小鼠前扣带回皮质内THBS4在神经病理性痛中的表达变化

目的:探讨前扣带回皮质(ACC)中的血小板反应蛋白4(THBS4)在小鼠神经病理性疼痛中的表达变化情况。方法:利用免疫荧光染色方法观察正常小鼠ACC脑区THBS4的表达分布情况。将雄性健康小鼠随机分成假手术组(Sham组)和实验组(SNI组),通过选择性神经损伤(SNI)方法建立神经病理性疼痛小鼠模型,采用机械刺激和热辐射刺激方法分别检测小鼠的机械缩足阈值(PWT)和热缩足潜伏期(PWL)。采用Western Blot方法检测小鼠ACC脑区THBS4蛋白表达变化情况。结果:THBS4在小鼠ACC脑区广泛分布,在兴奋性和抑制性神经元都有表达,但主要在兴奋性神经元中表达。小鼠在建立SNI模型后,其同侧足底在7和56 d均出现了稳定的机械痛和热痛敏化现象。Western Blot实验显示,与sham组相比,SNI后ACC脑区THBS4的表达水平显著下调。结论:THBS4大量表达于小鼠ACC,主要与兴奋性神经元共标。SNI模型小鼠ACC脑区中THBS4蛋白表达水平显著下调,提示ACC脑区中THBS4可能参与介导了神经病理性疼痛的发生发展过程。

血清ANXA2、ADAMTS4水平与短暂性脑缺血发作患者颈动脉斑块性质的关系

目的探讨血清膜联蛋白A2(ANXA2)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)水平与短暂性脑缺血发作(TIA)患者颈动脉斑块性质的关系。方法选择TIA患者156例(观察组)、同期体检健康的志愿者78例(对照组),采集所有研究对象外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清ANXA2、ADAMTS4。TIA患者入院后接受颈动脉血管超声检查,由两名经验丰富的影像科医师评估颈动脉斑块形成及稳定性。采用多因素Logistic回归模型分析TIA患者颈动脉斑块不稳定的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ANXA2、ADAMTS4水平对TIA患者颈动脉斑块不稳定的预测价值。结果观察组血清ANXA2、ADAMTS4水平均高于对照组(t分别为16.636、25.358,P均<0.05)。颈动脉血管超声检查发现,TIA患者颈动脉斑块不稳定者76例、颈动脉斑块稳定或无颈动脉斑块者80例,颈动脉斑块不稳定的发生率为48.72%(76/156)。单因素分析发现,TIA患者颈动脉斑块不稳定与年龄、吸烟、饮酒、合并高血压、卒中风险及血清ANXA2、ADAMTS4水平有关(P均<0.05);多因素Logistic回归分析显示,吸烟、饮酒、卒中风险增加以及血清ANXA2、ADAMTS4水平升高为TIA患者颈动脉斑块不稳定的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清ANXA2、ADAMTS4水平单独和联合预测TIA患者颈动脉斑块不稳定的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.780、0.874,血清ANXA2、ADAMTS4水平联合预测TIA患者颈动脉斑块不稳定的AUC大于二者单独(Z分别为3.151、3.326,P均<0.05)。结论血清ANXA2、ADAMTS4水平升高是导致TIA患者颈动脉斑块不稳定的独立危险因素;血清ANXA2、ADAMTS4水平对TIA患者颈动脉斑块不稳定均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。

