岳西小黄姜精油提取优化及成分分析

为了确定岳西小黄姜精油最佳提取工艺,探究不同提取方法对小黄姜精油得率和微观结构的影响,建立岳西小黄姜挥发性物质GC-MS检测方法。该研究分别采用水蒸气蒸馏法、超声辅助水蒸气蒸馏法、超声-微波协同辅助水蒸气蒸馏法、超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法提取小黄姜精油。比较各方法的精油得率,选择得率最高的方法进行单因素试验和正交优化确定最佳提取工艺。结果表明,超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法的精油得率最高,最佳提取工艺为:料液比1∶3.5(g/mL)、超声温度50℃、超声功率400 W、超声时间20 min、复合酶用量(半纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶=1∶1)40 U/g、酶解温度40℃、酶解pH值5.5、酶解时间2 h、提取时间45 min。在此条件下精油得率为3.28%。对精油提取后的姜渣进行扫描电镜观察,经超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法得到的姜渣细胞完整性破坏最为严重,说明该方法对精油的提取更为彻底。采用顶空固相微萃取(headspace solid-phase microextraction, HS-SPME)提取法和超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法从鲜姜中共提取鉴定出75种挥发性物质,其中HS-SPME提取法鉴定出49种,超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法提取鉴定出60种。本研究为小黄姜精油提取提供了新思路,并为生姜深加工利用提供了参考依据。

蔗糖、多效唑和钾对广西小黄姜试管姜的诱导研究

为探究广西小黄姜试管姜的诱导条件,采用不同浓度的蔗糖、多效唑和钾营养对广西小黄姜试管苗进行诱导研究,比较分析了诱导的试管姜块大小、直径和植株生长情况。结果表明:广西小黄姜对蔗糖的耐受性较差,70 g/L浓度条件下出现了生长受抑制的现象,最佳的诱导浓度为50 g/L;在低糖浓度条件下添加多效唑并不能诱导广西小黄姜产生姜块,在多效唑添加浓度为6 mg/L时,试管苗的生长开始受到抑制;添加低浓度钾对广西小黄姜试管苗生长具有促进作用,但不产生姜块;添加高浓度的钾可诱导小黄姜试管苗产生姜块,但是生长会受到抑制。优组试验表明,最佳的蔗糖浓度为50 g/L、多效唑浓度为2mg/L、磷酸二氢钾浓度为60mmol/L,该组合诱导的试管姜植株粗壮,叶色翠绿,根系生长良好,诱导出的姜块大,有实际应用价值。

贵州小黄姜脱毒原种栽培因子优化

【目的】研究贵州小黄姜脱毒原种高产栽培技术,为促进贵州脱毒生姜产业发展提供参考。【方法】以盘州小黄姜脱毒原种为研究对象,采用二次旋转回归设计,在普定县进行密度(64770株/hm_(2)、75000株/hm_(2)、90000株/hm_(2)、105000株/hm_(2)、115230株/hm_(2))、氮肥(277.5 kg/hm_(2)、360 kg/hm_(2)、480 kg/hm_(2)、600 kg/hm_(2)、681 kg/hm_(2))、磷肥(118.5 kg/hm_(2)、180 kg/hm_(2)、270 kg/hm_(2)、360 kg/hm_(2)、420 kg/hm_(2))及钾肥(497.7 kg/hm_(2)、600 kg/hm_(2)、750 kg/hm_(2)、900 kg/hm_(2)、1002.3 kg/hm_(2))与产量间关系的研究。【结果】产量(Y)与栽培密度(X 1)、N(X 2)、P 2O 5(X 3)和K 2O(X 4)的二次回归方程为Y=46554.08+652.63 X 1+535.19 X 2+431.55 X 3+761.15 X 4-1642.44 X 12-1270.33 X 22-1420.58 X 32-906.12 X 42+338.96 X 1 X 2+562.51 X 1 X 3-872.69 X 1 X 4-1187.58 X 2 X 3+159.93 X 2 X 4+75.02 X 3 X 4;随着密度、氮肥、磷肥及钾肥施用量的增加,脱毒原种的产量呈先升后降趋势,氮肥和磷肥间互作关系显著;在氮肥、磷肥处于较高水平时,施肥水平的变化对脱毒原种的产量影响较大;在氮肥、磷肥施用量分别为480 kg/hm_(2)和270 kg/hm_(2)(均处于0水平)时,盘州小黄姜脱毒原种产量最高,为45054.15 kg/hm_(2)。【结论】在普定县,盘州小黄姜脱毒原种产量达45000 kg/hm_(2)以上的优化栽培方案为栽培密度90075~97425株/hm_(2),施N量495.15~564.00 kg/hm_(2),施P 2O 5量244.95~310.20 kg/hm_(2),施K 2O量771.15~870.90 kg/hm_(2),适宜的氮磷钾比为1.8∶1∶2.9。

