期刊文献+
共找到33篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
Cocktail of Theileria equi antigens for detecting infection in equines
1
作者 Shimaa Abd El-Salam El-Sayed Mohamed Abdo Rizk +6 位作者 Mohamed Alaa Terkawi Ahmed Mousa El Said El Shirbini El Said Gehad Elsayed Mohamed Fouda Naoaki Yokoyama Ikuo Igarashi 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2015年第12期977-981,共5页
Objective:To use two diagnostic antigens belonging to the frequently associated in Theileria domain,Theileria equi(T.equi)protein 82(Te 82)and T.equi 104 k Da microneme-rhoptry antigen precursor(Te 43),to diagnose T.e... Objective:To use two diagnostic antigens belonging to the frequently associated in Theileria domain,Theileria equi(T.equi)protein 82(Te 82)and T.equi 104 k Da microneme-rhoptry antigen precursor(Te 43),to diagnose T.equi infection in horses as compared with equi merozoite antigen-2(EMA-2).Methods:In the current study,we applied a cocktail-ELISA containing two antigens(EMA-2+Te 82)to diagnose T.equi infection either in experimentally infected horses or in field infection.Results:Our findings have revealed that a cocktail formula of EMA-2+Te 82 provided a more practical and sensitive diagnostic candidate for diagnosing T.equi infection in horses as compared with Te 82 or Te 43 alone.Conclusions:The ELISA technique using a cocktail formula of EMA-2+Te 82 offers a practical and sensitive diagnostic tool for diagnosing T.equi infection in horses and using of this promising cocktail formula will be applicable for epidemiological surveys and will help control the infection in horses. 展开更多
关键词 theileria equi equi MEROZOITE antigen-2 theileria
下载PDF
基于Hsp70基因的马梨形虫分类学定位分析 被引量:7
2
作者 罗金 刘光远 +4 位作者 田占成 谢俊仁 张萍 沈辉 党根生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期3694-3700,共7页
