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PCR和核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究 被引量:15
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作者 代敏 王红宁 吴琦 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期482-485,共4页
对沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%,对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75%,具有较高的检出率。用光... 对沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%,对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75%,具有较高的检出率。用光生物素对PCR产物进行标记,制备核酸探针,采用菌落原位杂交的方法对沙门氏菌进行检测,结果表明13株阳性、3株阴性,杂交结果与PCR结果阳性符合率为93.75%,具有较高的特异性。通过条件的优化,建立的四环素耐药基因tetC的PCR和核酸探针检测技术,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径。 展开更多
关键词 沙门氏菌 tetc 耐药基因 核酸探针 PCR 四环素类抗生素 流行病学监测 PCR产物 耐药性 试验结果 原位杂交 检测技术 特异性 符合率 耐药率 阳性 检出率 生物素 药敏
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猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析 被引量:7
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作者 代敏 王红宁 +2 位作者 吴琦 李春 于新芬 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期415-417,434,共4页
本研究对 16株猪致病性沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测 ,结果表明 ,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性 ,耐药率达 10 0 %。对四环素耐药基因 tet C进行 PCR扩增 ,结果在 12株沙门氏菌的质粒上扩增出特异性产物 ,与药敏试... 本研究对 16株猪致病性沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测 ,结果表明 ,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性 ,耐药率达 10 0 %。对四环素耐药基因 tet C进行 PCR扩增 ,结果在 12株沙门氏菌的质粒上扩增出特异性产物 ,与药敏试验结果阳性符合率 75 % ,具有较高的检出率 ;序列分析结果表明 tet C的核苷酸同源率较高 ,达 97.7%~ 98.7% ,建立 tet C基因的 PCR检测技术 ,为沙门氏菌对四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径。 展开更多
关键词 沙门氏菌 四环素耐药基因 tetc PCR 序列分析
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禽源致病性沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的PCR扩增及序列分析 被引量:1
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作者 张正庆 罗薇 +3 位作者 刘亚刚 于学辉 傅安静 黄兴 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2007年第2期313-315,共3页
通过对临床分离并经生化实验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验,结果证明:有19株有高耐药性,另外2株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与... 通过对临床分离并经生化实验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验,结果证明:有19株有高耐药性,另外2株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验符合率为100%;利用PCR检测四环素耐药基因tetC具有很高的敏感性和特异性,从而为禽类致病性沙门氏菌的耐药性检测提供了高效敏感的手段. 展开更多
关键词 沙门氏菌 四环素耐药基因 tetc PCR
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禽源致病性沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的PCR扩增及序列分析 被引量:2
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作者 张正庆 罗薇 +3 位作者 刘亚刚 于学辉 傅安静 黄兴 《畜禽业》 2006年第12期18-20,共3页
通过对临床分离并经生化试验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验,结果证明:有19株有高耐药性,另外2株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了PCR扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,... 通过对临床分离并经生化试验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验,结果证明:有19株有高耐药性,另外2株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了PCR扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验符合率为100%;利用PCR检测四环素耐药基因tetC具有很高的敏感性和特异性,从而为禽类致病性沙门氏菌的耐药性检测提供了高效敏感的手段. 展开更多
关键词 沙门氏菌 四环素耐药基因 tetc PCR 核酸探针
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猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析 被引量:1
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作者 代敏 王红宁 +2 位作者 吴琦 李春 于新芬 《四川畜牧兽医》 2003年第B09期28-28,共1页
四环素类抗生素作为一类广谱抗生素,现已产生严重的耐药性。作为人兽共患病原菌的沙门氏菌,也存在大量这样的耐药菌株,使得本病的发病率和死亡率都不断上升。本研究对规模化猪场分离的经动物试验和生化试验鉴定的致病性沙门氏菌16株、... 四环素类抗生素作为一类广谱抗生素,现已产生严重的耐药性。作为人兽共患病原菌的沙门氏菌,也存在大量这样的耐药菌株,使得本病的发病率和死亡率都不断上升。本研究对规模化猪场分离的经动物试验和生化试验鉴定的致病性沙门氏菌16株、药敏质控菌ATCC25922和沙门氏菌标准株C79-13对进行了四环素、金霉素、土霉素的药敏试验,结果表明:16株致病性沙门氏菌对四环素类抗生素表现出普遍耐受性,耐药率达100%。其中MIC值>128μg/mL的高耐药菌株13株,高耐药率81.25%;MIC值为32μg/mL的低耐药菌株3株,低耐药率18.75%。设计沙门氏菌四环素抗性基因tetC的引物,对16株致病性沙门氏菌的tetC基因做PCR扩增,结果12株菌获得以质粒为模板长约400bp的特异性扩增产物,未能从染色体扩增到产物。分别对临床分离的1株低耐药菌株(DY1)和1株高耐药菌株(SL1-3)的tetC基因扩增产物进行序列分析,结果表明:菌株DY1和SL1-3的tetC的核苷酸同源率为97.7%;菌株DY1与质粒pBR322中tetC的核苷酸同源率为98.7%;菌株SL1-3与质粒pBR322中tetC的核苷酸同源率为98.4%,说明对于耐药程度和地方来源各不相同的菌株,在核苷酸序列上同源率很高。本文用PCR技术对规模化猪场分离的致病性沙门氏菌的四环素耐药基因进行了研究。 展开更多
