不同基因型烤烟对镰刀菌根腐病的抗性鉴定与评价

为明确不同基因型烤烟对烟草镰刀菌根腐病的抗性,利用10个烟草品种(系),采用粗毒素幼芽接种、带菌菌谷接种、孢子悬浮液培养等方法进行抗性鉴定。结果表明,供试品种对尖孢镰刀菌抗性表现出显著差异;对尖孢镰刀菌表现出抗的品种(系)有4个,分别是‘Y2001’、‘Y2002’、‘长脖黄’、‘664-01’;对尖孢镰刀菌表现出感的品种(系)有6个,分别是‘7710’‘、7713’‘、Y2007’‘、Y2008’‘、中烟100’、‘小黄金1025’。3种接种方法鉴定结果基本一致,共筛选出4个抗性品种(系)。

棘孢木霉与30%霜霉·嘧菌酯协同防治烟草镰刀菌根腐病

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂,采用菌丝生长速率法测定生防棘孢木霉Tr-0111、化学杀菌剂30%霜霉·嘧菌酯对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的毒力及两者的相容性,同时测定两者混配对尖孢镰刀菌的毒力系数,并通过盆栽试验评价其对烟草镰刀菌根腐病的防治效果。结果表明,30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111对尖孢镰刀菌均具有较强的毒力,其EC50值分别为0.0643 mL/L、2.36×10^(2)cfu/mL,且两者相容性好。除V30%霜霉·嘧菌酯∶V_(Tr-0111)=4∶6时无增效作用,其他8个混配比例均具有增效作用,其中V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=7∶3时增效比率最高,为1.16,抑菌率为68.37%。盆栽试验结果表明,V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=5∶5时,对烟草镰刀菌根腐病的防效最好,为78.18%,其次为7∶3和1∶9,防效分别为77.27%和72.73%,均显著高于单一使用30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111。因此,可以将0.0643 mL/L 30%霜霉·嘧菌酯和2.36×10^(2)cfu/mL棘孢木霉Tr-0111以5∶5比例混匀复配应用于烟田防治烟草镰刀菌根腐病,减少化学农药使用。

湖南烟草镰刀菌根腐病病原鉴定及防治药剂筛选

为明确湖南郴州和永州地区烟草根腐病的病原种类,针对主要病原菌筛选有效的防治药剂,分别利用组织分离法和平板稀释法对两地主要烟区采集的烟草根腐病病样和根际土壤进行病原分离,通过形态学观察、翻译延伸因子1A(EF-1α)序列进化分析以及致病性测定确定病原种类,采用生长速率法测定供试杀菌剂对主要病原菌菌丝生长的抑制效果,并通过活体盆栽防效试验验证候选杀菌剂对主要病原菌的防治效果。共分离到真菌128株,其中镰刀菌87株,包括共享镰刀菌Fusarium commune、甜瓜镰刀菌Fusarium incarnatum、藤仓镰刀菌Fusarium fujikuroi、茄镰刀菌Fusarium solani、层出镰刀菌Fusarium proliferatum、Fusarium falciforme、Fusarium humuli共7个种。其中,F.commune占比最高,为39.08%,其次为F.solani和F.incarnatum,占比均为14.94%。致病力测定结果表明,这些菌株都能引起烟草发病,明确其为烟草根腐病的病原物。F.commune对40%咪鲜胺EW、43 g/L戊唑醇SC和15%氰烯菌酯SC高度敏感,EC50分别为0.026、0.079和0.169μg/mL。盆栽试验结果表明,40%咪鲜胺EW的防治效果最为显著,相对防效达到94.43%±2.79%,其次为43 g/L戊唑醇SC和15%氰烯菌酯SC,相对防效为88.63%±1.68%和83.07%±2.55%。本研究表明,湖南郴州和永州地区烟草镰刀菌根腐病病原真菌以共享镰刀为主,供试药剂中,40%咪鲜胺EW对该病原菌的抑菌效果最好。

