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基于Bt毒素的杀虫蛋白理性设计与创新应用策略
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作者 徐重新 金嘉凤 +5 位作者 孙晓明 沈成 张霄 陈澄宇 刘贤金 刘媛 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期96-125,共30页
Bt毒素是源于苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的具有特殊杀虫功能的大分子蛋白,其制剂和转基因作物已广泛用于害虫防治,产生了巨大的经济和社会生态效益。围绕Bt毒素挖掘和提升其应用价值是持续研究的热点,特别是随着Bt毒素结构... Bt毒素是源于苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的具有特殊杀虫功能的大分子蛋白,其制剂和转基因作物已广泛用于害虫防治,产生了巨大的经济和社会生态效益。围绕Bt毒素挖掘和提升其应用价值是持续研究的热点,特别是随着Bt毒素结构功能和作用机制日趋明晰,为其功能修饰和创新应用创造了条件,相关研究蓬勃发展,成效显著。大量研究表明,采用定点突变、结构域替换或融合以及抗独特型抗体模拟等策略,是理性设计活性更高、稳定性更强、杀虫谱更广、非靶标生物安全性更高甚至是可用于害虫抗药性治理的有别于母体Bt毒素的突变体、结构杂合体乃至功能效应物抗体等新型杀虫蛋白的有效手段;此外,采用催化毒素活化、驱动毒素靶向受体结合、促进毒素表达以及同源或异源杀虫材料复配或共表达的协同促效等创新增效策略,也是助推Bt毒素应用价值的重要手段。本文总结了Bt毒素结构功能和作用机制,梳理了基于Bt毒素功能修饰的突变体、结构杂合体以及功能效应物抗体等新型杀虫蛋白理性设计和基于Bt毒素功能增效的创新应用策略等相关研究进展,并结合作者团队在模拟Bt毒素杀虫功能效应物抗体靶向设计研发方面的最新成果,探讨了基于Bt毒素的杀虫蛋白理性设计与创新应用策略未来发展动向及潜在可行捷径,为相关研究提供较为全面的最新有价值的文献资料和启发思路。 展开更多
关键词 bt毒素 苏云金芽孢杆菌 杀虫蛋白 定点突变 抗独特型抗体 蛋白融合表达 杀虫增效物
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土壤真菌群落和潜在功能对施加外源Bt毒素的响应 被引量:1
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作者 李玉洁 葛蕾 +11 位作者 胡聪 王璐瑶 郭官清 武国干 王翠 宋丽莉 孙宇 王金斌 曾海娟 徐勤青 全哲学 李鹏 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期848-861,共14页
转Bt(Bacillus thuringiensis)基因植物和Bt重组菌生物农药释放的Bt毒素是一类具有生物毒性的潜在环境外源污染物,Bt毒素环境行为和生态效应是转基因植物和植物用转基因微生物安全风险评价的重要内容,但是外源Bt毒素对土壤真菌群落和潜... 转Bt(Bacillus thuringiensis)基因植物和Bt重组菌生物农药释放的Bt毒素是一类具有生物毒性的潜在环境外源污染物,Bt毒素环境行为和生态效应是转基因植物和植物用转基因微生物安全风险评价的重要内容,但是外源Bt毒素对土壤真菌群落和潜在功能的影响还不清楚。以施加不同浓度Bt毒素处理土壤和未施加Bt毒素对照土壤为研究对象,分析Bt毒素在土壤中的持留动态;同时采用真菌18S rRNA基因高通量测序技术,分析施加Bt毒素对土壤真菌群落和功能多样性的影响。结果表明,Bt毒素施加量和培养时间均可以显著影响土壤真菌群落组成,且随着Bt毒素施加量增加和土壤培养时间延长,土壤真菌群落差异性逐渐变大。施加Bt毒素提高了土壤真菌群落香农指数和关联网络的负相关性比例及模块数,因而没有对土壤真菌群落的多样性和稳定性产生负面影响。上述结果表明,评估Bt毒素的环境行为及微生态效应要关注Bt毒素施加量及其长期影响。随着Bt毒素施加量增加,Phymatotrichopsis、Homalogastra、Geosmithia和Apiotrichum等真菌以及参与蛋白质降解、碳素代谢和磷素代谢的功能基因编码酶相对丰度显著升高,推测上述真菌物种和潜在功能参与了Bt毒素在土壤中的降解和转化过程。研究结果为转Bt基因植物、Bt重组菌生物农药以及Bt毒素的生态安全风险评价提供了科学参考和理论依据。 展开更多
关键词 bt毒素 bt基因植物 bt菌生物农药 群落多样性 生物安全风险评价
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折叠结构的PVDF/BTO复合薄膜压电纳米发电机的制备及性能研究
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作者 张昌松 王向阳 +1 位作者 魏立柱 王如鹏 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期234-239,共6页