【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBan... 【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBank中23种已知虫种的相应序列进行分析比较。【结果】该片段编码639个氨基酸,其疏水性氨基酸达到208个,极性氨基酸167个。同一性分析显示,该基因片段与报道的马巴贝斯虫Hsp70基因(B.equi BAF02625.1)亲缘关系最近,其次是小泰勒虫(T.parva XP764717.1)和环形泰勒虫(T.annulata AAA30130.1),而与感染马属动物的另一个虫种驽巴贝斯虫(B.caballi BAF02619.1)亲缘关系较远。【结论】马泰勒虫Hsp70基因的克隆及系统发育分析显示,之前被定名为马巴贝斯虫(B.equi)的虫种隶属于泰勒虫虫种。本试验为马巴贝斯虫正确更名为马泰勒虫(T.equi)的分类地位提供了又一佐证。 展开更多
关键词 马泰勒虫 努巴贝斯虫 热休克蛋白(Hsp70) 分类学定位
下载PDF
马泰勒虫病PCR检测方法的建立和应用 被引量:11
3
作者 罗金 刘光远 +2 位作者 谢俊仁 田占成 党根生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期28-31,共4页
为寻求一种快速、有效的马泰勒虫(Theileria equi,T.equi)PCR检测方法。基于马泰勒虫18SrRNA基因序列,在其V4高变区设计特异性引物Te-18F、Te-18R,通过PCR技术获得了531bp的核酸片段。用该引物对马泰勒虫、马泰勒虫和驽巴贝斯虫混合样... 为寻求一种快速、有效的马泰勒虫(Theileria equi,T.equi)PCR检测方法。基于马泰勒虫18SrRNA基因序列,在其V4高变区设计特异性引物Te-18F、Te-18R,通过PCR技术获得了531bp的核酸片段。用该引物对马泰勒虫、马泰勒虫和驽巴贝斯虫混合样本、驽巴贝斯虫、尤氏泰勒虫、中华泰勒虫、环形泰勒虫、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫和瑟氏泰勒虫基因组模板进行特异性试验。同时对马泰勒虫基因组模板进行不同浓度稀释后扩增,以便于确定试验的敏感性。用本试验建立的方法与常规显微镜镜检方法对45份马属动物血样进行检测。特异性试验显示,在被检测的9个样本中,只有马泰勒虫及马泰勒虫和驽巴贝斯虫混合模板中扩增出了符合大小的特异核酸片段。驽巴贝斯虫、尤氏泰勒虫、中华泰勒虫、环形泰勒虫、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫和瑟氏泰勒虫的扩增结果均为阴性。灵敏度试验结果表明,PCR对马泰勒虫的扩增效率可达到10-13。对本试验建立的PCR检测马泰勒虫方法评估结果显示,PCR对马泰勒虫的检出率为17.78%(8/45),显微镜镜检结果只有8.89%(4/45)两者的符合率为100%。本试验建立的马泰勒虫PCR检测方法不失,为一种好的检测方法。 展开更多
关键词 马泰勒虫 PCR诊断方法 建立 应用
下载PDF
3个马群感染马泰勒虫的分子病原学调查 被引量:7
4
作者 薛艳 邓显佑 +3 位作者 王嘉福 冉雪琴 田松军 魏小红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第4期1086-1091,共6页
试验采用显微镜观察、PCR和竞争性酶联免疫吸附试验(competitive enzyme-linked immunosorbentassay,cELISA)等方法对贵州矮马、西南马和伊犁马的马泰勒虫病的感染状况进行研究。结果显示,从32份新鲜的血液涂片中,观察到形态完整的马... 试验采用显微镜观察、PCR和竞争性酶联免疫吸附试验(competitive enzyme-linked immunosorbentassay,cELISA)等方法对贵州矮马、西南马和伊犁马的马泰勒虫病的感染状况进行研究。结果显示,从32份新鲜的血液涂片中,观察到形态完整的马泰勒虫(Theileria equi)虫体,检出率12.5%。从贵州矮马、西南马及伊犁马3个马群血液总DNA中都检测到马泰勒虫的18SrRNA基因片段,与已知序列的同源性为97%~100%;相比之下,贵州矮马与伊犁马的阳性率相近,分别为76.62%和73.81%,西南马较低,仅为33.33%。另外,经cELISA检测,与伊犁马(31.71%)相比,贵州矮马和西南马血液中抗马泰勒虫抗体的阳性率较低,分别为24.68%和12.12%,并与两个马群的血液理化指标存在一定的联系:与中性细胞数量、γ-谷氨酰转移酶和肌酸激酶的含量呈弱正相关;与红细胞、白细胞、血小板、淋巴细胞数量及血红蛋白含量呈弱负相关。这些研究结果提示3个马群中均存在较高比例的马泰勒虫感染。 展开更多
关键词 贵州矮马 西南马 伊犁马 马泰勒虫 抗体 18SrRNA
下载PDF
马泰勒虫RON2基因的原核表达及生物信息学分析 被引量:4
5
