罗汉果组培块茎诱导及离体再生

为满足罗汉果种质资源保存和优良种苗生产的需求,以“伯林二号”罗汉果带芽茎段为外植体,采用添加不同浓度的萘乙酸(NAA)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)和多效唑的MS培养基,诱导块茎、离体保存和恢复生长,并移栽种植,比较不同处理的块茎诱导率、存活率、株高、叶片数等。结果表明,供试罗汉果块茎诱导和离体保存的最佳培养基为1/2MS+0.05 mg/L NAA+0.50 mg/L 6-BA+1.00 mg/L多效唑,块茎诱导率为97.67%,540 d离体保存存活率为87.00%;诱导块茎恢复生长最佳培养基为MS+0.5 mg/L NAA+1.00 mg/L 6-BA,存活率99.00%,根和不定芽长势良好。移栽试验发现,诱导块茎移栽存活率达到97.33%,高于组培苗,且植株长势最佳,诱导块茎恢复生长后茎段培养的组培苗和常规方法培养的组培苗移栽表现无明显差异,长势良好。

罗汉果组织培养研究进展

就罗汉果组织培养的发展历程,脱毒苗产业化存在的问题及其对策,以及罗汉果组织培养的应用前景等予以综述,以期为今后的相关研究与应用提供参考。

罗汉果组培苗生物学特性研究

对罗汉果组培苗生育周期、生长发育习性以及生态适应性进行观测,结果表明:年全生育期为240～260d,定植当年即可正常开花结实。根系与块茎有两个增长高峰期,分别为开花结果期(7月上、中旬)、枯苗期(11月上旬～12月上旬);茎蔓在定植20d内生长较缓慢,之后逐步加快,其中主蔓和一级侧蔓构成植株空间骨架结构,二级侧蔓和三级侧蔓为主要结果蔓;开花座果盛期在7月下旬至8月中旬,花、果着生位置以二级侧蔓的6～15节和三级侧蔓的3～18节为主,点花授粉宜在雌雄花开放的当天上午进行,果实的生长膨大约在座果后的30d内完成,但果实发育成熟约需80d。生长发育的适温为22～28℃,其中旬温25～28℃时对花果生育最为适宜;生长过程中应保持土壤湿润和80%以上的空气湿度;全生育期对氮和钾的吸收量较大,但在生殖生长期,尤其在结果盛期与果实发育期,对磷、钾的需求增加。

不同立地条件罗汉果组培苗的光合特性

比较了三种不同立地条件罗汉果组培苗的光合光响应特性以及主要环境因子和光合生理参数的日变化,从光合作用的角度探讨影响罗汉果组培苗生长的关健生态因子。结果显示:罗汉果组培苗的光饱和点和补偿点均随海拔的增高而增大;丘陵的最大净光合速率最高,山地最低。丘陵和山地罗汉果组培苗的净光合速率(Pn)日变化曲线呈"双峰"型,在12:30～13:30时出现轻微的非气孔限制,平地受云层遮挡,无第二峰出现;9:00～15:30时之间的罗汉果组培苗Pn与气孔导度(Gs)正相关,而Pn和Gs均与光量子通量密度(PFD)、叶温(TL)和叶片内外水汽压差(VPD)负相关,并随TL和VPD的增大下降幅度更大。丘陵环境条件最适合罗汉果组培苗的生长,中午前后Pn的下降与此时的强光、高温和低湿度有关,是气孔限制和非气孔限制同时作用的结果。

罗汉果不同器官直接分化再生苗的研究

以青皮果品种的叶片、叶柄和无芽茎段作为外植体,研究其直接分化再生苗能力的差异。结果表明:⑴MS+6-BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L和MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.1mg/L两组培养基均可使叶片外植体直接分化出芽并建成再生苗。叶片基部的分化能力最强,中部稍次,尖部最弱。⑵MS+6-BA3.0mg/L+IAA0.1mg/L则诱导叶片外植体首先脱分化形成愈伤组织,继而再分化成再生苗,,且畸形苗居多,无应用价值。⑶叶柄和无芽茎段在三组培养基中都只能脱分化形成大量愈伤组织,难以分化再生苗。

罗汉果组培苗营养动态与施肥技术研究

利用正交试验等方法,分析罗汉果[Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffrey]组培苗不同生育期的植株氮、磷、钾三元素营养动态变化,总结不同栽培管理阶段的施肥技术与方法及其对植株生长发育的影响。结果表明,罗汉果组培苗生长发育的各个阶段,氮、磷、钾三元素含量及比例有所不同,但均以钾素量最大,氮素为次,磷素所占比例甚少;基肥对于罗汉果组培苗早期生长具有重要的促进作用,选用猪粪等有机农家肥并掌握合理的用量,可增强植株长势;幼苗期追肥以偏重钾素的配方对植株生长的较为有利,花果期施用适量的有机农家肥和复合肥对于增加植株的结果数量、提高大中果比率具有显著的促进作用。

