Irradiation Injury Temporarily Induces Enhancement of APN/CD13 Peptidase Activity on Aorta-gonads-mesonephros (AGM)-derived Stromal Cells

This study was designed to investigate the expression of aminopeptidase N （APN）/CD13 on intraembryonic AGM stromal cells, and the change of its enzymatic activity after irradiation injury. The expression of APN/CD13 on AGM stromal cells was assayed by RT-PCR and immunihistochemistry. After the stromal cells in AGM region were irradiated with 8.0 Gy of ^60Co T-rays, APN/CD13 enzymatic activity was measured by spectrophotometer at different time points. The result showed that AGM stromal cells strongly expressed APN/CD13. The enzymatic activity of APN/CD13 decreased temporarily after irradiation injury, then increased to higher level 4 h after irradiation, and it returned to the pre-irradiation level 24 to 48 h after the irradiation. The enzymatic activity of APN/CD13 was temporarily enhanced after irradiation injury, which might be one of the compensatory mechanisms that promote the hematopoietic recovery after irradiation.

VEGFA、VEGFC及其受体和angiopoietin-1/angiopoietin-2及其受体在人胚胎卵黄囊血岛、AGM区的表达

本研究观察VEGFA、VEGFC及其受体和angiopoietin 1、angiopoietin 2及其受体在发育第 3- 12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉 生殖腺 中肾 (AGM )区的表达。在征得意外流产孕妇同意并签字后 ,收集其意外流产的受精龄第 3- 12周的人胚胎 ,用 4 %多聚甲醛固定 ,石蜡包埋切片 ,HE和免疫组织化学染色 ,光镜观察。结果表明 :第2 1- 2 5天人胚卵黄囊血岛血管内皮细胞和造血细胞强表达VEGFA及其受体flt1和flk 1,VEGFC及其受体flt4 ,angiopoietin 2及其受体Tie 2蛋白 ;弱表达angiopoietin 1蛋白。背主动脉和中肾于发育第 4周开始表达上述各种因子及其受体 ,免疫阳性反应物集中在大而圆、有核的造血细胞。阳性细胞的数量到第 7周到达高峰。 8周以后 ,阳性细胞数量显著减少 ,到 12周几乎所有的血细胞为免疫阴性反应。生殖腺主要在第 6 - 8周表达VEGFA ,flt1,flt4 ,angiopoietin 1,angiopoietin 2和Tie 2蛋白 ,但不表达VEGFC和flk 1。在AGM区的血管内皮细胞未检测到上述各因子的表达。结论 :人胚胎卵黄囊血岛造血细胞和内皮细胞以及背主动脉和中肾共表达多种与血管发生和血液发生相关的因子。人胚内造血发生于第 4周。

人AGM区基质细胞对脐血LTC-IC的支持作用

为探讨人主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞对脐血长期培养启动细胞(LTC-IC)的造血支持作用,建立了人AGM区基质细胞与脐血CD34+细胞体外长期共培养体系。采用免疫磁珠方法分离人脐血CD34+细胞,接种于已制备好人AGM区基质细胞(hAGMS1-S5)饲养层的24孔板中共培养,同时设无饲养层组作为对照,分别于共培养5、6、7、8周时收获细胞行造血细胞集落培养,并采用极限稀释法(LDA)检测与人AGM区基质细胞共培养后的脐血CD34+细胞的LTC-IC含量。结果表明,无饲养层的对照组培养5周后不再产生造血细胞集落,而以hAGMS1-S5作为饲养层,共培养5周后造血细胞仍具有集落形成能力。hAGMS1-S5维持LTC-IC的作用组间比较有显著性差异(P<0.05),其中以hAGMS3与S4组支持作用最强。LDA检测结果显示,hAGMS3和S4维持LTC-IC的能力无显著性差异(P>0.05);与hAGMS3和S4共培养14天后脐血CD34+细胞中的LTC-IC扩增,分别是达到(176±46)%、(187±52)%,S3和S4两组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论:人AGM区基质细胞S1-S5对脐血LTC-IC具有维持作用,特别是hAGMS3和S4两株细胞对脐血LTC-IC具有更好的维持及扩增作用。