作者 张伟 范士龙 +10 位作者 韦丽婷 芦星 王金明 李思媛 呼尔查 马英 张梦圆 宋瑞其 张杨 巴音查汗 刘丹丹 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2021年第12期18-27,共10页
【目的】对马泰勒虫棒状体颈部蛋白2(RON2)进行原核表达和生物信息学分析,为后续蛋白互作试验提供材料基础。【方法】以马泰勒虫新疆分离株为研究对象,克隆其RON2基因,并与GenBank中已知的马泰勒虫美国WA株基因组数据和顶复门原虫RON2... 【目的】对马泰勒虫棒状体颈部蛋白2(RON2)进行原核表达和生物信息学分析,为后续蛋白互作试验提供材料基础。【方法】以马泰勒虫新疆分离株为研究对象,克隆其RON2基因,并与GenBank中已知的马泰勒虫美国WA株基因组数据和顶复门原虫RON2基因序列本地数据库进行BLAST比对,确定其进化关系。构建重组表达载体pET-32a-RON2,融合表达重组蛋白,对RON2基因编码蛋白进行生物信息学分析。【结果】马泰勒虫新疆株RON2基因(NCBI登录号MT939257)长3920 bp,高度保守,与顶复门原虫RON2基因核苷酸和氨基酸序列的相似性分别为31.2%~82.7%和23.8%~79.5%。成功构建原核表达重组质粒,获得的RON2融合重组蛋白分子质量为26 ku,为包涵体蛋白。生物信息学分析表明,RON2蛋白是一种碱性、不稳定亲水性跨膜蛋白,二级结构以α螺旋为主,亲水性较差,抗原性较弱,与其他顶复门原虫RON2蛋白具有相似的三级空间特殊结构和氨基酸序列,且可能与其他入侵蛋白存在相互作用关系。【结论】获得马泰勒虫新疆株RON2基因,诱导表达获得部分RON2融合重组蛋白,该蛋白存在与其他入侵相关蛋白相互作用的位点,可能参与了虫体入侵宿主细胞的过程。 展开更多
关键词 马泰勒虫 棒状体颈部蛋白2 原核表达 遗传进化 生物信息学分析
下载PDF
马泰勒虫不同PCR检测方法的比较 被引量:5
6
作者 张守发 贾立军 鞠玉琳 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1046-1049,共4页
为寻求一种快速、有效的马泰勒虫PCR检测方法,用Bec-UF2、Equi-R;EMA-1F、EMA-1R两对引物对56份马血液样本中马泰勒虫的核蛋白体基因和表面蛋白基因进行了常规PCR方法检测,用EMA-5、EMA-6;EMA-7、EMA-8两对引物对56份马血液样本中马泰... 为寻求一种快速、有效的马泰勒虫PCR检测方法,用Bec-UF2、Equi-R;EMA-1F、EMA-1R两对引物对56份马血液样本中马泰勒虫的核蛋白体基因和表面蛋白基因进行了常规PCR方法检测,用EMA-5、EMA-6;EMA-7、EMA-8两对引物对56份马血液样本中马泰勒虫的表面蛋白基因进行了PCR和套式PCR方法检测。结果显示,以Bec-UF2、Equi-R为引物的PCR方法的阳性检出率为57.1%(32/56),以EMA-5、EMA-6;EMA-7、EMA-8为引物的套式PCR方法的阳性检出率为51.8%(29/56),以EMA-1F、EMA-1R为引物的PCR方法的阳性检出率为17.9%(10/56)。结果表明,以Bec-UF2、Equi-R为引物的常规PCR方法为检测马泰勒虫的最佳方法。 展开更多
关键词 马泰勒虫 常规PCR 套式PCR
下载PDF
驽巴贝虫和马泰勒虫双重PCR检测方法的建立 被引量:5
7
作者 张杨 张玉婷 +3 位作者 王振宝 波拉提 李海 巴音查汗 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期105-109,共5页
目的建立驽巴贝虫(Babesia caballi)和马泰勒虫(Theileria equi)的双重PCR检测方法。方法根据Gen Bank发表的驽巴贝虫裂殖子m RNA BC48基因保守序列和马泰勒虫核糖体小亚基18 s r RNA基因保守序列,设计、合成2对特异性引物,经优化反应条... 目的建立驽巴贝虫(Babesia caballi)和马泰勒虫(Theileria equi)的双重PCR检测方法。方法根据Gen Bank发表的驽巴贝虫裂殖子m RNA BC48基因保守序列和马泰勒虫核糖体小亚基18 s r RNA基因保守序列,设计、合成2对特异性引物,经优化反应条件,建立双重PCR检测方法,并检测该方法的特异性和敏感性。用该双重PCR法对采集于伊犁地区马疑似病例全血样品进行检测,并与镜检法、常规PCR和荧光PCR的结果进行比较。