盐蒺藜质量标准提升研究

目的 修订并提高盐蒺藜的质量标准。方法 以10批盐蒺藜为研究对象,对其外观性状、粉末显微特征进行观察,采用薄层色谱法对其中蒺藜皂苷K进行定性鉴别,参照2020年版《中国药典》通则相关方法测定其水分、总灰分、酸不溶性灰分和水溶性浸出物,采用HPLC-ELSD法测定其中蒺藜皂苷K的含量并建立盐蒺藜特征图谱。结果 明确了盐蒺藜外观性状、粉末显微特征的描述,10批盐蒺藜薄层色谱中均可定性出蒺藜皂苷K,取消了酸不溶性灰分的检查,修订了水分、总灰分的限度,新增了水溶性浸出物、蒺藜皂苷K含量限度和盐蒺藜特征图谱,方法学考察结果显示所建立的HPLC-ELSD检测方法符合含量测定要求。结论 建立的方法简便可行、专属性强、重复性好,可用于盐蒺藜的质量控制。

蒺藜炒制过程中蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K的变化规律及机制研究

采用HPLC-ELSD测定不同炒制程度的蒺藜中蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K含量,结果发现蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K的含量均呈先升高后降低趋势,2个皂苷均在火候最佳时含量最高。通过蒺藜总皂苷提取物的模拟炮制发现,在炮制时间一定时,随着炮制温度由180℃升高至240℃蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K的含量逐渐减少。在一定温度下,随炮制时间的延长蒺藜皂苷K含量先升高后降低,在5 min时含量最高;而蒺藜呋甾皂苷B含量仅在180℃时,随着炮制时间的增加,呈先升高后降低趋势,在10 min时含量最高;在200,220,240℃时,随着炮制时间的增加,蒺藜呋甾皂苷B含量逐渐降低。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱定性分析tribuluside A,蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K 3种蒺藜皂苷单体的模拟炮制产物,证实含有C-22-OH的tribuluside A和蒺藜皂苷I在蒺藜炮制中发生脱羟基反应分别转化生成含有C-20-C-22位双键的蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K,从而使两者含量升高;蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K的C-3和C-26位含有糖链,在蒺藜炮制中发生脱糖反应生成单糖链皂苷和短糖链皂苷,从而使两者含量降低。该研究为下一步揭示蒺藜的炮制原理提供了依据。

LC-QQQ/MS结合色差技术优选炒蒺藜饮片的炮制工艺

目的建立一种蒺藜甾体皂苷含量测定和外观颜色均匀性检测方法来优化炒蒺藜炮制工艺。方法以LC-QQQ/MS测定蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K的总含量作为化学指标,采用色彩色差仪测定炒蒺藜饮片总色值Ε*ab,以30次随机抽取样品Ε*ab值的RSD值作为外观颜色均匀性指标。在此基础上,采用L9(3~4)正交试验法,以炒制温度、炒制时间和炒药机转速为考察因素,优选炒蒺藜饮片的炮制工艺。结果蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K均具有良好的线性关系(r>0.999),检测限分别为1.28,10.44 ng·mL^(-1),定量限分别为5.40,27.81 ng·mL^(-1),精密度、24 h稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%,平均加样回收率分别为96.66%和97.10%。色差技术可为炒蒺藜外观颜色均匀性提供客观化的数值。炒蒺藜最佳炮制工艺为200℃以60 r·min^(-1)转速炒制15 min。结论LC-QQQ/MS结合色差技术所优选的蒺藜炒制工艺稳定可行,可为其他中药炮制工艺优化提供参考。