基于网络药理学的合欢花抗抑郁作用机制研究

在对合欢花中的化学成分进行鉴定基础上,采用网络药理学方法预测合欢花抗抑郁的化学成分和作用机制。通过超高液相色谱-高分辨质谱联用技术(UHPLC-HRMS)对合欢花中化学成分进行表征,利用SwissTargetPrediction和Similarityensembleapproach数据库筛选合欢花活性成分的潜在作用靶点,同时利用DisGeNET数据库得到抑郁症相关的靶点,采用jvenn绘制韦恩图得到疾病与药物的共有靶点;通过STRING数据库构建PPI网络并筛选关键靶点,采用DAVID 6.8数据库对关键靶点进行KEGG通路富集分析及基因本体(GO)功能注释。结果表明,合欢花发挥抗抑郁作用主要成分为木犀草素、槲皮素、异鼠李素、腺苷、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷、槲皮素-3-O-α-D-吡喃木糖苷、槲皮素-3-O-α-D-呋喃阿拉伯糖苷、山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷、金丝桃苷、槲皮苷,这些活性成分作用于MAPK1、MMP2、PTGS2、TNF、AR、EGFR、AKT1、MMP9、IGF1R核心靶点后通过HIF-1、MAPK、C-type lectin receptor(CLRs)、AGE-RAGE、IL-17及EGFR络氨酸激酶抑制剂抵抗通路中发挥抗抑郁作用。研究结果表明,合欢花抗抑郁作用是通过多成分、多靶点和多通路共同作用的结果,该研究为合欢花抗抑郁活性作用机制深入研究提供参考。

合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆及海马CREB表达的影响

目的:观察合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马CREB表达的影响。方法:SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组和合欢花组,每组10只。采用孤养加慢性轻度不可预见性应激结合方法构建抑郁模型,氟西汀或合欢花水提物灌胃治疗21 d。空白组给予生理盐水。用药结束后,采用体重测定、旷场试验、糖水实验评估各组大鼠的抑郁情况。Morris水迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力。ELISA法检测海马组织中cAMP含量。免疫组化法检测海马CREB的表达情况。结果:与模型组相比,合欢花组和氟西汀组抑郁症状明显改善。水迷宫结果显示:与空白组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期(EL)明显延长,平台所在象限的游泳时间百分比和穿越站台次数明显减少(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组和合欢花组EL明显缩短,游泳时间百分比和穿越站台次数增加(P<0.05或P<0.01);但氟西汀组和合欢花组以上指标的差异不明显(P>0.05)。海马cAMP含量及CREB平均光密度检测结果显示:与空白组比较,模型组大鼠海马cAMP含量、CREB的平均光密显著降低(P<0.01);与模型组相比,氟西汀组和合欢花组上述指标明显升高(P<0.01);而氟西汀组和合欢花组上述指标无统计学差异(P>0.05)。结论:合欢花水提物可以改善抑郁模型大鼠的抑郁症状提高抑郁大鼠学习记忆能力,其机制可能与提高海马CREB的表达影响cAMP-CREB通路有关。

合欢花的化学成分及其药理作用的研究进展

合欢花作为安神类中药,药用历史悠久,其化学成分种类多样,且药理活性明显。合欢花中的化学成分包括黄酮类、挥发油类、三萜皂苷类、甾体类及鞣质类等。经现代药理研究表明,合欢花具有抗焦虑、抗抑郁、镇静催眠、保肝、抗氧化和抗肥胖等多种作用,具有较大的潜在药用价值。因此本文通过对合欢花的化学成分和药理作用进行综述,为其临床应用和药效物质基础研究提供依据。

合欢花总黄酮抗焦虑作用研究

目的考察合欢花总黄酮的抗焦虑作用。方法雄性ICR小鼠正常组、合欢花黄酮组(2.5、5.0、10.0 g·kg-1)、阳性药物地西泮组各14只。连续给药7天后,采用高架十字迷宫(EPM)焦虑动物模型和明暗箱(LDB)焦虑动物模型,观察合欢花总黄酮对小鼠行为学的影响。结果合欢花总黄酮低、中、高剂量组小鼠进入开臂次数百分比(OE%)和在开臂时间百分比(OT%)均显著高于对照组(P<0.05)。明暗箱实验中合欢花总黄酮低剂量组进入明箱次数和明箱活动时间显著高于对照组(P<0.05)。结论合欢花总黄酮在高架十字迷宫模型和明暗箱模型均显示出抗焦虑作用,其抗焦虑作用机制有待于进一步探讨。

