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突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制的初步研究(英文)
1
作者
钱时权
李晓玉
+1 位作者
朱苏文
程备久
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2009年第1期24-30,共7页
聚羟基烷酸酯(PHAs)是一类以胞内颗粒形式存在的能被完全生物降解的贮能物质。本研究利用生物信息学的方法初步分析了离子束诱变选育出的突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制。为了分析高产PHAs特性,实验首先提取pCBH4突变菌株含有合成PHA...
聚羟基烷酸酯(PHAs)是一类以胞内颗粒形式存在的能被完全生物降解的贮能物质。本研究利用生物信息学的方法初步分析了离子束诱变选育出的突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制。为了分析高产PHAs特性,实验首先提取pCBH4突变菌株含有合成PHAs基因的质粒并转化受体菌DH5α,然后根据原始序列设计引物,从突变株pCBH4中扩增出phaA、phaB和phaC基因并对其进行了序列分析。结果表明:转化菌表现出高产PHAs特性;phaA基因在序列末端有7处碱基发生改变,这一变化导致5个氨基酸发生了改变;phaC基因也发生了类似的变化。从这些结果可以推断pCBH4突变株高产PHAs不是由于工程菌基因组遗传变异所致,可能是phaA和phaC基因突变的结果。
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关键词
合成
phas
相关基因
生物合成
突变
生物信息学分析
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职称材料
NPR1多肽抗体的制备和应用
被引量:
6
2
作者
陈卓
刘家驹
+6 位作者
毕亮
李向阳
胡德禹
于丹丹
王贞超
杨松
宋宝安
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期145-150,共6页
根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好...
根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。
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关键词
非表达型病程相关蛋白
序列分析
多肽
合成
多克隆抗体
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职称材料
无鱼粉无鱼油饲料喂养下大黄鱼幼鱼个体间生长及相关基因表达差异
被引量:
3
3
作者
刘灵婕
林晓煜
+2 位作者
王秋荣
叶坤
王志勇
《集美大学学报(自然科学版)》
CAS
2020年第6期401-410,共10页
为了解大黄鱼个体间对无鱼粉无鱼油饲料的适应性差异,配制了无鱼粉无鱼油配合饲料对大黄鱼幼鱼(体重1.75~5.75 g)进行为期70 d左右的饲养,测定不同个体的生长状况、体组织脂肪酸组成,并用qRT-PCR技术检测高度不饱和脂肪酸(highly unsatu...
为了解大黄鱼个体间对无鱼粉无鱼油饲料的适应性差异,配制了无鱼粉无鱼油配合饲料对大黄鱼幼鱼(体重1.75~5.75 g)进行为期70 d左右的饲养,测定不同个体的生长状况、体组织脂肪酸组成,并用qRT-PCR技术检测高度不饱和脂肪酸(highly unsaturated fatty acids,HUFA)合成相关基因表达情况。结果表明:投喂无鱼粉无鱼油饲料饲养的大黄鱼幼鱼个体生长差异显著,各组最大个体体重是其同组最小个体的3~4倍;生长快个体肌肉中EPA含量较生长慢个体高,而DHA含量则相反(P<0.05),但两者之间ΣHUFA差异不显著;Elovl1、Elovl5、Elovl6和Δ6-Fad 4个基因在大黄鱼脑中表达量最高,其次是肝脏,在肌肉中表达量则最低;投喂无鱼粉无鱼油饲料饲养的生长快个体的脑中Elovl1和Δ6-Fad,肝中Elovl5、Δ6-Fad和Elovl1,以及胃和肠中Elovl1的表达量均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于生长慢个体。这说明大黄鱼不同个体之间营养需求或饲料选择性存在显著差异,因此,可通过遗传选育培育出对鱼粉鱼油需求量低的养殖品种。
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关键词
大黄鱼
鱼粉
鱼油
脂肪酸
生长差异
HUFA合成基因
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职称材料
题名
突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制的初步研究(英文)
1
作者
钱时权
李晓玉
朱苏文
程备久
机构
安徽农业大学安徽省生物质材料与能源重点实验室
蚌埠学院食品与生物工程系
出处
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2009年第1期24-30,共7页
基金
Anhui Key Laboratory Foundation(04swz002)
文摘