为提高聚偏氟乙烯(PVDF)的压电输出性能,将钛酸钡(BTO)纳米颗粒引入到PVDF溶液中,使用流延法制备PVDF/BTO复合压电薄膜,采用高温拉伸与电极化工艺处理复合薄膜。使用扫描电子显微镜、X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱仪、差示扫描量热... 为提高聚偏氟乙烯(PVDF)的压电输出性能,将钛酸钡(BTO)纳米颗粒引入到PVDF溶液中,使用流延法制备PVDF/BTO复合压电薄膜,采用高温拉伸与电极化工艺处理复合薄膜。使用扫描电子显微镜、X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱仪、差示扫描量热仪和准静态压电常数测试仪对复合薄膜的形貌和压电性能进行表征,探究BTO含量对PVDF/BTO复合薄膜的影响,研究BTO诱导PVDF链条偶极子重新排列形成β晶型的机理。结果表明,当BTO含量为10%(质量分数)时,PVDF/BTO复合薄膜的晶体结构中β晶型的含量最多,压电性能最强。最后设计了不同层数的折叠结构并组装制成压电纳米发电机(PENG),发现折叠层数越多,PENG的最大输出电压越高。 展开更多
关键词 聚偏氟乙烯 钛酸钡 压电纳米发电机 压电性能
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BT135VRE页岩气开发专用套管性能研究
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作者 倪鑫 张行刚 +4 位作者 石晓霞 米永峰 余泽金 詹飞 周继峰 《石油管材与仪器》 2024年第4期13-17,I0002,共6页
与常规油气开采相比,页岩气开采多为大斜度和水平井,完井射孔多达20段以上,同时套管在井下还要受到反复的拉、压、挤等交变载荷,下井深、井下温度高,工况条件苛刻。针对以上问题,设计并开发了BT135VRE高钢级页岩气开采专用套管,同时对... 与常规油气开采相比,页岩气开采多为大斜度和水平井,完井射孔多达20段以上,同时套管在井下还要受到反复的拉、压、挤等交变载荷,下井深、井下温度高,工况条件苛刻。针对以上问题,设计并开发了BT135VRE高钢级页岩气开采专用套管,同时对其理化性能、组织、热稳定性、常温抗挤毁性能、高温抗挤毁性能进行了研究。结果表明,在900℃淬火+670℃回火的热处理工艺下,BT135VRE屈服强度≥965 MPa,0℃横向冲击吸收功≥100 J,高强度下匹配高的韧性,同时材料在高温下还具有良好的热稳定性和高温抗挤毁性能,满足复杂工况条件下页岩气开采需求。 展开更多
关键词 bt135VRE 高温抗挤毁 高强高韧 页岩气 套管
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低温胁迫对Bt棉纤维中杀虫蛋白含量及氮代谢的影响
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作者 戴雨阳 岳野 +5 位作者 刘震宇 何润 刘雨婷 张祥 陈德华 陈媛 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期709-720,共12页
本研究以常规种泗抗1号(Sikang 1,SK1)和杂交种泗抗3号(Sikang 3,SK3)为材料进行盆栽试验,研究了不同低温水平及其处理持续时间对Bt棉盛铃期纤维中杀虫蛋白含量变化及氮代谢生理特征。结果表明,纤维中的杀虫蛋白含量随着温度的降低总体... 本研究以常规种泗抗1号(Sikang 1,SK1)和杂交种泗抗3号(Sikang 3,SK3)为材料进行盆栽试验,研究了不同低温水平及其处理持续时间对Bt棉盛铃期纤维中杀虫蛋白含量变化及氮代谢生理特征。结果表明,纤维中的杀虫蛋白含量随着温度的降低总体呈下降趋势,同时低温处理持续期显著影响杀虫蛋白含量。与对照相比,纤维中杀虫蛋白含量的降低幅度随低温胁迫时间的延长而增大。此外,随着处理温度的降低,可溶性蛋白含量、谷丙转氨酶活性、谷草转氨酶活性呈下降趋势,游离氨基酸含量、肽酶活性、蛋白酶活性呈上升趋势,且在低温处理48 h后,均与杀虫蛋白含量呈极显著相关。因此,低温胁迫促使了蛋白质的合成功能下降,分解能力增强,导致可溶性蛋白含量下降,游离氨基酸含量升高,最终导致杀虫蛋白含量下降,且其受低温胁迫持续期显著影响。 展开更多
关键词 bt 低温 杀虫蛋白 氮代谢
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昆虫对杀虫剂和转Bt基因植物的抗性进化机制研究进展
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作者 彭羽佳 李文萃 刘勇波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期40-51,共12页