小黄姜组培快繁技术研究

以贵州省六盘水市特产小黄姜茎尖为外植体,进行了组织培养快速繁殖技术研究。结果表明:消毒时间对茎尖成活率影响很大,以0.1%HgCl_2消毒15 min最有效。筛选出了不定芽分化的最适培养基(MS+6-BA 3.5mg/L+NAA 0.1 mg/L),实现了小黄姜的继代和增殖同步化,组培苗移栽到营养土与珍珠岩为3∶1的混合基质中生长,成活率达到94%。

贵州水城小黄姜硒含量及对硒的富集能力

为了探明贵州水城小黄姜硒含量及其对硒富集能力,采用原子荧光光谱法测定水城县不同产地的水城小黄姜不同部位的硒含量以及其种植土壤硒含量。结果表明:发耳镇新龙村小黄姜种植土的硒含量最高为1.782μg/g,其小黄姜根的硒含量也是最高为0.086μg/g,水城小黄姜叶对硒的富集能力最强。

罗平小黄姜的贮藏保鲜新方法

通过用微型节能冷库(简称微型库)藏法和自行设计的箱藏法进行罗平小黄姜(生姜)鲜姜贮藏效益比较,箱藏法烂损姜率1.73%,微型库藏法烂损姜率1.81%,箱藏法比微型库藏法降低0.08个百分点;箱藏法每1000kg鲜姜的贮藏成本为34.57元,微型库藏法每1000kg鲜姜的贮藏成本为166.80元,每贮藏1000kg鲜姜,箱藏法比微型库藏法节约132.23元,说明箱藏法较微型库藏法是一种既高效又节能的实用方法。

折溪'小黄姜'内生细菌初步鉴定

为了解贵州省折溪'小黄姜'中内生菌资源,采用涂布法从折溪'小黄姜'中分离、纯化出内生细菌,通过形态学特征结合分子生物学手段确定其分类地位.结果表明,从折溪'小黄姜'中共分离出5株不同的内生菌,命名为GrsB1、GrsB2、GrsB3、GrsB4、GrsB5,其中GrsB1属于芽孢杆菌科、微小杆菌属(Exiguobacterium),其他4株菌属于肠杆菌科,分别属于拉乌尔菌属(Raoultella)、肠杆菌属(Enterobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)、沙雷氏菌属(Serratia),肠杆菌科数量最多.虽然分离出的内生菌数量较少,但菌株种属分布范围较大,可以为小黄姜内生菌资源的进一步研究提供理论基础.

贵州水城小黄姜中微量元素分析

采用原子吸收分光光度法测定贵州水城县主要种植区9个样地水城小黄姜中微量元素Fe、Zn、Mn、Cu、Ca、Na、Mg、Cd和Pb的含量。结果表明:9个不同样地水城小黄姜Fe、Zn、Mn、Cu、Ca、Na、Mg、Cd、Pb各微量元素范围分别为113.04～188.99 mg kg^(-1)、16.90～30.93 mg kg^(-1)、110.18～672.45 mg kg^(-1)、5.27～11.32 mg kg^(-1)、3 180.75～4 613.60 mg kg^(-1)、234.00～440.10 mg kg^(-1)、981.95～1 217.40 mg kg^(-1)、0.045～0.773 mg kg^(-1)、0.165～1.815 mg kg^(-1),平均含量Ca>Mg>Na>Mn>Fe>Zn>Cu>Pb>Cd,不同样地水城小黄姜Ca、Mg、Mn、Zn、Cd、Pb微量元素含量均达到极显著差异。水城小黄姜含有多种微量元素,且Ca和Mg元素含量丰富。9个样地Pb、Cu的含量均低于《药用植物及其制剂进出口绿色行业标准》限量标准,部分样地Cd超标。