胃癌微环境中CAFs、THBS4的临床意义及与预后的关系

目的探究胃癌微环境中血小板反应蛋白4(THBS4)表达的临床病理意义及与预后的关系。方法选择2015至2018年就诊的胃癌患者100例,依据各肿瘤组织中THBS4的表达将患者分为高THBS4(n=38)组和低THBS4(n=62)组。检测胃癌相关成纤维细胞(CAFs)和胃癌细胞系中THBS 4的表达。分析THBS4的表达与胃癌患者病理特征的关系,并在随访3年记录期间患者生存情况。结果THBS4表达水平与α-平滑肌肌动蛋白水(α-SMA)平呈正相关;与肿瘤直径,高肿瘤浸润深度,淋巴结转移,临床Ⅲ、Ⅳ期,肿瘤分化程度显著相关(P<0.001),且低分化肿瘤组织中THBS4的表达明显高于高或中分化肿瘤组织(P<0.001),与患者年龄、性别及远处转移无相关性(P>0.05)。胃癌组织CAFs中α-SMA的表达与肿瘤直径,淋巴结转移显著正相关(P<0.05);与性别、年龄、及组织学分级无关(P>0.05)。高THBS4表达组3年生存率(41.03%)明显低于低THBS4表达组(64.57%),差异有统计学意义(P<0.001)。结论THBS4在胃癌微环境中表达,CAFs中的THBS4与胃癌的发展密切相关,且可以作为胃癌患者的预后评估指标。

心脏超声造影联合血清ADAMTS-4、OPG评估冠心病病人冠状动脉病变程度的临床价值

目的:探讨心脏超声造影联合血清血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4(ADAMTS-4)、骨保护素(OPG)评估冠心病病人冠状动脉病变程度的临床价值。方法:选取2019年10月—2022年10月四川绵阳四0四医院收治的90例冠心病病人作为研究对象,根据Gensini评分将病人分为重度病变组(30例)、中度病变组(28例)、轻度病变组(32例),均行心脏超声造影检查及血清ADAMTS-4、OPG检测。比较3组心脏超声造影定量参数(A值、β值)及血清ADAMTS-4、OPG检测值;采用Pearson相关性分析心脏超声造影定量参数及血清ADAMTS-4、OPG水平与Gensini评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估心脏超声造影定量参数及血清ADAMTS-4、OPG水平对重度冠状动脉病变的评估效能。结果:中度病变组、重度病变组心脏超声造影定量参数A值、β值低于轻度病变组,血清ADAMTS-4、OPG水平高于轻度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度病变组心脏超声造影定量参数A值、β值低于中度病变组,血清ADAMTS-4、OPG水平高于中度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,心脏超声造影A值、β值与Gensini评分均呈负相关(P<0.05),血清ADAMTS-4、OPG水平与Gensini评分均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,A值、β值及血清ADAMTS-4、OPG单独诊断重度冠状动脉病变的最佳截断值分别为3.38、0.30、107.57 ng/mL、0.20 ng/mL,对应的曲线下面积(AUC)分别为0.797,0.883,0.895,0.680,4项指标联合诊断的AUC为0.937。结论:心脏超声造影定量参数A值、β值及血清ADAMTS-4、OPG与冠心病病人冠状动脉病变程度存在相关性,联合检测在重度冠状动脉病变的评估中具有较高的应用价值。

siRNA下调THBS4对人骨肉瘤MG63增殖的影响

目的探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制血小板反应蛋白4(thrombospondin 4,THBS4)基因的表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响及其分子机制。方法将合成的THBS4 siRNA转染到人成骨细胞株MG63,CCK-8法观察对细胞增殖的影响,荧光定量PCR检测THBS4及TGF-beta1的mRNA表达,Western-blotting检测THBS4及TGF-beta1的蛋白表达。结果 Thbs4 siRNA转染后实验组48 h,72 h OD值高于阴性对照组(P<0.05),差异具有显著性;Thbs4 mRNA和蛋白的表达水平明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.01);Thbs4 siRNA转染后MG63细胞中TGF-beta1 mRNA及蛋白的表达水平提高(P<0.01)。结论 THBS4 siRNA转染MG63后能够促进细胞增殖,其机制可能是激活TGF-beta1信号通路。