合欢花总黄酮含量的测定及其超声提取工艺研究

[目的]提取并测定合欢花中总黄酮。[方法]采用Al Cl3-甲醇显色-紫外分光光度法测定合欢花中总黄酮的含量,并以总黄酮提取率为指标,通过正交试验优化合欢花中黄酮类化合物的超声提取工艺。[结果]确定紫外检测波长为434 nm,精密度、重复性的RSD分别为0.96%、1.46%,加样回收率为99.6%。超声提取最佳工艺参数为料液比1∶30(g∶m L)、乙醇体积分数80%、温度60℃、提取2次,在此条件下总黄酮提取率为2.94%。[结论]该方法可为进一步开发合欢花资源提供一定的参考。

紫外分光光度法和高效液相色谱法测定合欢花总黄酮含量的比较研究

目的:比较紫外分光光度法和高效液相色谱法测定合欢花总黄酮含量的差异,探讨合欢花总黄酮含量测定方法的可靠性。方法:紫外分光光度发以槲皮苷为指标性成分,在435nm波长处进行测定。高效液相色谱法以槲皮苷计总黄酮含量。结果:紫外分光光度法测得的合欢花总黄酮含量以槲皮苷计为29.8%。高效液相色谱法测得的合欢花总黄酮含量以槲皮苷计为28.2%。结论:紫外分光光度法和高效液相色谱法测定的合欢花总黄酮含量差异较小,紫外分光光度法可以代替高效液相色谱法对总黄酮进行快速测定。

合欢花水提物对抑郁模型大鼠细胞因子的影响

目的观察合欢花水提物对抑郁模型大鼠血清细胞因子IL-2、IL-6和NO的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法 2014年12月—2015年9月选择SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、合欢花组和氟西汀组各10只。模型组、合欢花组和氟西汀组大鼠采用孤养加慢性轻度不可预见性应激结合的方法构建抑郁模型,应激前1 h,空白组、模型组给予生理盐水灌胃,合欢花组给予合欢花水提物灌胃,氟西汀组给予氟西汀灌胃,各组均治疗21 d。用药结束后,采用体重测定、旷场实验观察各组大鼠的体重和体重增加量、水平穿越格数和竖立次数,评估各组大鼠的抑郁情况。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-2、IL-6、NO的变化情况。HE染色观察大鼠前额叶皮质病理形态的改变。计量资料采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果实验处理第21天,模型组大鼠体重、体重增加量、水平穿越格数、竖立次数分别为(230.10±5.36)、(20.10±3.87)g、(52.00±6.41)个、(14.00±3.65)次,均低于空白组的(269.70±7.04)、(60.00±3.74)g、(102.10±4.95)个、(26.80±4.57)次,差异均有统计学意义(均P<0.05)。合欢花组和氟西汀组体重、体重增加量、水平穿越格数、竖立次数分别为(262.80±6.56)、(53.20±4.02)g、(91.70±6.48)个、(22.50±5.70)次、(265.00±7.62)、(55.20±3.65)g、(90.20±6.14)个、(22.70±5.68)次,均高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ELISA结果显示,模型组大鼠血清中的IL-2、IL-6、NO含量分别为(3.519±0.368)、(0.345±0.036)pg/ml、(30.589±7.187)nmol/ml,均明显高于空白组的(2.261±0.370)、(0.160±0.031)pg/ml、(21.169±5.429)nmol/ml,差异均有统计学意义(均P<0.05)。合欢花组及氟西汀组大鼠血清中的IL-2、IL-6、NO含量分别为(2.570±0.390)、(0.190±0.034)pg/ml、(24.353±5.759)nmol/ml、(2.552±0.265)、(0.186±0.033)pg/ml、(23.250±6.655)nmol/ml,均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HE染色结果显示氟西汀组和合欢花组大鼠前额叶皮质病理损伤明显减轻。结论合欢花水提物可以改善抑郁模型大鼠的抑郁症状,减轻脑组织病理损伤,其机制可能与降低抑郁大鼠血清IL-2、IL-6、NO水平有关。