人AGM区基质细胞系的建立及其生物学特性

【目的】建立人主动脉鄄性腺鄄中肾(AGM)区基质细胞系,研究其生长特性及表面标志的表达。【方法】取孕30～35d的人胚胎分离培养AGM区基质细胞,传代培养成系并检测其增殖能力,应用流式细胞术、免疫荧光方法检测其造血相关表面标志和细胞外基质蛋白成分。【结果】人AGM区基质细胞呈成纤维样形态,指数生长期倍增时间约为16h。流式细胞仪检测结果显示CD31、CD34、CD45在人AGM区基质细胞表面为阴性表达,而CD29、CD44、CD105、CD166均为阳性表达。免疫荧光检测结果显示AGM区基质细胞表达细胞外基质蛋白Tenascin、Fibronectin、Laminin及α鄄SMA。【结论】人AGM区基质细胞系呈现造血组织特异的相关分子表达特征,可以作为研究造血发生机理的模式细胞。

小鼠胚胎AGM区永生化MSC样基质细胞的分离及其生物学特征

为了探讨小鼠胚胎主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区基质微环境对胚胎造血的作用,分离鉴定小鼠背主动脉(dorsalaorta,DA)来源间充质干细胞样基质细胞(mesenchymal stem cell like stromal cells,MSC like stromal cells)并研究其生长特性、表面标志和间质分化能力。取E11.5小鼠胚胎,分离获得DA区细胞,转染质粒pSV3neo-SV40,筛选具有G418抗性的阳性细胞,挑取成纤维样细胞,传代培养并检测其增殖能力,应用流式细胞术检测相关表面标志,诱导其向脂肪、成骨和成软骨细胞分化。结果表明:筛选获得的20个细胞克隆多为成纤维样细胞。mDAF3和mDAF18可在体外传代50代以上,稳定表达G418抗性,细胞倍增时间约为24小时,具有向成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞分化的能力,流式细胞术检测结果显示其表达CD29、CD44、CD105、Sca-1,弱表达CD34,CD45和CD31。结论:永生化的mDAF3和mDAF18具有MSC的表型特征和分化功能,提示小鼠胚胎DA区可能存在MSC,小鼠胚胎DA区MSC样基质细胞可为研究基质微环境对胚胎造血发育的调控作用提供支持细胞。

人胚胎造血的AGM区基质细胞基因表达谱分析

为了筛选在主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞中差异表达的基因,以药物流产的孕30-35天的人胚胎AGM区来源基质细胞为“实验方”,以源自意外而致流产的孕4-5月的水囊引产的胎儿肝组织的基质细胞为“驱动方”,建立了在人AGM区基质细胞中差异表达基因的消减杂交文库。进一步用基因芯片技术对所建立的抑制消减杂交文库进行筛选,并挑选其中明显差异表达的18个克隆进行序列测定和同源性分析。结果表明在所构建的AGM抑制消减杂交文库中,经过PCR鉴定有特异性扩增带且扩增带分子量在200-700bp的克隆有211个,阳性率高达76.4%。经过基因芯片筛选,挑选出ratio值大于5的克隆共18个进行序列测定显示,在测序的18个明显差异表达的阳性克隆中,4个为未知基因,14个为已知基因,其中这些已知基因分别参与了细胞迁移、分化、生长、细胞周期、信号转导及血管发生等细胞重要生命过程。这些基因大多数在胚胎分化造血发育中的作用尚未见报道。结论筛选AGM区基质细胞中差异表达的基因为进一步研究胚胎造血发育的分化调控的分子机理提供了必要的理论基础。

内皮细胞特异性缺失PTEN基因对小鼠胚胎AGM区血液血管干细胞发育的影响

本研究探讨内皮细胞特异性缺失PTEN基因能否影响小鼠胚胎AGM区血液血管干细胞(hemangioblast)的发育。基于Cre/loxP系统,获得Tie2CrePtenloxp/loxp和Tie2CrePtenloxp/wt基因型小鼠胚胎。采用PCR方法进行基因型鉴定;分离E10-E10.5胚胎AGM区,用胶原酶消化成单细胞,在甲基纤维素半固体体系里进行BL-CFC(blastcolony-forming cell)培养,4-5天后计数BL-CFC数目。将单个BL-CFC挑出进行扩增培养,悬浮细胞进行造血集落培养,贴壁细胞在Matrigel上进行体外成血管实验,鉴定其双向分化功能。结果表明:内皮细胞特异性缺失PTEN基因,小鼠胚胎AGM区BL-CFC数量下降;同时,BL-CFC的造血分化能力增强,但BL-CFC来源的内皮细胞体外成血管能力下降。结论:内皮细胞特异性缺失PTEN基因,可以在血液血管干细胞水平影响造血和内皮细胞的分化。

