海甘蓝硫甙合成关键酶S-GT基因两种表达载体的构建

Thiohydroximate S-glucosylt ransferase(S-GT)是硫甙生物合成的一个关键酶。根据发表的甘蓝型油菜S-GT基因cDNA序列设计引物,以海甘蓝总DNA为模板进行PCR扩增,获得S-GT基因全长,构建了海甘蓝S-GT基因的植物双元表达载体pCambia2300sn-Ca SGT。用PCR的方法对CaSGT基因的外显子进行了拼接,将得到的序列正向插入到了大肠杆菌表达载体pET-32b(+)中,得到重组质粒pET-32b(+)-CaS-GT,为进一步研究CaSGT的生物学特性打下基础。