6株芽孢杆菌的生物学特性比较研究

以实验室分离保存的6株芽孢杆菌为材料,对其主要生物学特性进行了研究,包括产酶活力,对NaCl、牛胆盐、人工胃液和人工肠液的耐受性及对抗生素的敏感性。结果显示,枯草芽孢杆菌1、凝结芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌均能产生较高活性的中性蛋白酶和淀粉酶;2株枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌能耐较高浓度的NaCl;枯草芽孢杆菌2、凝结、纳豆和蜡样芽孢杆菌对牛胆盐的耐受性较强;除地衣芽孢杆菌外,其他5株芽孢杆菌对胃液和肠液的耐受性较好;6株芽孢杆菌均对常用饲用抗生素敏感。结果表明,枯草1、凝结、蜡样芽孢杆菌是优良的候选益生菌菌株。

芽孢杆菌益生菌株的筛选

选用从健康动物肠道中分离的芽孢杆菌为出发菌株,按照益生菌的特定要求,模拟体内胆盐环境(胆盐含量0.3%w/v),来监测菌株的耐受能力;测定在人工胃液、肠液环境中作用不同时间后的存活率,初步筛选能够作为益生菌的芽孢杆菌。试验结果表明,有3株芽孢杆菌分别为:B5329、B22、B544,在胆酸盐、人工胃液、人工肠液中表现出了很强的耐受能力,其中B544还具有很强的产淀粉酶、蛋白酶和木聚糖酶的能力。

动物益生菌短短芽胞杆菌FJAT-1501-BPA制剂的制备及其益生特性评价

为优化短短芽胞杆菌FJAT-1501-BPA胶悬剂配方,获得性状稳定可长期贮存的菌剂,同时对其作为益生菌进行益生特性评价,本试验研究了不同稳定剂、p H、Na Cl及防腐剂浓度对短短芽胞杆菌FJAT-1501-BPA发酵液保存特性的影响,并对其产芽孢率、耐热性、抗生素敏感性、人工胃肠液耐受性、胆盐耐受性等生物学特性进行评估。结果显示,添加4%Na Cl、0.1‰柠檬酸钙、0.1‰双乙酸钠、0.1‰山梨酸钾、2.0‰黄原胶,调节p H为7,可作为短短芽胞杆菌FJAT-1501-BPA胶悬剂保存的参考条件。短短芽胞杆菌FJAT-1501-BPA能够抑制沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌3种动物肠道病原菌的生长,具有产孢率高、耐热、耐酸、耐胆盐的特点,可与链霉素、氨苄西林同时使用,益生效果良好。因此,短短芽胞杆菌FJAT-1501-BPA可作为益生菌菌株应用于畜牧生产。

耐胃肠道环境芽孢杆菌菌株的筛选

以来源于健康动物肠道的芽孢杆菌为出发菌株,通过模拟体内高胆盐环境(胆盐含量0.3%),来监测菌株的耐受能力;测定在人工胃液、肠液环境中作用不同时间后的存活菌数的方法,来初步筛选能够作为益生菌的芽孢杆菌。实验结果表明,有3株芽孢杆菌分别为B5329、B22、B544,在胆酸盐、人工胃液、人工肠液中表现出了很强的耐受能力。

枸橼酸莫沙必利片体外溶出度的研究

目的通过测定进口药的枸橼酸莫沙必利片(商品名:加斯清)及国产样品的体外溶出度,为药品的质量和指导临床合理用药提供科学依据。方法依据国家标准[WS1-(X-287)-2003Z]和进口药品注册标准(JX20080288)的体外溶出度的规定,采用紫外分光光度法分别测定加斯清及国产样品在模拟胃液(0.1 mol/L盐酸)和人工肠液(pH=6.8磷酸缓冲液)中的溶出度。结果加斯清及国产样品在模拟胃液中的溶出度均较好,10 min后溶出度均大于90%;加斯清在人工肠液中的溶出度优于国产样品:45 min时的溶出度大于80%,符合进口药品注册标准(JX20080288),而国产样品A、B、C在人工肠液中60 min时的溶出度均低于50%,不符合进口药品注册标准(JX20080288)。结论加斯清及国产样品在模拟胃液的溶出度均较好,而在人工肠液中的溶出度加斯清优于国产样品。

乳酸菌在体外模拟胃肠环境中的抗性研究及其发酵特性

目的筛选耐酸、耐胆盐能力强,能耐受人体胃肠环境在肠道中存活生长的乳酸菌菌株.方法对2株链球菌和6株乳杆菌进行耐酸、耐胆盐能力试验,并接种在人工胃液和人工肠液中,在不同时间段取样,活菌计数.结果菌株BLL26在pH值为1.5的培养液中1h,活菌数为107 CFU.mL-1,存活率为5.38%;在猪胆盐浓度0.3%的培养液中,活菌数为108 CFU.mL-1,存活率为58.9%;在人工胃液中3h,活菌数为106 CFU.mL-1;在人工肠液中6h,活菌数没有变化.结论菌株BLL26是能够耐受人体胃肠环境的菌株,其发酵特性适宜酸乳发酵.