为防治昆虫对农作物的危害,采取了喷施杀虫剂和种植转Bt基因抗虫植物等措施。然而,杀虫剂的大规模使用和转Bt基因抗虫植物的大面积连续种植使得一些靶标昆虫产生了抗性进化,这不仅影响防治效果,而且还影响整个农业生态系统服务功能。本... 为防治昆虫对农作物的危害,采取了喷施杀虫剂和种植转Bt基因抗虫植物等措施。然而,杀虫剂的大规模使用和转Bt基因抗虫植物的大面积连续种植使得一些靶标昆虫产生了抗性进化,这不仅影响防治效果,而且还影响整个农业生态系统服务功能。本文综述了昆虫对化学杀虫剂、微生物杀虫剂和转Bt基因植物产生抗性的分子机制。昆虫对化学杀虫剂的抗性进化机制主要是靶标位点敏感性下降和解毒酶系活性增强;对微生物杀虫剂的抗性进化机制主要是免疫系统激活和共生菌群变化;对转Bt基因植物的抗性进化机制主要是昆虫中肠结合受体基因突变或表达下调和中肠蛋白酶活性降低。为了减缓昆虫抗性进化和提高杀虫剂效率,未来建议减少使用化学杀虫剂,合理利用杀虫谱广和活性高的微生物杀虫剂以及抗虫植物等方法系统治理农业害虫。 展开更多
关键词 昆虫防治 化学杀虫剂 微生物杀虫剂 bt基因植物 抗性机制
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深入了解目的基因(Bt基因)的检测与鉴定
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作者 梅李胜 吴文娟 《生物学教学》 北大核心 2024年第3期90-92,共3页
目的基因的检测与鉴定是基因工程基本操作程序的最后一步,用以确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定表达其遗传特性。本文结合实际教学案例,介绍目的基因的检测和鉴定方法,为理解基因工程提供一定的参考。
关键词 bt基因 PCR DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交技术
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Inhibition of protein degradation increases the Bt protein concentration in Bt cotton
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作者 Yuting Liu Hanjia Li +6 位作者 Yuan Chen Tambel Leila.I.M Zhenyu Liu Shujuan Wu Siqi Sun Xiang Zhang Dehua Chen 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期1897-1909,共13页
Bacillus thuringiensis(Bt)cotton production is challenged by two main problems,i.e.,the low concentration of Bt protein at the boll setting stage and the lowest insect resistance in bolls among all the cotton plant’s... Bacillus thuringiensis(Bt)cotton production is challenged by two main problems,i.e.,the low concentration of Bt protein at the boll setting stage and the lowest insect resistance in bolls among all the cotton plant’s organs.Therefore,increasing the Bt protein concentration at the boll stage,especially in bolls,has become the main goal for increasing insect resistance in cotton.In this study,two protein degradation inhibitors(ethylene diamine tetra acetic acid(EDTA)and leupeptin)were sprayed on the bolls,subtending leaves,and whole cotton plants at the peak flowering stage of two Bt cultivars(medium maturation Sikang 1(SK1))and early maturation Zhongmian 425(ZM425)in 2019 and 2020.The Bt protein content and protein degradation metabolism were assessed.The results showed that the Bt protein concentrations were enhanced by 21.3 to 38.8%and 25.0 to 38.6%in the treated bolls of SK1 and ZM425 respectively,while they were decreased in the subtending leaves of these treated bolls.In the treated leaves,the Bt protein