蟾蜍细胞溶素的纯化及其生化特性研究

利用阴离子交换和凝胶过滤柱层析等方法对蟾蜍卵黄外被细胞溶素进行了分离纯化，获得了高纯度的样品．该酶的质量为３２ｋＤ，其特异性ＭＣＡ－人工合成底物为Ｂｏｃ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－ＭＣＡ，能被ＤＦＰ、ＳＢＴＩ、ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ和ｐ－ＡＭＰＳＦ等蛋白酶抑制剂所强烈抑制，但不受ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ、ｂｅｓｔａｔｉｎ、Ｅ－６４和ＥＤＴＡ等的影响。

金鱼、八目鳗和蟾蜍蝌蚪表皮Malpighian细胞超微结构的比较研究

本文对50只金鱼、5只八目鳗和10只蟾蜍蝌蚪的表皮做了电镜研究。在八目鳗和蝌蚪都观察到了典型的带微嵴的Malpighian细胞,而金鱼只在无鳞皮区观察到这种带微嵴的Malpighian细胞或称微嵴细胞。认为,微嵴细胞只见于无鳞皮,细胞表面的微嵴是一恒定性结构。并对其机能进行了讨论。

蟾蜕抗肿瘤及增强免疫效应研究

目的:研究一种新发现的蟾蜍药用部位——蟾蜕在小鼠体内的抗肿瘤及增强免疫效应的功能。方法:检测S180肉瘤、H22肝癌、Lewis肺癌荷瘤小鼠服用蟾蜕以后的肿瘤变化,观察蟾蜕延长HCA肝腹水癌小鼠寿命的效应,采用MTT法检测Lewis肺癌荷瘤小鼠服用蟾蜕以后的T淋巴细胞转化率和NK细胞活性变化,同时考察大剂量蟾蜕的服用是否对小鼠有明显毒性。结果:服用蟾蜕以后S180肉瘤、H22肝癌实体瘤、Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤有明显缩小,Lewis肺癌荷瘤小鼠T淋巴细胞转化率和NK细胞杀伤活性均有明显上升,大剂量服用蟾蜕对小鼠无明显毒副作用。结论:提示蟾蜕在动物体内具有明显的抗肿瘤效果和增强免疫效应,是一种安全的可用于抗肿瘤治疗的药用动物新资源。

蟾蜕的氨基酸分析及其对小鼠营养作用观察

对一种新的中华大蟾蜍药用和食用部位-蟾蜕氨基酸组成和含量进行分析并观察其对实验小鼠饲养效果。用日立835-50型氨基酸自动分析仪对蟾蜕水解液中氨基酸组成和含量进行了检测,以大剂量蟾蜕(16g/kg/d)给实验小鼠连续喂养2周,观察其对小鼠的饲养效果。氨基酸检测结果:提示蟾蜕富含多种必需和非必需氨基酸,总含量达到干质量的50%以上。而小鼠短期大剂量服用蟾蜕后,生长状况极佳,无明显毒副作用。以上结果提示,蟾蜕营养价值较高,有一定滋补作用,可能是其具有保健作用的机制之一,因而是一种潜在的很有价值的新药用和食用资源。

基于UHPLC-QqQ-MS对蟾衣中游离氨基酸与总氨基酸的分析

为探究蟾衣的营养和药用价值,采用超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(UHPLC-QqQ-MS)技术,分析蟾衣中游离氨基酸和总氨基酸的组成及含量。实验结果显示,在蟾衣样品中分析出的游离氨基酸有11种:天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、γ-氨基丁酸、酪氨酸、苏氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸;总氨基酸有18种:精氨酸、胱氨酸、组氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、γ-氨基丁酸、酪氨酸、脯氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸;并检出了17种氨基酸的含量:谷氨酸含量最高,其次是天冬氨酸,组氨酸和胱氨酸含量较低。此外,本研究建立的UHPLC-QqQ-MS技术用于测定上述游离氨基酸和总氨基酸专属性好,灵敏度高,可检测较低质量浓度的氨基酸。蟾衣的氨基酸种类丰富,药用氨基酸种类齐全,具有重要的营养价值和药用价值。实验结果可为深入研究蟾衣药材的资源开发利用提供基础资料。