山谷型藏羊公羊瘤胃和粪便微生物多样性研究

为了研究青藏高原山谷型藏羊公羊胃肠道微生物组成结构,试验采集了10只放牧+补饲饲养方式下的周岁山谷型藏羊公羊的瘤胃和直肠内容物(指粪便),分别提取其基因组DNA,采用16S rDNA V3~V4扩增子高通量测序技术分析了瘤胃和粪便样品微生物门和属水平组成结构、标志微生物、α和β多样性及微生物功能。结果表明:山谷型藏羊瘤胃和粪便样品共得到5 383个分类操作单元(operational taxanomic units, OTUs),其中2 144个OTUs为瘤胃样品所特有,1 860个OTUs为粪便样品特有,1 379个为二者共有。瘤胃微生物优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和浮霉菌门(Planctomycetes),相对丰度分别为53.2%、34.9%和3.1%;优势菌属为理研菌科_RC9_肠道菌群(Rikenellaceae_RC9_gut_group)和普式菌属_1(Prevotella_1),相对丰度分别为13.5%和12.0%。粪便微生物优势菌门为拟杆菌门、厚壁菌门和疣微菌门(Verrucomicrobia),相对丰度分别为47.4%、25.3%和16.9%;优势菌属为艾克曼菌属(Akkermansia)和克里斯滕森菌科_R7菌群(Christensenellaceae_R7_group),相对丰度分别为15.6%和7.3%。山谷型藏羊瘤胃和粪便样品的标志微生物均为拟杆菌门和厚壁菌门,且瘤胃和粪便样品微生物α和β多样性差异明显,主要功能均为碳水化合物代谢(carbohydrate metabolism)、氨基酸代谢(amino acid metabolism)、膜运输(membrane transport)与共同因子和维生素代谢(metabolism of cofactors and vitamins)等。说明山谷型藏羊瘤胃和粪便有各自独特的微生物组成结构。

复合菌剂对青藏高原羊粪堆肥腐熟的影响

该研究旨在探讨复合菌剂在加快青藏地区羊粪堆肥进程和改善堆肥发酵品质方面的作用效果。试验选择具有淀粉、蛋白质及木质纤维素等降解能力和耐高温能力的菌株,组合形成2种复合菌剂(T1,由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、假单胞菌、粪产碱菌、酿酒酵母、里氏木霉及黑曲霉等比例组成;T2,由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、假单胞菌、植物乳杆菌、黄孢原毛平革菌及米曲霉等比例组成),同时选取市售菌剂T3,将3种复合菌剂接种于羊粪中,以不添加菌剂(CK)为对照,在青海进行了为期28 d的堆肥试验。通过测定堆肥过程中温度、有机质、碳氮比和种子发芽指数等指标,研究不同复合菌剂对青藏高原羊粪堆肥腐熟的影响。结果表明,与对照组相比,T1、T2和T3处理可分别使堆体最高温度提升7.6、2.5和2.8℃,均可使堆肥高温期(>50℃)延长5 d,堆肥有机质降解率分别提高8.1%、4.5%和3.9%;T1、T2和T3可分别降低堆肥碳氮比为12.1%、6.82%和6.06%,并最终提升堆肥产品的种子发芽指数分别达25.6%、20.1%和12%;添加复合菌剂可缩短堆肥时间,其中T1可提前大约2周达到CK的最终堆肥状态。综上所述,添加复合菌剂可有效促进青藏高原羊粪堆肥腐熟,并缩短堆肥时间,且T1的效果最佳。

草地藏系绵羊中性基因TF和HP遗传共适应性研究

对若尔盖县草地藏系绵羊选育基础群的中性结构基因TF、HP进行遗传共适应及草地藏系绵羊遗传平衡性进行研究.结果表明:草地藏系绵羊中性结构基因TF、HP的基因及遗传共适应性均处于遗传平衡状态.