安息香配伍冰片在人工胃肠液中的成分变化研究

目的:研究安息香与冰片配伍后其主要成分苯甲酸及总香脂酸在人工胃肠液中的含量变化情况。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)研究苯甲酸含量变化,采用紫外分光光度法(UV)研究总香脂酸含量变化。结果:HPLC测定苯甲酸含量大小为:人工肠液>水>人工胃液,配伍冰片组含量大于单味样品组含量;UV测定总香脂酸含量大小为:人工肠液>水>人工胃液;配伍冰片组含量大于单味样品组含量。结论:HPLC和UV测定结果表明安息香在人工肠液中吸收更好,而在人工胃液中吸收较少,表明安息香主要在肠道代谢;与冰片配伍有利于安息香的吸收,体现了冰片与安息香相须相使的作用,表明了配伍的合理性。

丁酸梭菌CBM01的碳、氮源优化及其对胃肠道耐受性的研究

本试验旨在探究丁酸梭菌CBM01的最佳碳、氮源及其对胃肠道的耐受性。采用控制变量的方法,以梭菌增菌培养基为基础,对丁酸梭菌CBM01的碳、氮源进行优化,同时对其胃肠道耐受性进行研究。结果显示:1)丁酸梭菌CBM01的最佳碳源和最佳氮源分别为葡萄糖和蛋白胨;2)丁酸梭菌CBM01在人工胃液和人工肠液中作用3 h后,存活率分别为90.33%和92.09%;3)丁酸梭菌CBM 01可耐受的最高胆盐浓度为0.40%。由此可见,丁酸梭菌CBM 01对胃肠道环境具有良好的耐受性,是一株开发潜力巨大、应用前景广阔的益生菌。

除虫脲在人工胃/肠液和肠道菌群及生物样品中的稳定性研究

为了考察除虫脲(DFB)在人工胃/肠液和肠道菌群及生物样品中的稳定性,为合理开发DFB口服制剂提供试验依据。采用高效液相色谱法(HPLC),分别将DFB与空白人工胃液(pH为1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH为6.8,不含酶)、人工胃液(pH为1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH为6.8,含胰蛋白酶)、SD大鼠(雄性)肠道菌群或生物样品分别共孵育不同时间后,检测DFB的含量变化。结果表明,DFB在空白人工胃液和人工胃液中孵育0~2 h剩余百分比基本没有发生变化,之后随着时间的增加,剩余百分比略有下降,但剩余百分比都在90%以上,总体呈现稳定趋势。在空白人工肠液中孵育,剩余百分比随着时间增加显著下降,孵育6 h后剩余百分比为82.97%;在人工肠液中孵育6 h,DFB的剩余百分比为77.41%。DFB在SD大鼠肠道菌群中孵育12 h发生部分降解,但DFB的剩余百分比在90%以上,总体呈稳定趋势。DFB在肝、胃、大肠等生物样品中孵育6 h后,DFB的剩余百分比均在90%以上;而在小肠生物样品中孵育6 h后DFB的剩余百分比为84.06%。

一种三联乳酸菌的体外降胆固醇和抗氧化能力研究

为获得一种易在体内定植且降胆固醇和抗氧化能力较强三联乳酸菌,以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei S1)、屎肠球菌(Enterococcus faecium S4)和哈伯氏乳杆菌(Lactobacillus harbinensis S6)3株供试菌株制备三联乳酸菌,考察三联乳酸菌的人工胃肠耐受性、降胆固醇能力、γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)含量和抗氧化活性。结果表明,三联乳酸菌在人工胃肠液处理24 h后,存活率为47.88%,活菌数为1.25×10^9 CFU/mL;总胆固醇去除率、胆盐水解酶(Bile salt hydrolase,BSH)比活以及GABA含量分别为73.43%、151.40 U/mg、1.387 mg/mL;还原力、超氧自由基清除率、羟自由基清除率分别为1.52、95.68%、89.93%,显著高于对照组(P<0.01)。三联乳酸菌的人工胃肠液耐受较强,且具有较强的降胆固醇和抗氧化能力,可进一步开发为功能性微生态制剂或保健品。