THBS4基因在高原地区胃癌组织中表达的生物学行为及临床意义

目的通过研究高原地区胃癌组织中THBS4基因的表达,探讨THBS4基因对高原地区胃癌生物学行为的影响及为高原地区胃预后的评估提供理论依据。方法收集高原地区无化疗且临床资料完整的胃癌手术标本60例,采用RT-PCR及S-P法,检测60例胃癌标本中THBS4蛋白的表达。结果用RT-PCR技术分析的结果显示,10例高分化胃癌组织中THBS4 mRNA有5例表达;29例低分化胃癌中24例表达,高分化癌与中、低分化癌组织中的表达有差异。中、低分化胃癌中的THBS4 mRNA水平高于高分化胃癌(P<0.05)。THBS4mRNA表达与淋巴转移有关,但与临床分期无关。免疫组化S-P法染色分析显示,THBS4蛋白在低分化29例中21例表达;中分化阳性率8例;均高于高分化(4例),THBS4在高分化癌和中、低分化癌组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05);中、低分化胃癌中的的THBS4阳性高于高分化胃癌。THBS4基因在高原地区胃癌组织中表达与胃癌的分化程度有关;与淋巴转移有关。结论 THBS4基因可作为判断高原地区胃癌细胞分化不良的指标,对胃癌的预后评估有重要意义。

FGFR2、THBS1和THBS4在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨成纤维细胞生长因子2型受体(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)、凝血酶敏感蛋白家族(thrombospondins,THBS)成员THBS1和THBS4在胃癌组织中的表达及临床意义,并分析FGFR2与THBS1、THBS4的相关性。方法采用免疫组化SABC法检测胃癌组织中FGFR2、THBS1和THBS4的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 FGFR2、THBS1和THBS4在胃癌组织中的高表达率分别为68.67%、57.83%和62.65%,三者在胃癌组织中的表达均高于癌旁正常组织(P<0.001)。FGFR2表达与肿瘤浸润深度(P=0.003)和临床分期(P=0.009)密切相关,而与患者年龄、性别、肿块大小、分化程度及淋巴结转移无相关性(P>0.05);THBS1表达与患者的临床病理特征均无相关性(P>0.05);THBS4表达与患者肿瘤分化程度相关,高或中分化肿瘤组织THBS4的表达明显高于低分化肿瘤组织(P=0.001)。相关性分析显示FGFR2与THBS1表达呈正相关(r=0.229,P=0.037),与THBS4表达呈负相关(r=-0.213,P=0.045)。结论 FGFR2、THBS1与THBS4在胃癌组织中高表达,FGFR2可能正向调控THBS1表达,而负向调控THBS4表达,其作用可能是FGFR2信号通路参与胃癌侵袭转移的分子机制之一。

血清CypA、ADAMTS-4水平与老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定性的关系

目的探讨血清亲环素A(CypA)、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序列的解聚蛋白样金属基质蛋白酶4(ADAMTS-4)水平与老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定性的关系。方法选择老年后循环脑梗死患者142例,CT血管造影检查发现椎基底动脉存在不稳定性斑块86例(UP组)、稳定性斑块31例(SP组)、无斑块25例(NP组)。所有研究对象入院次日采集清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CypA、ADAMTS-4。收集所有研究对象基线临床资料,采用多因素Logistic回归模型分析老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CypA、ADAMTS-4水平对老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的预测价值。结果UP组血清CypA、ADAMTS-4水平均显著高于SP组和NP组,SP组血清CypA、ADAMTS-4水平均显著高于NP组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血糖、CypA、ADAMTS-4水平高是老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CypA、ADAMTS-4水平单独和联合预测老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的曲线下面积分别为0.691、0.740、0.911,血清CypA、ADAMTS-4水平联合预测老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的曲线下面积显著高于血清CypA、ADAMTS-4水平单独(P均<0.05)。结论血清CypA、ADAMTS-4水平与老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定密切相关,并可作为预测老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的生物学指标。