关键词 耐药基因 tetc PCR扩增 序列分析 广谱抗生素 规模化猪场
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编码破伤风毒素C片段(TetC)的DNA疫苗初免及TetC粘膜加强的免疫策略
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作者 边国林 《国外医学(预防.诊断.治疗用生物制品分册)》 2003年第2期82-82,共1页
关键词 编码破伤风毒素C片段 DNA疫苗 初免 tetc粘膜 加强的免疫策略
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不同土壤中四环素抗性基因tetC的检测
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作者 庄倩芸 潘霞 +4 位作者 王声灵 陈抒忆 李思佑 张美玲 汪正华 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期23-26,共4页
目的检测不同土壤中四环素抗性基因tetC的存在、扩散和迁移情况。方法选取历史悠久的中学校园、公园和成规模的猪场化粪池周边土壤为研究对象,进行PCR分子检测和抗性菌株检测。结果猪场化粪池周边5、50、200 m处土壤中均存在四环素抗性... 目的检测不同土壤中四环素抗性基因tetC的存在、扩散和迁移情况。方法选取历史悠久的中学校园、公园和成规模的猪场化粪池周边土壤为研究对象,进行PCR分子检测和抗性菌株检测。结果猪场化粪池周边5、50、200 m处土壤中均存在四环素抗性基因tetC和抗性菌株,而中学校园、公园和距化粪池500 m处土壤尚未检测到抗性基因和抗性菌株的存在。结论本研究说明土壤环境中抗性基因的存在与抗生素的浓度有关,而且抗性基因产生后可通过一定方式向周边环境扩散和迁移。本课题的研究成果为进一步系统研究抗生素抗性基因在土壤中的环境行为及其生态风险提供了验证基础。 展开更多
关键词 不同土壤 四环素抗性基因 tetc 检测
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Potential dissemination mechanism of the tetC gene in Aeromonas media from the aerobic biofilm reactor under oxytetracycline stresses
8
作者 Yanhong Shi Yu Zhang +3 位作者 Xiangyang Wu Hong Zhang Min Yang Zhe Tian 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2021年第7期90-99,共10页
The tet C gene has been found to be one of the most widely distributed tetracycline resistance( tet) genes in various environmental niches, but the detailed dissemination mechanisms are still largely unknown. In the p... The tet C gene has been found to be one of the most widely distributed tetracycline resistance( tet) genes in various environmental niches, but the detailed dissemination mechanisms are still largely unknown. In the present study, 11 tet C-containing Aeromonas media strains were isolated from an aerobic biofilm reactor under oxytetracycline stresses, and the genome of one strain was sequenced using the Pac Bio RSII sequencing approach to reveal the genetic environment of tet C. The tet C gene was carried by an IS 26 composite transposon, named Tn 6434. The tet C-carrying Tn 6434 structure was detected in all of the A. media strains either in a novel plasmid p Aeme2( n = 9) or other DNA molecules( n = 2) by PCR screening. The NCBI database searching result shows that this structure was also present in the plasmids or chromosomes of other 13 genera, indicating the transferability of Tn 6434. Inverse PCR and sequencing confirmed that Tn 6434 can form a circular intermediate and is able to incorporate into a preexisting IS 26 element, suggesting that Tn 6434 might be responsible for the dissemination of tet C between different DNA molecules. This study will be helpful in uncovering the spread mechanism of tet genes in water environments. 展开更多
关键词 Aeromonas media tetc IS 26 Circular intermediate Inverse PCR
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三重PCR方法对猪、鸡源细菌中四环素类药物耐药基因的检测 被引量:5
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作者 夏青青 王红宁 张安云 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期171-176,共6页
针对GenBank上已公开的四环素类耐药基因tetA、tetC、tetM序列进行比对分析,设计特异性扩增引物,建立三重PCR法快速检测方法.结果表明,单重PCR和三重PCR的符合率为100%.应用本检测方法和传统药敏试验方法(药敏纸片法)对412猪、鸡源细菌... 针对GenBank上已公开的四环素类耐药基因tetA、tetC、tetM序列进行比对分析,设计特异性扩增引物,建立三重PCR法快速检测方法.结果表明,单重PCR和三重PCR的符合率为100%.应用本检测方法和传统药敏试验方法(药敏纸片法)对412猪、鸡源细菌的四环素耐药基因和表型同时进行检测.PCR检测实验结果显示,在412株待检细菌中,tetA、tetC、tetM的检出率分别为47.57%,38.35%和34.95%.药敏实验结果表明,待测细菌对四环素的耐药率最高,为95%;对多西环素的耐药率次之,为92%;对米诺环素耐药率相对最低,为84%.比较两种方法,发现其检出结果的符合率为88%.说明两种方法具有较高的一致性.本研究建立了一种猪、鸡源细菌四环素类药物耐药基因三重PCR检测方法,并进行了初步应用. 展开更多
关键词 四环素耐药性 tetA tetc tetM 三重PCR
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