韧黏素在大鼠胚胎心脏发育过程中的表达

目的检测韧黏素-C(TN-C)和韧黏素-X(TN-X)在大鼠胚胎心脏中的表达,探讨其在胚胎心脏发育过程中的作用。方法雌性SD大鼠64只,雄性SD大鼠20只,雌雄同笼,以观察到雌鼠排出阴栓为妊娠0.5d(ED0.5),分别于ED12.5、ED15.5、ED19.5处死孕鼠,取出心脏。半定量反转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述各孕龄大鼠胚胎心脏中TN-C和TN-X mRNA表达;免疫组织化学染色法观察上述各孕龄大鼠心脏TN-C和TN-X蛋白表达。结果TN-C mRNA在ED12.5大鼠胚胎心脏中高表达(0.6837±0.0431),ED15.5(0.4543±0.0388)和ED19.5(0.2505±0.0384)大鼠胚胎心脏TN-C mRNA表达下降,与ED12.5比较有显著性差异(Pa<0.05);ED12.5、ED15.5、ED19.5大鼠心脏TN-X mRNA相对表达量分别为0.7471±0.0433、0.7584±0.070、0.7671±0.088,各组间表达无显著性差异。免疫组织化学显示TN-C在ED12.5大鼠胎心有表达,在ED15.5少量表达,在ED19.5大鼠心脏未见表达;TN-X在ED12.5大鼠胎心的心室肌的细胞中有表达,在ED15.5、ED19.5胎鼠心脏中表达于整个心脏的心肌及房室间隔。结论TN-C在胚胎心脏早期发育过程中可能占有重要作用,而TN-X可能是心脏存活所必须的。

机械力作用诱导心脏瓣膜间质细胞TN-C表达及意义

目的通过压力培养细胞装置研究主动脉瓣膜间质细胞在机械力作用下肌糖蛋白-C(TN-C)表达的改变,从瓣膜对机械力损伤修复角度探讨风湿性心脏瓣膜病的发病机制。方法无菌手术获取主动脉瓣,剥除内皮层,胶原酶消化分离间质细胞,体外培养;构建产生等双轴周期性压力装置;利用机械力作用细胞后,以实时定量RT-PCR鉴定TN-C的表达;加入不同蛋白激酶阻断剂,分析参与机械力诱导TN-C的信号传导途径。结果成功构建双轴周期性压力装置;机械力通过RhoA/ROCK途径诱导TN-C的转录,而p38MAPK、PKC和ERK途径没有参与机械力诱导TN-C的表达。结论在风湿性瓣膜炎的发病过程中,机械力在TN-C的转录和表达中有一定作用,从而诱发瓣膜病理改变。

胃癌组织中Tenascin、MVD、Ki-67的表达及其临床意义

目的:探讨胃癌组织中Tenascin蛋白、微血管密度(microvascular density,MVD)、Ki-67的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化Elivision法检测70例胃癌组织和20例癌旁正常组织中Tenascin、CD34和Ki-67的表达。结果:①正常胃黏膜上皮Tenascin阴性,胃癌中的Tenascin主要表达于肿瘤相关纤维母细胞的胞质中,且与胃癌的Lauren分型、分化程度、临床分期、淋巴结转移显著相关(P<0.05);②胃癌中MVD和Ki-67-L(I标记指数)均高于正常胃黏膜(P<0.001),且均与胃癌的临床分期、浸润深度、淋巴结转移显著相关(P<0.05);结论:胃癌组织中Tenascin可抑制胃癌的演进,MVD及Ki-67可作为胃癌患者预后的预测指标,联合检测胃癌组织Tenascin、MVD、Ki-67的表达情况,对于进一步了解胃癌的生物学行为和判断预后具有一定的临床价值与意义。

酒精性心肌病大鼠中成腱蛋白表达与心肌纤维化的关系

目的探讨酒精性心肌病心肌中成腱蛋白X（TN—X）表达以及与心肌重构和心肌纤维化的关系。方法实验动物分为酒精喂养组（酒精组）和对照组，6个月后检测心脏结构、功能和心肌胶原含量，免疫组化法和Western免疫印迹法测定心肌TN-X、信号转导蛋白（smad）3和smad-7的蛋白表达。结果6个月后，酒精组左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（FS）低于对照组、左室舒张末期内径（LVEDd）和胶原容积分数（CVF）高于对照组（均P〈0．05）。酒精组TN-X和smad-3蛋白表达（88％±6％、82％±8％）明显高于对照组（33％±11％、29％4-8％）；smad-7蛋白表达（37％±9％）低于对照组（79％±10％）（均P〈0．01）。TN—X表达与LVEF、FS和smad-7呈显著负相关，与LVEDd、CVF和smad-3呈显著正相关（均P〈0．01）。结论TN—X在酒精性心肌病中表达增加，可能促进酒精性心肌病心肌纤维化和心肌重构。