西藏部分地区羔羊球虫感染现状调查

为调查西藏部分地区绵羊羔羊、山羊球虫感染率及球虫种类,采用饱和食盐水漂浮法检测了乃东县(40)、那曲县(31)、白朗县(44)、康马县(50)、亚东县(50)和日土县(48)共计263份粪便样本。结果显示:西藏部分县绵羊球虫平均感染率86.05%;乃东县、那曲县、白朗县、康马县、亚东县绵羊羔羊球虫感染率分别为87.50%(35/40)、87.10%(27/31)、81.82%(36/44)、88.00%(44/50)、86.00%(43/50);185例绵羊羔羊球虫阳性病例中混合感染率达100%;经鉴定共感染8种艾美尔球虫,分别为颗粒艾美耳球虫(E.granulosa)47.91%(103/215)、绵羊艾美耳球虫(E.ovinoidalis)40.47%(87/215)、小艾美耳球虫(E.parva)37.67%(81/215)、阿撒他艾美耳球虫(E.ahsata)30.23%(65/215)、温布里吉艾美耳球虫(E.weybridgensis)24.19%(52/215)、浮(福)氏艾美尔球虫(E.faurei)18.60%(40/215)、错乱艾美耳球虫(E.intricata)15.35%(33/215)、巴库艾美耳球虫(E.bakuensis)13.49%(29/215)。西藏日土县山羊球虫感染率为83.33%;40例阳性病例中混合感染率达100%;经鉴定共感染7种艾美尔球虫,分别为艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)39.58%(19/48)、阿氏艾美耳球虫(E.arloingi)47.92%(23/48)、约奇艾美耳球虫(E.jolchijevi)43.75%(21/48)、柯氏艾美耳球虫(E.christenseni)43.75%(21/48)、山羊艾美耳球虫(E.caprina)35.42%(17/48)、雅氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovae)27.08%(13/48)、家山羊艾美耳球虫(E.hirci)22.92%(11/48)。说明西藏部分地区绵羊羔羊、山羊球虫病具有高感染率的特点,其对当地羔羊的危害仍有待深入研究。

西藏牦牛、绵羊棘球蚴病病原的分子鉴定

本研究旨在对西藏自治区那曲地区和拉萨市牦牛、绵羊体内棘球蚴病原进行分子生物学鉴定并分析其遗传变异规律。对2016年11月底采自西藏拉萨市当雄县和那曲地区嘉黎县的5只绵羊体内的5个棘球蚴包囊、15头牦牛体内的18个棘球蚴包囊分别分离棘球蚴原头蚴或生发层组织,提取基因组DNA,应用PCR方法扩增nad 1基因,通过测序获得nad1全基因序列。运用DNAStar MegAlign软件对序列进行同源性分析。以GenBank中已公布的棘球属的nad1全基因序列为比对对象,采用最大似然法(ML)构建系统发育树。结果显示,所测定的牦牛和绵羊的23个棘球蚴病原nad 1基因序列与GenBank登录的细粒棘球蚴狭义种(G1基因型)nad 1基因序列高度同源,同源性为99.6%~99.8%,23条nad 1基因的遗传距离为0~0.0022447。同源基因的碱基变异率为0.2%~0.4%;与棘球属其他棘球绦虫同源基因的碱基变异率为14.9%~19.8%。有5个样本的nad 1基因在不同位点发生碱基突变,变异位点发生序列转换。以上结果表明,本研究所采集牦牛和绵羊的棘球蚴为细粒棘球绦虫G1基因型,其nad 1基因变异小,序列一致性高。

藏系绵羊遗传多样性的研究进展

系统地总结了藏系绵羊在表型和地域、染色体核型和带型、生化同功酶、线粒体DNA和基因组DNA的RAPD分析等不同层次的遗传多样性研究的概况,说明了藏系绵羊的遗传多样性研究目前仍处于比较低的水平上,因此有必要对藏系绵羊的遗传多样性进行更深入的研究,尤其加强DNA分子水平上的研究。