聚羟基烷酸酯(PHAs)是一类以胞内颗粒形式存在的能被完全生物降解的贮能物质。本研究利用生物信息学的方法初步分析了离子束诱变选育出的突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制。为了分析高产PHAs特性,实验首先提取pCBH4突变菌株含有合成PHAs基因的质粒并转化受体菌DH5α,然后根据原始序列设计引物,从突变株pCBH4中扩增出phaA、phaB和phaC基因并对其进行了序列分析。结果表明:转化菌表现出高产PHAs特性;phaA基因在序列末端有7处碱基发生改变,这一变化导致5个氨基酸发生了改变;phaC基因也发生了类似的变化。从这些结果可以推断pCBH4突变株高产PHAs不是由于工程菌基因组遗传变异所致,可能是phaA和phaC基因突变的结果。
关键词
合成
phas
相关基因
生物合成
突变
生物信息学分析
Keywords
the related genes for synthesizing phas
biosyn
the
sis
mutation
bioin
for
matic analysis
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
NPR1多肽抗体的制备和应用
被引量:
6
2
作者
陈卓
刘家驹
毕亮
李向阳
胡德禹
于丹丹
王贞超
杨松
宋宝安
机构
贵州大学绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地
贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期145-150,共6页
基金
贵州省教育厅自然科学研究项目重点项目[黔科教(2009)0132号]
贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目[黔省专合字(2009)104号]
+2 种基金
农业科技成果转化资金项目(2009GB2F200330)
科技人员服务企业行动项目(2009GJF20047)
贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NY字[2011]3052号)
文摘
根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。
关键词
非表达型病程相关蛋白
序列分析
多肽
合成
多克隆抗体
Keywords
Nonexpressor of patho
genes
is-
related
genes
1(NPR1) Sequence analysis Polypeptide
synthesizing
Polyclonal antibody
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
无鱼粉无鱼油饲料喂养下大黄鱼幼鱼个体间生长及相关基因表达差异
被引量:
3
3
作者
刘灵婕
林晓煜
王秋荣
叶坤
王志勇
机构
集美大学水产学院
农业农村部东海海水健康养殖重点实验室
出处
《集美大学学报(自然科学版)》
CAS
2020年第6期401-410,共10页
基金
海水鱼类产业技术体系专项资金资助项目(CARS-47-G04)
国家科技基础条件平台水产种质资源平台项目(2019DKA30470)
+1 种基金
福建省自然科学基金项目(2018J01450)
福建省教育厅中青年教师教育科研项目(JAT170302)。
文摘
为了解大黄鱼个体间对无鱼粉无鱼油饲料的适应性差异,配制了无鱼粉无鱼油配合饲料对大黄鱼幼鱼(体重1.75~5.75 g)进行为期70 d左右的饲养,测定不同个体的生长状况、体组织脂肪酸组成,并用qRT-PCR技术检测高度不饱和脂肪酸(highly unsaturated fatty acids,HUFA)合成相关基因表达情况。结果表明:投喂无鱼粉无鱼油饲料饲养的大黄鱼幼鱼个体生长差异显著,各组最大个体体重是其同组最小个体的3~4倍;生长快个体肌肉中EPA含量较生长慢个体高,而DHA含量则相反(P<0.05),但两者之间ΣHUFA差异不显著;Elovl1、Elovl5、Elovl6和Δ6-Fad 4个基因在大黄鱼脑中表达量最高,其次是肝脏,在肌肉中表达量则最低;投喂无鱼粉无鱼油饲料饲养的生长快个体的脑中Elovl1和Δ6-Fad,肝中Elovl5、Δ6-Fad和Elovl1,以及胃和肠中Elovl1的表达量均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于生长慢个体。这说明大黄鱼不同个体之间营养需求或饲料选择性存在显著差异,因此,可通过遗传选育培育出对鱼粉鱼油需求量低的养殖品种。
关键词
大黄鱼
鱼粉
鱼油
脂肪酸
生长差异
HUFA合成基因
Keywords
Larimichthys crocea
fish meal
fish oil
fatty acid
growth variation
HUFA syn
the
sizes
related
genes
分类号
S917.4 [农业科学—水产科学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
突变工程菌pCBH4高产PHAs分子机制的初步研究(英文)
钱时权
李晓玉
朱苏文
程备久
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2009
0
下载PDF
职称材料
2
NPR1多肽抗体的制备和应用
陈卓
刘家驹
毕亮
李向阳
胡德禹
于丹丹
王贞超
杨松
宋宝安
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
6
下载PDF
职称材料
3
无鱼粉无鱼油饲料喂养下大黄鱼幼鱼个体间生长及相关基因表达差异
刘灵婕
林晓煜
王秋荣
叶坤
王志勇
《集美大学学报(自然科学版)》
CAS
2020
3
下载PDF
职称材料
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