concentrations increased by 7.6 to 23.5%and 11.2 to 14.9%in SK1 and ZM425,respectively.The combined application of EDTA and leupeptin to the whole cotton plant increased the Bt protein concentrations in both bolls and subtending leaves.The Bt protein concentrations in bolls were higher,increasing by 22.5 to 31.0%and 19.6 to 32.5%for SK1 and ZM425,respectively.The organs treated with EDTA or/and leupeptin showed reduced free amino acid contents,protease and peptidase activities and significant enhancements in soluble protein contents.These results indicated that inhibiting protein degradation could improve the protein content,thus increasing the Bt protein concentrations in the bolls or/and leaves of cotton plants.Therefore,the increase in the Bt protein concentration without yield reduction suggested that these two protein degradation inhibitors may be applicable for improving insect resistance in cotton production. 展开更多
关键词 bt cotton bt protein inhibition of protein degradation protein degradation metabolism
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Animal Safety Test of Bacillus thuringiensis BT Protein
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作者 Weimeng NING Dingkuo LIU +6 位作者 Fang LIU Yuan LI Xiaowei YANG Zhenguo GUAN Guijun YANG Bo ZHANG Pengcheng HU 《Asian Agricultural Research》 2024年第2期31-32,35,共3页
[Objectives]To determine the biological safety of BT protein from Bacillus thuringiensis(Bt)fermentation broth to mammals at high doses.[Methods]Healthy mice were randomly divided into 4 groups with 10 mice in each gr... [Objectives]To determine the biological safety of BT protein from Bacillus thuringiensis(Bt)fermentation broth to mammals at high doses.[Methods]Healthy mice were randomly divided into 4 groups with 10 mice in each group.The experimental groups were fed with Bt fermentation supernatant at 0.2,0.6 and 1.0 mL/kg,respectively,once a day for 7 consecutive days.The blank control group was fed normally without intragastric administration.[Results]There was no significant difference in blood routine and blood biochemical analysis between the experimental group and the control group.After intragastric administration,the mice were dissected,and no obvious pathological changes were found;the heart,liver,spleen,lung and kidney were taken to make tissue sections,and no pathological changes were found by microscopic observation.[Conclusions]Mice can tolerate high doses of BT protein from B.thuringiensis fermentation broth. 展开更多