烟草镰刀菌根腐病生防菌GDND-2的鉴定及防病效果

为烟草根腐病生防菌剂的研发储备菌株资源。以烟草根腐病菌为靶标,筛选拮抗菌,通过培养形态、生化特征和分子技术鉴定菌株。用平板划线测定拮抗菌耐受力,盆栽试验验证其对病害的防效。筛选出拮抗菌GDND-2,其10%和20%发酵滤液对病菌生长抑制率为53.09%和62.24%。鉴定GDND-2为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velenzensis),该菌抑菌谱广,耐极端温度、酸碱和盐碱,对多菌灵等7种常用杀菌剂不敏感。GDND-2发酵液处理15、30、45 d,对烟草根腐病的防效为70.00%、74.62%和79.51%,处理45 d的防效高于多菌灵。贝莱斯芽孢杆菌GDND-2抗菌谱广,性状优良,可有效防治烟草根腐病,有望开发为生防菌剂。

鄂西北烟草根腐病病原菌的分离及鉴定

镰刀菌属引起的根腐病是烟草的重要病害,根腐病危害严重可导致烟草产品质量和产量出现重大损失。为明确鄂西北烟草根腐病病原,从湖北十堰烟区采集典型症状标本分离病原菌,对其进行了形态学和分子生物学鉴定,结合基因系统发育学分析和致病性验证,确定鄂西北烟草根腐病的病原为尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、木贼镰刀菌和接骨木镰刀菌。

枯草芽孢杆菌和甲基硫菌灵对烟草根腐病的防效研究

为有效防治烟草根腐病和保障烟叶生产,本文开展了枯草芽孢杆菌和甲基硫菌灵对烟草根腐病的防效研究。结果表明,施用枯草芽孢杆菌和甲基硫菌灵处理烟株发病率和病情指数均较清水对照低。移栽后15、30、45 d均用80%甲基硫菌灵可湿性粉剂4 500 g/hm^(2)灌根处理对烟草根腐病的防效较低。移栽后用1~2次80%甲基硫菌灵可湿性粉剂4 500 g/hm^(2)处理采烤前病死率较低。用80%甲基硫菌灵可湿性粉剂4 500 g/hm^(2)灌根1次处理防治成本较低。综合来看,针对病害较重田块,建议在移栽后15 d施用1次甲基硫菌灵,以获得较高的病害防效和较低的防治成本。

4种杀菌剂对烟草根黑腐病菌的室内毒力测定

采用生长速率法测定了4种杀菌剂对烟草根黑腐病菌[Thielaviopsis basicola(Berk.and Br.)Ferraris]的室内抑菌毒力。测定结果表明,多菌灵、甲基托布津、大生M-45和杀毒矾等4种药剂对烟草根黑腐病菌的EC50分别为0.4251、5.3134、30.2686和37.2234mg/L,EC90分别为0.8170、11.4312、110.1398和160.5393mg/L。并且,结合对各种药剂有效成分和作用机理的比较,确定最佳的用药方式为多菌灵与大生M-45交替施用。

生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病的防治效果及农艺性状的影响

【目的】筛选防治烟草镰刀菌根腐病的有效药剂,促进生物菌剂在烟草生产上应用。【方法】以10~9cfu/g NJ13WP(Bacillus methylotrophilus)、10^(10) cfu/g FG14 WP(B.amyloliquefaciens)、10~9 cfu/g NT35 WP(B.velezensis)和10^(10) cfu/g FS6WP(B.amyloliquefaciens)4种生物杀菌剂为材料,采用生长速率法测定4种生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病菌的室内毒力,采用灌根法进行病害的田间药效试验,并测定烟草的农艺性状。【结果】10^(10)cfu/g FG14和10~9 cfu/g NJ13 2种生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病菌的EC_(50)值分别为0.342和0.581mg/L,109cfu/g NT35和10^(10) cfu/g FS6 2种生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病菌的毒力较强,其EC_(50)值分别为2.655和8.189mg/L。4种生物杀菌剂田间防效达42.97%～70.19%,其中10~9 cfu/g NT35 1 350～2 250g/hm^2处理防治效果较好,防效达63.60%～70.19%;防治效果超过50%的生物杀菌剂对烟草农艺性状产生了一定的影响,对烟草根、茎、叶生长均有不同程度的促进作用。【结论】10~9 cfu/g NT35 1 350～2 250g/hm^2、10~9 cfu/g NJ13 1 350～1 800g/hm^2、10^(10) cfu/g FG14 2 250g/hm^2和10^(10) cfu/g FS6 2 250g/hm^2处理对烟草镰刀菌根腐病的田间防治效果较好,防效在60%以上。