罗汉果组培苗繁育标准操作规程研究

该操作规程明确规定了罗汉果的种质特性、种源地环境和组培苗生产技术规程。

罗汉果组培繁殖的技术要点

报道罗汉果组培繁殖的各项主要技术要点,包括组培条件、培养基的配制、外植体的选取与消毒、接种与培养、种源保存、炼苗与移栽、苗木包装与运输等。提出了5种培养基参考配方,即茎段诱导培养:MS+BA0.5～1.0mg/L+IAA(NAA)0.05～0.1mg/L+白糖3%+琼脂4.5g/L,pH5.8;茎尖诱导培养:MS+BA0.5～1.0mg/L+NAA0.05～0.1mg/L+椰子水100mL+白糖3%+琼脂4.5mg/L,pH5.8;继代培养(丛生芽方式):MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.05/IAA0.1mg/L+白糖3%+琼脂4.5mg/L,pH5.8;继代培养(微型扦插方式):MS+BA0.1mg/L+IAA0.3mg/L+活性炭0.07g/L+白糖3%+琼脂4.5mg/L,pH5.8;生根培养:MS+BA0.07mg/L+IBA0.15mg/L+IAA0.1mg/L+活性炭0.1g/L+白糖3%+琼脂4.5mg/L,pH5.8。分析了外植体培养过程中可能出现的不良状况的原因并提出预防措施,明确了炼苗移栽的适宜条件并制定出相应的管理方法。形成了一套较为完整的罗汉果组培苗繁殖生产技术规程。

烯效唑(S-3307)对罗汉果组培苗组织结构的影响

低浓度(0.01mg/L)的烯效唑(S-3307)能使罗汉果组培苗植株矮化、根茎粗壮、叶片增厚。经解剖学观察表明,与CK相比,添加S-3307的培养基培养的苗,其根、茎细胞明显缩短增粗,细胞层数增加;其叶片栅栏组织细胞变长,海绵组织细胞宽度增大。测量结果显示,S-3307培养的根、茎直径分别是CK的2.23倍和1.38倍,维管柱直径亦相应增加,叶片栅栏组织细胞平均长度是CK的1.32倍,海绵组织细胞宽度是CK的1.53倍,以上两种叶肉组织的变化使叶片的厚度增加。

罗汉果组培苗的生根培养

目的 了解罗汉果组培苗生根所需的最佳条件。方法 在1／2MS的培养基中分别附加植物激素IAA、IBA、NAA0.1mg／L后，接入罗汉果无根小苗，置于不同温度条件下培养。结果以附加NAA效果最好，诱导率最高。达到90％。培养温度对诱导生根和根伸长有影响，低温（16℃～22℃）有利于诱导发根，高温（30℃）于利于根伸长；在日夜变温（16℃～30℃）的培养条件下，罗汉果组培苗发根多，根较长，生长粗壮。结论 在本试验中罗汉果组培苗以1／2MS附加NAA0．1mg·L^-1，日夜变温（16℃～30℃）培养的的条件下生根最好，诱导率高，根多、长，生长粗壮。

罗汉果茎段快繁技术研究

为了获得高质量的罗汉果组培苗,本文主要探究罗汉果从外植体诱导到幼苗移栽的整个过程。实验结果表明:外植体消毒的最佳方法为10%过氧化氢,消毒3min,污染率最低,而外植体成活率高达80%。MS+IBA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L和MS+IBA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L有利于罗汉果的增殖,其增殖系数达4.45,1/2MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L最适合罗汉果根的分化。移栽初期有光照并经过炼苗的移栽方法成活率最高,幼苗移栽成活率在80%以上。

组培苗罗汉果生产标准操作规程

该操作规程明确规定了罗汉果组培苗的产地环境，栽培技术措施，采收加工方法，品质卫生标准及其检测（外观品质、成分含量、农药残留）和储运方法。基地生产应用表明，生长一年采收，平均单株产量75～100个，平均每公顷产12万～15万个；干果产品罗汉果总苷含量不低于3．2％；产品各项卫生质量指标均达到国家相关规定。

用灵发素(LFS)建立翅子罗汉果组织培养技术

目的：建立翅子罗汉果的组织培养技术；方法：以翅子罗汉果野生植株的单节茎段作外植体，MS为基本培养基，在统一添加NAA0．1后，再分别添加LFS，BA，KT0．3进行诱导；结果：（1）只有MS＋NAA0．1＋LFS0．3能诱导腋芽萌发并适成根苗齐全的再生植株，25d萌发率≥90％；其它培养基只诱导外植体形成大量愈伤组织，腋芽不萌发；（2）用MS＋LFS0．3进行继代培养，周期25～30d，增殖倍数3．7；（3）再生植株移栽成活率90％～100％。结论：在常用的CTKs中，至今仅发现LFS能够诱导翅子罗汉果单节茎段获得再生植株。

