酶解法制备禾虫多肽液的工艺优化及其脱腥工艺探究

目的应用单因素和响应面实验优化禾虫的酶解工艺,结合模糊数学法探究一种有效的脱腥方法。方法以中性蛋白酶为酶解剂,禾虫为主要原料,研究液料比、酶用量、时间、温度、pH对酶解效果的影响。在单因素实验的基础上,以液料比、酶解温度、酶用量为自变量,禾虫多肽液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为响应值,通过Box-Behnken响应面法分析不同因素对酶解效果的影响,确定酶解的最优组合,并应用美拉德反应、硅藻土和酵母粉对禾虫多肽液进行脱腥实验,模糊数学法评价3种脱腥处理的效果。结果根据响应面实验得出禾虫的最佳酶解组合为:液料比1:1(g/mL)、酶解温度60℃、中性蛋白酶用量2450 U/g,得到酶解液的DPPH自由基清除率47.25%±0.11%;禾虫多肽液脱腥的最佳处理为:酵母粉添加量0.7%,反应温度35℃,反应时间30 min。结论中性蛋白酶酶解禾虫制备禾虫多肽液并采用酵母粉脱腥效果最佳,为禾虫的精深加工提供借鉴,促进禾虫产业的发展。

响应面优化超声波预处理辅助酶解法制备金针菇抗氧肽

为获取抗氧性更强的金针菇肽,本试验对超声波预处理辅助酶解法制备金针菇抗氧肽的最佳工艺条件进行了优化。以金针菇肽对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)的清除率作为指标,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶进行了筛选,又对等电点沉淀法分离抗氧肽的最适pH进行了优化,然后在确定胰蛋白酶为最佳蛋白酶,6为沉淀抗氧肽的最佳pH的基础上进行单因素试验,再在固定液料比为40:1(mL/g),酶解温度为37℃,酶解pH为8的前提下进行四因素三水平的响应面试验,以探讨超声功率、超声时间、酶添加量、酶解时间对制备工艺的影响。最后通过超滤分离法对抗氧肽进行了分级和活性比较。结果显示:金针菇抗氧肽的最佳制备条件为:超声时间6 min,超声功率296 W,酶添加量为金针菇样品量的1.1%(g/g),酶解时间75 min,在此条件下,金针菇抗氧肽对ABTS·的清除率为(76.63±1.24)%;截留分子质量<3 kDa的肽对ABTS·的清除率最高。说明金针菇肽具有一定的抗氧性,为金针菇抗氧肽的开发提供了依据。

苦荞蛋白降血脂肽的酶解制备、氨基酸组成及活性研究

以苦荞麦为原料提取苦荞蛋白,以胰脂肪酶抑制率为指标,通过单因素和响应面优化试验筛选出苦荞蛋白降血脂肽的酶解条件,同时对苦荞蛋白降血脂肽的氨基酸组成和降血脂活性进行研究。结果表明,用菠萝蛋白酶酶解苦荞蛋白得到的降血脂肽对胰脂肪酶的抑制活性更高,其最佳酶解条件为酶解时间2.1 h,酶解温度62.0℃,底物浓度3.23%,pH7.0和酶底比0.4%,在此条件下酶解物的胰脂肪酶抑制率为81.22%±0.16%。氨基酸分析结果显示,苦荞蛋白降血脂肽中必需氨基酸占比27.82%,疏水性氨基酸占比32.11%,酸性氨基酸占比35.86%,精氨酸与赖氨酸的比值为2.28。苦荞蛋白肽显示出良好的体外降血脂活性,其牛磺胆酸钠结合率、胆固醇酯酶抑制率和胰脂肪酶抑制率的EC_(50)/IC_(50)值分别为9.136、3.902和0.051 mg/mL。研究结果为苦荞麦资源的高值化利用和苦荞蛋白活性肽的开发提供了新思路和理论依据。

