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Optimization of Growth Conditions to Identify the Superior Bacillus Strain Which Produce High Yield of Thermostable Alpha Amylase
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作者 Witharanage Wasana Prasadini Rodrigo Lakmi Samodha Magamulla +1 位作者 Morawakage Sajith Thiwanka Yapa Mudiyanselage Shashika Madhuwanthi Yapa 《Advances in Enzyme Research》 CAS 2022年第1期1-22,共22页
Thermostable α-amylases hold a very important place in commercial industrial applications in Sri Lanka. Therefore, the main aim of this study was to identify superior Bacillus strain and optimize growth conditions th... Thermostable α-amylases hold a very important place in commercial industrial applications in Sri Lanka. Therefore, the main aim of this study was to identify superior Bacillus strain and optimize growth conditions that could yield high α-amylase production. Three Bacillus strains, B. amyloliquefaciens ATCC 23350, B. licheniformis ATCC 14580 and B. megaterium ATCC 14581 were used for the study. Shake flask culture experiments were conducted to identify the effect of various fermentation conditions such as growth temperature, incubation period, carbon source, nitrogen source, initial pH and carbon concentration on extracellular α-amylase production. DNSA assay was carried out to determine the enzyme activity. The highest temperature for enzyme activity was reported by B. licheniformis at 85&degC, followed by B. amyloliquefaciens at 75&degC and B. megaterium at 45&degC. Both B. amyloliquefaciens and B. licheniformis were able to give their optimum enzyme production at 37&degC, while B. megaterium at 30&degC in 150 rpm with initial pH of 7. B. licheniformis and B. amyloliquefaciens gave their optimum yield of the enzyme after 48 h of incubation while B. megaterium gave after 24 h of incubation. Among the carbon sources tested cassava starch was able to give the highest enzyme production. For B. amyloliquefaciens, the highest yield of the enzyme was obtained with 2% of starch, tryptone as a nitrogen source and initial pH of 7. Maximum enzyme production for B. licheniformis was obtained with 1.5% of starch, KNO<sub>3</sub> as a nitrogen source and initial pH of 6. For B. megaterium 1% of starch, tryptone and pH 7.5 induced the optimum α-amylase production. According to the results obtained, B. amyloliquefaciens is the highest thermostable alpha amylase producer. However, according to the industrial requirement, B. licheniformis can also be used as an enzyme producer due to its stability in higher temperatures. 展开更多