藏绵羊朊蛋白基因的原核表达

从藏绵羊全血中提取基因组总DNA，用所设计的引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白（PrP^c）基因。测序分析表明，所克隆的羊PrP^c基因片段大小为771bp，包含了羊朊蛋白基因的完整编码区序列，其与国内外报道的序列基本相同。将目的基因与经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切的载体pGEX-4T-1连接后转化宿主菌BL21（DE3），挑选重组阳性菌用IPTG诱导表达，收集不同培养时间的菌液进行SDS-PAGE和Western-blotting。结果表明，PrP基因在大肠杆菌中成功表达，并能被抗牛PrP^c单抗4C11识别。凝胶薄层扫描结果显示，表达蛋白约占菌体总蛋白的309／6～45％，目的蛋白以包涵体的形式存在，包涵体经变性裂解、纯化和复性后得到具有一定生物学活性的目的蛋白。

藏绵羊DNA分子遗传标记的研究进展

分析讨论了藏绵羊DNA分子遗传标记在其遗传育种研究中的应用现状和存在的问题,展望了其今后的研究趋势和发展前景。

羔羊精料补充料对祁连山东段高寒牧区不同羔羊品种短期育肥效果的研究

以天祝藏羊和甘肃高山细毛羊为试验对象,探讨高寒牧区羔羊的最优育肥模式。采用全舍饲方式进行羔羊短期育肥试验,观测其育肥期总增重、平均日增重,并分析育肥经济效益。结果表明:试验组藏羊与细毛羊的日增重都显著高于对照(P<0.05);细毛羊增重显著高于藏羊(P<0.05)。藏羊在饲喂量为0.25kg/d时,增重效果最优,经济收益达到38.7元/只;细毛羊在饲喂量为0.3kg/d时,增重效果最佳,经济收益达到180.6元/只。说明以甘肃高山细毛羊为育肥品种,以0.3kg/d的饲喂量是高寒牧区最优的育肥模式。

饮水温度和豆浆对育肥藏北母绵羊和藏北母山羊效果的影响

[目的]研究自由饮用18～20℃温水和每日饮用豆浆对补饲育肥藏北母绵羊（S）和藏北母山羊（G）的效果。[方法]试验用羊为淘汰的2～3岁藏北母绵羊和藏北母山羊。选择350只年龄接近、体重相近的藏北母绵羊，随机分为7组，每组50只。在试验期内，对照自由放牧组母绵羊50只，每日按照农牧民放牧习惯自由放牧，晚上不予补饲；绵羊6个试验组每日按照农牧民放牧习惯白天自由放牧，晚上收牧后给予一定补饲，补饲的精料颗粒料添加量为280 g/d，燕麦青干草为自由采食。经过预试验7 d，正式试验期49 d。试验前后，对每只试验羊称重。藏北山羊分组试验同藏北绵羊。试验结束后，随机在试验处理组和对照组中各选取母羊11只屠宰，随即测定试验羊的屠宰率。[结果]在相同饮水条件下，随10%豆浆饮用量的增加，体重和屠宰率差异显著（P＜0.05）；在10%豆浆饮用量相同的试验组，饮水由冰水换为温水，体重和屠宰率差异极显著（P＜0.01）。在不计人工投入和电费的条件下，育肥藏北母绵羊各组效益差异极显著（P＜0.01）。 S4、S5和S6共3个试验组有经济效益，且随着饮水温度和豆浆量的增加，经济效益也越高（P＜0.01），S6试验组每只羊可带来高达105.95元的经济效益；育肥藏北母山羊各组效益差异亦显著（P＜0.01），且只有G6试验组每只羊可带来21.35元的经济效益。[结论]藏北母绵羊和藏北母山羊体重和屠宰率仍有较大的提升空间。选择合适的饲养模式对藏北母绵羊和藏北母山羊进行短期育肥，能够带来可观的经济效益。该试验研究为今后在饲草料相对缺乏的藏北牧区短期育肥绵羊和山羊提供了技术和数据参考。