组织培养用于小鼠胚胎AGM区造血发育的研究

本研究通过建立组织培养方法探讨小鼠胚胎主动脉-性腺-中肾区(AGM)区造血发育规律。选取小鼠胚胎AGM区作为实验对象,体外组织培养2天后,应用集落形成实验观察髓系祖细胞的数量,应用体内移植考察CFU-S11和造血干细胞的发育。结果表明:组织培养后的AGM区细胞仍然具有形成髓系集落的能力;每个胚胎期10.5天(E10.5)AGM区在致死剂量照射的成年小鼠脾脏中可形成10.8±3.5个CFU-S11。更重要的是,经组织培养的E10.5-E11.5 AGM区能高比例(85.7%)、高嵌合〔(51.12±21.17)%〕、长期(>4个月)重建受致死剂量照射的成年小鼠的造血系统,在受鼠的外周血、骨髓、脾脏、胸腺中均能检测到供体来源的淋系或髓系祖细胞嵌合。结论:应用本研究建立的组织培养体系可对正常或基因突变胚胎AGM区中的多种造血起始细胞(尤其是造血干/祖细胞)进行发育动力学研究。

含人AGM区基质细胞对小鼠胚胎干细胞诱导体外分化为造血干/祖细胞的作用

为探讨人主动脉一性腺一中肾(AGM)区基质细胞对小鼠胚胎干细胞(em bryonic stem cells,ESC)体外诱导分化为造血干细胞(HSC)的影响及其作用机制,将小鼠E14ESC诱导为拟胚体(EB),收获的EB细胞以Transw ell非接触共培养体系分别在人AGM区、胎肝(FL)或骨髓(BM)基质细胞饲养层上进一步诱导分化,分为EB对照、AGM诱导、FL诱导、BM诱导、AGM+FL诱导和AGM+BM诱导共6组。分别收获各组EB来源细胞,以流式细胞仪检测Sca-1+c-K it+细胞含量,并进行各系造血细胞集落形成单位(CFU)分析。结果显示:经不同基质细胞饲养层诱导后EB来源细胞中Sca-1+c-K it+细胞比例均较诱导前明显升高(p<0.01),AGM+FL诱导组为(21.96±2.54)%,显著优于其它诱导组(p<0.01),AGM+BM诱导组阳性细胞比例亦较单纯BM诱导组明显增加(p<0.01);EB对照组造血集落产率明显低于其它诱导组,AGM+FL、AGM+BM诱导组集落产率较高,尤以AGM+FL诱导组最佳(p<0.01)。结论:人AGM区基质细胞有助于维持一定的原始HSC数目及高增殖潜能,在AGM区基质细胞诱导基础上可明显提高FL或BM基质细胞对ESC源性原始HSC的进一步扩增作用。

BMP-4在人AGM区基质细胞的表达

本研究旨在观察BMP-4在人胚胎主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞的表达,为建立含AGM区基质细胞的诱导胚胎干细胞造血分化培养体系提供理论和实验依据。体外传代培养人胚胎AGM区基质细胞(hAGM S1-S5)及取自同期胚胎的躯干成纤维细胞(hFT),采用RT-PCR方法在mRNA水平分析BMP-4在hAGM S1-S5的表达情况,并应用ELISA方法测定BMP-4在hAGM S1-S5细胞培养上清液中的分泌水平,同时以hFT细胞作为对照。结果表明:体外培养中的hAGM S1-S5细胞形态学表现主要为成纤维间质细胞样,少量呈内皮样,是早期胚胎AGM区来源的异质细胞群。hAGM S1-S5细胞均表达BMP-4 mRNA,hFT不表达BMP-4 mRNA。hAGM S1-S5细胞培养上清液中可测得分泌的BMP-4,其分泌水平(pg/ml)分别为55.98±11.20、61.16±9.39、76.26±11.31、86.38±18.34、85.39±21.22,与hFT对照组(16.76±7.04pg/ml)相比有显著性差异(p<0.05),hAGM S1-S5组间比较BMP-4水平无显著性差异(p>0.05)。结论:体外培养中的人AGM区基质细胞表达BMP-4,与AGM区基质细胞支持造血干细胞原始发生的功能相关。