关键词 thermostable Α-amylase Bacillus Strain FERMENTATION Incubation Period
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发芽-挤压-淀粉酶协同处理对速食糙米粉品质特性的影响 被引量:30
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作者 张冬媛 邓媛元 +7 位作者 张名位 马永轩 张雁 魏振承 张瑞芬 刘磊 唐小俊 遆慧慧 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期759-768,共10页
【目的】探讨发芽-挤压膨化-高温α-淀粉酶协同处理对速食糙米粉的冲调性、流动性、色度、风味和淀粉消化性能等品质特性的影响,为高品质速食糙米食品的加工提供理论依据。【方法】糙米经发芽处理后采用高温α-淀粉酶辅助挤压膨化协同处... 【目的】探讨发芽-挤压膨化-高温α-淀粉酶协同处理对速食糙米粉的冲调性、流动性、色度、风味和淀粉消化性能等品质特性的影响,为高品质速食糙米食品的加工提供理论依据。【方法】糙米经发芽处理后采用高温α-淀粉酶辅助挤压膨化协同处理(Extrusion-Germinated Brown Rice-Enzyme,EGBRE),以糙米发芽直接挤压膨化处理(Extrusion-Germinated Brown Rice,EGBR)、糙米不发芽分别采用高温α-淀粉酶辅助挤压膨化协同处理(Extrusion-Brown Rice-Enzyme,EBRE)和直接挤压膨化处理(Extrusion-Brown Rice,EBR)3种方式作为对照,分别比较分析糙米粉的水溶性指数、吸水性指数、冲调结块率、分散时间、粘度以及其色度、挥发性物质、淀粉消化性能等品质特性,并进行整体感官评分。【结果】高温α-淀粉酶处理能显著提高糙米粉的溶解性,其中,EGBRE较EGBR水溶性指数提高2.11倍,EBRE较EBR水溶性指数提高2.55倍;而发芽处理对糙米粉的溶解性影响不显著。高温α-淀粉酶处理能显著降低糙米粉冲调后的粘度,其中,EGBRE较EGBR粘度下降60.0%,EBRE较EBR粘度下降31.3%;而发芽处理对糙米糊粘度影响不明显。高温α淀粉酶处理还能显著增加糙米粉中挥发性物质总量,而发芽处理能降低其脂质氧化产物的含量。发芽、挤压膨化和高温α-淀粉酶三者协同处理能显著降低糙米粉的冲调结块率、缩短分散时间,其中,EGBRE较EGBR、EBRE和EBR的冲调结块率分别下降55.4%、74.8%和84.0%,分散时间分别缩短27.2%、17.3%和52.5%。同时,发芽-挤压-淀粉酶协同处理能显著影响糙米粉的休止角,改善粉体流动性能,但会适当提高粉体的色度。此外,发芽-挤压膨化-高温α-淀粉酶协同处理较直接挤压膨化处理,糙米粉中快消化淀粉比例显著提高,抗性淀粉比例显著降低。【结论】发芽-挤压-淀粉酶协同处理可以显著改善速食糙米粉的品质特征与冲调性,降低结块率,缩短分散时间,降低冲调粘度,提高淀粉的消化性能,适当增加挥发性风味物质含量。 展开更多
关键词 糙米 发芽 高温Α-淀粉酶 挤压膨化 品质特性
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高温α-淀粉酶产生菌株的选育 被引量:25
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作者 卢涛 舒丹 +3 位作者 张杰 陈金瑞 李晖 刘成君 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期1131-1133,共3页
从西藏当雄温泉附近的土壤中,分离到一株能在55℃生长并分泌高温α 淀粉酶的菌株,经初步鉴定为凝结芽孢杆菌,命名为BacilluscoagulansLS 1.该菌株用紫外线和亚硝基胍诱变,在55℃摇瓶培养条件下,筛选到一个发酵液酶活达到100U/mL的突变株... 从西藏当雄温泉附近的土壤中,分离到一株能在55℃生长并分泌高温α 淀粉酶的菌株,经初步鉴定为凝结芽孢杆菌,命名为BacilluscoagulansLS 1.该菌株用紫外线和亚硝基胍诱变,在55℃摇瓶培养条件下,筛选到一个发酵液酶活达到100U/mL的突变株,较出发菌株的酶活提高了约25倍.发酵液经90℃处理60min,酶活性保持在90%以上. 展开更多
关键词 凝结芽孢杆菌 高温Α-淀粉酶 诱变育种 菌株选育 发酵条件 酶活性
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高温α-淀粉酶生产菌种选育的研究 被引量:24
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作者 胡学智 凌晨 +1 位作者 侯琴芳 雷肇祖 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期267-273,共7页
