Identification and sequencing of preprothyrotropin-releasing hormone and its receptor in rat testis

Objective: To investigate the expression regulation of thyrotrophin-releasing hormone (TRH) and its receptor (TRH-R) in rat testis and their function in the reproduction and development. Methods: Total RNA of fat testicular tissues was used as template. The oligonucleotide primers were designed from the sequence of rat hypothalamus prepro(pp)TRH and pituitary TRH-R cDNA for reverse transcription- polymerase chain reaction (RT- PCR ). Specific fragments of ppTRH and TRH-R cDNA were cloned and sequenced. Results: DNA sequence analysis indicated that cDNA Sequences of ppTRH and TRH-R from rat testis were consistent with those of hypothalamus ppTRH and pituitary TRH-R cDNA. Conclusion: TRH may function as a new autocrine or paracrine regulator of testicular function via a transmembrane receptor very similar or identical to that in pituitary.

甲状腺自身抗体检测在Graves病中的诊断价值

目的探讨抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)在Graves病中的诊断价值。方法将甲状腺疾病患者根据其临床诊断将其分为Graves病组(n=105)、桥本病组(n=66)、甲亢型亚甲炎组(n=29);另选择同期健康体检者作为对照组(n=59)。分别采用电化学发光法和化学发光法检测其血清TRAb和TPOAb水平,并对其中46例Graves病患者血清TRAb和TPOAb进行动态监测。结果与桥本病组比较,Graves病组患者血清TRAb水平及阳性率较高(P<0.05),而其TPOAb水平及阳性率较低(P<0.05)。治疗有效的Graves病患者,血清TRAb水平随症状的缓解而逐渐下降。血清TPOAb水平与治疗有效与否关系不大。结论 TRAb和TPOAb检测在Graves病的诊断及鉴别诊断中具有重要意义,TRAb的动态监测有助于临床疗效的判断。

促甲状腺素受体在BALB/c小鼠主要组织和器官的分布及其意义

目的:研究正常BALB/c小鼠体内各主要组织、器官的促甲状腺素受体(thyrotrophin receptor,TSHR) mRNA的分布,为Graves病(GD)或／和甲状腺相关眼病(TAO)动物模型的制作提供病理学依据。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测BALB/c小鼠甲状腺及腺外部分组织、器官中TSHR mRNA表达水平。结果:以甲状腺组织TSHR mRNA表达水平为标准1,呈相对高表达组织依次为肾上腺、胸腺、睾丸、卵巢及眼外肌,呈相对低表达的组织依次为肾脏、脑组织、腹壁脂肪、下颌下腺、肺脏、腹壁皮肤、眼眶脂肪、肝脏直至脾脏,胰腺、心脏及腹直肌中未见TSHR mRNA表达。结论:BALB/c小鼠体内,TSHR除了在甲状腺中表达外,还广泛存在于甲状腺外组织,且全身各处的TSHR作用机制可能不同。

大鼠睾丸前促甲状腺激素释放激素原及其受体的表达与发育变化

为研究促甲状腺激素释放激素 (thyrotrophin releasinghormone ,TRH)及其受体 (TRHreceptor,TRH R)在大鼠睾丸组织中的表达规律和在生殖发育调节中的作用 ,依据大鼠下丘脑中的前TRH原 (preproTRH ,ppTRH)和垂体中的TRH RcDNA设计引物 ,采用RT PCR法从大鼠睾丸组织中获得了 ppTRH和TRH R的cDNA克隆 ,测序后构建表达载体 ,在大肠杆菌中表达了可溶性的ppTRH和TRH R融合蛋白。利用实时动态定量RT PCR (realtimequantitativeRT PCR)法观察了 ppTRH和TRH R在不同发育阶段大鼠睾丸中的表达变化 ,发现在睾丸间质细胞发育的初期阶段 (第 8天 ) ,没有ppTRH和TRH R的表达 ,但从第 15天起能观察到 pp TRH和TRH R的表达 ,并且表达量在 2 0天、 35天、 6 0天和 90天逐渐增加。这些结果表明 :大鼠睾丸组织能特异性表达ppTRH和TRH R ,并且表达量与发育过程相关。ppTRH和TRH R体外表达产物的获得为后续研究其功能奠定了基础。

