梨形四膜虫毒性的定量结构-活性相关性模型,计算了227种有机污染物的分子连接性指数和分子形状指数,优化筛选了分子连接性指数的0X、1X、2X、4X和5Xc、分子形状指数的K1和K2共7种参数,将这7种结构参数作为神经网络输入层变量,110种有机污染物对欧洲林蛙蝌蚪的毒性值作为输出层变量,采用7:8:1的网络结构方式,构建了令人满意的对欧洲林蛙蝌蚪毒性的神经网络预测模型,方程总相关系数r为0.988,毒性预测值与实验值之间的平均误差为0.14。为检验指数的普适性,同样用这7个结构参数与117种醇和酚类化合物对梨形四膜虫的毒性进行分析,所得神经网络模型的总相关系数达到0.997,对梨形四膜虫毒性的预测值与实验值之间的平均误差仅为0.065,结果表明,所建模型具有良好的预测有机污染物对林蛙蝌蚪及梨形四膜虫急性毒性的能力。

中国林蛙在人工生态系中的生物学特性

本文记述了在人工生态系中，中国林蛙的交配、产卵、孵化、取食行为、取食数量及活动规律等生物学特性，为快速高效养殖中国林蛙提供了生物学依据。

一种中国林蛙抗菌肽的光谱研究

从中国林蛙皮中纯化得到了一种抗多种临床多重耐药菌的抗菌肽(RTCⅠ),初步氨基酸组成分析结果表明其不含碱性氨基酸,此抗菌肽在276·5和356·5nm波长光的激发下发射出448nm的荧光,利用傅里叶变换红外光谱、拉曼光谱、电子吸收光谱及荧光光谱等技术研究了此特定荧光产生的结构依据.此抗菌肽的主要组成是Tyr,Asn(Asp)和Glu(Gln),抗菌肽特殊的荧光光谱和电子吸收谱与Tyr的酚羟基和Asn侧链的强氢键有关.这一特殊的荧光(448nm)及圆二色谱(259,263和267nm)信号为进一步在分子水平上研究此抗菌肽的抗菌机理提供了依据.

哈士蟆油和青蛙油主要营养成分的测定

采用半微量凯氏定氮法、荧光分光光度法、色谱—质谱联用分析法、原子吸收分光光度法,分析测定了哈士蟆油和青蛙油的蛋白、脂溶性维生素、脂肪酸、微量元素及重金属的成分和含量。结果表明:蛤士蟆油与青蛙油蛋白含量较高,分别为72.8%和73.8%;蛤士蟆油维生素A和维生素D的含量分别为青蛙油的1.3和1.6倍;蛤士蟆油维生素E的含量为4.09μg g,在青蛙油中未测出维生素E;蛤士蟆油与青蛙油脂类物质含量基本一致,约为6%,其中不饱和脂肪酸含量分别占其脂肪酸的77.26%和64.67%;蛤士蟆油与青蛙油均含有人体必需的常用微量元素,但青蛙油中重金属Pb、Hg含量超标。

林蛙油治疗绝经后骨质疏松症的临床研究

目的:观察林蛙油治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效,并探讨其作用机制。方法:将60例绝经后骨质疏松症患者随机分为治疗组和对照组,每组30例,治疗组采用口服林蛙油治疗,对照组采用口服仙灵骨葆胶囊治疗。治疗6个月后,观察2组患者治疗前后临床症状体征评分改变及骨密度、骨代谢指标变化情况。结果:①症状体征评分。治疗前2组患者症状体征评分比较,差异无统计学意义(t=1.781,P=0.113);治疗6个月后,2组患者症状体征评分均较治疗前降低[(17.67±3.67)分,(6.44±2.46)分,t=13.808,P=0.000;(20.22±2.17)分,(11.89±1.90)分,t=15.811,P=0.007],治疗组降低更明显[(11.23±2.44)分,(8.33±1.58)分,t=2.760,P=0.025]。②骨密度。治疗前和治疗6个月后,2组患者骨密度比较,组间差异均无统计学意义(t=0.824,P=0.425;t=0.767,P=0.457);治疗6个月后,2组患者骨密度与治疗前比较,差异均无统计学意义[(-2.37±0.84)g·cm-2,(-2.65±0.91)g·cm-2,t=0.811,P=0.432;(-2.19±0.83)g·cm-2,(-2.41±0.56)g·cm-2,t=0.727,P=0.479]。③骨代谢指标。治疗前2组患者骨碱性磷酸酶、雌二醇、白细胞介素-6、骨钙素血清含量比较,组间差异均无统计学意义(t=1.622,P=0.127;t=1.114,P=0.284;t=1.554,P=0.143;t=1.185,P=0.160)。治疗6个月后,2组患者血清骨碱性磷酸酶含量[(17.13±2.13)单位·L-1,(7.80±1.82)单位·L-1,t=12.594,P=0.000;(16.40±1.80)单位·L-1,(10.73±2.12)单位·L-1,t=8.324,P=0.000]、血清白细胞介素-6含量[(125.20±13.86)μg·L-1,(88.13±10.20)μg·L-1,t=5.795,P=0.000;(131.93±11.07)μg·L-1,(107.40±7.74)μg·L-1,t=9.648,P=0.000]、血清骨钙素含量[(6.19±0.96)ng·L-1,(3.54±1.12)ng·L-1,t=6.504,P=0.000;(5.80±0.56)ng·L-1,(5.15±0.51)ng·L-1,t=6.733,P=0.000]均较治疗前降低,治疗组降低更明显[(9.33±2.87)单位·L-1,(5.67±2.64)单位·L-1,t=7.416,P=0.000;(37.17±19.08)μg·L-1,(24.53±9.85)μg·L-1,t=2.253,P=0.041;(2.65±1.53)ng·L-1,(0.64±0.37)ng·L-1,t=4.820,P=0.000];2组患者血清雌二醇含量均较治疗前升高[(21.73±5.55)pg·mL-1,(43.40±5.65)pg·mL-1,t=8.208,P=0.000;(24.27±7.72)pg·mL-1,(34.13±5.75)pg·mL-1,t=5.006,P=0.000],治疗组升高更明显[(21.67±10.22)pg·mL-1,(9.87±7.63)pg·mL-1,t=4.209,P=0.001]。结论:林蛙油在短期内未能提高绝经后骨质疏松症患者的骨密度,但可以明显提高其血清雌二醇水平,降低其血清骨碱性磷酸酶、白细胞介素-6和骨钙素水平,这可能是林蛙油可以明显改善PMOP患者的临床症状与体征的作用机制之一。

中国林蛙卵油对高脂血症大鼠降脂作用的观察

目的:揭示CO_2超临界萃取的中国林蛙卵油(egg oil of Rana temporaria chensinensis David,EORTCD)对大鼠血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及脂蛋白的影响。方法:用SBA-300型全自动生化分析仪测定连续口服EORTCD前后高脂血症大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯以及血清脂蛋白的含量。结果:连续口服EORTCD 20d后,能明显降低实验性高血脂症大鼠血清TC、TG和低密度脂蛋白(LDL)的含量。结论:EORTCD具有显著的降血脂作用。