以地衣芽孢杆菌B.198为出发株,经不同诱变剂反复诱变和自然选育,得到突变株A.4041,其产高温α-淀粉酶为出发株的100倍。在摇瓶培养条件下,酶活力达200u/ml,是一株无孢子并带有 Rif^r、Met^-、Arg^-标记的抗分解代谢阻遏突变株。初步纯化... 以地衣芽孢杆菌B.198为出发株,经不同诱变剂反复诱变和自然选育,得到突变株A.4041,其产高温α-淀粉酶为出发株的100倍。在摇瓶培养条件下,酶活力达200u/ml,是一株无孢子并带有 Rif^r、Met^-、Arg^-标记的抗分解代谢阻遏突变株。初步纯化的 A.4041 α-淀粉酶最适反应 pH 为5—7,最适反应温度90—95℃,于90℃、60分钟处理不失活,表明突变株 A.4041所产α-淀粉酶是高温淀粉酶,具有工业生产价值。 展开更多
关键词 淀粉酶 地衣芽孢杆菌 高温
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耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达 被引量:20
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作者 董晨 曹娟 +1 位作者 张迹 沈标 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期534-538,共5页
高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启... 高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子构建了表达载体pP43NMK-amy和pUBC19-amy,并在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis1A752S中进行表达.结果表明,与地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子相比,采用P43启动子的耐高温α-淀粉酶其表达水平提高了8.9倍.而且在枯草芽孢杆菌B.subtilis1A752S中分泌表达的α-淀粉酶仍具有耐高温的特性,酶反应的最适温度为90℃,表明酶的热稳定性由蛋白质本身的氨基酸序列决定的. 展开更多
关键词 耐高温α-淀粉酶基因 启动子P43 amy启动子 高效表达
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地衣芽孢杆菌WB-11菌株耐高温α-淀粉酶的酶学特性 被引量:9
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作者 陈红歌 顾溯海 +2 位作者 任随周 马向东 贾新成 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期63-66,共4页
从地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis )中分离到一α 淀粉酶组分 ,经PAGE及SDS PAGE检测为电泳均一的纯酶蛋白。该酶最适反应温度为 95℃ ,5 0和 70℃条件下酶活性稳定 ,90℃保温 30min残余酶活力为 2 8 9%。该酶最适作用pH为 6 0~... 从地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis )中分离到一α 淀粉酶组分 ,经PAGE及SDS PAGE检测为电泳均一的纯酶蛋白。该酶最适反应温度为 95℃ ,5 0和 70℃条件下酶活性稳定 ,90℃保温 30min残余酶活力为 2 8 9%。该酶最适作用pH为 6 0~ 6 5 ,在pH 5 0~ 8 0内稳定。酶的相对分子质量为 6 5 90 0 ,等电点 6 94 ,对可溶性淀粉的Km 值为 0 4 1mg·mL-1 。Ca2 + 、Mn2 + 、Cu2 + 、Co2 + 及Ba2 + 对酶具有激活作用 ,其中Ca2 + 激活作用最显著 ,且以 4~ 8mmol·L-1 浓度为最适。Ca2 + 还能显著提高酶的热稳定性 ,4mmol·L-1 Ca2 + ,90℃保温 30min ,酶的残余活力提高至 83%。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 WB-11菌株 耐高温Α-淀粉酶 酶学特性
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一株产α-高温淀粉酶的地衣芽孢杆菌的分离和筛选 被引量:19
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作者 蒋若天 宋航 +3 位作者 陈松 蒲宗耀 刘成君 卢涛 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期37-41,共5页