不同硒营养状态下大鼠血浆甲状腺激素水平的变化

以Hooded lister大鼠作为动物模型,用以纯氨基酸为基础配制的半纯合日粮,研究了在不同硒营养状态下大鼠体内甲状腺激素的代谢。结果表明,大鼠食用缺硒日粮(含硒0.005ppm),经硒耗竭四周后,肝SeGSH-Px活性降到对照组(含硒0.105ppm)大鼠的1.0％(P<0.01),GST酶活性显著上升(P<0.01);血浆四碘甲腺原氨酸(T_4)水平上升(P<0.05),而三碘甲腺原氨酸(T_3)水平下降(P<0.05),血浆促甲状腺激素(CSH)含量无明显变化。说明硒为正常甲状腺激素代谢所必需。

T3/T4值、TRAb和ALP在育龄期女性甲状腺毒症中的鉴别价值

目的:探讨T3/T4值、TRAb和ALP在鉴别育龄期女性Grave’s病和破坏性甲状腺炎中的价值。方法:比较82例Graves’病和32例甲状腺炎患者的T3/T4值、TRAb和ALP水平,应用ROC评价其对Graves’病和甲状腺炎的鉴别价值。结果:Graves’病组T3/T4值、TRAb和ALP较甲状腺炎组均显著升高(P<0.01),3个指标鉴别诊断的灵敏度和特异度良好,其中TRAb的灵敏度和特异度分别达0.878和0.969,3个指标的最佳诊断界点分别为20.29(nmol/μmol)、2.805IU/L和143.5IU/L。结论:T3/T4值、TRAb和ALP简便、安全,可用于育龄期女性甲状腺毒症患者的鉴别诊断,TRAb应作为其首选指标。

人脐带间充质干细胞体外诱导分化为甲状腺细胞的初步探讨

目的:体外诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)向甲状腺细胞分化,探讨人UCMSCs向甲状腺细胞分化的可能性。方法:从胎儿脐带中分离UCMSCs培养至第三代,流式细胞仪鉴定后分为两组,诱导组接种于含胰岛素、促甲状腺激素因子的培养液中,对照组接种于完全培养基中。对细胞形态学进行观察;流式细胞仪鉴定诱导后细胞表面抗原TTF-1和TSHR的表达情况。结果:培养的P3UCMSCs呈长梭形、漩涡状生长,经鉴定表达间充质干细胞抗原;诱导组细胞形态d4开始发生变化,有些细胞变成三角形、不规则生长。对照组仍为长梭形;诱导后d12经检测诱导组TTF-1和TSHR的表达明显高于对照组。结论:人UCMSCs在特定的培养条件下有向甲状腺细胞分化的可能性。

大鼠睾丸前促甲状腺激素释放激素及其受体cDNA的克隆和序列测定

目的 研究促甲状腺激素释放激素 (thyrotrophin- releasing hormone,TRH)及其受体 (TRH recep-tor,TRH- R)在大鼠睾丸组织中的表达规律和在生殖发育调节中的作用。 方法 以大鼠睾丸组织总 RNA为模板 ,依据大鼠下丘脑中的前 TRH和垂体中的 TRH- R c DNA设计引物 ,进行反转录聚合酶链式反应 (reverse tran-scription- polymerase chain reaction,RT- PCR) ,对特异性片段进行序列测定。 结果 从大鼠睾丸组织中获得了前 TRH和 TRH- R的 c DNA片段 ,其核苷酸序列与大鼠下丘脑中的前 TRH和垂体中的 TRH- R c DNA序列完全一致。 结论 首次用 RT- PCR的方法从大鼠睾丸组织中获得了前 TRH和 TRH- R的 c DNA克隆。