罗平小黄姜中6-姜辣素含量测定的方法学研究

目的建立罗平小黄姜6-姜辣素的含量测定方法。方法高效液相色谱法,色谱柱ZORBAX-SB-C18(规格:4.6*150 5-Micron);流动相为乙腈:水=45:55溶液;流速为1.0 mL·min^-1;进样量:10μL;柱温:35℃;检测波长280 nm。结果标准曲线回归方程Y=0.55535 X-7.15104(R=0.99999)进样量在107~8025 ng范围内,线性关系良好。准确度试验RSD为3.8%(n=9),平均回收率为97.7%,精密度试验RSD为0.18%,重复性试验RSD为2.9%。结论本实验方法稳定可靠、简便可行、具有较好的重现性,为罗平小黄姜的质量评价提供了依据。

“水城小黄姜”芽茎尖组培脱毒与快繁体系的建立

为建立“水城小黄姜”芽茎尖组培脱毒快繁体系,本试验以“水城小黄姜”芽茎尖为外植体,研究不同消毒时间、不同诱导分化培养基、不同增殖培养基及不同生根培养基对茎尖消毒、愈伤组织诱导、不定芽增殖、生根的影响,并对组培苗进行脱毒效果的检测。结果表明:“水城小黄姜”芽茎尖采用75%医用酒精消毒60 s+10%次氯酸钠(NaClO)消毒20 min处理效果最好,污染率7.7%,成活率达87.2%;不同培养基配比对茎尖诱导分化效果有差异,以MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L效果最佳,愈伤诱导率达75.0%;最适增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增殖系数大,长势旺盛、茎粗芽壮、叶绿,组培苗生长好,且可与生根协同接续;适宜生根的培养基为MS+NAA 0.10 mg/L,生根数多,平均根长适中。用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定组培苗中烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV),获得了“水城小黄姜”脱毒核心苗,且脱毒率达93.75%。因此,本研究认为通过“水城小黄姜”芽茎尖脱毒组培快繁体系的建立,可为“水城小黄姜”种苗的脱毒快繁及工厂化育苗提供参考。

小黄姜真空微波干燥特性及其动力学研究

为探究小黄姜真空微波干燥效率及其干制品品质,以小黄姜为原料,研究了微波功率、切片厚度、装载量、微波间隔时间对小黄姜真空微波干燥特性的影响,建立干燥动力学模型。结果表明,小黄姜真空微波干燥过程表现为前期加速和后期降速2个阶段。微波功率越大,干燥速率越快,干基含水率达到平衡时所需干燥时间越短,因此微波功率与干燥速率呈正相关;切片厚度、装载量、微波间隔时间越大,则干燥速率越小,干基含水率降低越缓慢,干燥耗时越长,因此切片厚度、装载量、微波间隔时间与干燥速率呈负相关;小黄姜真空微波干燥过程符合Page模型,模型预测值与试验值拟合良好(R;=0.985),此模型能够对小黄姜真空微波干燥过程进行预测和描述。该结果为小黄姜真空微波干燥参数的优化及实际干燥工艺提供参考。

六盘水小黄姜脱毒快繁技术及遗传变异研究

以贵州省六盘水市六枝特区折溪乡小黄姜姜芽为外植体,通过外植体灭菌实验确定了一套高效的姜芽外植体灭菌方法,即剥去姜芽外层组织后,用75%酒精处理30 s,0.1%升汞处理3 min。该方法可在保证存活率为100%时,达到99%的灭菌率。本研究采用正交方法检测不同浓度生长素萘乙酸(1-naphthylacetic acid,NAA)和细胞分裂素6-苄氨基腺嘌呤(6-benzylaminopurine,6-BA)对六盘水小黄姜组培苗生长的影响。数据结果表明,在接种3个月内,正交组平均长出丛生芽1.7个,不定根3.1条。当培养基中激素含量为1.0 mg/L NAA和4.0 mg/L 6-BA时,平均长出丛生芽4.1个,不定根12条。说明该激素浓度组合是促进组培苗丛生芽和不定根生长及分化的最优组合。烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)酶联检测显示脱毒小黄姜组培苗TMV浓度平均值为0.299 5 ng/m L(未处理小黄姜TMV浓度为3.317 4 ng/m L),说明结合茎尖脱毒与热处理脱毒可以有效除去小黄姜体内的TMV。采用ISSR分子标记技术对小黄姜脱毒苗进行遗传变异分析,从100条ISSR引物中筛选出5条稳定的多态性引物,不同继代小黄姜脱毒苗遗传变异检测表明继代培养8次后的植株与母株的遗传特性均保持一致。