从西藏当雄温泉附近的土壤中用锥虫蓝平板,55℃培养,筛选到一株分泌高温淀粉酶的菌株,经生理生化初步鉴定后,克隆16s rDNA基因测序,提交GenBank比对后,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheninformis),命名为B.licheninformis LT。通过... 从西藏当雄温泉附近的土壤中用锥虫蓝平板,55℃培养,筛选到一株分泌高温淀粉酶的菌株,经生理生化初步鉴定后,克隆16s rDNA基因测序,提交GenBank比对后,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheninformis),命名为B.licheninformis LT。通过对B.licheninformis LT的生长条件和产酶条件的研究表明:该菌高温特性良好,最高可以在65℃生长,产酶最适温度50℃;可以在pH3.0~pH11.0的LB培养基中生长,最佳产酶pH10.0,LB培养基加入淀粉诱导,发酵液酶活可达80U。对该菌所产α-高温淀粉酶的性质研究表明:酶的最适反应温度为95℃,100℃处理60min发酵液酶活力没有明显下降,最适酶作用pH10.0,添加1g/L的钙离子具有激活作用。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 高温淀粉酶 分离 筛选
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地衣芽孢杆菌A.4041耐高温α-淀粉酶的纯化及性质 被引量:11
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作者 赵荧 刘红岩 +4 位作者 宫正宇 冯启 阎宝山 马鹤雯 梁安杰 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1997年第3期85-88,共4页
地衣芽孢杆菌A.4041(Bacillus,licheniformisA.4041)耐高温α-淀粉酶,经硫铁沉淀和垂直板制备凝胶电泳纯化,得到三种电泳均一的组分,α-Ⅰ,α-Ⅱ和α-Ⅲ.其相对质量分数分别为14.7%,32.2%和52.9%;等电点为5.2,5.4和... 地衣芽孢杆菌A.4041(Bacillus,licheniformisA.4041)耐高温α-淀粉酶,经硫铁沉淀和垂直板制备凝胶电泳纯化,得到三种电泳均一的组分,α-Ⅰ,α-Ⅱ和α-Ⅲ.其相对质量分数分别为14.7%,32.2%和52.9%;等电点为5.2,5.4和5.5;相对分子质量为48000,55000和60000.酶作用于可溶性淀粉的米氏常数分别为4.5mg/mL,3.4mg/mL和2.6mg/mL.最适作用温度皆为90℃;最适pH为6.0~6.5;稳定pH范围皆为4~11.5在温度高于70℃,保温30min条件下,三组分的活力开始下降,但α-Ⅱ和α-Ⅲ在100℃,保温30min时仍分别保持15%和20%的残余活力,表明该酶的热稳定性良好.Ca2+,Mg2+,K+对酶明显激活;Cu2+,Fe3+,Zn2+,Al3+,EDTA、甲醛、戊二醛对酶强烈抑制. 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 淀粉酶 提纯 耐高温性 发酵
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耐高温α-淀粉酶产生菌的分离鉴定及发酵条件与酶性质研究 被引量:20
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作者 张强 刘成君 +2 位作者 蒋芳 李晖 陈金瑞 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期34-37,共4页
从西藏八宿温泉附近土壤中 ,分离到一株能在 5 .5℃生长并分泌高温α- 淀粉酶的菌株 ,其生长pH 5 . 0~11. 0 ,最适生长pH 7. 0~ 8. 0。该菌株经初步鉴定为地衣芽孢杆菌 ,命名为BacilluslicheniformisZ - 8。在 4 5℃ ,10 %装液量 ,16.... 从西藏八宿温泉附近土壤中 ,分离到一株能在 5 .5℃生长并分泌高温α- 淀粉酶的菌株 ,其生长pH 5 . 0~11. 0 ,最适生长pH 7. 0~ 8. 0。该菌株经初步鉴定为地衣芽孢杆菌 ,命名为BacilluslicheniformisZ - 8。在 4 5℃ ,10 %装液量 ,16. 0r/min条件下振荡培养 4 8h后 ,发酵液酶活可达 2 1. 2× 10 .4UV/mL。发酵培养基的组成成分为黄豆粉 0 . 5 %、麸皮 1%、可溶性淀粉 0 . 2 5 %、pH 8. 8。对该酶的性质研究表明 ,其最适作用pH为 6 . 0 ,最适反应温度为 95℃ ,95℃下保温 6 0min处理后酶活仅损失 5 . 4 % ,对Ca2 + 没有依赖性。 展开更多
关键词 产生菌 发酵条件 发酵培养基 反应温度 酶性质 发酵液 黄豆粉 生长 分离鉴定 麸皮
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耐高温α-淀粉酶活力测定法的研究 被引量:30
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作者 王福荣 唐景春 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期27-30,40,共5页