烟草灰霉病在烟草漂浮育苗中的表现及8种杀菌剂对病菌的室内毒力测定

对引起烟草漂浮育苗中"根茎腐烂病"的病原菌进行了分离鉴定及致病性测定,确定病原菌为灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pevs.)。采用生长速率法用8种杀菌剂对其进行了室内毒力测定,结果表明:供试杀菌剂对烟草灰霉病菌菌丝生长的抑制作用存在明显差异,25%咪鲜胺乳油对病菌菌丝生长的抑菌效果最好,其抑制中浓度(EC_(50))为0.03 mg/L;其次为10%多氧霉素WP、50%秀安WP、58%绿色多菌灵WP、50%速科灵WP、50%农利灵干悬浮剂、20%嘧霉胺悬浮剂,它们对病菌菌丝生长的EC_(50)分别为2.21 mg/ L,3.48 mg/L,6.79 mg/L,23.21 mg/L,24.74 mg/L,34.94 mg/L;80%大生M-45WP的抑制活性最差,EC_(50)为621.36 mg/L。

鸢尾丝囊霉(Aphanomyces iridis)引起的烟草漂浮苗根腐病的初步报道

为明确近年来烟草漂浮育苗过程中出现的疑似根腐病的病原,2017年5月分别从河南省宝丰、泌阳、许昌、临颍等烟区苗床共采集12个具有代表性的病害样本,进行病原菌分离、形态学鉴定、18S rDNA-ITS序列分析和致病性测定。结果表明,从样本中分离纯化出10个真菌菌株,其18S rDNA-ITS序列与NCBI数据库中鸢尾丝囊霉(Aphanomyces iridis)序列同源性均为99%。漂浮苗及盆栽接种试验结果表明,烟苗接种后均有不同程度的发病,发病率为100%。将发病组织在PDA培养基上进行分离培养,也同样得到丝囊霉菌。本研究根据发病症状和病原菌,首次明确了鸢尾丝囊霉可引起烟草漂浮苗根腐病。

安徽省烟草根黑腐病病原鉴定及生物学特性分析

为了明确引起安徽省烟草根黑腐病的病原菌种类,选择具有典型症状的烟草根黑腐病烟株,采用胡萝卜圆片法对病原菌进行了分离。同时根据病原菌的培养形态和r DNA-ITS区序列对病原菌种类进行了鉴定,采用灌根法对病原菌进行致病性测定,并对病原菌的生物学特性进行研究。鉴定结果表明,分离得到的病原菌菌株为基生根串珠霉(Thielaviopsis basicola),对烟草品种云烟87有致病力。生物学特性分析表明,病原菌生长的最适培养基为V8,菌丝生长和孢子萌发最适温度为25℃、最适p H为6,分生孢子致死温度为53℃。该病原菌能有效利用淀粉、麦芽糖、葡萄糖等碳源以及尿素、硝酸锌等氮源。

烟草镰刀菌根腐病拮抗细菌的筛选鉴定及促生防病效果

为挖掘对烟草镰刀菌根腐病具有较强拮抗作用的生防菌株,采用稀释涂布平板法从健康烟株根际土壤中分离纯化对烟草镰刀菌根腐病(Fusarium root rot)主要病原具有一定拮抗作用的细菌,进行形态学、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定,并测定促生防病效果。经平板对峙测定,筛选出2株对烟草镰刀菌根腐病病原具有较好抑制作用的菌株YX53和YX72,对茄病镰刀菌(F.solani)的抑制效率分别为83.66%和73.54%,对尖孢镰刀菌(F.oxysporum)的抑制效率分别为57.57%和55.89%;2菌株无菌发酵滤液对病原孢子萌发抑制率为84.82%~100%,其挥发性化合物可抑制病原菌丝生长或产孢,且对烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)、根串珠霉菌(Thielaviopsis basicola)等也有抑制效果。鉴定结果表明,YZ53和YX72分别为蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus和枯草芽孢杆菌B. subtilis。经2菌株处理的烟苗胚根增长率分别达到了67.86%和161.61%,盆栽烟苗根长、最大叶面积、鲜质量等均有所增加;YX53盆栽防病效果在89.47%以上,YX72在99.53%以上。

