miR-155-5p和TRIP13在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系

目的探讨miR-155-5p及甲状腺激素受体因子13(TRIP13)在结直肠癌(CRC)中的表达水平及与预后的关系。方法选取2015年1月—2017年5月本院经病理确诊的78例CRC患者为研究对象。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测CRC组织及癌旁组织中的miR-155-5p、TRIP13 mRNA表达情况,免疫组化染色法测定CRC组织及癌旁组织中TRIP13蛋白表达情况;分析miR-155-5p、TRIP13蛋白表达对CRC患者预后的影响;采用Kaplan-meier分析组织中miR-155-5p、TRIP13蛋白对CRC患者预后的影响;采用Pearson检验分析CRC组织中miR-155-5p与TRIP13 mRNA表达水平的相关性;多因素Cox回归分析CRC患者预后的影响因素。结果CRC组织miR-155-5p、TRIP13 mRNA表达水平及TRIP13蛋白的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05);CRC组织中miR-155-5p、TRIP13蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、浸润深度无关(P>0.05),与患者TNM分期、肿瘤分化、淋巴结转移具有显著相关性(P<0.05)。miR-155-5p高表达组5年内生存率(42.50%)低于低表达组(71.05%);TRIP13蛋白阳性组5年内生存率(43.48%)低于阴性组(75.00%);CRC组织中miR-155-5p与TRIP13 mRNA表达水平呈正相关(r=0.491,P<0.05);Cox回归显示,肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移、miR-155-5p、TRIP13是CRC患者预后的影响因素(P<0.05)。结论CRC组织中miR-155-5p、TRIP13表达上调,并与CRC的进展和患者的预后有关,检测miR-155-5p、TRIP13表达情况有助于患者的预后评估。

TRIP13在非小细胞肺腺癌中促增殖侵袭和血管生成的影响及作用机制

目的:研究甲状腺激素受体作用因子13(Thyroid hormone receptor interactor 13,TRIP13)对非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer,NSCLC)增殖、侵袭和血管生成的影响及作用机制。方法:收集45例NSCLC患者肿瘤及其对应癌旁组织,通过qRT-PCR检测肿瘤和癌旁组织中TRIP13表达量并分析其与患者临床特征的相关性。检测人肺腺癌细胞系A549和肺鳞癌细胞系SKMES1 TRIP13表达量。通过慢病毒转染法将PLK-TRIP13转染至A549和SKMES1,分析其与NSCLC细胞增殖、侵袭和血管生成的关系。结果:与癌旁组织相比,TRIP13在肿瘤组织高表达。TRIP13的高表达与肿瘤类型、肿瘤分期和淋巴结转移相关。过表达TRIP13显著促进A549细胞增殖、侵袭和血管生成,而对SKMES1细胞增殖、侵袭和血管生成的促进作用不显著。结论:TRIP13能够促进非小细胞肺腺癌的增殖、侵袭和血管生成,检测TRIP13与NSCLC病理类型可以作为一种潜在的肺腺癌临床治疗方案。

沉默TRIP13位点对慢性淋巴细胞白血病患者细胞株生物学影响及通路机制

目的探讨甲状腺激素受体相互作用蛋白13(TRIP13)位点对慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者细胞株生物学影响及通路机制。方法选择2013年至2018年我院收治的80例门诊为CLL的患者设为研究组,同时选取同期80例体检健康者作为对照组。比较两组患者静脉血中CD19^+B淋巴细胞TRIP13信使核糖核酸(mRNA)相对表达量、干扰靶点TRIP13蛋白敲减效率及TRIP13干扰后JVM-2细胞凋亡率,观察JVM-2细胞慢病毒感染情况、TRIP13干扰后JVM-2细胞增殖能力及对凋亡相关蛋白的影响。结果研究组TRIP13mRNA相对表达量明显高于对照组(P<0.05);TRIP13干扰5d内干扰组JVM-2细胞增殖能力明显低于对照组(P<0.05);TRIP13干扰后干扰组JVM-2细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);TRIP13干扰后干扰组较对照组JVM-2细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、髓细胞增生原癌基因(Myc)蛋白表达下调,活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(Caspase-3)表达上调(P<0.05)。结论 CLL患者体内TRIP13水平升高,TRIP13基因通过调控Bcl-2、Myc及Caspase-3信号通路诱导体内Bcl-2、Myc蛋白表达下调,Caspase-3蛋白表达上调,有望成为治疗CLL新的靶点。

TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及机制

目的:通过在细胞系Granta-519和JVM-2敲低/过表达TRIP13来探索TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及可能的分子机制。方法:使用慢病毒转染技术构建敲低/过表达TRIP13的Granta-519细胞和JVM-2细胞及其对照组细胞,荧光显微镜判断慢病毒对细胞的转染效率,实时荧光定量PCR技术和蛋白免疫印迹法评估敲低/过表达效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,Annexin V-APC单染法检测细胞凋亡率,PI染色法检测细胞周期,蛋白免疫印迹法检测P53、MDM4和BCL-2的表达水平。结果:敲低TRIP13后Granta-519和JVM-2细胞的增殖能力显著减弱而凋亡率显著升高,过表达TRIP13后细胞的增殖能力显著增强而凋亡率显著降低。敲低TRIP13后Granta-519细胞明显阻滞于G1期,JVM-2细胞明显阻滞于G1和G2/M期。在Granta-519中敲低TRIP13后BCL-2蛋白的表达降低,MDM4蛋白的表达升高;过表达TRIP13后MDM4蛋白的表达降低。在JVM-2细胞中过表达TRIP13后BCL-2蛋白的表达升高。结论:TRIP13促进B细胞淋巴瘤细胞的增殖,抑制其凋亡,并通过参与细胞周期的调控影响增殖和凋亡。B细胞淋巴瘤细胞中TRIP13促进BCL-2蛋白的表达,抑制MDM4蛋白的表达。

B细胞淋巴瘤患者TRIP13mRNA表达水平与临床特征的关系

目的探讨B细胞淋巴瘤患者淋巴瘤组织或骨髓组织(受淋巴瘤侵犯)中甲状腺激素受体相互作用因子13(TRIP13)mRNA表达水平的变化及其与临床特征的关系。方法选取2018年9月1日至2020年11月30日在嘉兴市第二医院就诊,进行淋巴结活检或骨髓穿刺活检的患者66例,留取患者多余的新鲜淋巴结活检组织或新鲜骨髓活检组织(受淋巴瘤侵犯)冻存。采用RT-PCR法检测组织中TRIP13 mRNA表达水平。比较惰性B细胞淋巴瘤组(22例)、侵袭性B细胞淋巴瘤组(20例)、淋巴结炎组(24例)患者TIRP13 mRNA表达水平;分析TRIP13 mRNA表达水平对B细胞淋巴瘤的诊断效能;以TRIP13 mRNA表达水平诊断B细胞淋巴瘤的最佳截断值为分界点,将B细胞淋巴瘤患者分为TRIP13 mRNA低表达组(12例)及TRIP13 mRNA高表达组(30例),比较两组患者临床特征。结果淋巴结炎组患者TIRP13 mRNA表达水平低于惰性B细胞淋巴瘤组、侵袭性B细胞淋巴瘤组(均P<0.05),而惰性B细胞淋巴瘤组与侵袭性B细胞淋巴瘤组患者TIRP13 mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。以B细胞淋巴瘤与淋巴结炎为状态变量作ROC曲线,AUC为0.709,最佳截断值为0.215,灵敏度为0.721,特异度为0.652(P<0.05)。与TRIP13 mRNA低表达组相比,高表达组患者IgH基因重排阳性率较高(76.7%比41.7%,P<0.05),4个疗程后获得完全缓解率较低(33.3%比66.7%,P<0.05)。结论B细胞淋巴瘤患者TRIP13 mRNA表达水平明显升高,测定其水平有助于鉴别B细胞淋巴瘤组织和淋巴结炎组织,且其对临床早期治疗反应预判有一定价值。

TRIP13促进子宫内膜癌增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制

目的:探讨甲状腺激素受体因子13(Thyroid hormone receptor interactor 13,TRIP13)对子宫内膜癌(Endometrial carcinoma,EC)增殖、迁移和侵袭的影响及调控机制。方法:分析TRIP13在子宫内膜癌中的表达模式;通过慢病毒敲减和质粒过表达调控子宫内膜癌细胞中TRIP13的表达量;通过CCK-8、Transwell迁移及侵袭实验观察TRIP13对子宫内膜癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过Western blot技术检测TRIP13表达水平的变化,并研究其对PI3K/Akt信号通路蛋白的影响。结果:癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)分析发现,子宫内膜癌组织中TRIP13的表达水平显著高于正常子宫内膜组织(P<0.05);TRIP13的高表达与子宫内膜癌患者的低生存率呈显著正相关(P<0.05)。TRIP13过表达可促进子宫内膜癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力(P<0.05),并上调p-PI3K、p-Akt的表达(P<0.05),而下调TRIP13后则可逆转上述结果。结论:TRIP13通过调控PI3K/Akt信号通路促进子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