桂南地区罗汉果的引种栽培与品质分析

通过对广西植物组培苗有限公司选育的优良罗汉果组培苗进行大田种植观察分析，结果表明，4月定植更有利于植株生长，6～10月授粉均可保证植株有较高的坐果率；筛选的青冠品种能良好地适应桂南地区环境种植，产果量达194355个／hm^2，中大果率达到72．8％，甜甙V含量为0．18％，比同品种在桂北种植高出50％；显示出桂南地区也是罗汉果的适宜栽培区。

罗汉果组培苗生产体系的建立

以罗汉果带节茎段为材料,对其诱导、继代、生根和移栽等条件进行研究,为罗汉果组培苗生产体系的建立提供条件。结果表明:MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1为诱导培养基,诱导率可达40.0%;继代培养采用单节茎段扦插和促进腋芽生枝方法,适合的培养基为2/3改良MS+IBA 0.5mg·L-1+GA30.3mg·L-1+蔗糖40g·L-1+琼脂6.0g·L-1,增殖系数为4.0;生根培养基为1/2改良MS+IBA 0.5mg·L-1+蔗糖2.0%+活性炭0.1%+琼脂6.0g·L-1,生根率达到94%;栽培基质以泥炭土∶珍珠岩=10∶2为宜,移植成活率可达97.8%。

预防罗汉果组培苗徒长的措施及其补救办法

分析罗汉果组培苗植株发生徒长、不结果或结果少、果实小的原因,2005年采取培育健壮无病大苗带土提早移栽;科学运筹水肥,做到“前促、中控、后攻”;低节位多次打顶摘心,促进侧蔓生长;对徒长株进行回缩短截;喷施催花剂诱导花芽分化,喷施多效唑抑制节间徒长等预防与补救措施,当年结果株率达94.47%,比2004年提高了13.69%。

罗汉果茎段组织培养与植株再生体系的研究

以青皮罗汉果茎段为外植体,探讨了不同消毒剂、消毒时间、不同丝瓜络提取物浓度和不同激素组合对罗汉果茎段组培育苗的影响,以期能够在较短时间内培育出大量优质种苗,加快推广速度,同时也是解决罗汉果病毒病的根本途径。结果表明:以罗汉果茎段作为外植体,其最佳消毒方式是0.05%的高锰酸钾溶液浸泡消毒25 min,0.1%的升汞消毒8 min,75%的乙醇消毒30 s,成活率达81%。芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg/L丝瓜络提取物浓度,诱导率达92%;芽增值最佳培养基为MS+1.0 mg/L丝瓜络提取物浓度+0.1 mg/L NAA,增殖系数达2.43;生根培养的最佳培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA+0.2 mg/L碳粉,生根数在5~9条之间,生根率高达93%;最佳炼苗基质组成为:蛭石∶珍珠岩∶苔藓体积比=2∶1∶1,移栽成活率达100%。

罗汉果高效组培快繁技术的探究及优化

研究了消毒时间、不同激素及浓度配比对罗汉果带腋芽茎段消毒、腋芽诱导、继代培养及生根诱导的影响,从而确定在最短周期内繁殖罗汉果无菌苗的最佳组培快繁方案。结果表明,0.1%升汞最佳消毒时间为8 min,除菌率可达58%;芽诱导培养基的最佳激素组合为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L,诱导率为97.5%;继代培养基最佳激素组合为6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1mg/L+GA30.1 mg/L,增殖率为9;根诱导培养基最佳激素组合为IBA 1.0 mg/L,生根率为98%。GA3能有效促进新芽的分化、增殖和生长。

罗汉果组培苗栽培技术特点及存在的问题

本文从罗汉果组培苗与传统种薯苗的对比出发,总结归纳了罗汉果组培苗栽培技术的特点,同时也指出了罗汉果组培苗栽培中存在的问题,以供广大生产者参考。

罗汉果茎段组培快繁技术研究

以青皮果品种的罗汉果幼嫩茎段作为试验材料,探讨不同消毒试剂、消毒时间、激素组合及激素浓度梯度对罗汉果组织培养过程中的影响,以期在短时间内获得大量罗汉果组培苗。结果表明:外植体最佳消毒方式为0.1%氯化汞溶液消毒6 min,成活率达85%;激素组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的培养基可诱导发芽;激素组合为MS+0.4 mg/L IBA+1mg/L 6-BA为最佳继代增殖培养基,增殖系数达6.3;最佳芽苗伸长培养基为MS+0.05 mg/L 6-BA+0.1 mg/L GA_(3),35 d平均伸长5.1 cm;最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA,生根数量在3~8条之间,生根率达86%。