膝骨关节炎患者血清及关节液中TSP-1、TLR-4水平变化及临床意义

目的探讨膝骨关节炎(KOA)患者血清及关节液中血小板反应蛋白-1(TSP-1)、Toll样受体4(TLR-4)水平变化及意义。方法选取上海市嘉定区中心医院2019年5月至2022年2月收治的92例KOA患者作为观察组,另选取同期在该院体检的健康成年人32例作为对照组。比较两组血清和关节液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、TSP-1、TLR-4水平;观察两组血清及关节液中TNF-α、IL-1β、TSP-1、TLR-4水平与KOA病情严重程度的相关性,分析TSP-1、TLR-4诊断KOA的临床价值。结果观察组血清和关节液中TNF-α、IL-1β、TSP-1、TLR-4水平均明显高于对照组(P<0.05)。观察组血清及关节液中TNF-α、IL-1β、TSP-1、TLR-4水平随Kellgren-Lawrence(K-L)分级升高而升高,不同K-L分级间TNF-α、IL-1β、TSP-1、TLR-4水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组血清和关节液中TNF-α、IL-1β、TSP-1、TLR-4各因子间呈正相关(P<0.05),且血清和关节液中TNF-α、IL-1β、TSP-1、TLR-4与患者K-L分级呈正相关(P<0.05)。血清TSP-1、TLR-4诊断KOA的灵敏度、特异度分别为0.913、0.887和0.826、0.863,最佳截断值分别为247.260、5.080 ng/mL;关节液中TSP-1、TLR-4诊断KOA的灵敏度、特异度分别为0.948、0.937和0.989、0.906,最佳截断值分别为239.745、4.620 ng/mL。结论血清及关节液中TSP-1、TLR-4可作为KOA临床诊断和病情评估的潜在标志物,均具有较高的诊断效能,且血清TSP-1、TLR-4检测创伤更小、成本更低,更易被患者接受。

血小板反应蛋白4通过诱导肿瘤相关巨噬细胞M2型极化促进肝癌细胞转移

血小板反应蛋白4(thrombospondin 4,THBS4)属于THBS家族成员,是细胞外基质分泌的蛋白质,参与调控细胞增殖、黏附及血管生成等多种生理过程。近来研究表明,机体在炎症刺激下加速产生THBS4并诱导巨噬细胞粘附与积累。我们的前期研究证实,THBS4在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中发挥促癌作用,但THBS4对肝癌免疫微环境的影响尚不明确。本文旨在分析THBS4通过诱导肿瘤相关巨噬细胞M2型极化,促进肝癌细胞转移的作用。通过肝癌条件培养基(HCC conditioned medium,HCM)模拟肿瘤微环境,发现在HCM作用下巨噬细胞中THBS4表达呈时间依赖性升高(P<0.05);下调THBS4促使M1型巨噬细胞标志物IL-1β、CD86的表达升高(P<0.01),而M2型标志物IL-10和CD206表达降低(P<0.01)。进一步通过Transwell共培养实验检测THBS4诱导的M2型巨噬细胞对肝癌转移的影响。将下调THBS4的M2型巨噬细胞(M2-TAMs)与HepG2肝癌细胞进行共培养。结果显示,下调THBS4的M2-TAMs明显抑制了HepG2细胞的侵袭和迁移能力(P均<0.01)。综上所述,肿瘤微环境促进巨噬细胞中THBS4表达,THBS4可能通过诱导巨噬细胞M2型极化促进肝癌细胞侵袭转移。本文为探究THBS4诱导肝癌免疫微环境的建立提供了一些新的实验依据。

