铜绿假单胞菌临床菌株TTSS表达水平及相关因素分析

Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,TTSS)是铜绿假单胞菌的重要致病因子.分析临床菌株中TTSS的表达水平,对于研究铜绿假单胞菌的致病机制具有重要意义.本研究通过测定融合报告基因exsA-lacZ和exoT-lacZ编码的β-半乳糖苷酶活力,分析了150株铜绿假单胞菌临床菌株exsA和exoT基因的表达水平,发现71株(47.33%)细菌exsA基因的表达为阳性6,5株(43.33%)细菌exoT基因的表达为阳性,基因exsA与exoT表达水平存在正相关(P<0.001),且不同菌株间两者表达水平差异较大.采用统计学方法对实验结果进一步分析发现,TTSS表达与呼吸道感染等临床症状相关(P<0.05);与标本的分离时间相关(P=0.029);与菌株亚胺青霉烯耐药性存在负相关(P<0.05).本研究结果显示,铜绿假单胞菌临床菌株TTSS表达水平差异较大,与多种因素存在相关性.

基于Internet的网络化三容水箱实验平台

基于网络的故障诊断与容错控制算法的现有研究大多止于数值仿真,而简单的数值算例无法准确反应实际的工业过程,需要利用真实的物理实验平台对各种算法进行评估。本文构建了基于Internet的网络化三容水箱系统,为网络化故障诊断与容错控制算法提供了一个基准的实验平台。该系统有较为精确的数学模型,可以方便地设置多种故障。整个系统立足于真实的物理系统、真实的网络传输特性以及真实的故障种类,可作为基准平台对网络化故障诊断与容错控制算法的效果进行评估。

放射受体分析法测定东莨菪碱膜控制剂的血药浓度

家兔背部皮肤贴用东莨菪碱膜控制剂(transdermal therapeutic system of seopola-mine,TTSS),不同时间从耳缘静脉采血,立即用Sep-PAK C_(18)柱分离提取,~3H-QNB作放射配基。进行放射受体分析(RRA)。结果,我校研制的TTSS给药后72h内血药浓度基本稳定在0.85～1.96ng/ml,与美国CIBA公司的TTSS类似。

丁香假单胞菌的分子生物学研究进展

丁香假单胞菌是好氧、腐生性强的革兰氏阴性菌,所引起的植物病害发生率位居十大细菌性植物病害之首,尤其引发的疫病在各农业大国爆发并有在世界范围扩散的趋势,给各国农业生产造成巨大的经济损失。基于国内外学者最新的分子生物学研究报道,对丁香假单胞菌的致病变种、病原菌鉴定、植物检疫、早期快速检测技术、致病机制及生物防治等方面进行综述,并探讨现阶段该病害研究存在的问题以及未来的研究方向与防治方案。

流出系数故障对三容水箱系统的影响

研究了三容水箱中流出系数故障对系统稳定性的影响,流出系数的变化直接影响了一步转移矩阵的稳定性,进而影响了系统的整体性能。首先,通过建立三容水箱的模型,得出了系数矩阵与流出系数的关系,然后通过仿真模拟,得到了各个流出系数对系数矩阵特征值的影响的仿真图。最终根据仿真图分析了流出系数故障对三容水箱系统稳定性的影响。

嗜水气单胞菌AH-1 quorum sensing负调控Ⅲ型分泌系统的表达

通过构建嗜水气单胞菌AH-1 Quorum Sensing(QS)2个关键调节基因ahyI,ahyR的突变菌株,来系统分析嗜水气单胞菌AH-1Ⅲ型分泌系统基因,揭示它们由QS系统调控.在ahyI突变菌中,TTSS分泌效应因子(effector)aexT量显著提高.通过构建LacZ-TTSS基因启动子融合表达,进一步表明QS系统负调控编码TTSS组分的基因.

痢疾杆菌细胞内存活机制研究进展

细菌侵染宿主细胞后,宿主对入侵细菌的识别与杀灭决定了细菌的命运。病原菌侵入宿主细胞后,通过改变吞噬体囊泡进入宿主细胞的胞质内,从溶解的吞噬体逃逸以获得复制的场所。然而,这些细胞内的外来者,受到宿主固有免疫系统的监视,如由Nod/CARD家族蛋白介导的、通过激活NF-κB诱导的炎症反应。最近的研究表明,自体吞噬作用,一种主要降解细胞内蛋白质和(或)细胞器的降解系统,同样可以识别入侵细菌。事实上,除非细菌能逃逸自吞噬体膜的包围,否则最终通过自体吞噬作用由自吞噬溶酶体降解。本文综述了痢疾杆菌感染上皮细胞的最新进展,集中讨论痢疾杆菌对抗自体吞噬降解并在细胞内存活的策略。

沙门菌Ⅲ型分泌蛋白融合HBx抗原介导的T细胞免疫效果观察

目的检测沙门菌减毒株作为载体,Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,TTSS)效应蛋白-肿瘤抗原融合蛋白激发机体产生T细胞免疫反应的能力。方法重组原核表达质粒,表达Ⅲ型分泌蛋白SspH2和肿瘤抗原HBx融合分子,转化鼠伤寒沙门菌减毒株SL3261,口饲免疫小鼠。通过检测免疫小鼠脾细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放确定疫苗激发CTL作用;利用ELISPOT方法检测免疫小鼠脾淋巴细胞释放IFN-γ能力;腋下接种稳定表达HBx的B16细胞,观察免疫小鼠肿瘤的体积及重量,检测该疫苗的免疫保护效果。结果通过LDH释放试验发现,经细菌体内表达及投递SspH2-HBx融合蛋白诱发后,小鼠脾淋巴细胞具有特异的CTL反应活性;ELISPOT结果显示细菌表达、投递SspH2- HBx蛋白具有特异诱发淋巴细胞分泌IFN-γ活性;肿瘤接种试验进一步证实这种基于TIKS的肿瘤疫苗可以特异抑制肿瘤的生长。结论以沙门菌减毒株作为载体、Ⅲ型分泌蛋白SspH2作为底物融合肿瘤抗原HBx能够激发显著的T细胞免疫反应、产生一定的免疫保护作用;这种基于沙门菌TTSS的疫苗具有一定的开发、应用前景。