胃祺Ⅱ号方对实验性FD大鼠胃排空的影响与特点

为研究益气健脾通络复方的作用 ,采用不规则进食加稀盐酸喂养制作大鼠功能性消化不良 (FD)模型 ,并随机分成A、B、C、D四组 ,分别给予胃祺Ⅱ号方 (主药 :党参、黄芪、莪术、枳壳 )、木香顺气丸、普瑞博思和蒸溜水灌胃 ,2 8d后观察胃排空、检测胃体组织中一氧化氮 (NO)、下丘脑中促甲状腺释放激素 (TRH)含量。结果 :胃排空率A、B、C三组无差异 (P >0 0 5 ) ,但A组胃排空水平恢复均匀平稳 ,接近E组 (正常组 ) ;A组NO、TRH的变化最明显 ,与D组比较有显著差异 (P <0 0 5～ 0 0 1) ,而B、C组与D组之间无明显差异 (P >0 0 5 )。提示胃祺Ⅱ号方对FD有良好的治疗作用 ,能增强胃肠的动力顺应性 。

促甲状腺素释放激素类似物YM14673对大鼠脑外伤后脑水肿及血脑屏障通透性的影响

目的观察促甲状腺素释放激素 (TRH)类似物YM 14 673对脑外伤后血脑屏障的影响。方法制作大鼠急性脑外伤模型 ,外伤前静脉注入伊文氏蓝。大鼠分为假手术组、生理盐水组、给药组Ⅰ ( 0 1mg/kg)、给药组Ⅱ ( 1mg/kg)。伤后 2 4h处死 ,测定脑水含量及脑组织和血浆中的伊文氏蓝含量。结果大鼠脑外伤后 ,生理盐水组脑组织脑水含量明显高于假手术组 (P <0 0 1) ,遭受直接打击的左侧半球脑水含量明显高于右半球 (P <0 0 1)。经药物YM 14 673处理后 ,左右半球的脑水含量均下降 (P <0 0 5 ) ,而不同剂量治疗组之间脑水含量无显著性差异 (P >0 0 5 )。急性脑外伤后 ,脑组织中伊文氏蓝含量明显升高 ,YM 14 673对其没有影响。结论YM 14 673可减轻急性脑外伤引起的脑水肿 ,但对血脑屏障通透性没有影响。

促甲状腺激素释放激素受体-2在大鼠生后睾丸不同发育阶段的表达和定位

目的研究促甲状腺激素释放激素受体-2(TRH-R2)在大鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达,探讨其在生殖发育调节中的作用。方法应用蛋白质免疫印迹杂交技术以及免疫组织化学ABC法检测8d、15d、20d、35d、60d和90d大鼠睾丸中TRH-R2的表达和定位,并结合图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析,观察其在发育过程中的变化。结果免疫印迹杂交发现TRH-R2蛋白表达于出生后15d以后各阶段的大鼠睾丸;而免疫组织化学在第8d以后的各个发育阶段均检测到TRH-R2的表达,TRH-R2定位于大鼠睾丸的间质细胞,TRH-R2免疫反应阳性物位于细胞膜和细胞质内,细胞核为阴性;图像分析结果显示随着大鼠睾丸的发育,TRH-R2表达量逐渐增多,35d达到最大值,此后维持稳定水平,表达量在35d同其他阶段之间具有统计学差异(P<0·01)。结论TRH-R2在大鼠睾丸发育过程中均有表达,定位于睾丸的间质细胞,其表达量随着增龄变化而变化,即同发育过程相关。

心理应激后大鼠腺垂体促甲状腺素细胞的定量观察

目的 探讨心理应激对腺垂体促甲状腺素细胞的影响。方法 采用心理应激模型 ,并在不同应激条件下对大鼠腺垂体促甲状腺素细胞进行免疫组织化学和电镜观察 ,并用体视学公式作定量分析。结果 应激大鼠促甲状腺素细胞体积密度 (Vv)和数密度 (Nv)的值均低于正常对照组 ,且在不同应激条件的A、B、C三组存在显著差别。结论 心理应激可不同程度地抑制大鼠腺垂体促甲状腺素细胞合成和分泌促甲状腺素。