ADAMTS-4在心力衰竭患者心肌中的表达及意义

目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)在心力衰竭患者心肌中的表达及作用。方法收集2012年7月~2017年3月武汉大学人民医院终末期心力衰竭患者心脏移植后的病变心脏及配型不成功的正常供体心脏标本,心力衰竭患者17例,纳入心力衰竭组,男性12例,女性5例,年龄(46.5±9.7)岁;配型不成功的正常供体心脏8例,纳入对照组,均为男性,年龄(37.6±6.9)岁。心脏离体后立即分离样本,心肌组织采用HE和天狼星红染色,采用Real-time PCR及Western-blot技术检测ADAMTS-4在心肌组织中的表达水平。结果光镜下,对照组心肌细胞形态完整,胞浆均匀致密,细胞排列整齐,可见清晰的细胞核;心力衰竭组患者心肌细胞肿大,形态不规整,肌丝断裂,排列紊乱,可见畸形、增大的细胞核。天狼星红染色显示,心力衰竭组患者心肌组织胶原纤维含量较对照组增多,胶原纤维增粗、排列紊乱,胶原容积分数较对照组升高,(10.18±0.63)%vs.(2.56±0.25)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,心力衰竭组患者心肌组织ADAMTS-4m RNA相对表达水平明显增高,(1.00±0.03)vs.(1.50±0.03),差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,心力衰竭组患者心肌组织ADAMTS-4蛋白表达水平明显升高,(1.00±0.06)vs.(2.01±0.09),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4可能通过参与心肌组织重构影响心力衰竭的发生。

血小板反应素-4在胃癌中的表达及其临床意义

目的定量测定血小板反应素-4(TSP-4)基因在胃癌及癌旁组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理学特征、微血管密度(MVD)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平的关系,评价其在胃癌发生和发展中的意义。方法采用RT-PCR技术检测82例配对的胃癌组织及癌旁组织TSP-4mRNA的表达,并分析其与临床病理学特征的关系;通过免疫组织化学检测肿瘤组织中CD34和MMP-9的表达,分析TSP-4mRNA的表达与肿瘤微血管密度、MMP-9表达的相关性。结果TSP-4mRNA在胃癌中的表达高于癌旁组织(P=0.03);胃癌组织中TSP-4mRNA的表达水平与肿瘤大小、组织分型、淋巴结转移、肿瘤微血管密度及MMP-9表达密切相关(P=0.002,P=0.031,P=0.014,r=0.67P<0.01,P=0.008),但与性别、年龄及侵袭程度无关(P=0.53,P=0.57,P=0.15)。结论TSP-4可能通过调节胃癌新血管生成和MMP-9的表达,促进肿瘤生长与转移。

脂肪间充质干细胞移植提升脊髓损伤小鼠血小板反应蛋白4表达促进运动功能恢复

目的:评估脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)移植对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)小鼠血小板反应蛋白4(thrombospondin-4,Thbs-4)表达水平的影响,及ADSCs修复SCI的作用。方法:制备小鼠T10 SCI模型,随机分为假手术组、模型组、ADSCs移植组,每组30只。取同种系转绿色荧光基因小鼠皮下脂肪组织,分离培养ADSCs。损伤后即刻移植106个细胞至ADSCs移植组小鼠脊髓内,模型组注射同等剂量PBS。术前及术后每周进行运动功能BBB评分;采用免疫荧光法检测移植细胞存活、炎症反应情况;采用Western Blot法检测移植术后第7 d各组动物脊髓组织Thbs-4蛋白表达水平;采用ELISA法检测术后第3、14 d各组动物脊髓组织TNF-α浓度。结果:ADSCs移植后可在宿主体内存活至少2周。移植术后第7 d,Thbs-4在假手术组表达水平最低,模型组次之,在ADSCs移植组表达水平最高(P<0.05);ADSCs移植下调SCI后TNF-α浓度;移植术后第14 d,ADSCs移植组ED-1+炎症细胞数量显著少于模型组(P<0.05);运动功能评分结果显示从第2周起,ADSCs移植组小鼠显著优于模型组(P<0.05)。结论:ADSCs移植促进SCI小鼠运动功能恢复,其机制与提升Thbs-4蛋白表达水平,减轻受损脊髓组织炎症反应增生有关。

不同乳腺病变组织中TSP-1、CD44V5、HER4表达对微血管密度的影响

目的 探讨不同乳腺病变组织中微血管密度(MVD )的差异及其与TSP 1,CD44V 5 ,HER 4表达情况的关系。方法 采用免疫组化SP法,检测乳腺纤维腺瘤、小叶增生和乳腺浸润性导管癌(IDC )组织中TSP 1,CD 44V 5 ,HER 4的表达情况及MVD。结果 在IDC组织中的MVD明显高于其它两种组织(P <0 .0 5 ) ;在3种组织中MVD与TSP 1,CD 44V 5的表达均无关(P >0 .0 5 ) ,但在IDC中,MVD值与HER4表达有关(P <0 .0 5 ) ,HER 4阳性的IDC组织MVD较高。结论 IDC组织的MVD高于良性病变;HER4的表达可促进IDC组织中MVD的增加。