结果建立的双重PCR法可特异性地扩增驽巴贝虫和马泰勒虫的相应目的条带,分别长约155 bp和280 bp,而对其他种属的双芽巴贝虫(B.bigemina)、环形泰勒虫(T.annulata)、瑟氏泰勒虫(T.sergenti)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、犬新孢子虫(Neospora caninum)和伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)进行扩增未见相应片段。该方法对驽巴贝虫和马泰勒虫的最低检出浓度分别为4.85×105拷贝/μl和4.85×104拷贝/μl。对采集的24份疑似血样进行双重PCR扩增,驽巴贝虫的阳性率为45.8%(11/24),马泰勒虫的阳性率为75.0%(18/24),镜检法、常规PCR和荧光PCR与双重PCR检测的符合率分别为91.7%(22/24)、95.8%(23/24)和95.8%(23/24)。结论建立了可同时检测驽巴贝虫和马泰勒虫的双重PCR方法。 展开更多
关键词 驽巴贝虫 马泰勒虫 双重PCR法
下载PDF
中国新疆部分地区马泰勒虫感染的差异性及系统发育分析 被引量:5
8
作者 刘世芳 郭庆勇 +4 位作者 闻秀秀 张梦园 党娜娜 阿拉西.阿滨 巴音查汗 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2130-2137,共8页
【目的】分析新疆南北疆马泰勒虫感染的差异性及地方流行株遗传进化距离,研究马泰勒虫遗传多样性及其感染率。【方法】采自南北疆478份疑似马匹的血样,经马泰勒虫PCR方法检测,分析马泰勒虫感染情况并应用最大似然法(ML)基于18 S rRNA基... 【目的】分析新疆南北疆马泰勒虫感染的差异性及地方流行株遗传进化距离,研究马泰勒虫遗传多样性及其感染率。【方法】采自南北疆478份疑似马匹的血样,经马泰勒虫PCR方法检测,分析马泰勒虫感染情况并应用最大似然法(ML)基于18 S rRNA基因的遗传进化树及构建系统发育树。【结果】在所采集的样品中,中国新疆北疆地区马泰勒虫感染阳性率为13.96%(25/179),中国新疆南疆地区马泰勒虫感染阳性率为27.09%(78/299)。印度、南非、西班牙、伊朗等地方株聚为一支,扩增的18S rRNA基因(MF398476、MF398477)与瑞典地方株聚为一支。【结论】中国新疆南疆马泰勒虫感染率高于北疆,南北疆马泰勒虫感染存在显著性差异(P=0.001<0.05),在不同年龄段马匹的感染无显著性差异(P>0.05);扩增的马泰勒虫阿勒泰、托克逊地方流行株(MF398477、MF398476)与瑞士地方株(KM046918.1)亲缘关系最近。 展开更多
关键词 马泰勒虫 感染 系统发育
下载PDF
新疆昭苏县马泰勒虫病的诊疗及其效果观察 被引量:4
9
作者 刘世芳 阿拉西.阿滨 +2 位作者 宋瑞其 杨红霞 巴音查汗 《动物医学进展》 北大核心 2017年第8期122-125,共4页
为了观察和探讨不同检测方法及不同药物对马泰勒虫病的临床诊疗效果,提高对马泰勒虫病临床诊疗的防治水平,随机采集昭苏县种马场128匹疑似马血样品,采用临床症状观察、病原学检查和PCR检测等方法确诊了12例马泰勒虫病病例。将12匹阳性... 为了观察和探讨不同检测方法及不同药物对马泰勒虫病的临床诊疗效果,提高对马泰勒虫病临床诊疗的防治水平,随机采集昭苏县种马场128匹疑似马血样品,采用临床症状观察、病原学检查和PCR检测等方法确诊了12例马泰勒虫病病例。将12匹阳性马随机分为2组,即处方1组和处方2组,用药后的5d内,分别对每组患马进行临床症状观察、体温测定、血涂片检查和染虫率统计。结果显示,血涂片中含有圆形或圆点形的马泰勒虫,PCR检测得到512bp的目的条带,与目的片段相符。第1治疗组(三氮脒治疗组)治愈率为66.7%(4/6),第2治疗组(盐酸吖啶黄组)治愈率为83.3%(5/6),第2治疗组治愈率高于第1治疗组。本试验发现,临床症状观察、病原学检查和PCR检测法相结合可准确诊断马泰勒虫病;处方2组是2种处方中治疗马泰勒虫病的最佳处方,以上诊疗数据可为马泰勒虫病的防控提供参考。 展开更多
关键词 马泰勒虫病 诊疗 效果观察
下载PDF
马泰勒虫感染新西兰兔的病理组织学观察 被引量:2
10
作者 王莉君 刘世芳 +2 位作者 段永只 党娜娜 巴音查汗 《动物医学进展》 北大核心 2019年第1期42-46,共5页
