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突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制的初步研究(英文)
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作者 钱时权 李晓玉 +1 位作者 朱苏文 程备久 《激光生物学报》 CAS CSCD 2009年第1期24-30,共7页
聚羟基烷酸酯(PHAs)是一类以胞内颗粒形式存在的能被完全生物降解的贮能物质。本研究利用生物信息学的方法初步分析了离子束诱变选育出的突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制。为了分析高产PHAs特性,实验首先提取pCBH4突变菌株含有合成PHA... 聚羟基烷酸酯(PHAs)是一类以胞内颗粒形式存在的能被完全生物降解的贮能物质。本研究利用生物信息学的方法初步分析了离子束诱变选育出的突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制。为了分析高产PHAs特性,实验首先提取pCBH4突变菌株含有合成PHAs基因的质粒并转化受体菌DH5α,然后根据原始序列设计引物,从突变株pCBH4中扩增出phaA、phaB和phaC基因并对其进行了序列分析。结果表明:转化菌表现出高产PHAs特性;phaA基因在序列末端有7处碱基发生改变,这一变化导致5个氨基酸发生了改变;phaC基因也发生了类似的变化。从这些结果可以推断pCBH4突变株高产PHAs不是由于工程菌基因组遗传变异所致,可能是phaA和phaC基因突变的结果。 展开更多
关键词 合成phas相关基因 生物合成 突变 生物信息学分析
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NPR1多肽抗体的制备和应用 被引量:6
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作者 陈卓 刘家驹 +6 位作者 毕亮 李向阳 胡德禹 于丹丹 王贞超 杨松 宋宝安 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期145-150,共6页
根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好... 根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。 展开更多
关键词 非表达型病程相关蛋白 序列分析 多肽 合成 多克隆抗体
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无鱼粉无鱼油饲料喂养下大黄鱼幼鱼个体间生长及相关基因表达差异 被引量:3
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作者 刘灵婕 林晓煜 +2 位作者 王秋荣 叶坤 王志勇 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第6期401-410,共10页
为了解大黄鱼个体间对无鱼粉无鱼油饲料的适应性差异,配制了无鱼粉无鱼油配合饲料对大黄鱼幼鱼(体重1.75~5.75 g)进行为期70 d左右的饲养,测定不同个体的生长状况、体组织脂肪酸组成,并用qRT-PCR技术检测高度不饱和脂肪酸(highly unsatu... 为了解大黄鱼个体间对无鱼粉无鱼油饲料的适应性差异,配制了无鱼粉无鱼油配合饲料对大黄鱼幼鱼(体重1.75~5.75 g)进行为期70 d左右的饲养,测定不同个体的生长状况、体组织脂肪酸组成,并用qRT-PCR技术检测高度不饱和脂肪酸(highly unsaturated fatty acids,HUFA)合成相关基因表达情况。结果表明:投喂无鱼粉无鱼油饲料饲养的大黄鱼幼鱼个体生长差异显著,各组最大个体体重是其同组最小个体的3~4倍;生长快个体肌肉中EPA含量较生长慢个体高,而DHA含量则相反(P<0.05),但两者之间ΣHUFA差异不显著;Elovl1、Elovl5、Elovl6和Δ6-Fad 4个基因在大黄鱼脑中表达量最高,其次是肝脏,在肌肉中表达量则最低;投喂无鱼粉无鱼油饲料饲养的生长快个体的脑中Elovl1和Δ6-Fad,肝中Elovl5、Δ6-Fad和Elovl1,以及胃和肠中Elovl1的表达量均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于生长慢个体。这说明大黄鱼不同个体之间营养需求或饲料选择性存在显著差异,因此,可通过遗传选育培育出对鱼粉鱼油需求量低的养殖品种。 展开更多
关键词 大黄鱼 鱼粉 鱼油 脂肪酸 生长差异 HUFA合成基因
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