STAT3通过血小板反应蛋白4诱导足细胞凋亡及炎症反应

目的:探讨血小板反应蛋白4(thrombospondin-4,TSP-4)对高糖(high glucose,HG)刺激足细胞增殖、凋亡、氧化应激及炎症反应的潜在影响,揭示TSP-4在糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)发生发展中的作用。方法:(1)通过实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测HG诱导的足细胞中TSP-4和信号转导因子和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)的表达水平;(2)在HG诱导的足细胞中干扰TSP-4后,通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)测定增殖能力;通过流式细胞术测定足细胞的凋亡和细胞周期分布;使用试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的相对含量。此外,通过酶联免疫吸附法检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和IL-6的表达水平;(3)应用染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)验证转录因子STAT3与TSP-4的启动子区域的关系,并通过双荧光素酶报告基因检测进一步验证。结果:(1)TSP-4和p-STAT3在HG诱导的足细胞中呈时间依赖性上调(P<0.05);(2)干扰TSP-4可以逆转HG诱导的足细胞凋亡、氧化应激、炎症反应和受抑制的增殖(P<0.05);(3)STAT3可以结合TSP-4的启动子区域,从而诱导转录,对TSP-4启动子活性具有正向调控作用。结论:干扰TSP-4可减轻HG诱导的足细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,对足细胞具有保护作用;转录因子STAT3对TSP-4基因启动子活性具有正向调控作用。

浸润性乳腺癌组织中ADAMTS-4及ARGxx的表达变化

目的观察浸润性乳腺癌组织中含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)及其裂解蛋白聚糖后产生的新抗原表位ARGxx的表达变化。方法选择浸润性乳腺癌手术切除标本20份(观察组)及乳腺纤维腺瘤手术切除标本22份(对照组),采用免疫组化法检测其中的ADAMTS-4及ARGxx,并通过显微镜测量其表达强度(光密度值)。结果观察组和对照组ADAMTS-4表达阳性率分别为80.0%、27.3%,ARGxx表达阳性率分别为80.0%、18.2%,组间比较P均<0.01;观察组和对照组ADAMTS-4光密度值分别为0.235 8±0.059 5、0.170 0±0.051 0,ARGxx光密度值分别为0.215 0±0.045 5、0.134 2±0.036 3,组间比较P均<0.05。结论浸润性乳腺癌组织中ADAMTS-4表达升高且活性显著增强。