旨在研究马泰勒虫感染家兔后器官组织病理变化。以家兔为动物模型,去脾后人工感染马泰勒虫、在其体内进行扩繁,PCR检测是否成功感染,每日进行血液涂片和血常规检查,记录感染率,同时用1只健康兔作为对照;达感染高峰时,试验兔和对照兔进... 旨在研究马泰勒虫感染家兔后器官组织病理变化。以家兔为动物模型,去脾后人工感染马泰勒虫、在其体内进行扩繁,PCR检测是否成功感染,每日进行血液涂片和血常规检查,记录感染率,同时用1只健康兔作为对照;达感染高峰时,试验兔和对照兔进行剖检、制作组织切片,观察其主要器官病理变化。结果显示,感染兔心肌发生颗粒变性及水泡变性,心肌细胞间质增宽;肝脏小叶间静脉淤血,肝细胞呈现水泡变性,甚至气球样变;肺脏呈现典型间质性肺炎的病理变化;肾脏主要表现为急性肾小球肾炎;健康兔的各器官未见明显异常。血常规检测结果显示,感染兔有炎性血象、贫血和轻度脱水;感染兔临死前血液涂片检查发现红细胞中含大量马泰勒虫裂殖子,而健康兔未见异常。PCR检测得到512bp的目的条带,与预期目的片段相符。综上表明,感染兔心脏、肝脏、肺脏、肾脏均有明显的病理变化,与健康兔对比差异明显。 展开更多
关键词 马泰勒虫 病理切片 血常规
下载PDF
新疆塔城地区马梨形虫感染的分子生物学诊断及分析 被引量:1
11
作者 于伟伟 孟庆玲 +3 位作者 乔军 潘多荣 才学鹏 陈创夫 《家畜生态学报》 北大核心 2017年第8期66-69,73,共5页
采用常规血涂片镜检和PCR技术对新疆塔城地区疑似梨形虫感染的病马进行检测。通过18S rRNA基因通用引物扩增出目的基因,克隆测序后,与GenBank公布的梨形虫18S rDNA参考序列对比分析同源性,并构建系统进化树,确定梨形虫的种属。血涂片鉴... 采用常规血涂片镜检和PCR技术对新疆塔城地区疑似梨形虫感染的病马进行检测。通过18S rRNA基因通用引物扩增出目的基因,克隆测序后,与GenBank公布的梨形虫18S rDNA参考序列对比分析同源性,并构建系统进化树,确定梨形虫的种属。血涂片鉴定结果显示,红细胞中发现圆环形虫体,具有马梨形虫的主要特征。分子生物学鉴定发现,18S rDNA序列与马泰勒虫美国分离株核苷酸序列同源性为98.3%;遗传进化分析发现,该虫株与已知的泰勒属在同一大枝上,与马泰勒虫美国分离株、马泰勒虫西班牙分离株有较近的亲缘关系。 展开更多
关键词 马泰勒虫 分子生物学鉴定 18S RRNA基因 系统进化树
下载PDF
马泰勒虫裂殖子表面抗原2基因真核表达载体的构建及在293T细胞中表达
12
作者 张杨 肖培培 +4 位作者 王盼举 张梦圆 许正茂 刘世芳 巴音查汗 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期27-30,154,共5页
为了构建马泰勒虫裂殖子表面抗原(Theileria equi merozoite antigen,EMA)2的真核表达载体,试验采用PCR方法扩增出马泰勒虫EMA2基因,并构建真核表达载体pCMV-Flag-N-EMA2,用其转染293T细胞,通过Western-blot法检测EMA2蛋白的表达情况。... 为了构建马泰勒虫裂殖子表面抗原(Theileria equi merozoite antigen,EMA)2的真核表达载体,试验采用PCR方法扩增出马泰勒虫EMA2基因,并构建真核表达载体pCMV-Flag-N-EMA2,用其转染293T细胞,通过Western-blot法检测EMA2蛋白的表达情况。结果表明:EMA2基因长度为819 bp,核酸测序证实pCMV-Flag-N-EMA 2真核表达载体构建成功,转染后Western-blot法可检测到EMA2蛋白的表达。说明马泰勒虫特异性的pCMV-Flag-N-EMA2真核表达载体可转染至293T细胞中,实现体外表达。 展开更多
关键词 马泰勒虫 裂殖子表面抗原 克隆 同源重组 转染 真核表达载体
下载PDF
马泰勒虫新疆株EMA2基因的克隆及原核表达
13
作者 张杨 刘世芳 +3 位作者 海尼木古力·艾合买提 王盼举 宋瑞其 巴音查汗 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第4期88-91,共4页
裂殖子表面抗原蛋白家族因其高抗原保守性常作为马泰勒虫ELISA检测方法的基质。本研究根据马泰勒虫EMA2基因序列合成引物,以马泰勒虫新疆株DNA为模板,扩增获得目的基因,将其连接至pEASY-E1载体构建重组质粒pEASY-E-TE,并转化至大肠杆菌B... 裂殖子表面抗原蛋白家族因其高抗原保守性常作为马泰勒虫ELISA检测方法的基质。本研究根据马泰勒虫EMA2基因序列合成引物,以马泰勒虫新疆株DNA为模板,扩增获得目的基因,将其连接至pEASY-E1载体构建重组质粒pEASY-E-TE,并转化至大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达重组EMA2蛋白并鉴定。结果显示:PCR扩增获得了约819bp特异性DNA片段,构建了pEASY-E-TE重组质粒,成功诱导表达了35kDa的可溶性目的蛋白;经SDS-PAGE、Western blot鉴定,重组蛋白rEMA2具有良好的抗原性。本试验克隆表达的重组蛋白rEMA2可为ELISA方法的建立及后期研究提供靶基因材料。 展开更多