关键词 Bacillus thuringiensis(bt) bt protein Biological safety
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下午茶的韵味:咖啡与黑胶的交响 JBL SPINNER BT黑胶唱机与JBL音乐世家500桌面音响
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作者 五舟 《视听前线》 2024年第8期52-55,共4页
小高是个西点和咖啡方面的高手,知道我是玩音响的烧友,小高有次问道:“我家还有几张收藏的黑胶,这些承载着一些儿时的美好回忆,有点想翻出来再听听。”然而,播放这些唱片成了问题,因为她对黑胶唱片的印象还停留在父辈们使用的大型组合... 小高是个西点和咖啡方面的高手,知道我是玩音响的烧友,小高有次问道:“我家还有几张收藏的黑胶,这些承载着一些儿时的美好回忆,有点想翻出来再听听。”然而,播放这些唱片成了问题,因为她对黑胶唱片的印象还停留在父辈们使用的大型组合音响上。并且她最近常在工作室度过,不断地研究新式的西式点心,也会开班教几位小朋友烹饪,对于这样一个居所添置音响尤其黑胶唱机还是有点犯难。我心里记得这事儿,但也没有什么好的提议,直到我看到了JBLSPINNERBT黑胶唱机与JBL音乐世家500桌面音响,我感觉再合适不过了。 展开更多
关键词 JBL 音乐世家 下午茶 SPIN 黑胶唱片 bt 工作室 小高
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浅谈概算总价包干模式下建设方投资控制管理要点 以武汉轨道交通BT建设模式投资管理为例
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作者 胡魏玲 《城市轨道交通》 2024年第7期56-59,共4页
轨道交通BT模式投资控制存在结算争议多、投资控制难的问题,难点主要源于概算精度不深、合同条款标准化不足。本文以武汉轨道交通BT建设模式投资管理为例,总结了建设方在初步设计概算管理、发包合同条款设计、履约阶段变更签证等方面管... 轨道交通BT模式投资控制存在结算争议多、投资控制难的问题,难点主要源于概算精度不深、合同条款标准化不足。本文以武汉轨道交通BT建设模式投资管理为例,总结了建设方在初步设计概算管理、发包合同条款设计、履约阶段变更签证等方面管理的重点。 展开更多
关键词 初步设计概算 bt模式 变更签证 合同条款 轨道交通 总价包干 投资控制管理 标准化
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常见水稻病虫害胁迫对转cry1C基因抗虫水稻Bt蛋白表达量的影响 被引量:1
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作者 王欢 曹征鸿 +1 位作者 叶恭银 党聪 《生物安全学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期250-254,共5页
【目的】明确转Bt基因抗虫水稻在病虫害胁迫下对Bt蛋白表达量的影响。【方法】以Bt水稻T1C-19(表达Cry1C蛋白)为研究对象,探究褐飞虱、白叶枯病等6种水稻常见病虫害胁迫下其体内Bt蛋白的表达量变化。【结果】褐飞虱取食引起T1C-19水稻... 【目的】明确转Bt基因抗虫水稻在病虫害胁迫下对Bt蛋白表达量的影响。【方法】以Bt水稻T1C-19(表达Cry1C蛋白)为研究对象,探究褐飞虱、白叶枯病等6种水稻常见病虫害胁迫下其体内Bt蛋白的表达量变化。【结果】褐飞虱取食引起T1C-19水稻叶片中Bt蛋白含量降低,而黑尾叶蝉取食显著降低了T1C-19水稻叶鞘中的Bt蛋白含量,白叶枯病侵染导致Bt水稻叶鞘中的Bt蛋白含量显著上升。二化螟、水稻普通矮缩病、稻瘟病的胁迫对转基因水稻T1C-19叶片和叶鞘中的Bt蛋白含量均无显著影响。【结论】病虫害胁迫因种类不同对Bt水稻中Bt蛋白表达量的影响有所不同。这将为Bt水稻的抗虫效果评价提供数据基础,同时为Bt水稻病虫害综合治理提供科学依据。 展开更多
关键词 水稻 病虫害 胁迫 bt蛋白 表达量
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棉铃虫围食膜中Bt抗性相关蛋白的分离与鉴定
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作者 李怡萍 刘少凯 +1 位作者 袁向群 郭予元 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期132-138,共7页