汉逊德巴利酵母菌在胃酸、肠胆盐环境的耐受性研究

为探究汉逊德巴利酵母菌在酸性、胆盐环境及人工胃肠液下的存活情况,采用活菌计数法,分别在p H值1.0、1.5、2.0、2.5,胆盐浓度0.2%、0.3%、0.4%的PDA液体培养基,人工胃液作用0、2、4 h,以及人工肠液作用0、2、4、6、8、10 h环境下,测定汉逊德巴利酵母菌的活菌数。结果表明:耐酸试验中,该菌株在p H值1.0没有存活,p H值1.5、2.0、2.5活菌数与对照组比较下降明显(P<0.01);耐胆盐试验中,该菌株在0.4%的高胆盐浓度下仍然存活,活菌数随胆盐浓度增加而降低;人工胃液试验中,与0 h比较,2 h、4 h活菌数显著增加(P<0.01);人工肠液试验中,随着处理时间的延长,该菌株活菌数先升后降,但都比0 h活菌数增加。可见,汉逊德巴利酵母菌能够耐受较高的酸性环境和较高的胆盐环境,并在人工胃肠液环境下具有较高的存活能力,符合研制新型微生态制剂的条件。

c-Met抑制剂LWK-126在人工胃肠液中的稳定性研究

目的研究LWK-126在人工模拟胃肠液中的稳定性,为其代谢稳定性研究提供基础。方法采用RPHPLC法测定LWK-126在人工胃肠液放置0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0 h后的含量,计算其降解剩余百分含量。结果LWK-126质量浓度在0.25~12μg·mL^-1(r=0.9992,n=7)与峰面积成良好线性关系,在37℃空白人工胃肠液(不加酶)及人工胃肠液中的降解剩余百分率均大于93.51%。结论LWK-126在模拟人体胃肠道环境的溶液中较稳定,不会发生明显降解,不易受胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响。

人工胃/肠液和大鼠肠道菌群对氟苯尼考磺胺噻唑稳定性的影响

为新型偶联化合物-氟苯尼考磺胺噻唑(FST)研制和开发口服制剂提供数据支持,采用高效液相色谱法,对FST在5种溶液介质(无蛋白酶人工肠液、人工肠液、无蛋白酶人工胃液、人工胃液及大鼠肠道菌群培养液)中不同时刻的含量进行了研究,判断其稳定性差异。结果表明,FST在人工胃液和无蛋白酶人工胃液0~6 h含量保持基本稳定;在人工肠液和无蛋白酶人工肠液中孵育30 min已完全降解,且新出现的色谱峰在相同色谱条件下与氟苯尼考和磺胺噻唑对照品出峰时间相同。由此可知,FST的代谢产物为氟苯尼考和磺胺噻唑;FST在肠道菌群中发生了降解,0~8 h,FST含量迅速下降,而8~12 h趋于平稳,降至50%。说明FST在人工肠液中有明显的降解,在人工胃液中趋于稳定,肠道菌群对其稳定性也有一定的影响。

不同酿酒酵母体外模拟胃肠道内环境适应性研究

本研究旨在考察不同酿酒酵母菌株在体外模拟胃肠道内环境的适应性,为饲用酿酒酵母的科学使用提供理论依据。试验选择4株酿酒酵母菌株Sc1、Sc2、Sc3、Sc4分别开展:(1)37℃生长试验;(2)酸性酵母膏胨葡萄糖(YPD)肉汤中适应性生长试验;(3)人工胃液耐受性试验;(4)人工肠液耐受性试验。结果显示:Sc2在37℃具有较好的生长适应性,Sc4能够达到最大活菌数;pH3.0和pH4.0的YPD肉汤中4株酿酒酵母都能正常增殖,酿酒酵母Sc2、Sc3、Sc4酸耐受性优于Sc1;各菌株的商品化活性干酵母在人工胃液和人工肠液中2h存活率均高于50%,4h存活率高于45%,Sc4在模拟人工胃液中的耐受性最好,Sc3在模拟人工肠液中的耐受性最好。综上所述,不同酿酒酵母在体外模拟胃肠道内环境的适应性不同,酿酒酵母Sc2、Sc3、Sc4比酿酒酵母Sc1具有更好的胃肠道环境耐受性。