促甲状腺激素释放激素受体-1(TRH-R1)蛋白在大鼠出生后睾丸不同发育阶段的表达和定位

目的 研究促甲状腺激素释放激素受体- 1 (thyrotrophin releasing hormonereceptor- type 1, TRH- R1) 在大鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达, 探讨其在生殖发育调节中的作用。方法 应用蛋白质免疫印迹杂交技术以及免疫组织化学ABC法检测TRH R1在8d、15d、20d、35d、60d和90d大鼠睾丸中的表达和定位, 并结合图像分析技术对免疫组化结果进行统计学分析观察其在发育过程中的变化。结果 免疫印迹杂交发现TRH R1蛋白表达于15d以后各阶段的大鼠睾丸; 而运用免疫组化在第8d即检测到TRH -R1的表达, 以后发育过程中的各个阶段均有阳性反应细胞, TRH- R1定位于大鼠睾丸的间质细胞; 免疫反应阳性物均位于胞膜和胞质, 胞核区为阴性; 图像分析结果表明, 随着大鼠睾丸的发育,TRH -R1表达量呈增多趋势, 且具有统计学差异(P<0. 01)。结论 本实验证明TRH- R1 在出生后8d大鼠的睾丸内即有表达, 并持续表达于其后各个发育阶段; TRH- R1定位于睾丸的间质细胞, 其表达量随着增龄变化呈增多趋势, 即同发育过程相关。

幼龄绵羊腺垂体-甲状腺轴机能活动的季节及昼夜节律变化

用RIA法测定6～15月龄的半细毛绵羊血清中TSH和T_3、T_4含量的季节及昼夜变化表明,8只绵羊血清中TSH的年平均含量为9.193士2.24μIU/mL。7只绵羊血清中的T_3和T_4年平均含量为1.216士0.49和58.110士11.05ng/mL.幼龄绵羊血清中TSH和T_3、T_4含量的季节变化,有明显的同步平行变化,并与外界气温呈负相关。除T_3夏秋两季含量较接近,无明显差别(P>0.05)外,3种激素其它各季含量,均有极显著的差异(P<0.01)。3种激素的年均值昼夜变化,最高值与最低值之间差异显著(P<0.05或<0.01)。各季节昼夜含量变化,均无统计学差异(P>0.05),绵羊血清中3种激素含量在多数个体间,有明显差异。

高碘和低碘甲状腺肿小鼠血清T3、T4和TSH的变化比较

本研究观察了给高碘和低碘饲料20～360天中6组小鼠血清T_3、T_4和TSH的变化,并对二者进行了比较。发现高碘动物组血清T_4升高,低碘组T_3升高,T_4 降低,低碘组实验中期TSH升高。结果提示,高碘甲状腺肿的发病机理与低碘甲状腺肿不同。

TPOAb、TRAb、TGAb与妊娠期合并甲减患者甲状腺功能关系及预测妊娠结局价值

目的探讨甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)与妊娠期合并甲减患者甲状腺功能关系及预测妊娠结局价值。方法选取2016年1月至2021年1月本院96例妊娠期合并甲减患者作为观察组,另选取50例妊娠期健康孕妇作为对照组,分析TPOAb、TRAb、TGAb与甲状腺功能(TSH、FT3、FT4)关系,并评价TPOAb、TRAb、TGAb对妊娠结局的预测价值。结果妊娠期合并甲减患者TPOAb、TRAb、TGAb与TSH、TT3、TT4水平呈正相关关系,与FT3、FT4水平呈负相关关系(P<0.05);TPOAb、TRAb、TGAb为妊娠期合并甲减患者不良妊娠结局影响因素(P<0.05);ROC曲线显示,TPOAb、TRAb、TGAb联合预测不良妊娠结局的AUC最大,为0.899,优于单一检测。结论 TPOAb、TRAb、TGAb与妊娠期合并甲减患者甲状腺功能呈负相关,联合检测可有效预测妊娠结局,为及时采取有效、个体化治疗提供依据。