棉铃虫是世界性的重要农业害虫。围食膜作为昆虫抵御病原微生物入侵及有害物质的第一道天然保护性屏障,其上可能存在与Bt抗性相关的受体蛋白。本研究以Bt Cry1Ac抗性和敏感品系的棉铃虫围食膜为对象,采用NuPAGE电泳技术、配体杂交、质... 棉铃虫是世界性的重要农业害虫。围食膜作为昆虫抵御病原微生物入侵及有害物质的第一道天然保护性屏障,其上可能存在与Bt抗性相关的受体蛋白。本研究以Bt Cry1Ac抗性和敏感品系的棉铃虫围食膜为对象,采用NuPAGE电泳技术、配体杂交、质谱鉴定和生物信息学分析等技术,测定了围食膜蛋白含量,鉴定了蛋白质的组成及与Bt Cry1Ac毒素的结合能力。结果表明敏感品系围食膜中蛋白含量为22.19%,抗性品系围食膜中蛋白含量为26.99%。抗、感品系棉铃虫围食膜上存在与Cry1Ac毒素结合的6个差异蛋白,推测其中棉铃虫羧酸酯酶蛋白和血影蛋白是2个有意义的抗性相关蛋白,2个新蛋白可能参与Bt抗性。研究证明棉铃虫围食膜上存在Bt结合蛋白且与抗性相关,为进一步明确Bt抗性机制、制定合理的Bt抗性治理策略提供了理论依据。 展开更多
关键词 棉铃虫 围食膜蛋白 bt抗性 分离与鉴定
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PPS/PTFE/PbTiO_(3)复合纤维滤料制备及过滤特性研究 被引量:1
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作者 柳静献 张舒 +1 位作者 吕超 程娇 《安全与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期514-520,共7页
为提高不同工作环境下过滤材料对颗粒物的捕集效率,通过聚四氟乙烯(PTFE)乳液浸渍后处理工艺将典型热压电材料钛酸铅(PbTiO_(3))粉末黏附于聚苯硫醚(PPS)滤料,制备了不同钛酸铅附着浓度的PPS/PTFE/PbTiO_(3)复合滤料,并对其过滤效率及... 为提高不同工作环境下过滤材料对颗粒物的捕集效率,通过聚四氟乙烯(PTFE)乳液浸渍后处理工艺将典型热压电材料钛酸铅(PbTiO_(3))粉末黏附于聚苯硫醚(PPS)滤料,制备了不同钛酸铅附着浓度的PPS/PTFE/PbTiO_(3)复合滤料,并对其过滤效率及压差特性进行了评估。结果表明,当乳液质量分数为10%、钛酸铅粉末附着浓度为0.043 g/cm^(2)时,复合滤料过滤效率最高。受益于钛酸铅粉末的热电性及压电性;随着温度升高,钛酸铅热释电电压升高,复合滤料过滤效率逐渐提高,当含尘气流达到140℃时,其对0.3μm粒子过滤效率相较于20℃提高了22.06%;随着风速增大,复合滤料过滤效率降低幅度更小。 展开更多
关键词 环境工程学 捕集效率 压差特性 钛酸铅 热电性 压电性
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表面负载Fe_(3)O_(4)对BT@PANI/PVDF复合材料介电性能的影响
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作者 王海燕 王初晗 +1 位作者 李澜 尚天蓉 《功能材料》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期10089-10097,共9页
通过氧化沉淀法制备出钛酸钡@聚苯胺-四氧化三铁(BT@PANI-Fe_(3)O_(4))核壳粒子,并以此为填料制备了聚偏氟乙烯(PVDF)介电复合材料,研究了硫酸亚铁铵(FAS)与BT@PANI核壳粒子的质量比对复合材料介电性能的影响。结果表明:在测试频率范围... 通过氧化沉淀法制备出钛酸钡@聚苯胺-四氧化三铁(BT@PANI-Fe_(3)O_(4))核壳粒子,并以此为填料制备了聚偏氟乙烯(PVDF)介电复合材料,研究了硫酸亚铁铵(FAS)与BT@PANI核壳粒子的质量比对复合材料介电性能的影响。结果表明:在测试频率范围,复合材料的介电常数随着FAS与BT@PANI质量比的增加而增大,当FAS与BT@PANI核壳粒子的质量比为1∶1时,BT@PANI-Fe_(3)O_(4)/PVDF复合材料的介电常数可达14(100 Hz),与BT@PANI/PVDF(12,100 Hz)复合材料相比,介电常数得到提高,介电损耗保持在0.1左右,在高频时,BT@PANI-Fe_(3)O_(4)/PVDF介电损耗(0.03,104 Hz)小于BT@PANI/PVDF(0.09,104 Hz)复合材料,满足实际应用。报道的多壳层策略可以扩展到各种无机杂化物,以开发新型介电纳米复合材料。 展开更多
关键词 聚合物基复合材料 介电性能 核壳粒子 钛酸钡 四氧化三铁
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高温干旱下缩节胺通过调节碳和氨基酸代谢提高Bt棉杀虫蛋白含量的生理机制 被引量:1
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作者 邢羽桐 滕永康 +5 位作者 吴天凡 刘媛媛 陈源 陈媛 陈德华 张祥 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1471-1483,共13页