双酶分步酶解盐津乌骨鸡肉工艺及其氨基酸组成分析

以云南盐津乌骨鸡肉为原料,蛋白水解度为指标,采用响应面分析法优化盐津乌骨鸡肉酶解条件;用氨基酸分析仪及凝胶渗透色谱法检测酶解液的氨基酸组成和多肽分子量分布。结果表明,双酶分步酶解最佳工艺条件为动物蛋白酶酶解时间5 h、酶添加量2.6%、酶解pH值6.5,灭酶后,再加入木瓜蛋白酶酶解3 h、酶添加量2.5%、酶解温度60℃。在该条件下,盐津乌骨鸡肉水解度为(32.62±0.79)%;酶解液中含有17种氨基酸,总游离氨基酸含量可达6.02 mg/mL,且亮氨酸、精氨酸等呈味氨基酸含量较高,其中多肽的相对分子质量主要集中分布在1 kDa以下。该研究结果可为后续盐津乌骨鸡相关新型调味制品的开发提供一定的理论依据。

响应面法优化酶解处理制备墨红玫瑰花还原糖的工艺

以墨红玫瑰花瓣为原料,采用纤维素酶或果胶酶处理墨红玫瑰花瓣,以还原糖含量为指标,通过单因素和响应面试验确定墨红玫瑰花瓣酶解过程中料液比、酶添加量和酶解时间的最佳条件。在此基础上,检测酶解提取对样品抗氧化、弹性蛋白酶抑制活性的影响。结果表明,纤维素酶酶解的最佳工艺条件如下:料液比1∶54.20(g/mL),纤维素酶添加量4.00%,提取时间3 h 49 min,所得提取物中还原糖含量达到139.07±1.32 mg/g。果胶酶酶解的最佳工艺条件为料液比1∶61.80(g/mL),酶添加量5.52%,提取时间3 h 12 min,此条件下墨红玫瑰花瓣还原糖含量为122.99±1.14 mg/g。HPLC分析发现2种酶解处理的墨红玫瑰花瓣提取物所含的主要还原糖均为葡萄糖和半乳糖。经酶法处理后获得的墨红玫瑰花瓣提取物的还原糖含量、抗氧化性及弹性蛋白酶抑制力均得到明显提升,为墨红玫瑰花深加工提供理论支持。

响应面法优化芡实粉复合酶酶解工艺及多糖抗氧化性研究

为确定复合酶法酶解芡实粉的最佳工艺及芡实多糖的抗氧化活性,以优质产地的芡实粉为原料,通过单因素试验、Box-Behnken试验设计及响应面分析研究复合酶添加量、pH、酶解温度、酶解时间对水解程度(dextrose equivalent,DE值)的影响;并通过测定酶解后芡实多糖对DPPH自由基的清除能力评价其抗氧化活性。结果表明,复合酶法酶解芡实粉的最佳工艺参数为复合酶(普鲁兰酶∶α-淀粉酶)的质量比5∶6、酶添加量0.3%(以原料质量为基准)、pH 6.5、酶解温度56℃、酶解时间45 min。该条件下生产的芡实粉基料水解度可达20.25%,且酶解后芡实多糖具有一定的抗氧化活性。该研究结果为芡实相关产品的开发利用提供了理论依据及方法基础。

基于响应面法优化酒糟酶解工艺

为提高酒糟纤维素酶解效率,促进酒糟资源化利用,该试验以酿造副产物酒糟为原料,以还原糖得率为评价指标,结合单因素试验结果、Plackett-Burman试验筛选显著因素和响应面法优化酒糟酶解工艺条件,并采用扫描电镜(SEM)观察酒糟原料、芬顿试剂预处理酒糟、酶解酒糟的显微结构。结果表明,最佳酶解工艺条件为:处理时间27 h、处理pH 4.7、纤维素酶添加量1060 U/g、酶解pH 4.9。在此优化条件下,还原糖得率为64.44%,较对照组提高148.37%。SEM结果显示,酒糟经过芬顿试剂预处理和酶解后表面形态呈现蓬松状态,木质纤维结构被破坏,孔隙率增加;进一步酶解后块状物质明显减少,露出许多小孔,表明酒糟还原糖得率与表面微观形貌变化直接相关。

