白首乌甾体总苷的体外抗肿瘤作用

体外用细胞生长曲线法、MTT试验、蛋白质含量测定法及形态学观察研究了白首乌甾体总苷 (CG)的抗肿瘤作用。结果表明 :CG对 Hce- 86 93、PC3、Hela、PAA4种实体瘤细胞均有较强的体外细胞毒作用 ,且呈浓度依赖性。 CG作用于 Hela细胞 4d,形态观察表现为细胞膜皱缩、细胞核固缩。

白首乌提取物对小鼠肝癌细胞H_(22)的抑制作用

目的:研究白首乌提取物对小鼠肝癌细胞H22的抑制作用。方法:建立H22细胞移植性肿瘤模型小鼠,随机分为白首乌低剂量(50μg/mL)组、中剂量(100μg/mL)组、高剂量(200μg/mL)组、空白对照组、模型组、阳性对照组共6组,给药15d后处死测量小鼠的瘤重,胸腺指数,脾指数和bax、bcl-2在瘤组织中的表达程度。结果:白首乌具有明显的抗肿瘤作用。结论:白首乌对小鼠肝癌细胞H22有抑制作用,对小鼠免疫器官无明显影响,同时,能够增加肿瘤组织中凋亡细胞的数量,增加抑癌基因bax蛋白的表达,并可减少癌基因bcl-2蛋白的表达。

白首乌提取物体外抗肝癌Bel7402活性物质的筛选

以Bel7402,L02两株细胞为筛选模型,研究了滨海白首乌抗癌活性。用乙醇做溶媒,通过对不同提取条件下提取的产物进行体外细胞毒活性试验及优化,确定了滨海白首乌抗癌活性物质的最佳提取条件为:温度37℃,时间2 h,料液比为1∶10,提取1次。醇提物经过大孔吸附树脂、硅胶柱进一步分离,得到活性成分最佳的组分Ⅱ,经过定性研究,确定此组分是由甾体、三萜、酚类、生物碱为主及少量的糖类组成。

白首乌中的C_(21)甾体苷的提取及纯化工艺研究

目的优化白首乌中C21甾体苷类成分的提取及纯化工艺。方法以白首乌C21甾体苷为考察对象,单因素、正交实验优化提取工艺,考察纯化C21甾体苷的大孔吸附树脂的型号、除杂溶剂、洗脱溶剂及洗脱参数。结果确定8倍量的95%乙醇回流提取2次,每次1.5h,选用HPD-100大孔吸附树脂,分别用2BV的水、1BV的20%的乙醇作为除杂溶剂、3BV 70%乙醇富集洗脱,所得固体中C21甾苷的含量达49%。结论此法提取纯化白首乌中C21甾体苷工艺简单、产物纯度高,可为C21甾体苷的进一步研究提供依据。

白首乌苷B抗结肠癌作用的研究

目的:评价白首乌苷B(简称CGB)体内外抗结肠癌作用,并探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测CT-26、HT-29、SW-620和HCT-116四种结肠癌细胞在CGB处理24、48、72 h后的细胞活性;采用流式细胞仪检测PI单染和Annexin V-FITC/PI双染后的细胞周期及细胞凋亡率;采用Western Blot方法测定细胞内周期蛋白的水平;采用CT-26小鼠和HT-29裸鼠移植性肿瘤模型,评价CGB的体内抗肿瘤作用。结果:CGB体外对四种结肠癌细胞有明显的增殖抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;CGB能增加结肠癌细胞G0/G1期的比例,同时降低S期和G2/M期的比例,使细胞阻滞于G1期而无法进入S期;CGB能增加晚期凋亡细胞比例,但对早期凋亡和坏死细胞无明显影响;CGB能下调结肠癌细胞中周期蛋白CDK6、cyclin D1和CDK4的表达,且具有明显的量-效关系;CGB对移植性CT-26和HT-29肿瘤的生长具有明显的抑制作用。结论:CGB具有良好的抗结肠癌作用,其作用机制与诱导细胞凋亡、下调周期蛋白的表达、阻滞细胞周期、促使肿瘤组织坏死有关。

炮制前后隔山消对荷S_(180)肉瘤小鼠的影响

目的比较炮制前后隔山消对荷S180肉瘤小鼠的抑瘤率和毒性。方法 KM小鼠接种S180瘤株造成荷瘤小鼠模型。观察比较隔山消生品及两种炮制品的水提物的抑瘤率和毒性。结果 3种水提物对小鼠S180肉瘤的最大抑制率分别为54.64%5,4.22%和46.93%。无明显毒性。结论隔山消炮制前后均对小鼠S180肉瘤有一定抑制作用,且无明显的毒性。

白首乌的组织培养和快速繁殖技术研究

建立和优化白首乌组织培养克隆化快速繁殖技术,为保护白首乌的野生资源,发展人工资源和探讨育种新途径奠定基础。在组织培养条件下进行白首乌愈伤组织的诱导、分化,试管苗复壮和生根等一系列技术优化试验。在培养基中适当添加矮壮素(PP333)能显著改善试管苗的素质,萘乙酸(NAA)对植株愈伤组织的生成具有十分有效的作用。PP333和NAA与激素配合使用,能十分有效地调控白首乌愈伤组织的分化、试管苗的生长与生根。