用湖羊胎替代藏羊胎酶解制备羊胎素工艺研究

目的对以湖羊胎和传统羊胎素生产原料—藏绵羊胎为原料制备的羊胎素进行比较,提供湖羊胎替代藏羊胎作为羊胎素生产原料的科学依据。方法以产于杭嘉湖地区的湖羊胎为原料,以传统羊胎素生产原料—藏羊胎为对照,进行制备羊胎素的酶解正交试验。结果在设定料液比1:10、酶解时间4h的前提下,湖羊胎酶解的最佳条件为:温度45℃、酶浓度40U/g、pH值8.0。在此最佳条件下,湖羊与藏羊胎的水解度分别为35.36%和40.47%,两种羊胎素冻干粉的产率分别为17.56%、19.44%,两者的大分子均得到有效降解,氨基酸组成和含量无明显差异。结论湖羊胎是一种可以替代藏羊胎的羊胎素生产原料。

川西北草原牦牛、藏羊肠道寄生虫流行病学调查及防治措施

采用粪便内蠕虫虫卵检查法,对四川红原县牧区采集的39份粪样品,其中牦牛30份,藏羊9份,对6种常见寄生虫进行了流行病学调查,结果表明这几种寄生虫的检出率为:球虫牦牛57%;藏羊67%、线虫牦牛57%;藏羊100%、前后盘吸虫牦牛43%;藏羊22%、肝片吸虫牦牛23%,藏羊11%、鞭虫牦牛7%及绦虫牦牛3%等。在此基础上,结合川西北草原畜牧业的生产实际,提出了主要寄生虫病的防治措施。

藏系绵羊遗传多样性及其品种(系)分化的研究

以青海和甘肃省分布的8个藏系绵羊群体为对象，对其基因组DNA进行了RAPD分析。结果表明：群体内遗传多样性指数Ho值平均为0．37，总群体平均遗传多样性指数Hsp为1．51；藏系绵羊的遗传多样性75．5％分布在品种群间，24．5％分布在品种群内；品种内个体间的平均D值为0．0177（0．0152～0．0197）；品种群间的平均D值为0．0492（O．0419～O．0569）。现有藏系绵羊可划分为高原草地型（Altiplano Meadow Type，AMT）和山谷草地型（Valley Grassplot Type，VGT）两大类群。

藏东南河谷型绵羊舍饲和放牧行为的观察

通过对藏东南河谷型绵羊放牧行为的观察发现 ,全天放牧时间 450 min,其中游走 6 8min,占 1 5.2 2 % ;采食 3 2 8min,占 75.1 % ,休息 3 6 min,占 8.3 5%。对藏东南河谷绵羊舍饲行为观察结果表明 ,昼夜 2 4 h中 ,采食 2 93 .8min,占 2 0 .4% ;反刍 3 98.0 min,占 2 7.6 % ;站立 2 90 .9min,占 2 0 .2 % ,卧息 453 .6 min,占 3 1 .5% ,饮水 4.3 min,占 0 .3 %。在放牧条件下 ,用计数法估测得绵羊的采食量为 2 .79kg,在舍饲条件下 ,日采食量为 5.4kg,折算成风干物质分别为 0 .47和 0 .92 kg,风干物质分别占活重的 1 .74%和 3 .41 %。

拉萨河谷冬春季放牧与舍饲彭波半细毛羊牧草、血液及被毛矿物质含量

为分析拉萨河谷冬春季放牧与舍饲彭波半细毛羊采食牧草、血液及被毛中主要矿物质元素的含量,试验选用1.5岁左右彭波半细毛羊母羊60只,随机分为放牧组(GZ)和舍饲组(IF)进行试验。结果表明:试验所用牧草矿物质元素,除钼外其他元素含量均为绿麦草>冬季天然牧草。冬季天然牧草磷、镁、硫、铜、锰、锌和硒及绿麦草镁含量低于正常范围。(2)舍饲组血清钙(P=0.026)、硫(P=0.030)、铜(P=0.011)和钼(P=0.014)含量高于放牧组,镁(P=0.090)、铁(P=0.071)、锌(P=0.083)和碘(P=0.066)含量有增高的趋势;其被毛钙(P=0.003)、磷(P=0.006)、镁(P<0.001)、铁(P=0.022)、锰(P<0.001)和碘(P=0.012)含量均高于后者,铜含量有增高的趋势(P=0.068)。在血液和被毛中,放牧组血清铜、锰及被毛铜、锰和硒含量及舍饲组血锰及被毛锰、硒含量均低于推荐值。以上结果表明,拉萨河谷冬春季放牧彭波半细毛羊钙、铁、钼和碘充足,但磷、镁、硫、铜、锰、锌和硒缺乏或不足;舍饲(以谷物为主的精补料+绿麦草干草)能有效解决磷、镁、硫、铜、锌和硒的缺乏问题,但锰仍需补充。