酶解法制备菌菇酱工艺优化

目的:以香菇、杏鲍菇、双孢菇为原料,采用纤维素酶对其进行酶解处理制备菌菇酱。方法:采用酶解法,以氨基酸态氮含量为指标,通过响应面法优化菌菇酱的最佳酶解工艺。结果:菌菇酱的最佳酶解工艺条件为酶添加量0.6%、pH 6、酶解温度50℃、料液比1∶30(g/mL),此工艺条件下,实测菌菇酱的氨基酸态氮含量为0.418μg/100 g。结论:该菌菇酱的感官评定及营养成分指标均达到或优于国标标准,表明该工艺切实可行,具有一定的推广应用价值。

白乌鱼鱼肉多肽的酶解工艺优化

白乌鱼是新培育的淡水鱼品种,其蛋白肽的功能性有待深入研究。为建立最优的制备白乌鱼鱼肉蛋白肽的水解工艺,为其功能性评价提供参考,以白乌鱼鱼肉为原料,在比较不同蛋白酶(碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶)对其水解度影响的基础上,通过单因素实验和响应面法对白乌鱼鱼肉的酶解工艺进行了优化,结果显示:碱性蛋白酶水解白乌鱼鱼肉的水解度最高(29.5%)。以该酶为催化剂,通过单因素实验(酶解温度、酶解时间、pH和酶浓度)和响应面法得出在酶解温度55℃、酶解时间4.65 h、pH 8.65、酶浓度1.0%时,白乌鱼鱼肉的水解度最高(39.62%)。以该酶解工艺为条件,验证实验的实测水解度为39.87%,与预测值39.62%的相对误差为0.63%。因此,所建立的白乌鱼鱼肉的酶解工艺具有可靠性。

响应面法优化三文鱼骨排酶解工艺的研究

采用双酶复合酶解法处理三文鱼骨排,以水解度、TCA-可溶性肽含量、电子舌关键味觉响应值为指标,筛选出最适蛋白酶组合。以酶解温度、液固比、酶解pH、酶解时间、酶添加量5个因素进行单因素试验,通过Plackett-Burman试验筛选关键因素并进行响应面试验优化酶解工艺。结果表明,三文鱼骨排复合酶解的最适蛋白酶组合为复合蛋白酶∶风味蛋白酶2∶1,最佳工艺条件为酶解温度49℃、液固比3.9∶1、酶添加量0.85%、酶解pH 8.0、酶解时间3 h,在此条件下得到酶解液的水解度和TCA-可溶性肽含量分别为18.11%和9.45 mg/mL,与预测值无显著性差异(P>0.05)。该研究为三文鱼骨排的深加工和高值化利用提供了一定的参考。

珍珠母肽酶解工艺的优化及对人肝癌细胞HepG2能量代谢的影响

该研究以水解度为指标,仿生酶用量、提取时间、提取温度为条件因素,设计Box-Behnken响应方案,对珍珠母肽酶解条件进行优化;同时研究其不同质量浓度的珍珠母肽对HepG2肝癌细胞的抑制作用的影响。最佳酶解工艺条件为:温度55℃,调节pH值为2.0,加入胃蛋白酶质量分数1%,酶解2.6 h后,pH值调节为8.0,加入胰蛋白酶质量分数1.7%,酶解3 h,此时珍珠母肽水解度为31.21%;基于此酶解条件获得珍珠母肽进行对肝癌细胞抑制作用,研究实验结果显示不同质量浓度珍珠母肽(12.5、25、50、100、200μg/mL)与氯化钴(CoCl_(2))诱导的HepG2肝癌细胞缺氧模型相比较,均可抑制细胞存活率,珍珠母肽中氨基酸结果显示,精氨酸可能参与抑制肝癌细胞增殖,从能量代谢的角度说明珍珠母肽可通过减少三磷酸腺苷的生成和降低乳酸、己糖激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶能量代谢关键酶活力达到抑制HepG2细胞增殖的目的,可为珍珠母肽的制备工艺提供参考,为其开发利用提供一定的理论基础。