解聚蛋白样基质金属蛋白酶4表达及其与颈动脉斑块易损性关系的研究

目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4(ADAMTS-4)在颈动脉粥样硬化性狭窄患者中的表达及其与斑块易损性的相关性,同时分析血液相关指标与斑块易损性之间的关系。方法回顾性连续纳入2017年8月至2019年12月广东省人民医院神经外科收治的颈动脉粥样硬化性狭窄并行颈动脉内膜切除术(CEA)患者43例,其中1例分期行双侧CEA,以2例计算,共计44例患者。以颈部血管超声造影结果0~1级为稳定斑块,2~3级为易损斑块;以高分辨率增强MR血管成像(MRA)结果Ⅰ~Ⅲ型、Ⅶ~Ⅷ型为稳定斑块,Ⅳ~Ⅵ型为易损斑块。当颈部血管超声造影与高分辨率增强MRA对斑块易损性评估结果不一致时,以颈部血管超声造影结果为准。根据斑块性质,将44例患者分为稳定组(15例)和易损组(29例)。记录两组患者的一般资料、血液学指标、斑块中ADAMTS-4的表达,一般资料包括年龄、性别、高血压病、糖尿病和狭窄侧别;血液学指标包括血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、ADAMTS-4、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR),并进行组间比较。分析PLR和ADAMTS-4与斑块易损性的相关性(对正态分布资料采用Pearson相关分析,对非正态分布资料及有序变量采用Spearman秩相关分析)。术前采用酶联免疫吸附测定检测血清中ADAMTS-4的水平;对斑块组织行免疫组织化学染色,检测ADAMTS-4在斑块中的表达,分为阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%。结果(1)两组患者年龄、性别、高血压病、糖尿病、颈动脉粥样硬化性狭窄侧别的差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)两组血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、NLR的差异均无统计学意义(均P>0.05);稳定组血清ADAMTS-4水平、PLR均低于易损组,组间差异均有统计学意义[分别为(72±26)μg/L比(116±24)μg/L,t=-5.683;110.87(87.25,134.05)比151.33(130.72,169.17),Z=-2.860;均P<0.01]。(3)稳定组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为10/15、3/15、2/15,易损组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为3/29、14/29、12/29,组间差异有统计学意义(Z=-3.330,P=0.001)。(4)相关性分析结果显示,PLR水平、斑块ADAMTS-4与斑块易损性的相关度较低(Spearman相关系数r值分别为0.436、0.508),血清ADAMTS-4水平与斑块易损性呈中度相关(Pearson相关系数r=0.659),均与斑块易损性呈正相关(均P<0.01)。结论PLR及ADAMTS-4表达水平与颈动脉斑块的易损性呈正相关,PLR和斑块ADAMTS-4与易损性相关度均较低,血清ADAMTS-4与斑块易损性为中度相关。

ADAMTS-4在冠心病中的研究进展

含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(A disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type-1motifs-4,ADAMTS-4)属于ADAMTS金属蛋白酶家族中的一员,主要由巨噬细胞分泌,由无活性的酶原经过切割转化为具有活性的酶在细胞外发挥作用,ADATMS-4 mRNA表达受IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-1、IL-6、TGF-β等多种因子的调控,参与了关节炎、骨关节病、癌症、心脏病等多种疾病的发生发展过程。作为一种新型炎症因子,ADAMTS-4在动脉粥样硬化的发展中起了重要作用,对动脉粥硬化斑块的不稳定性有影响,并且其在急性心肌梗死中的表达也有变化。因此,ADAMTS-4与冠状动脉粥样硬化性心脏病有着密切联系。文章就ADAMTS-4与冠心病的研究进展做一综述。

血清sOX40L和ADAMTS-4联合检测对老年急性脑梗死患者的预后价值

目的分析老年急性脑梗死患者血清可溶性OX40配体(sOX40L)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4(ADAMTS-4)联合检测对患者预后的预测价值。方法选取2019年7月-2023年8月就诊于河北省保定市第一中心医院的老年急性脑梗死患者作为脑梗组(n=121),并根据预后mRS评分分为预后良好组(n=78)和预后不良组(n=43),根据不同脑损伤程度分为轻度(n=31)、中度(n=57)和重度损伤组(n=33),另选取体检健康者作为健康组(n=68)。用酶联免疫吸附法检测血清sOX40L、ADAMTS-4水平并进行比较;收集患者临床资料并分析;用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清sOX40L、ADAMTS-4水平对老年急性脑梗死患者预后的预测价值;logistic回归分析影响老年急性脑梗死患者预后的因素。结果脑梗组血清sOX40L、ADAMTS-4水平高于健康组,差异均有统计学意义(t=13.946、14.297,P均<0.05);且血清sOX40L、ADAMTS-4水平随着脑损伤程度的加重而升高,差异均有统计学意义(F=31.900、22.080,P均<0.05)。预后不良组血清sOX40L、ADAMTS-4水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(t=10.240、9.433,P均<0.05),两组患者的脑梗死部位、入院时NIHSS评分、Hcy水平差异均有统计学意义(t=5.178、8.818、6.121,P均<0.05)。后循环脑梗死、NIHSS高评分、Hcy、sOX40L、ADAMTS-4水平升高均是老年急性脑梗死患者预后不良的危险因素(P均<0.05)。sOX40L、ADAMTS-4、两者联合预测老年急性脑梗死患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.872、0.879、0.952,联合预测价值更高(Z_(联合vs.sOX40L)=2.794,P=0.005;Z_(联合vs.ADAMTS-4)=2.340,P=0.019)。结论老年急性脑梗死患者血清sOX40L、ADAMTS-4水平显著升高,两者水平变化可能成为预测急性脑梗死预后的指标,且两者联合预测价值更高。