CBD及水溶性CBD在人工胃液、肠液中稳定性研究

为考察大麻二酚(CBD)和水溶性CBD在人工胃液和肠液中24h内稳定性,并对CBD降解及产生四氢大麻酚(THC)的条件及速率进行考察。采用HPLC法对人工胃液、不含胃蛋白酶的人工胃液、含0.2%NaCl人工胃液、含1%SDS人工胃液、含1%SDS和0.2%NaCl人工胃液、人工肠液、不含胰蛋白酶的人工肠液、0.2%NaCl溶液、纯化水中CBD中大麻素进行了实时监测。结果表明:使CBD降解的主要条件为HCl溶液,乙醇、1%SDS可加速降解速率,并产生THC,胃蛋白酶、胰蛋白酶、低浓度的NaCl(0.2%)不会使CBD降解产生THC。水溶性CBD不含有乙醇和1%SDS的情况下,在人工胃液中比较稳定,不会产生THC;CBD和水溶性CBD在加入乙醇的情况下,在人工胃液中会产生THC。

一株广谱抑菌活性乳酸菌的筛选及特性研究

【目的】从贵州剑河采集的传统自然发酵豆酱中分离筛选具有广谱抑菌效果的乳酸菌,并进行肠道益生特性的研究。【方法】通过抑菌试验分离筛选得到菌株DJ-04,对其进行人工胃肠液耐受性、胆盐耐受性和渗透压耐受性的研究,并对其进行生理生化鉴定和16S r RNA鉴定。【结果】菌株DJ-04对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌和铜绿假单胞菌的生长有很好的抑制作用;在p H值为2.5的人工胃液中处理3 h活菌数达到107 CFU/m L以上;在人工肠液中处理3 h活菌数达到108 CFU/m L以上,对人工胃肠液表现出良好的耐受性。能耐受一定浓度的牛胆盐,在质量浓度0.2 g/100 m L的牛胆盐环境中活菌数可达到107 CFU/m L;具有较高的渗透压耐受能力,在Na Cl质量浓度为10 g/100 m L的液体MRS中培养24 h后,活菌数仍在107 CFU/m L以上。经鉴定,DJ-04为植物乳杆菌。【结论】植物乳杆菌DJ-04具有良好的人工胃肠液耐受性以及耐胆盐和耐渗透压能力,具有肠道益生菌的潜能。

荧光标记鹿茸蛋白提取物胃肠道吸收离体实验研究

鹿茸是一种名贵的中药,含有丰富的蛋白质及多肽等活性成分,对神经、心血管、免疫、生殖系统有显著的调节作用[1]。鹿茸的传统给药方式为口服给药,给药后经消化道相关酶的降解发生一系列的变化,然而,由于检测方法的限制,

寒水石生品、炮制品在人工胃肠液中的溶出率

目的:对南、北寒水石奶淬、水淬、生品在人工胃肠液中溶出率进行分析。方法:通过人工模拟胃肠环境来分析寒水石的溶出情况,利用配位滴定法检测样品中主成分钙含量,计算溶出率。结果:南、北寒水石在人工胃液中溶出率在70%～110%,溶出率依次为奶淬<水淬<生品;在人工肠液中,南寒水石溶出率低于10%,其中生品溶出率最低,北寒水石低于20%,水淬制品溶出率最低。结论:南、北寒水石可能主要在胃内吸收,肠内吸收较少。

地龙湿法超微粉碎提取物在模拟胃肠环境中的降解研究

研究地龙湿法超微粉碎提取物在模拟胃肠环境中的降解情况。采用调整溶液pH及膜生物反应器原理两种方法终止酶解反应、Bradford法检测地龙蛋白浓度变化情况、SDS-PAGE凝胶电泳法检测地龙蛋白的降解情况、HPLC方法检测地龙小分子物质降解情况。结果表明,地龙蛋白在人工胃液中发生完全降解;在人工肠液中,高分子量蛋白发生较大程度降解,而低分子量蛋白未发现明显降解。地龙小分子物质在人工胃液中未发生明显降解;在人工肠液中出现明显降解,并且出现了新的小分子物质。地龙湿法超微粉碎提取物在体内发挥药效作用的物质可能是已降解后的多肽、氨基酸及可稳定存在于肠液环境的小分子物质。

灵芝孢子粉多糖在人工胃肠液中溶出率的研究

研究破壁与未破壁灵芝孢子粉多糖在模拟人体环境中释放程度的差异,破壁与未破壁孢子分别经人工胃、肠液作用后,多糖溶出率分别为46.82%、83.91%和17.56%、33.03%,破壁孢子经人工胃肠液共同作用后多糖总溶出率达到88.04%。试验结果表明,灵芝孢子经破壁处理后有利于其功效成分在人体胃肠中的释放。