藏绵羊乳中酶活力的研究

对40只藏绵羊脱脂乳中4种酶的活力进行了检测,结果显示,乳中酶活力存在较大个体差异。γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳过氧化物酶(LP)和淀粉酶(AMY)的活力分别为268.25±89.18U/100mL、231.85±107.38U/100mL、3.97±3.68U/mL、80.65±73.91U/100mL。其中,头胎和第2胎乳中的淀粉酶活力显著高于第3、4胎,乳中其他酶的活力未见明显的胎次变化。研究发现,藏绵羊乳中的乳过氧化物酶和γ-谷氨酰转肽酶活力较牦牛乳和藏山羊乳的低得多,尤其是乳过氧化物酶活力极低。

补饲对西藏彭波半细毛羊产肉性能的影响

为了研究秋季补饲精料对彭波半细毛羊母羊产肉力的影响,试验选择30只体重相近[(26.98±0.50)kg]的成年彭波半细毛羊母羊,随机分为3组,即完全放牧不补饲组(对照组,G1组)、每天每只补饲200 g组(G2组)、每天每只补饲400 g组(G3组),试验羊白天放牧,晚上归牧后补饲全价配合精饲料,试验期为87 d,饲养试验结束从每组挑选6只体重相近的进行屠宰试验。结果表明:各处理组体重无显著差异(P>0.05),但G3组的总增重、平均日增重(ADG)显著(P=0.006;P=0.009)高于G2组和G1组;G3组的料重比最高(P=0.023),而G2组与G1组无显著差异(P>0.05);8月份增重速度最快(P<0.001),料重比最高(P<0.001)。宰前活重、胴体重和除脾脏外的消化器官重量在组间差异不显著(P>0.05),G3组、G2组的脾脏重量显著(P=0.008)高于G1组;G3组的屠宰率、背膘厚和眼肌面积显著(P=0.049;P=0.008;P=0.021)高于G1组,G2组与G1组无显著差异(P>0.05)。说明补饲精料能显著提高彭波半细毛羊的产肉力和饲料转化效率,每天每只补饲400 g效果较优。

藏系绵羊随机扩增多态性DNA最佳反应体系的研究

以高原型藏羊的基因组DNA为模板,通过对RAPD反应体系中的各种参数进行优化试验,建立了适宜于藏系绵羊RAPD分析的最佳反应体系:在PE2400型DNA扩增仪的25μL反应体系中,模板DNA的量为60～120 ng,引物量为4～8pmol,Mg2+浓度为2.0 mM,Taq DNA聚合酶为1～2.5 U,dNTP浓度为150～200μM;94℃预变性3分钟后35次循环的参数设定为:94℃1分钟,36℃1分钟,72℃2.5分钟,最后72℃延伸10分钟。利用这些条件对藏系绵羊的基因组DNA进行RAPD分析,其结果的重复性和可靠性大为提高。

牦牛中华皮蝇蛆和藏羊的皮蝇蛆扫描电镜形态学比较观察

应用电子显微镜对寄生于牦牛体的中华皮蝇蛆和藏羊皮蝇蛆进行了形态学扫描观察,结果:感染藏羊皮蝇幼虫气门板稍平,呈平面方形,气门钮稍突出,气门孔周围有少量小的突棘,第10节腹面前后缘均未发现棘。感染牦牛的中华皮蝇幼虫,气门板稍有凹陷,气门钮突出。第10节腹面前后缘均有棘,气门孔周围有少量小的突棘。

歇武乡藏羊最优畜群结构的选择

根据数学优选法原理 ,结合歇武乡示范户藏羊生产实况 ,对羊群结构进行分析 ,找出藏羊的最优畜群结构方案 ,分析。