【目的】探讨高温干旱胁迫下缩节胺(mepiquat chloride,DPC)调控Bt(Bacillus thuringiensis)棉杀虫蛋白含量的生理机制,为高抗虫性Bt棉品种选育及高产高效栽培提供理论依据。【方法】2020—2021年以转Bt抗虫基因抗虫棉品种泗抗3号为材料... 【目的】探讨高温干旱胁迫下缩节胺(mepiquat chloride,DPC)调控Bt(Bacillus thuringiensis)棉杀虫蛋白含量的生理机制,为高抗虫性Bt棉品种选育及高产高效栽培提供理论依据。【方法】2020—2021年以转Bt抗虫基因抗虫棉品种泗抗3号为材料,采用盆栽法,在人工气候室进行高温干旱胁迫,胁迫开始后立即用20 mg·L^(-1) DPC和清水(对照)喷施。7 d后测定铃壳杀虫蛋白含量、α-酮戊二酸含量、丙酮酸含量以及谷氨酸合酶活性、谷氨酸草酰乙酸转氨酶活性、可溶性蛋白含量、游离氨基酸含量。并进行转录组测序,利用DESeq进行差异基因分析,通过GO富集和KEGG Pathway数据库注释参与DPC调节杀虫蛋白含量的差异表达基因。【结果】与清水对照相比,DPC可显著提高高温干旱条件下Bt棉铃壳中杀虫蛋白含量,提高幅度达4.7%—11.9%。在碳代谢方面,α-酮戊二酸含量、丙酮酸含量提高46%—57%和25%—29%;在氨基酸代谢方面,谷氨酸合酶活性、谷氨酸草酰乙酸转氨酶活性、可溶性蛋白含量、游离氨基酸含量分别提高32%—44%、30%—40%、28%和22%—27%。转录组分析结果表明,DPC处理后上调基因7542条,下调基因10449条。GO和KEGG结果显示,差异基因主要涉及氨基酸代谢、碳代谢等生物过程。其中编码6-磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶、谷氨酸丙酮酸转氨酶、丙酮酸脱氢酶、柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶、谷氨酸合酶、吡咯啉-5-羧酸脱氢酶、谷氨酸草酰乙酸转氨酶、N-乙酰谷氨酸合成酶、乙酰鸟氨酸脱乙酰酶基因表达显著上调。【结论】高温干旱下,DPC通过调节碳、氨基酸代谢增加丙氨酸、α-酮戊二酸含量,提高天冬氨酸、谷氨酸、丙酮酸和精氨酸合成能力,进而提高Bt棉杀虫蛋白含量。 展开更多
关键词 bt 缩节胺 杀虫蛋白 氨基酸代谢 碳代谢
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实验条件下BT肽对南美白对虾副溶血性弧菌的攻毒试验
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作者 潘雪央 陆俊锴 华建权 《江西水产科技》 2023年第2期16-17,共2页
副溶血弧菌引起的急性肝胰腺坏死病是南美白对虾的主要病害之一。通过在饲料中添加BT肽并进行攻毒实验来探究BT肽是否能够增强南美白对虾的天然免疫力。结果表明,在饲料中添加BT肽可以显著提高南美白对虾对副溶血弧菌的抗病能力,但是免... 副溶血弧菌引起的急性肝胰腺坏死病是南美白对虾的主要病害之一。通过在饲料中添加BT肽并进行攻毒实验来探究BT肽是否能够增强南美白对虾的天然免疫力。结果表明,在饲料中添加BT肽可以显著提高南美白对虾对副溶血弧菌的抗病能力,但是免疫保护的持续时间稍显不足,其原因有待进一步研究。 展开更多
关键词 南美白对虾 bt 副溶血弧菌 免疫
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Cry类和Vip3Aa类Bt杀虫蛋白对亚洲玉米螟的毒力和增效作用 被引量:1
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作者 胡小华 王振营 +2 位作者 何康来 解海翠 王月琴 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期310-315,共6页
筛选对靶标害虫高效的Bt杀虫蛋白、评价蛋白组合对靶标害虫的杀虫作用,对于转基因抗虫新品种的研发具有重要的指导意义。本文采用人工饲料混合法评价了Cry1Ab、Cry1Fa、Cry1Ca、Cry1Ba、Cry2Aa、Vip3Aa11、Vip3Aa20、Vip3Aa19共8种Bt杀... 筛选对靶标害虫高效的Bt杀虫蛋白、评价蛋白组合对靶标害虫的杀虫作用,对于转基因抗虫新品种的研发具有重要的指导意义。本文采用人工饲料混合法评价了Cry1Ab、Cry1Fa、Cry1Ca、Cry1Ba、Cry2Aa、Vip3Aa11、Vip3Aa20、Vip3Aa19共8种Bt杀虫蛋白对亚洲玉米螟的毒力;同时评估了Cry1Ab/Vip3Aa19、Cry1Fa/Vip3Aa19混合蛋白对亚洲玉米螟的杀虫作用,筛选出毒力最佳的组合比例。结果表明:Cry1Ab、Cry1Fa、Cry2Aa对亚洲玉米螟的LC 50在0.24~0.72μg/g之间,其中Cry1Ab的毒力最强,显著高于Cry1Fa和Cry2Aa蛋白,Cry1Fa与Cry2Aa毒力无显著性差异。Cry1Ca、Cry1Ba、Vip3Aa11、Vip3Aa20、Vip3Aa19对亚洲玉米螟的LC 50均大于50μg/g。当Cry1Ab/Vip3Aa19、Cry1Fa/Vip3Aa19混合比例为1∶1时,增效作用最强,增效因子分别为3.18和1.58。本研究结果为多价转基因玉米的研发提供了重要依据。 展开更多