人AGM区及胎肝基质细胞促进小鼠胚胎干细胞向造血干细胞分化和体内造血重建

目的:探讨小鼠胚胎干细胞(ESCs)经人主动脉-性腺-中肾(AGM)区及胎肝(FL)基质细胞程序诱导后,向造血干细胞(HSCs)分化的效率及其造血功能。方法:将E14 ESCs诱导为拟胚体(EB),并在人AGM区及FL基质细胞饲养层上进一步诱导分化,培养6 d后收集细胞检测Sca-1+c-Kit+细胞含量、分析造血细胞集落形成能力及致瘤性。再将不同诱导阶段的EB来源细胞移植经致死量[60Co]γ射线辐照的BALB/c雌鼠,观察生存率、植入状况和造血重建。结果:(1)EB来源细胞经人AGM区及FL基质细胞程序诱导后Sca-1+c-Kit+细胞含量为(21.96±2.54)%,造血集落总数为(520±52)/105cells,明显优于诱导前及人AGM区基质细胞初步诱导者(P<0.05)。(2)NOD-SCID小鼠接种经人AGM区及FL基质细胞诱导的ESCs未见畸胎瘤。(3)BALB/c雌鼠移植经人AGM区及FL基质细胞诱导的EB来源细胞后生存率77.8%,14 d外周血细胞计数明显改善,存活受鼠均检测到供体来源sry基因,而移植人AGM区基质细胞诱导的EB细胞者15 d内全部死亡。结论:人AGM区及FL基质细胞能促进小鼠ESCs定向分化为HSCs,有效重建体内造血功能。

人胚AGM区造血干／祖细胞的分离及其在含AGM区基质细胞体系中的培养

本研究分离人胚主动脉-性腺-中肾(AGM)区造血干/祖细胞(HSPC)并在含人AGM区基质细胞的培养体系中进行培养,以了解人AGM区基质细胞对HSPC的作用。以免疫组织化学方法检测人胎龄28-45天胚胎AGM区细胞CD34、Flk-1、VEGF的表达;分离AGM来源的HSPC,通过直接接种和经Transwell非直接接触两种方法接种于含人AGM区基质细胞系(hAGMS3和hAGMS4)饲养层的培养体系,观察HSPC生长情况和卵石区形成细胞(cobblestone area-forming cells,CAFC)并计数卵石区(cobblastone area,CA);用间接免疫荧光方法检测培养体系中悬浮细胞和CAFC的CD34、Flk-1表达;收获细胞进行半固体造血集落培养以检测两种培养方法对AGM-HSPC的集落形成能力影响。结果表明:人AGM区造血细胞表达CD34和Flk-1。两种接种方法均显示有CFC形成,直接接触培养能形成CD34和Flk-1双阳性的CAFC,集落总数明显高于非接触培养(hAGMS3体系:1647±194vs389±31,p<0.05;hAGMS4体系:1586±75vs432±35,p<0.05)。结论:①人胚AGM区含有CD34+Flk-1+的HSC。②首次建立含人胚AGM基质细胞的AGM-HSPC培养体系,直接接触培养和非直接接触培养均能促进AGM-HSC的生长,AGM基质细胞与HSC直接接触发挥重要作用。

AGM区与胚胎期造血

哺乳动物造血在胚胎发育过程中出现于不同的解剖部位 ,这些部位参与了原始造血或永久造血。造血干细胞的起源问题一直是造血领域的争论焦点。以往认为 ,它起源于胚外的卵黄囊。然而 ,近年来 ,有相当多的证据表明 ,造血干细胞最早起源于截然不同的区域———胚内中胚层中的主动脉 性腺 中肾区 ,简称AGM区。本文综述了有关造血干细胞在胚胎和AGM区中的起源与定位 ,AGM区造血微环境以及其中的分子调控机制等问题。