挤压膨化结合酶解制备低GI代餐粉及其体外消化率测定

以藜麦、燕麦、青稞、苦荞为主要原料,辅以薏仁、葛根、桑叶、菊粉、低聚果糖等,利用酶解植物性原料及挤压膨化工艺制备代餐粉。以分散性指数和感官评分为指标,通过单因素试验和Box-Behnken试验结合优化原料挤压膨化工艺,并对原料代餐粉、挤压膨化代餐粉和酶解挤压膨化代餐粉的品质、体外消化率和血糖生成指数进行测定。结果表明:酶解挤压膨化代餐粉的最佳挤压膨化工艺为挤压温度150℃,螺杆转速810 r/min,喂料速度340 r/min,该工艺下代餐粉的分散性指数98.81%,感官评分89分。三种粉品质差异显著,酶解挤压膨化代餐粉的分散性指数和感官品质最高,酶解挤压膨化代餐粉eGI值为51.56,属于低GI食物,可为低GI代餐粉的开发提供一定的参考。

超声辅助酶法对杜仲籽粕蛋白的提取工艺优化

为充分利用生物质废弃物杜仲籽粕和高值化开发杜仲籽粕蛋白,以杜仲籽粕为原料,采用超声辅助蛋白酶法制备了杜仲籽粕蛋白。采用单因素实验系统分析了加酶量、液料比、酶解温度、酶解时间、pH值、超声功率和超声时间对蛋白提取率的影响,并通过响应面实验优化了杜仲籽粕蛋白的提取工艺条件。研究发现,加酶量和液料比在一定范围内对杜仲籽粕蛋白的提取率影响较小。当加酶量为0.8%和液料比为15(mL∶g)时,杜仲籽粕蛋白提取率最高。其他单因素对杜仲籽粕蛋白提取率的影响大小排序依次为:酶解时间>超声时间>超声功率>pH值>酶解温度。在最优化条件下(酶解温度40℃、酶解时间88 min、pH值10、超声功率300 W和超声时间57 min),杜仲籽粕蛋白提取率最高可达27.91%。

响应面法优化羚羊角多肽提取工艺研究

目的:探讨制备羚羊角多肽的最佳酶解工艺条件。方法:以羚羊角多肽提取率为指标筛选中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中酶解羚羊角多肽作用较佳的蛋白酶。采用单因素法初步考察胰蛋白酶用量、酶解温度、pH、酶解时间等因素对多肽提取率的影响;再以响应面法考察酶用量、酶解时间、酶解温度对羚羊角多肽提取率的影响,确定最佳酶解工艺﹐并进行验证。结果:响应面得到最佳提取工艺参数为:提取温度55℃,提取时间3.4 h,胰蛋白酶用量5400 U/mL。结论:响应面法优化的羚羊角多肽提取工艺简单快捷、稳定,成本低廉,安全性高,为羚羊角的进一步开发利用提供参考。

响应面法优化构树叶多糖酶法提取工艺的研究

利用纤维素酶法提取构树叶多糖,考查了料液比、提取温度、提取时间和纤维素酶添加量4个单因素对多糖得率的影响。在此基础上,利用响应面法优化构树叶多糖的酶法提取工艺。响应面得到的最佳工艺条件为料液比1∶30(g∶mL),提取温度58℃,提取时间160 min,纤维素酶添加量0.95%,在此条件下,多糖提取率为17.25%,验证试验结果与模型预测值相符。

α-淀粉酶水解马铃薯中淀粉提取还原糖参数优化

采用单因素实验方法及响应面法对α-淀粉酶水解马铃薯中的淀粉的酶用量、pH值、温度及时间等条件进行了优化。通过响应面法得出最佳组合条件为pH=6.0,酶加量37 mg(0.37%),酶解时间5.1 h,酶解温度66℃。在此工艺条件下马铃薯水解程度最大达到,还原糖提取率为5.104%与还原糖提取率预测值5.20%误差低于2%。酶解动力学试验结果显示,在不同的底物浓度条件下,酶解速率的变化规律符合米氏方程的特征。采用双倒数作图法计算出K m=99.13 g/L,V max=11.66 g/(L·h),得米氏方程式为V=2.92[S]/(99.13+[S]),R 2=0.99752,方程极显著,可很好地模拟α-淀粉酶酶解动力学过程。研究可以为资源化废弃马铃薯提供借鉴。