血清淀粉样蛋白A1通过抑制血小板反应蛋白4表达促进胰腺导管腺癌细胞的增殖和转移

目的探讨血清淀粉样蛋白A1(SAA1)调控胰腺导管腺癌(PDAC)细胞的增殖和转移能力及相应的机制研究。方法通过从基因表达综合数据库(GEO)数据库下载GSE71729数据集中正常胰腺组织、原位PDAC和肝转移的PDAC组织的RNA表达矩阵数据并使用R软件筛选差异表达基因,设计构建SAA1的小干扰RNA(siRNA)在PDAC细胞中沉默SAA1的表达并通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)等实验检测沉默SAA1对PDAC细胞增殖和转移能力的调控作用并探寻作用机制,构建转染沉默SAA1且包含荧光素酶的慢病毒(sh-SAA1)的PDAC细胞并对裸鼠进行皮下及尾静脉注射检测增殖和转移能力变化。两组间数据比较使用独立样本t检验。结果在GSE71729数据集中,原位PDAC组织中SAA1表达量显著高于正常胰腺组织且在肝转移的PDAC组织中表达量进一步增高(logFC=3.08、4.62,P<0.05),在PDAC细胞系PANC-1和CFPAC-1中沉默SAA1,沉默SAA1组SAA1表达量低于对照组(0.584±0.038、0.529±0.032比1.045±0.092,t=6.555、7.499,P<0.01;0.470±0.032、0.501±0.048比1.010±0.086,t=8.334、7.339,P<0.01),沉默SAA1组细胞增殖低于对照组(2.254±0.158、1.959±0.144比3.214±0.127,t=8.192、11.330,P<0.01;1.303±0.092、1.591±0.115比2.293±0.116,t=11.600、7.456,P<0.01)、沉默SAA1组细胞迁移低于对照组[(137.667±11.441)、(231.000±11.518)个比(775.333±44.289)个,t=19.710、16.820,P<0.01;(241.667±24.851)、(140.000±21.649)个比(650.000±15.895)个,t=19.580、26.850,P<0.01],沉默SAA1组细胞侵袭低于对照组[(140.667±15.326)、(321.000±20.833)个比(735.000±23.930)个,t=15.640、14.950,P<0.01;(262.333±17.172)、(275.000±17.205)个比(556.667±20.336)个,t=29.580、18.450,P<0.01]。动物实验结果同样显示沉默SAA1组成瘤体积低于对照组[(828.800±66.110)mm 3比(1345.000±46.904)mm 3,t=12.740,P<0.01],沉默SAA1组成瘤重量低于对照组[(0.656±0.154)g比(1.066±0.125)g,t=4.137,P<0.01]。使用GSEA分析SAA1发挥作用的机制,结果显示SAA1高表达与细胞外基质受体互作通路相关(NS=0.45,P<0.05)且沉默SAA1组血小板反应蛋白4(THBS4)表达量低于对照组(1.725±0.239比7.285±2.181,t=2.546,P<0.01),沉默SAA1组基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达低于对照组(1.681±0.584比2.741±1.052,t=4.148,P<0.01;5.645±0.647比7.116±1.375,t=3.764,P<0.01)。结论在PDAC细胞中,高表达的SAA1通过抑制THBS4促进MMP-2和MMP-9表达从而增强PDAC的增殖和转移能力。