小鼠胚胎AGM区Flk-1^+细胞的造血特性

本研究旨在考察Flk-1分子在胚胎期10.5 d(E10.5)的主动脉-性腺-中肾区(AGM区)不同类型造血前体细胞的表达情况。通过流式细胞术分析发现低于10%的Flk-1+细胞与CD41、CD45/Ter119有共表达,继而分选出CD31+CD45-Ter119-Flk-1+CD41+(R1,代表不成熟的造血前体细胞)和CD31+CD45-Ter119-Flk-1+CD41-(R2,代表内皮细胞)两群细胞,利用造血集落培养和OP9共培养体系分别考察其体外的髓系与淋系潜能。结果表明:仅R1组细胞能在造血集落培养体系中形成典型的造血集落,但与OP9共培养7-9 d后,两组细胞均能产生丰富的造血前体细胞(CD45+c-Kit+)、髓系细胞(Gr-1+/Mac-1+)、红细胞(Ter119+)和B淋巴细胞(CD19+)。结论:E10.5的小鼠胚胎AGM区Flk-1仍然在幼稚的造血前体细胞以及更早期的生血内皮细胞表达,但是此时的造血干细胞前体和造血干细胞是否表达Flk-1仍需通过体内功能实验明确。

AGM区基质细胞对异基因骨髓移植后造血重建及GVHD的影响

目的探讨AGM区基质细胞对异基因骨髓移植后造血重建及GVHD的影响。方法以7．5Gy60Co γ射线照射的BALB／ C小鼠为骨髓移植模型,将小鼠分为四组,A:正常对照组、B:空白对照组、C:异基因骨髓单个核细胞单纯移植组、 D:异基因AGM区基质细胞和骨髓单个核细胞联合移植组,计数并比较各组小鼠骨髓移植后第4、11、18d的WBC及BMMNC 数目,观察并记录比较C、D两组小鼠的一般情况和存活时间及存活率等各项GVHD指标。结果联合移植组在照射后第 11、18d的白细胞及骨髓单个核细胞计数均高于单纯移植组,至第18d已趋近于正常。且联合移植组GVHD发生时间较晚, 存活率显著高于单纯移植组。结论 AGM区基质细胞不仅能加快造血重建,还能延缓移植后GVHD的发生,降低死亡率, 提高移植成功率。

Nfic基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-20a靶向关系的验证

目的构建核因子C(nuclear factor I-C,Nfic)基因3′非编码区(3′UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证micro RNA-20a(miR-20a)与其潜在靶基因Nfic的靶向关系。方法通过micro RNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-20a与Nfic基因3′UTR潜在的互补结合位点;PCR扩增出Nfic基因3′UTR序列,将此序列克隆至荧光素酶报告载体p MIR-Report Luciferase;将重组荧光素酶报告质粒与miR-20a mimics(实验组)或NCmimics(对照组)共同转染293-AD细胞,收集细胞后通过双荧光素酶报告系统检测2组细胞的荧光素酶活性,从而对Nfic与miR-20a的靶向调节关系进行鉴定。将miR-20a mimics和NC mimics分别转染骨髓基质细胞系ST2,裂解细胞提取蛋白后采用Western blotting检测NFIC蛋白的表达水平。结果构建的重组荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确。双荧光素酶报告基因检测显示,与对照组相比,miR-20a可以抑制Nfic 3′UTR报告基因载体的荧光素酶活性(P<0.05);Western blotting结果显示,与对照组相比,ST2细胞转染miR-20a mimics后NFIC蛋白表达水平明显下调。结论成功构建了Nfic基因3′UTR荧光素酶报告质粒,而miR-20a可以直接作用于Nfic基因3′UTR,抑制其荧光素酶活性。