烟草根黑腐病拮抗木霉菌株TB72的鉴定及抑菌作用

菌株TB72是针对烟草根黑腐病菌从烟草报际土壤中分离筛选出有较强拮抗作用的木霉菌,为进一步明确其抑菌能力、控病效果及其对烟草根黑腐病的生防潜能,本研究通过平板对峙培养法、抑菌活性检测和控病测试,结合菌株TB72的培养性状、形态特征和分子鉴定确定其分类地位。试验结果发现菌株TB72对烟草根黑腐病菌具有明显拮抗作用,抑菌率达52.3%;控病试验表明菌株TB72对烟草根黑腐病的防效达84.5%,能显著降低烟株接种病菌后的发病率和病情指数。抑菌活性检测菌株TB72无菌滤液在测试的各浓度下对病菌苗丝生长和孢子萌发均有较好的抑制效果。通过对菌株TB72的培养性状、形态特征及ITS序列分析,确定其为木霉属中的棘孢木霉Trichoderma asperellum。

烤烟漂浮育苗根系致腐细菌的分离与鉴定

烟草漂浮育苗中,移栽前在育苗池液的烟苗根系常发生腐烂,影响健壮烟苗的培育和移栽后烟苗的成活率。本研究分别从发生根腐的育苗池液和烟苗的腐烂根系采集样品,分离和纯化培养195株细菌,根据分离物细菌的培养特征、显微形态特征初步归类,筛选出28株细菌;进一步测定其致腐性、生理生化特征及16S r DNA基因序列。通过综合分析,鉴定致腐细菌的属种。结果表明,13株细菌具有较强的致腐性,分离纯化鉴定的致腐性菌株分别为5个属中6个种的细菌,分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),韦氏芽孢杆菌(B.weihenstephanensis),耐寒短杆菌(Brevibacterium frigoritolerans),克氏微杆菌(Microbacterium ketosireducens),罗氏耶尔森氏菌(Yersinia rohdei)和香味类香味菌(Myroides odoratus),这些细菌是引起烟草漂浮育苗过程中烟苗根系腐烂的主要细菌。

拮抗放线菌TA21对烟草根黑腐病菌的抑制及其控病作用

菌株TA21是一株从重庆烟区土壤中筛选出的对烟草根黑腐病菌Thielaviopsis basicola有较强拮抗作用的放线菌,为了明确其抑菌效果和控病作用及其在烟草根黑腐病生防中的应用潜力,本文进行了菌株TA21抑菌活性检测和温室控病测试;并通过形态学、生理生化和分子分类的方法确定其分类地位。室内测定试验表明,菌株TA21对烟草根黑腐病菌的抑菌带宽达12.5mm;温室控病试验发现其对烟草根黑腐病防治效果达85.3%。无菌滤液试验表明,在试验浓度范围内无菌滤液均能有效抑制烟草根黑腐病菌菌丝生长、减少孢子萌发。根据菌株形态特征、培养性状、生理生化特性、细胞组分及16S rDNA序列分析,确定菌株TA21为链霉菌属吸水链霉菌Streptomyces hygroscopicus。

广东韶关烟区烟草镰刀菌根腐病病原鉴定及致病性分析

为明确广东韶关烟草镰刀菌根腐病菌种类及致病力,在珠玑、始兴、南雄和乌茎采集根腐病样本,用组织分离法分离病原菌,盆栽接种带菌麦粒测定其致病性,观察菌株形态,基于EF-1α和β-Tub基因序列构建发育树鉴定病原菌。结果表明,获得45株镰刀菌,通过形态特征和分子技术鉴定为茄病镰刀菌Fusarium solani、共享镰刀菌F.commune、藤仓镰刀菌F.fujikuroi和尖孢镰刀菌F.oxysporum,分别占比42.22%,26.67%、20.00%和11.11%,对烟草均有致病性,强弱排列为F.commune≈F.fujikuroi>F.oxysporum>F.solani。本研究可为广东韶关地区烟草镰刀菌根腐病的防治提供依据。