关键词 马泰勒虫 新疆虫株 EMA2基因 原核表达
下载PDF
马泰勒虫和弩巴贝斯虫双重荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:3
14
作者 陈克伟 胡哲 +6 位作者 郭奎 刘荻萩 戚亭 郭巍 杨光璞 杜承 王晓钧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1282-1286,1292,共6页
马梨形虫病(EP)是由巴贝斯虫属的驽巴贝斯虫(B.caballi)和泰勒虫属的马泰勒虫(T.equi)感染引起的蜱传马属动物疾病。为建立EP两种病原的双重荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中T.equi和B.caballi 18S rRNA基因序列设计特异性引物... 马梨形虫病(EP)是由巴贝斯虫属的驽巴贝斯虫(B.caballi)和泰勒虫属的马泰勒虫(T.equi)感染引起的蜱传马属动物疾病。为建立EP两种病原的双重荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中T.equi和B.caballi 18S rRNA基因序列设计特异性引物和探针,经过反应体系和条件优化,建立了能够同时检测T.equi和B.caballi的双重荧光定量PCR检测方法。特异性试验结果显示该方法与马疱疹病毒Ⅰ型(EHV-1),马疱疹病毒Ⅳ型(EHV-4),马流产沙门氏菌(S.abortus equi),马链球菌(S.equi),马传染性贫血病毒(EIAV)均无交叉反应,特异性强。敏感性试验结果显示,该方法对T.equi和B.caballi的质粒标准品的检测下限均为100拷贝/μL,敏感性高;将T.equi和B.caballi的质粒标准品10倍倍比稀释为1×10^(8)拷贝/μL~1×10^(4)拷贝/μL共5个稀释度,进行组内、组间重复性试验,结果显示该方法的组内、组间变异系数均小于5%,重复性好。利用本实验建立的方法对2019年我国北方西部地区200份马属动物全血样品进行检测,结果显示T.equi的阳性率为47%(94/200),B.caballi的阳性率为2.5%(5/200),其中T.equi和B.caballi混合感染率为1%(2/200),该方法与套式PCR的符合率为97.5%,且该方法具有耗时较短、易操作等特点。本研究首次建立的EP双重荧光定量PCR检测方法对T.equi和B.caballi的鉴别检测、病原监测、流行病学调查等均具有重要的意义。 展开更多
关键词 马梨形虫 马泰勒虫 驽巴贝斯虫 双重荧光定量PCR
下载PDF
马梨形虫病及其诊断方法概述 被引量:10
15
作者 刘铮 张义伟 +3 位作者 李茜茜 桑晓宇 冯颖 姜宁 《中国动物检疫》 CAS 2019年第10期66-70,共5页
本文概述了马梨形虫病的流行特点及其诊断方法,并分析了各种诊断方法的优缺点。病原学诊断可快速诊断病例,但大量检测时操作较为困难;ELISA技术已经十分成熟,是世界动物卫生组织推荐的标准诊断方法;CFT可准确诊断早期(急性)感染,但无法... 本文概述了马梨形虫病的流行特点及其诊断方法,并分析了各种诊断方法的优缺点。病原学诊断可快速诊断病例,但大量检测时操作较为困难;ELISA技术已经十分成熟,是世界动物卫生组织推荐的标准诊断方法;CFT可准确诊断早期(急性)感染,但无法识别经过药物已产生抗补体反应的个体;PCR方法可直接检测病原体核酸,敏感性较高,但操作较为复杂;real-timePCR特异性强、灵敏度高、稳定性强,但所需仪器昂贵;LAMP技术敏感、简便、快速,但常出现假阳性结果。除病原学检测外,以上方法大多不适于田间检测。因此,需要建立一种操作简便、诊断准确、成本低廉的田间检测方法,未来研究方向将主要侧重于免疫学和分子生物学。 展开更多
关键词 马梨形虫病 驽巴贝斯虫 马泰勒虫 诊断方法
下载PDF
马泰勒虫新疆株EMA-1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:6
16
作者 宋瑞其 王盼举 +4 位作者 王振宝 瓦热斯.吐尔松 闻秀秀 张杨 巴音查汗 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1737-1743,共7页