研究耐高温α-淀粉酶的反应动力学机理,绘制酶反应进程曲线,求得酶浓度与5min吸光度的回归方程,制订出酶浓度与吸光度关系表。
关键词 耐高温 Α-淀粉酶 酶活力 分光光度法 测定
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耐酸耐高温α-淀粉酶的研究进展 被引量:14
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作者 石方方 焦国宝 +3 位作者 丁长河 屈建航 屈凌波 刘仲敏 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2014年第4期171-176,共6页
介绍了耐酸耐高温α-淀粉酶在工业生产中具有经济、节能、方便操作等优势;并且概述了耐酸耐高温α-淀粉酶的菌种来源,其中耐酸性α-淀粉酶的菌种主要来源于芽孢杆菌、曲霉以及嗜热真菌;耐高温α-淀粉酶的菌种主要来源于凝结芽孢杆菌、... 介绍了耐酸耐高温α-淀粉酶在工业生产中具有经济、节能、方便操作等优势;并且概述了耐酸耐高温α-淀粉酶的菌种来源,其中耐酸性α-淀粉酶的菌种主要来源于芽孢杆菌、曲霉以及嗜热真菌;耐高温α-淀粉酶的菌种主要来源于凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和嗜热网络球杆菌等;本文还对耐酸耐高温α-淀粉酶的菌种选育技术方法包括物理方法、化学方法以及基因操作技术等进行了阐述。研究发现对耐酸耐高温α-淀粉酶的发酵工艺进行优化后,最高可以使酶活提高2.1倍;同时在对该淀粉酶的钙离子依赖性进行研究中,得出某些耐酸耐高温α-淀粉酶具有不依赖Ca2+的特性;最后预测人们将会运用基因工程等技术手段,不断地开发出各种特性的耐酸耐高温性α-淀粉酶。 展开更多
关键词 耐酸耐高温α-淀粉酶 菌种选育 发酵优化 钙离子
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高温α-淀粉酶产生菌的筛选及酶学性质研究 被引量:11
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作者 朱何东 陈远钊 +3 位作者 常峰 吴飞 胡承 王忠彦 《酿酒科技》 北大核心 2006年第5期30-32,共3页
从酒厂高温曲中筛选到一株产高温α-淀粉酶的野生菌株,经初步鉴定为链霉菌,命名为Streptomyces sp.1109。在45℃条件下,该菌株固体发酵产酶活力达到169.13 u/g。通过酶学性质研究,该酶反应最适温度为85℃,最适pH为6.5,具有较高的热稳定性。
关键词 微生物 高温Α-淀粉酶 筛选 酶学性质
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耐高温α-淀粉酶产生菌的选育研究 被引量:11
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作者 张强 黄丹 王川 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第4期21-23,41,共4页
从土壤中分离到1株能在55℃生长并分泌耐高温α-淀粉酶的菌株,其最适生长pH值为7.0~8.0,最适生长温度50℃。该菌株经初步鉴定为芽孢杆菌,疑似微地衣芽孢杆菌,命名为DG-1。对该菌株分泌的耐高温α-淀粉酶的性质研究表明,最适作用pH值为7... 从土壤中分离到1株能在55℃生长并分泌耐高温α-淀粉酶的菌株,其最适生长pH值为7.0~8.0,最适生长温度50℃。该菌株经初步鉴定为芽孢杆菌,疑似微地衣芽孢杆菌,命名为DG-1。对该菌株分泌的耐高温α-淀粉酶的性质研究表明,最适作用pH值为7.0,在pH6.0~7.5的范围内有较高酶活。最适反应温度为95℃,95℃保温60min处理后酶活仅损失4.73%。经紫外线诱变处理,得到菌株DG-4,酶活较出发菌株提高了104.6%。 展开更多
关键词 高温Α-淀粉酶 芽孢杆菌 选育 鉴定 酶性质 诱变
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海参体壁中α-1,4淀粉酶的分离纯化及性质 被引量:5
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作者 张杰 张永勤 +4 位作者 罗彩华 刘征东 程袁芬 卢菲菲 张童 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期137-141,共5页
通过采用匀浆、硫酸铵盐析、透析、DEAE-52阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶层析等方法从海参体壁中分离纯化并得到了α-1,4淀粉酶。结果表明,该酶具有3条亚基链,分子质量约为420 k D;最适p H值为9.0,最适温度为80℃,90℃条件下保温... 通过采用匀浆、硫酸铵盐析、透析、DEAE-52阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶层析等方法从海参体壁中分离纯化并得到了α-1,4淀粉酶。结果表明,该酶具有3条亚基链,分子质量约为420 k D;最适p H值为9.0,最适温度为80℃,90℃条件下保温30 min后仍有38%以上的相对酶活性,因此,该酶是一种具有较高热稳定性的碱性高温淀粉酶。K+、Fe3+和Mn2+对其有较强的抑制作用,Cu2+和Ca2+对其有较强的激活作用。 展开更多