Optimization of enzymatic hydrolysis of pigeon pea for cooking quality of dhal

Cooking quality of dehusked splits is influenced by the dehulling method,in particular,by the pre-milling treatments.The effects of four enzymatic hydrolysis parameters,i.e.,enzyme concentration(20-60 mg/100 g dry matter),incubation time(3-15 h),incubation temperature(40-60℃)and tempering water pH(4.0-6.0)on cooking time of pigeon pea dhal were optimized using response surface methodology.Three kinds of enzymes,i.e.,xylanase,pectinase,and cellulas were used in combination for enzymatic pre-treatment.A quadratic model satisfactorily described the dehulling efficiency with high value for the coefficient of determination R^(2)(0.9062).It predicted a minimum cooking time of 21.91 min at enzyme concentration of 37.8 mg/100 g dry matter,incubation time 8.69 min,incubation temperature 48.5℃ and pH 5.49 of tempering water.Cooking time at optimum condition was observed to be 21.50 min and the predicted values of cooking time showed 2.19% deviation from the experimental values.Results of the study revealed that cooking time of enzyme treated dhal could be decreased by 19.77% compared to the oil treated dhal.

超声辅助酶法优化鸡肉蛋白水解工艺

鸡肉蛋白酶解产物中含有丰富的氨基酸和肽类物质,可用于研发相关天然功能性产品、调味料等,可大幅提高鸡肉资源的附加价值和利用率。采用单因素试验及响应面分析法对超声辅助酶法水解鸡肉蛋白工艺进行优化,研究蛋白酶的种类及不同工艺条件对鸡肉蛋白水解度的影响。结果表明,最佳酶解工艺:在超声功率600 W,辅助酶解20 min条件下,固液比1∶4(g/mL)、总加酶量0.21%、酶解时间4 h、酶解温度53℃,此时,鸡肉蛋白水解度为37.48%。

罗汉果花枸杞复合饮料的研制

对罗汉果花枸杞复合饮料进行开发,为罗汉果花和枸杞的进一步开发利用提供依据。以罗汉果花和枸杞原料的利用率为考查指标,通过超声波辅助酶解的方法,进行单因素试验和响应面优化试验来优化原料酶解液的最佳工艺。最后以感官评分作为考查指标,进行饮料配方的确定。结果表明,原料酶解液的最佳工艺参数是枸杞和罗汉果花的质量比2∶1,料液比1∶35(g∶mL),纤维素酶和β-葡聚糖酶配比1∶2.3,pH值5~6,温度50℃,浸提2 h,在此最佳工艺参数下原料的利用率是60.6%。饮料最佳配方是一定量酶解液加入5.9%白砂糖、0.04%柠檬酸、0.06%抗坏血酸,在此最佳配方条件下感官评分是90.1分。按最佳配方制作的复合饮料色泽红亮透明,含有罗汉果花味和枸杞的醇香,口感酸甜,无沉淀析出。

英红九号茶蛋白降尿酸肽的酶解制备及不同分子量组分的活性对比

以英红九号红茶渣为原料,通过碱提酸沉提取茶叶蛋白,以黄嘌呤氧化酶抑制率为指标,采用单因素和响应面实验优化酶解制备降尿酸肽,对其氨基酸组成进行分析,并对最优酶解物进行超滤分离和活性评价。结果表明,在底物浓度2%(m/V)、加酶量0.3%(m/V)、温度39℃、pH值7.5和酶解时间3.4 h条件下,得到的降尿酸肽的黄嘌呤氧化酶抑制率为85.42%。氨基酸分析表明,降尿酸肽中必需氨基酸含量丰富(38.49%),高比例的疏水性氨基酸(48.00%)和碱性氨基酸(13.67%)对黄嘌呤氧化酶抑制活性有重要作用。酶解物经过超滤分离后,与原酶解物的活性(IC500.72 mg/mL)比较,<3 ku组分的黄嘌呤氧化酶抑制活性显著提升(IC500.41 mg/mL)。该研究可为茶叶蛋白的高值化利用提供参考,为茶叶源新型降尿酸健康食品的开发提供了理论依据。