马泰勒虫裂殖子表面抗原1(EMA-1)是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法,笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物,将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上,构建pGEX-4T... 马泰勒虫裂殖子表面抗原1(EMA-1)是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法,笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物,将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上,构建pGEX-4T-1/EMA1重组质粒,转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导得到EMA-1融合蛋白,切胶纯化后作为包被抗原建立检测马泰勒虫抗体的rELISA方法。结果显示:(1)GST-EMA1蛋白相对分子质量56ku,与其理论值基本一致;(2)通过Western blot分析证明其具有很好的特异性和反应原性;(3)以GST-EMA1蛋白作为包被抗原建立的rELISA可明显区分马泰勒虫、驽巴贝斯虫阳性血清和健康马血清;批内和批间重复试验的最大变异系数分别为14.79%和11.06%;(4)使用建立的间接ELISA与cELISA商品试剂盒分别对新疆伊犁马场收集的96份马血清样品进行检测,检出阳性率分别为27.1%(26/96)和25.0%(24/96),两者总符合率为95.8%。结果表明,基于原核表达的GST-EMA1蛋白所建立的rELISA特异性、重复性好,检出率与马泰勒虫临床分离率接近,可为新疆马泰勒虫病(特别是隐性带虫马)的检测、监控提供有效手段。 展开更多
关键词 马泰勒虫 新疆株EMA-1 间接ELISA 抗体 诊断
下载PDF
马泰勒虫和驽巴贝斯虫半胱氨酸蛋白酶截短基因的克隆表达及其生物信息学分析 被引量:2
17
作者 宋瑞其 呼尔查 +7 位作者 翟雪洁 樊新丽 李敏 张梦圆 宋晶晶 阿尔曼·海热 吾力江·卡马力 巴音查汗·盖力克 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2547-2556,共10页
旨在克隆、表达马泰勒虫(Theileria equi)和驽巴贝斯虫(Babesia caballi)半胱氨酸蛋白酶(cystein protease,CP)基因,并对其进行生物信息学预测和分析。提取马泰勒虫和驽巴贝斯虫的DNA,以此为模板扩增目的基因。利用克隆技术和原核表达... 旨在克隆、表达马泰勒虫(Theileria equi)和驽巴贝斯虫(Babesia caballi)半胱氨酸蛋白酶(cystein protease,CP)基因,并对其进行生物信息学预测和分析。提取马泰勒虫和驽巴贝斯虫的DNA,以此为模板扩增目的基因。利用克隆技术和原核表达系统克隆表达CP,用尿素透析法进行纯化。通过Dot blot验证其与相应阳性血清特异性反应。应用MAGA软件和Prot Param、TMHMM、SignalP-5.0、Antibody Epitope Prediction、SYFPEITHII、ProPred及EzMol^(2.1)等在线分析软件分析T.equi-CP和B.caballi-CP的基因及其蛋白序列。成功构建了重组质粒GST-T.equi-CP和GST-B.caballi-CP,经SDS-PAGE试验结果显示该基因表达的蛋白以包涵体形式高效表达,并能与相应阳性血清特异性反应。对T.equi-CP和B.caballi-CP基因编码蛋白进行系统发育分析发现,与其他原虫物种相比,系统发育分析结果与其原生动物学分类结果一致。经生物信息学分析预测显示,两个CP蛋白为亲水性蛋白,无跨膜区,不属于跨膜蛋白,无Th细胞表位,在细胞质、线粒体和细胞核中定位较多。其中T.equi-CP蛋白的相对分子质量为29 948.60,等电点为5.53,稳定系数为22.50。B.caballi-CP蛋白的相对分子质量为14 603.62,等电点为8.54,稳定系数为47.69,有信号肽区域。T.equi-CP和B.caballi-CP蛋白具有良好的反应原性,作为亲水性膜外蛋白,无Th细胞表位,在细胞质、线粒体和细胞核中定位较多等,可能说明CP在马梨形虫逃避宿主免疫反应,参与增殖、分化及程序性细胞死亡等发挥作用。本研究为T.equi-CP和B.caballi-CP蛋白的功能研究与马梨形虫的致病机制研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 马泰勒虫 驽巴贝斯虫 半胱氨酸蛋白酶 原核表达 进化树分析 生物信息学分析