烟草镰刀菌根腐病抗性鉴定方法研究

为获得不同烟草品种镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法,采用镰刀菌粗毒素幼芽接种、孢子悬浮液培养、带菌菌谷接种、离体叶片菌饼接种、草酸局部注射等5种方法对4个品种(小黄金1025、中烟100、长脖黄、664-01)的镰刀菌抗病性进行了研究。结果表明,镰刀菌毒素液胁迫法可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系毒素浓度为8%,处理时间6 d;镰刀菌孢子悬浮液接种法可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系孢子液浓度为107个/mL,处理时间4 d;带菌菌谷接种也可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系菌谷比例为20%,处理时间9 d;离体叶片用菌饼和草酸液处理,能区分品种的抗感性,但不能区分品种的抗感程度。研究结果认为孢子悬浮液接种法和带菌菌谷接种与其他3种方法相比可以准确评价品种对镰刀菌根腐病的抗感性。

烟草漂浮育苗中漂池营养液pH值对根系腐变的影响

红河州烟区近几年漂浮育苗中常发生根系腐变,多数发生根腐的育苗点,调配漂池液所用水源的pH值呈碱性。在昆明和弥勒两地,分别利用3个烤烟品种,调配漂池液所用水在加入漂池前,用4 M HCl或4 M NaOH将其调节成3种不同pH值(5.50、7.00和8.50),结果表明:因搬动苗盘造成根系损伤、易导致根腐;弥勒试验点中对应于加入3种pH值的水,根腐发生率分别为25.86%、45.31%和48.86%。育苗池液中施入专用肥后,使漂池液的pH值下降,并随育苗进程持续下降。3个烤烟品种中,红花大金元对根腐较为敏感。

烟草育苗漂池液中细菌数量变化与防控根腐药剂研究

【目的】烟草漂浮育苗过程中,常发生烟苗根系腐变,影响健壮烟苗的培育和造成育苗业主的极大经济损失。探索致腐原因及其防控措施,可减免育苗业主和烟农的经济损失。【方法】通过测定漂池液中细菌数量的动态变化,利用甲霜·锰锌、农用链霉素和福美双分别对分离鉴定的6种致腐性细菌进行抑菌效果测定,选用盐酸和草酸调节漂池液p H值和漂池液中分别加入3种农药进行防控根腐的试验,并进一步利用具有显著防控效果的药剂在育苗生产中进行试验示范。【结果】漂池液中细菌数量在根腐发生时期显著增加,除福美双对1种致腐菌无抑菌作用外,甲霜·锰锌、农用链霉素和福美双对分离鉴定的菌株均具有明显的抑制作用,分别用2种酸调节漂池液p H值至5.5、及分别施用甲霜·锰锌、农用链霉素、多肽保等对根腐均具有良好的防控效果。育苗生产中通过4 M HCl调节漂池液的p H值或在漂池中加入甲霜·锰锌,均显示出显著的防控效果。【结论】育苗过程中根腐现象主要由致腐细菌引起,可通过加入农药或调节漂池液p H值的试剂进行防控。

河南省平顶山烟区烟草根腐病发病情况调查及EM菌剂防治效果研究

为解决河南烟区烟草镰刀菌根腐病严重危害烟草生产及烟叶产品质量问题,对河南省平顶山烟区郏县、宝丰等产地的烟草根腐病发病情况及主要防治措施进行了调查,初步估算了烟草根腐病造成的经济损失。以河南主栽品种‘中烟100’为试验材料,采用固体菌剂土施、液体菌剂灌根和叶面喷施等不同的施用方法,对EM生物菌剂对大田烟草根腐病的防治效果进行了研究。固体EM菌剂土施处理研究结果表明,整地期、移栽期和培土期同时施用防治效果最好,发病率和死亡率分别为23%和16%;液体EM菌剂灌根处理研究结果表明,整地期、移栽期、团棵期、旺长期和打顶期同时施用防治效果最好,发病率和死亡率分别为18%和11%;液体EM菌剂叶面喷施的研究结果表明不同处理和对照间防治效果差别不大。综合研究结果显示,液体EM菌剂灌根对于烟草根腐病的防治具有较为显著的效果,为生产上烟草根腐病的生物防治提供了理论依据。