基于生物信息学方法分析软组织肉瘤中甲状腺激素受体相互作用蛋白13的表达及临床意义

目的探讨甲状腺激素受体相互作用蛋白13(TRIP13)在软组织肉瘤中的表达及临床意义。方法应用Oncomine、GEPIA、CCLE和Kaplan-Meier Plotter数据库分析TRIP13在软组织肉瘤中的表达及与预后的关系。应用cBioPortal数据库分析软组织肉瘤中TRIP13突变情况及与患者预后的关系。应用String数据库构建蛋白质相互作用网络,应用Metascape数据库进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果TRIP13在大部分肿瘤中表达水平升高。在软组织肉瘤组织和细胞中,TRIP13表达水平均升高。TRIP13高表达与软组织肉瘤患者的预后差有关。21%的软组织肉瘤患者发生TRIP13基因突变,与TRIP13未突变组患者相比,TRIP13突变组患者的中位总生存期(OS)和中位无病生存期(DFS)均明显较短。应用String数据库共获得10个与TRIP13相互作用的蛋白,这些蛋白主要具有激酶结合、腺苷三磷酸(ATP)酶活性、蛋白激酶活性等生物学功能,主要参与细胞周期、人T细胞白血病病毒1感染、黄体酮介导的卵母细胞成熟、卵母细胞减数分裂及病毒致癌过程。结论TRIP13在软组织肉瘤组织和细胞中表达水平均较高,其与软组织肉瘤患者的预后有关,有望成为软组织肉瘤诊断和治疗的生物标志物。

甲状腺激素受体相互作用因子13在B细胞淋巴瘤组织中的表达及其临床意义

目的探讨甲状腺激素受体相互作用因子13(TRIP13)在B细胞淋巴瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取2018年9月至2020年11月在嘉兴市第二医院就诊后进行淋巴结活检,并留取多余的新鲜淋巴结活检组织冻存的B细胞淋巴瘤患者44例为研究对象,参照2016年WHO对B细胞淋巴瘤分型诊断标准,将44例患者分为惰性淋巴瘤组20例和侵袭性淋巴瘤组24例。采用RT-PCR法检测B细胞淋巴瘤组织中TRIP13 mRNA表达水平,比较惰性淋巴瘤组和侵袭性淋巴瘤组TRIP13 mRNA表达水平。采用En Vision免疫组化染色法检测TRIP13蛋白表达情况。根据TRIP13免疫组化表达情况,将B细胞淋巴瘤患者分为TRIP13阴性组(0)和TRIP13阳性组(≥1+),比较两组患者性别、年龄、B细胞淋巴瘤分型情况、增殖指数(Ki-67)、乳酸脱氢酶、β2微球蛋白、白蛋白水平、T辅助细胞比例、活化CD4^(+)细胞比例、活化CD8^(+)细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)等临床特征;再根据TRIP13免疫组化表达强度,将TRIP13阳性患者分为TRIP13弱阳性组(1+)和TRIP13强阳性组(≥2+),比较两组患者上述临床特征。结果惰性淋巴瘤组和侵袭性淋巴瘤组TRIP13 mRNA表达水平分别为0.37(0.17,1.36)和0.69(0.28,1.15),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。TRIP13阳性组患者TRIP13 mRNA表达水平、Ki-67水平及活化CD8^(+)细胞比例均高于TRIP13阴性组,T辅助细胞比例、活化CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)均低于TRIP13阴性组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TRIP13弱阳性组TRIP13 mRNA表达水平、Ki-67水平、活化CD8^(+)细胞比例均低于TRIP13强阳性组,活化CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)均高于TRIP13强阳性组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论B细胞淋巴瘤组织中TRIP13阳性及强阳性与更高的Ki-67水平、活化CD8^(+)细胞比例及更低的活化CD4^(+)细胞比例有关,提示TRIP13阳性可能和肿瘤细胞增殖及免疫调控异常等发病机制有关。

TRIP13通过Hippo信号通路促进非小细胞肺癌的增殖、迁移和侵袭

目的探讨TRIP13在肺癌中的作用和信号传导机制。方法通过基因转染和siRNA干扰调控肺癌细胞中TRIP13的表达量;采用克隆形成实验、划痕实验以及基质胶侵袭实验观察TRIP13对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;采用Western blot检测TRIP13的表达量对Hippo信号通路蛋白的影响。结果检索GEPIA数据库发现,TRIP13在肺癌组织中的表达水平均明显高于癌旁正常肺组织(P<0.01);TRIP13的高表达与肺癌患者的低生存率正相关(P=0.0011)。TRIP13的过表达可显著促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并显著上调YAP、RhoA、CyclinB1和MMP9的表达,抑制LATS、MST和p-YAP的表达(P<0.05);而下调TRIP13后,则逆转上述结果。结论TRIP13调控Hippo信号通路促进非小细胞肺癌的增殖、迁移和侵袭。