下载PDF
马梨形虫病双重PCR检测方法的建立 被引量:5
18
作者 瓦热斯·吐尔松 王振宝 +4 位作者 阿兵 宋瑞琪 刘世芳 闻秀秀 巴音查汗 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第15期120-123,共4页
为了建立马梨形虫病双重PCR检测方法,试验根据Gen Bank发表的驽巴贝斯虫和马泰勒虫18S rRNA保守基因序列分别合成2对特异性引物,以核酸混合物为模板,优化反应条件建立马梨形虫病双重PCR检测方法,并检验该方法的特异性和敏感性。同时用... 为了建立马梨形虫病双重PCR检测方法,试验根据Gen Bank发表的驽巴贝斯虫和马泰勒虫18S rRNA保守基因序列分别合成2对特异性引物,以核酸混合物为模板,优化反应条件建立马梨形虫病双重PCR检测方法,并检验该方法的特异性和敏感性。同时用该双重PCR检测方法对采自昭苏种马场的马疑似病例全血进行检测,并与镜检法和单重PCR法进行比较。结果表明:该双重PCR检测方法能对驽巴贝斯虫和马泰勒虫核酸扩增出大小为529 bp和789 bp特异性目的片段,而对双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、羊泰勒虫、牛巴贝斯虫核酸的扩增均为阴性;驽巴贝斯虫和马泰勒虫阳性DNA被稀释1×108倍时均能检出其相应目的片段;对采集的46份马疑似病例血样进行PCR诊断,其中驽巴贝斯虫感染率为30.4%(14/46),马泰勒虫感染率为41.3%(19/46);双重PCR检测方法与单重PCR方法的符合率为100%。说明建立的双重PCR检测方法具有一定的特异性和敏感性,可用于驽巴贝斯虫和马泰勒虫临床感染隐性病例的联合检测与鉴别诊断。 展开更多
关键词 马泰勒虫 驽巴贝斯虫 单重PCR 双重PCR 建立
下载PDF
新疆昭苏县马梨形虫的检测及传播媒介蜱的鉴定 被引量:6
19
作者 图尔荪.萨迪尔 李佳 +2 位作者 王振宝 宋瑞其 巴音查汗 《动物医学进展》 北大核心 2016年第7期44-48,共5页
为了解新疆昭苏县马感染梨形虫情况及传播媒介蜱的种类,采用寄生虫病病原常规检查方法、分子生物学技术和血清学检测方法对200匹马进行马梨形虫的检测,对320只传播媒介蜱进行形态学鉴定。结果显示,血液涂片染色镜检红细胞染虫率为9.23%,... 为了解新疆昭苏县马感染梨形虫情况及传播媒介蜱的种类,采用寄生虫病病原常规检查方法、分子生物学技术和血清学检测方法对200匹马进行马梨形虫的检测,对320只传播媒介蜱进行形态学鉴定。结果显示,血液涂片染色镜检红细胞染虫率为9.23%,PCR、cELISA对驽巴贝斯虫的检出率分别为28%和23.5%,对泰勒虫的检出率分别为36%和34%;对马体表和周边环境采集的320只蜱虫鉴定为草原革蜱和森林革蜱2种。本研究为该地区马梨形虫病的防控提供了科学依据。 展开更多
关键词 泰勒虫 驽巴贝斯虫 鉴定
下载PDF
新疆阿勒泰地区马梨形虫病流行病学调查 被引量:2
20
作者 瞿业宏 岳城 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期43-46,共4页
本试验对阿勒泰地区的富蕴县、福海县、哈巴河县、清河县4个地区马血样(n=2697)进行马梨形虫病感染情况调查。结果显示:马梨形虫病感染率为18.69%(504/2697);其中,马泰勒虫感染率为9.12%(246/2697),马驽巴贝斯虫感染率为10.05%(271/269... 本试验对阿勒泰地区的富蕴县、福海县、哈巴河县、清河县4个地区马血样(n=2697)进行马梨形虫病感染情况调查。结果显示:马梨形虫病感染率为18.69%(504/2697);其中,马泰勒虫感染率为9.12%(246/2697),马驽巴贝斯虫感染率为10.05%(271/2697),混合感染0.48%(13/2697)。4个地区马梨形虫感染率分别为哈巴河县30.80%(158/513)、清河县19.10%(114/597)、富蕴县17.86%(135/756)、福海县11.60%(97/831),差异显著(P<0.05);不同年龄段马梨形虫感染情况显著差异(P<0.05);春季感染明显高于秋季感染,差异显著(P<0.05)。此数据可补充阿勒泰地区马梨形虫病的区域性流行病学数据。 展开更多
关键词 马梨形虫病 马泰勒虫 马驽巴贝斯虫 流行病学调查
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部