人胚胎AGM区基质细胞在体外培养中对脐血CD34^+细胞的支持作用

目的探讨人主功脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞对脐血 CD34^+细胞的造血支持作用。方法采用免疫磁珠法分离人脐血 CD34^+细胞,接种于底层已制备好的人 AGM 区基质细胞 S1～S5饲养层的24孔板中,同时设无饲养层组及取自同期胚胎的躯干成纤维(hFT)细胞为对照,体外培养28 d,每7 d 收获细胞并检测总数,流式细胞术检测 CD34^+、CD34^+ CD38^-细胞含量,并行造血细胞集落培养。结果在未加外源性造血生长因子的条件下,5株人 AGM 区基质细胞 hAGMS1～S5对制造血细胞总数、CD34^+及 CD34^+CD38^-细胞、造血细胞集落均有不同程度的扩增及维持作用,与无饲养层组、hFT 细胞组比较差异有统计学意义(P<0.05)。细胞总数在21d 达到峰值[扩增(25.13±4.83)倍],CD34^+、CD34^+CD38^-细胞在扩增14 d 达到峰值[(2.68±0.51)倍、(2.38±0.45)倍],高增殖潜能集落形成单位(HPP-CFU)亦在14 d 达到峰值[(2.62±0.85)倍]。hAGMS1～S5的造血支持作用组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05),其中 hAGMS3、S4优于 S1、S2及 S5。结论人 AGM 区基质细胞对脐血 CD34^+细胞具有维持及扩增作用,特别是 hAGMS3、S4两株细胞具有更好的维持作用。

区域软脑膜侧支循环评分及外周血ACE、SDF-1α与急性前循环脑梗死静脉溶栓预后的关系

目的探究区域软脑膜侧支循环(rLMC)评分及外周血血管紧张素转化酶(ACE)、基质细胞衍生因子(SDF)-1α水平与急性前循环脑梗死(AACI)静脉溶栓预后的关系。方法选择2018年8月至2022年8月济南市第三人民医院收治的117例AACI患者,根据静脉溶栓后3个月改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为预后良好组(mRS评分0~1分,n=70)与预后欠佳组(mRS评分2~5分,n=47),比较两组临床资料、rLMC评分、ACE、SDF-1α水平,分析rLMC评分、ACE、SDF-1α与AACI患者入院时美国国立卫生院神经功能缺损评分(NHISS)的相关性,采用logistic多因素分析AACI静脉溶栓预后的影响因素,评价各指标对AACI静脉溶栓预后的预测效能采用受试者工作特征曲线(ROC)分析。结果多因素logistic分析显示,入院时NIHSS评分升高、rLMC评分降低、ACE升高、SDF-1α降低是AACI静脉溶栓预后欠佳的独立危险因素(r=0.357,P<0.05)。117例AACI患者rLMC评分、SDF-1α与入院时NIHSS评分呈负相关(r=-0.402、-0.577,P<0.05),ACE与入院时NIHSS评分呈正相关(P<0.05)。rLMC评分、ACE、SDF-1α联合对AACI静脉溶栓预后的预测效能最高(AUC=0.824)。结论rLMC评分及外周血ACE、SDF-1α水平与AACI静脉溶栓预后关系密切,有望作为AACI静脉溶栓治疗3个月后不良结局的预测因子。

γ射线对小鼠主动脉性腺中肾区基质细胞氨基肽酶N／CD13活性的影响

目的探讨小鼠主动脉性腺中肾（AGM）区基质细胞氨基肽酶N／CD13（APN／CD13）的表达和放射损伤前后该酶活性的变化及意义。方法采用免疫组织化学染色、RT-PCR检测AGM区基质细胞APN／CD13的表达；^60Coγ射线8．0Gy照射细胞，在不同的时间点用分光光度计检测APN／CD13的酶活性。结果AGM区基质细胞APN／CD13呈强阳性表达；放射损伤后酶活性呈一过性降低，继而升高，4h达高峰，24—48h基本恢复至照射前水平。结论APN／CD13在AGM区基质细胞上呈强阳性表达；在放射损伤后酶活性增高，可能是促进造血功能恢复的一种代偿机制。

分区式脊髓导管联合骨髓基质干细胞修复脊髓横断损伤

目的探讨分区式脊髓导管联合骨髓基质干细胞在大鼠脊髓横断损伤模型中的修复作用。方法分区式脊髓导管联合骨髓基质干细胞桥接大鼠T8脊髓5mm全横断损伤，术后3个月观察修复效果。结果电生理检测显示皮层运动诱发电位的潜伏期（5．50±0．35）ms，与对照组比较较短，振幅（65．9±10．2）IxV，比对照组大（P〈0．05）；对桥接中间段进行神经微丝蛋白（NF）免疫荧光组织化学染色，可见再生神经纤维有序排列，电镜观察可见新形成的有髓神经纤维数量为11±4，高于对照组（P〈0．05）。结论分区式脊髓导管联合骨髓基质干细胞可桥接脊髓横断造成的缺损，促进有髓神经纤维再生，重建下行运动神经通路，部分恢复电生理特性。