三叶青提取物对A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响

目的探讨三叶青乙醇提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。方法 采用MTT比色法,测定不同浓度三叶青乙醇提取物对A375细胞体外抑制作用;比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素含量。结果在质量浓度为1～625μg/ml范围内,随着三叶青乙醇提取物浓度增大可抑制A375细胞的增殖(P<0.01);三叶青乙醇提取物浓度在1～5μg/ml时,对酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加趋势;而在25～625μg/ml时,对A375细胞有一定毒性。结论三叶青乙醇提取物在一定浓度范围内(1～625μg/ml)能抑制A375细胞的增殖,且呈剂量依赖关系。

三叶青抗肿瘤活性部位的筛选研究

目的研究三叶青乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对不同肿瘤细胞的体外抑制作用,筛选三叶青抗肿瘤活性部位。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法。结果三叶青乙醇提取物和其4个提取部位对肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用。其中,三氯甲烷部位和石油醚部位在一定浓度下可有效抑制肿瘤细胞的活性,乙酸乙酯部位和正丁醇部位对肿瘤细胞的抑制作用均较弱。结论三叶青中抗肿瘤的活性部位是三氯甲烷部位和石油醚部位,而且其对不同肿瘤细胞的体外抑制作用呈一定的浓度依赖作用。

基于体外抗氧化试验的三叶青活性物质提取工艺的研究

为选取最佳的三叶青抗氧化活性物质的提取工艺,分别采用热回流提取法、微波提取法和超声提取法制备三叶青提取物,用DPPH法、铁离子还原能力(FRAP)法、Trolox等效抗氧化能力(TEAC)法和羟自由基清除法综合评价各提取物的体外抗氧化能力,再用福林酚(Folin-Ciocalteu)比色法测定其总酚含量,将不同提取方法所得提取物的总酚含量与抗氧化能力之间做相关性分析,筛选提取方法,用正交试验优化该提取方法的工艺条件。结果表明,热回流提取方法所得三叶青提取物总酚含量最高,其清除羟自由基、ABTS^(+)·、DPPH自由基的能力及还原铁的能力皆优于微波提取法与超声提取法所得提取物;热回流提取法最佳提取工艺是60%(v/v)乙醇、60 ℃提取3次、1.5 h/次。热回流提取法适合于制备三叶青具有抗氧化活性的提取物。