关键词 bt CRY Vip3Aa 亚洲玉米螟
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土壤增氮对棉花当日花Bt杀虫蛋白含量影响及相关生理机制
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作者 刘雨婷 李远 +7 位作者 刘震宇 何润 陈晨 戴雨阳 陈媛 张祥 陈源 陈德华 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第4期37-42,共6页
以Bt棉常规品种泗抗1号、杂交品种泗抗3号为材料,在常规施氮量(CK,300 kg·hm^(-2))水平上,设计增施氮素25%、50%、75%、100%4个处理,探讨土壤增氮对棉花当日花中Bt杀虫蛋白含量的影响及其蛋白质代谢机制。结果表明:两类型品种当日... 以Bt棉常规品种泗抗1号、杂交品种泗抗3号为材料,在常规施氮量(CK,300 kg·hm^(-2))水平上,设计增施氮素25%、50%、75%、100%4个处理,探讨土壤增氮对棉花当日花中Bt杀虫蛋白含量的影响及其蛋白质代谢机制。结果表明:两类型品种当日花中Bt杀虫蛋白含量均随施氮量增加呈先升高后降低的趋势,且在施氮量增加75%时当日花中Bt蛋白含量达最大值,较CK增加37.8%~85.2%。氮代谢生理机制表明,施氮量增加75%时当日花可溶性蛋白质含量、游离氨基酸含量、蛋白质合成关键酶[谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、谷氨酸合成酶(glutamate synthase,GOGAT)]活性显著提高;蛋白质分解关键酶(蛋白酶、肽酶)活性则随施氮量增加呈下降趋势,但处理间差异不显著。在常规施氮水平上适量增氮有利于促进Bt杀虫蛋白合成,从而提高棉花Bt抗虫性。 展开更多
关键词 棉花 氮肥 bt杀虫蛋白 氮代谢
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美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4与BtCry9Ea10结合特性分析
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作者 王晓洁 王哲 +3 位作者 赵丹 王倩 陆秀君 郭巍 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期76-82,共7页
为明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis Cry9Ea10毒素蛋白对美国白蛾(Hyphantria cunea)的作用,本研究测定了其对美国白蛾四龄幼虫的活性,采用邻接法构建了美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4系统发育树;Ligand blot和ELISA试验研究了Bt... 为明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis Cry9Ea10毒素蛋白对美国白蛾(Hyphantria cunea)的作用,本研究测定了其对美国白蛾四龄幼虫的活性,采用邻接法构建了美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4系统发育树;Ligand blot和ELISA试验研究了Bt Cry9Ea10毒蛋白与HcABCC4受体蛋白间的结合能力;利用HcABCC4基因dsRNA,采用注射法比较了基因沉默前后Cry9Ea10毒素对美国白蛾的毒力变化。结果表明,Bt Cry9Ea10蛋白对美国白蛾幼虫有杀虫活性,毒力回归方程为y=-4.61+2.28x,LC_(50)和LC_(70)值分别为115.60和177.58μg/mL。美国白蛾HcABCC4氨基酸序列(GenBank登录号:MW727508.1)与夜蛾科棉铃虫Helicoverpa armigera(XM 049842273.1)、美洲棉铃虫H.zea(XM 047179823.1)、草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(XM 035574947.2)、斜纹夜蛾S.litura(KP335688.1)的ABCC4氨基酸序列聚为一支、相似性一致;Bt Cry9Ea10、Bt Cry1Ac毒素与HcABCC4 TMD结构域重组蛋白能特异结合,解离常数Kd值分别为(276.80±0.056)、(131.30±0.087)nmol/L,最大亲和力Bmax值分别为(0.23±0.06)、(0.86±0.086)。与对照组相比,美国白蛾注射HcABCC4 dsRNA后基因表达量下降58.04%,Cry9Ea10蛋白平均校正死亡率下降58.97%(P<0.05)。据此推断美国白蛾中肠HcABCC4蛋白是Bt Cry9Ea10的特异受体,为进一步揭示Bt Cry9Ea10蛋白的杀虫机制提供了资料。 展开更多
关键词 美国白蛾 ABCC4蛋白 bt Cry9Ea10 RNAI 毒力
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