关键词 海参 自溶 淀粉酶 分离 纯化 热稳定性
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耐高温α-淀粉酶在溶源性枯草杆菌表达系统中的高效表达 被引量:9
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作者 刘刚 邢苗 余少文 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期368-372,共5页
构建了高效表达耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌表达系统,并研究了该表达系统的主要特点.通过PCR扩增由地衣芽孢杆菌的基因组DNA分离高温淀粉酶基因后,将其克隆到质粒pSG703中.然后用pSG703质粒转化含温和性噬菌体φ105MU331的枯草芽孢杆... 构建了高效表达耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌表达系统,并研究了该表达系统的主要特点.通过PCR扩增由地衣芽孢杆菌的基因组DNA分离高温淀粉酶基因后,将其克隆到质粒pSG703中.然后用pSG703质粒转化含温和性噬菌体φ105MU331的枯草芽孢杆菌,通过同源重组使高温淀粉酶基因插入到溶源性枯草芽孢杆菌的染色体上,并处于φ105MU331的强启动子下游.由于高温淀粉酶基因处于噬菌体的强启动子下游,在热诱导后可以实现高温淀粉酶的高效表达,诱导后8h内分泌到培养液中的高温淀粉酶活性可以达到9.58×103u/mL.本文构建的重组高温淀粉酶表达系统具有稳定、高效和杂蛋白分泌少的特点. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 高温淀粉酶 温和性噬菌体
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高温α-淀粉酶-挤压膨化耦合处理对全谷物糙米粉品质的影响 被引量:6
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作者 马永轩 张名位 +5 位作者 张瑞芬 刘磊 贾栩超 黄菲 董丽红 白亚娟 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期111-116,共6页
以普通糙米、红米和黑米为原料,分析了高温α-淀粉酶-挤压膨化耦合处理对全谷物糙米粉径向膨化率、水溶性指数、吸水性指数、分散时间、结块率、黏度、糊化度以及还原糖、总蛋白质含量和可溶性蛋白质含量的影响。结果表明:3种全谷物糙... 以普通糙米、红米和黑米为原料,分析了高温α-淀粉酶-挤压膨化耦合处理对全谷物糙米粉径向膨化率、水溶性指数、吸水性指数、分散时间、结块率、黏度、糊化度以及还原糖、总蛋白质含量和可溶性蛋白质含量的影响。结果表明:3种全谷物糙米经过高温α-淀粉酶-挤压膨化耦合处理后其径向膨化率和糊化度均显著降低(P<0.05);水溶性指数显著升高(P<0.05)了2.51倍、1.89倍和2.73倍,吸水性指数显著降低(P<0.05)了77.29%、33.41%和67.44%;分散时间和结块率均显著降低(P<0.05),分散时间分别减少了64.60%、60.66%和65.40%,结块率分别降低了75.57%、84.64%和75.24%;冲调黏度均显著下降(P<0.05),加酶处理的糙米粉在低剪切速率下具有较低黏度,其黏度曲线趋于平直;还原糖和可溶性蛋白质含量显著提高(P<0.05),总蛋白质含量提高不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 高温Α-淀粉酶 挤压膨化 全谷物 冲调分散性 营养特性
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来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因在衣藻叶绿体中的表达 被引量:4
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作者 杨宗岐 李轶女 +2 位作者 张志芳 王勇 沈桂芳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期545-549,共5页
来源于Pyrococcusfuriosus的耐高温α-淀粉酶是一种重要的酒精工业用酶,在植物中表达耐高温α-淀粉酶可以大大降低用植物秸秆生产酒精的成本。选择衣藻叶绿体基因组同源片段clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2和壮观霉素抗性基因,构建了来... 来源于Pyrococcusfuriosus的耐高温α-淀粉酶是一种重要的酒精工业用酶,在植物中表达耐高温α-淀粉酶可以大大降低用植物秸秆生产酒精的成本。选择衣藻叶绿体基因组同源片段clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2和壮观霉素抗性基因,构建了来源于Pyrococcusfuriosus的耐高温α-淀粉酶基因的衣藻叶绿体表达载体p64A。通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中,经壮观霉素抗性(100mg/L)筛选,获得了9个抗性衣藻转化子。转化子经过抗性继代筛选后,经PCR、Southernblot检测分析及暗培养,证实耐高温α-淀粉酶基因已整合到衣藻叶绿体基因组中并得到表达。酶活性检测表明,转基因衣藻表达产物具有耐高温α-淀粉酶活性,每克鲜重衣藻最高达77.5u。实验结果证明在植物叶绿体中表达工业酶制剂是可行的。 展开更多