月经周期人工调整中妈富隆和敏定偶对甲状腺轴激素影响的比较研究

探讨第三代口服避孕药Ocs对甲状腺轴激素的影响,为科学合理调整月经周期提供理论依据和实践方法。方法:将受试者随机分为妈富隆组、敏定偶组和对照组,每组8人。服药组于自然月经周期第一天按药物说明书分别服用药物妈富隆和敏定偶,服用一个周期。分别在服药周期的第7±1天、12±1天、23±1天和停药后下一周期的第7±1天清晨抽取受试者上臂静脉血,测量TSH、T4、T3。结果:妈富隆和敏定偶在服药期间第12天与服药前一周期第7天有统计学差异。两种药物对T4有交互作用,且在药后下一周第7天与药前一周期第7天都有统计学差异,另外服药组与对照组在服药期间也有统计学差异。两周药物对T3的影响没有交互作用,但药后第7天与药前一周期第7天有统计学差异。rT3试验前后差异没有统计学意义。结论:两种药物间没有差异,对甲状腺轴激素的影响都在正常范围内,但能促进甲状腺激素的分泌,且有时间累计效应,因此不能连续调整两个周期。由于TH升高能提高机体的能量代谢和物质代谢,建议服药期间注意饮食的变化。

新生儿血清促甲状腺激素受体抗体水平探讨

目的探讨新生儿血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)含量与母体TRAb含量相关性以及TRAb对新生儿甲状腺功能的影响。方法采用放射免疫法(RIA)测定286例新生儿甲状腺功能及血清TRAb含量,以观察新生儿甲状腺功能状况。结果非甲状腺疾病不同患儿TRAb含量无显著性差异,新生儿与母体TRAb含量具有相关性,新生儿甲状腺疾病与他类疾病比较有显著性差异。结论曾患甲状腺疾病的或疑似病例母体,母子均应查TRAb,及时发现母体甲状腺激素异常及对新生儿甲状腺功能的影响,避免影响儿童生长发育。

TSHR及活性多肽对BALB/c小鼠甲状腺的影响

目的:探讨促甲状腺激素受体(TSHR)及活性多肽对BALB/c小鼠甲状腺的影响。方法:对BALB/c小鼠腹腔注射血蓝蛋白耦联的人TSHR(hTSHRaa352～366)和从豚鼠脂肪细胞提取的TSHR(gTSHR)进行免疫,每2周免疫1次共6次,每次免疫前2d取血,检测血清T4、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平。12周后处死小鼠,取甲状腺做病理组织学检查。结果:血清T4水平hTSHRaa352～366组从第6周开始下降(P<0.01),而且一直维持到12周,血清TRAb水平明显升高(P<0.01),甲状腺组织显示滤泡上皮细胞扁平、核缺失、皱缩、胶质浓缩等甲状腺功能减退病理改变;gTSHR组血清T4水平在第6周已下降,而12周时有的下降、有的则升高,无统计学意义,血清TRAb水平升高(P<0.01),甲状腺组织出现不均一的病理表现。结论:hTSHRaa352～366刺激BALB/c小鼠产生TRAb和促甲状腺激素受体抑制抗体(TBAb),抑制促甲状腺激素(TSH)与TSHR结合,降低了甲状腺激素T4水平;而gTSHR刺激BALB/c小鼠同时产生TRAb、促甲状腺激素受体刺激抗体(TSAb)和TBAb,引起甲状腺功能亢进或甲状腺功能减退。

TSH和Carbachol对甲状腺细胞内游离钙的动员作用

研究促甲状腺激素(TSH)和 Carbachol(Cch)对猪甲状腺细胞 Ca^(2+)的动员作用的结果表明,0.01～10mU/ml TSH 或10^(-5)～10^(-4)mol/L Cch 可引起甲状腺细胞[Ca^(2+)]急性升高.甲状腺细胞对 TSH 或 Cch 反应的敏感性在贴壁的单层细胞高于细胞悬液,在近汇合单层细胞高于汇合单层细胞。TSH 和 Cch 均能在无钙/EGTA 缓冲介质中刺激猪甲状腺细胞[Ca^(2+)]升高,提示此升高的[Ca^(2+)]源自细胞内储藏 Ca^(2+)的动员。