白首乌C-21甾体总苷对肝损伤小鼠氧化应激通路的影响

通过观察白首乌C-21甾体总苷对肝损伤小鼠氧化应激的影响来探讨白首乌的保肝作用机制。雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药组及白首乌总苷高剂量(8 g·kg-1)和低剂量(4 g·kg-1)组,用四氯化碳(CCl4)复制小鼠急性肝损伤模型,采集各组动物血液和肝组织标本,测定血清中ALT和AST水平,HE染色观察肝脏病理学改变,比色法检测肝组织SOD活性和MDA含量,Western blot法检测肝脏NF-κB p65,p-IκBα,i NOS和COX-2的表达,RT-PCR法测定肝组织中TNF-α和IL-6 mRNA的表达。与模型组比较,白首乌C-21甾体总苷可明显降低模型动物血清中ALT,AST水平(P<0. 01),同时显著升高肝匀浆中SOD活性(P<0. 01),并降低MDA含量(P<0. 01);HE染色结果显示白首乌2个剂量组均不同程度地减轻肝细胞水肿、变性;Western blot和RT-PCR法结果显示,白首乌总苷组p-IκBα,i NOS,NF-κB p65和COX-2蛋白表达显著下降(P<0. 01),TNF-α和IL-6 mRNA表达明显下调(P<0. 05)。白首乌C-21甾体总苷对CCl4诱导的小鼠肝损伤有较好的预防作用,通过减轻氧化应激,从而发挥保肝作用,其机制与提高细胞SOD活性、降低MDA水平,抑制NF-κB通路激活,下调i NOS和COX-2蛋白表达有关。

白首乌C-21甾苷对肾纤维化大鼠的干预作用及其机制研究

目的观察白首乌C-21甾苷对单侧输尿管结扎所致的大鼠肾纤维化的干预作用,并探究其作用机制。方法 80只SD大鼠随机选取15只为假手术组,剩余大鼠进行单侧输尿管结扎制备大鼠肾纤维化模型,将造模大鼠随机分为4组,即模型组、阳性药氯沙坦钾(20 mg/kg)组及白首乌C-21甾苷高、低剂量(400、200 mg/kg)组,每组15只。各组大鼠于造模后第2天起,每天ig给药1次(10mL/kg),连续给药4周,假手术组与模型组大鼠ig给予等体积蒸馏水。干预28d后,每组取10只大鼠的肾组织,采用碱水解法检测肾组织中羟脯氨酸(Hyp)水平,采用HE和Masson染色检测病理损伤和纤维化程度,通过免疫荧光、Western blotting法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定肾组织中Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)和collagen-Ⅲ mRNA表达水平。结果与模型组比较,白首乌C-21甾苷能明显改善肾纤维化大鼠的病变程度,减少炎性细胞浸润、纤维组织和胶原的增生,可以明显降低大鼠肾脏指数,降低肾组织中Hyp水平,并呈剂量依赖性(P<0.05、0.01);免疫组化和Western blotting结果显示,白首乌C-21甾苷可以明显上调大鼠肾组织E-cadherin的表达水平,下调TGF-β1和α-SMA蛋白的表达水平(P<0.05、0.01);qRT-PCR结果显示白首乌C-21甾苷可显著降低大鼠肾组织collagen-Ⅰ、collagen-Ⅲ mRNA表达水平(P<0.01)。结论白首乌C-21甾苷对单侧输尿管结扎的大鼠肾纤维化具有明显的干预作用,其机制可能与抑制collagen-Ⅰ和collagen-Ⅲ的过度表达,下调TGF-β1、α-SMA蛋白高表达和上调E-cadherin蛋白低表达有关,通过调控肾小管上皮-间质转化,发挥抗肾纤维化的作用。