关键词 PYROCOCCUS furiosus 耐高温Α-淀粉酶 叶绿体表达 衣藻
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温度和pH值对耐高温α-淀粉酶活力的影响 被引量:23
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作者 林剑 郑舒文 孙利芹 《中国食品添加剂》 CAS 2003年第5期65-67,53,共4页
本文系统的研究了温度、pH值和底物浓度对地衣芽孢杆菌HM - 3产生的耐高温α -淀粉酶酶活力的影响。研究结果表明 :地衣芽孢杆菌HM - 3耐高温α -淀粉酶的最适酶促反应温度为 :75℃ - 85℃之间 ,最适作用的pH值为 :6 .1- 7.0之间 ,该酶... 本文系统的研究了温度、pH值和底物浓度对地衣芽孢杆菌HM - 3产生的耐高温α -淀粉酶酶活力的影响。研究结果表明 :地衣芽孢杆菌HM - 3耐高温α -淀粉酶的最适酶促反应温度为 :75℃ - 85℃之间 ,最适作用的pH值为 :6 .1- 7.0之间 ,该酶用于玉米淀粉的液化其最适底物浓度是 2 0 %~ 2 5 %。 展开更多
关键词 温度 PH值 耐高温Α-淀粉酶 酶活力 底物浓度
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α-淀粉酶的活性及其热稳定性的研究 被引量:4
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作者 张剑 易华锋 +1 位作者 张开诚 秦英 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第10X期20-23,共4页
借助DNS试剂并利用分光光度法建立了一种测定淀粉中α-淀粉酶活性的方法。并用该法探讨了pH值、温度、淀粉浓度和钙的添加量对α-淀粉酶的热稳定性和活性的影响。研究表明:α-淀粉酶水解可溶性淀粉的最适酸度为pH 5.0;高浓度淀粉可以较... 借助DNS试剂并利用分光光度法建立了一种测定淀粉中α-淀粉酶活性的方法。并用该法探讨了pH值、温度、淀粉浓度和钙的添加量对α-淀粉酶的热稳定性和活性的影响。研究表明:α-淀粉酶水解可溶性淀粉的最适酸度为pH 5.0;高浓度淀粉可以较好地保护酶的活性和热稳定性,一定量的钙离子可提高α-淀粉酶的热稳定性和催化效率。向5%(w/w)的可溶性淀粉中添加10mmol/L Ca2+,α-淀粉酶活性和热稳定性能最大限度的发挥。与对照酶(不加Ca2+,在2h内最适反应温度为75℃)相比,加Ca2+酶的热稳定性可提高10℃。该酶在使用时,一次性投料要比分次投料的效果好。 展开更多
关键词 Α-淀粉酶 活性 热稳定性 CA2+
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超耐热酸性α-淀粉酶基因的克隆及其在酵母细胞中的表达 被引量:30
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作者 郭建强 李运敏 +2 位作者 岳丽丽 邱阳生 矫庆华 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期237-242,共6页
用PCR方法扩增来源于极端嗜热厌氧古菌Pyrococcus furiosus中的超耐热酸性α-淀粉酶的结构基因,将该结构基因引入载体pPIC9K中,将重组质粒pPIC9K—Amy转化大肠杆菌DH5α细胞,测序结果表明,克隆到的α-淀粉酶结构基因为1305bp,其编... 用PCR方法扩增来源于极端嗜热厌氧古菌Pyrococcus furiosus中的超耐热酸性α-淀粉酶的结构基因,将该结构基因引入载体pPIC9K中,将重组质粒pPIC9K—Amy转化大肠杆菌DH5α细胞,测序结果表明,克隆到的α-淀粉酶结构基因为1305bp,其编码的成熟肽为435个氨基酸。将正确构建的重组质粒转化毕赤酵母GS115细胞,得到酵母工程菌株。在酵母α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,超耐热酸性α-淀粉酶在甲醇酵母中大量表达并分泌到胞外,该酶的表达受甲醇的严格调控和诱导,随着诱导培养时间的增加,在培养基上清液中的单位体积酶活力相应上升,在诱导培养7d后酶活力达到最大值。该酶最适反应温度为90-100℃,最适反应pH值为4.5—5.5。该酶具有非常好的温度稳定性,在100℃条件下热处理5h。仍具有60%以上的酶活力。该酶的这些优点使其非常适于在工业生产上应用。 展开更多
关键词 超耐热酸性α-淀粉酶 激烈热球菌Pyrococcus furiosus pPIC9K质粒 毕赤酵母GS115
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