Determination of Total Anthraquinone and Free Anthraquinone in Different Processed Products of Rhubarb

[Objectives]The content of total anthraquinone and 5 free anthraquinones in different processed products of rhubarb were determined.[Methods]Using emodin as the reference,the concentration of 1%magnesium acetate methanol solution was used for color development,and the absorbance was measured at 516 nm wavelength;the mobile phase was methanol-0.1%phosphoric acid(76∶24)aqueous solution,the detection wavelength was set at 256 nm,the flow rate was 1.0 mL/min,the column temperature was 30℃,and the sample size was 10μL.[Results]The content of total anthraquinones in rhubarb was determined by UV spectrophotometry.The linear range was 0.98-23.52μg/mL,R2=0.9993,the average recoveries were 100.12%,99.66%and 99.15%,with RSDs of 1.58%,0.94%and 1.41%,respectively.The linear ranges of emodin,emodin,emodin,chrysophanol and emodin methyl ether were 0.0207-0.414(R2=0.9999),0.1721-3.442(R2=0.9996),0.0203-0.406(R2=0.9999),0.148-2.96(R2=0.9998)and 0.164-3.28(R2=0.9993),respectively.[Conclusions]The contents of total anthraquinones and free anthraquinones in different processed products of rhubarb were determined by UV spectrophotometry and HPLC.The method can be used for quality control of rhubarb and its different processed products.

Box-Behnken response surface method combined with fingerprint to optimize the extraction process of total anthraquinone from Cassia seeds

Objective:The Box-Behnken response surface method combined with fingerprints was used to optimize the extraction process of total anthraquinone from Cassia seeds.Methods:A three-factor,three-level response surface test was conducted based on the single-factor test with comprehensive evaluation as the measurement index.The comprehensive evaluation indexes included the extraction rate of total anthraquinone of Cassia seeds or the equivalent amount of herbs per gram of total anthraquinone of Cassia seeds,the normalized value of peak areas of 5 index components such as aurantio obtusin in the fingerprint of each sample to 16 shared peaks and the similarity of fingerprints(the reference fingerprint was established by the extraction solvent for the determination of Cassia seeds content in the Chinese Pharmacopoeia 2020 edition)with the weights of 0.2,0.5 and 0.3,respectively.Results:The best extraction process was obtained:the liquid-to-material ratio was 20:1(mL·g-1),the extraction solvent was mixture of 60%ethanol-ethyl acetate(2:1),and the extraction time was 15.12 min.The results of five sets of validation experiments showed that the overall evaluation of total anthraquinone of cassia seeds by the best process was 0.528(RSD=0.45%),and the prediction result of response surface method model was 0.531,and the relative error with the prediction result was 0.531.The relative error of the predicted results was 0.56%,and the best extraction process was consistent with the model prediction,and the obtained best process could be used for the extraction of total anthraquinone from Cassia seeds.Conclusion:The Box-Behnken response surface method combined with the fingerprint technique can be used to find the best reaction conditions and examine the interactions among the factors in a comprehensive and accurate manner,which can provide reference for the optimization and evaluation of the extraction process of Chinese medicine.

Establishment of the Determination Methods of Total Anthraquinone Content in Different Processed Products of Rhubarb

[Objectives]Ultraviolet spectrophotometry was established for the determination of total content of anthraquinone in different processed products of rhubarb.[Methods]Emodin was used as the control substance,and its color was developed by magnesium acetate methanol solution with the concentration of 1%,the absorbance was determined at the wavelength of 516 nm,the content of total anthraquinone in different processed products of rhubarb was determined to compare the content differences.[Results]The regression equation was y=0.0452 x+0.0015,R 2=0.9991.Emodin had a good linear range in the concentration of 0.98-23.52μg/mL,with high accuracy,good repeatability and stable detection results.This method revealed the content changes of total anthraquinone in rhubarb before and after processing.[Conclusions]This method could be used as the quality control method of different processed products of rhubarb,and provided reference for the comprehensive development and utilization of rhubarb resources in the future.

μ-TAS领域光谱检测“集成缩微”现状及激光微技术的研究

光谱微检测技术是微全分析系统（μ-TAS）生化芯片的常用核心技术之一。对国内外相关文献进行分析表明，“功能集成与结构缩微”技术是当前μ-TAS领域对光谱微检测提出的迫切要求。对“集成与缩微”方面研究现状进行了综述，并对与此有关的激光微技术研究作了展望。

变压器差动保护全星形接线TA断线的校验方法

讨论了微机型变压器保护中 ,当差动TA二次接线采用全星形接线时 。

朱砂七的药理作用及其在动物医学方面的应用研究进展

朱砂七为我国的一种传统中药,又名红药子、雄黄连、血三七等。朱砂七在陕西太白山一带具有悠久的药用历史,其味苦性凉,具有清热解毒、健脾益胃、收敛固涩、凉血活血、止血止泻等多种功效,可用于治疗各类炎症、泌尿系统感染、出血症等。近年研究表明,朱砂七具有抑菌、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等作用,针对其活性成分药理作用研究较多的有多糖、蒽醌类和总鞣质等。在畜禽疫病防治方面,以朱砂七多糖的相关研究较为突出,并已展示出其应用潜力。论文主要针对朱砂七活性成分的药理作用及其在动物医学方面的应用研究进展进行综述,旨在为其开发应用提供参考。

不同生长年限栽培唐古特大黄根、根茎总蒽醌含量差异测定

目的:对不同生长年限栽培唐古特大黄中根与根茎中总蒽醌类成分进行测定,分析生长年限对总蒽醌的影响,确定栽培唐古特大黄的采收年限。方法:采用《中国药典》中总蒽醌的测定方法,利用HPLC测定不同生长年限唐古特大黄根、根茎中总蒽醌的含量。结果:不同生长年限唐古特大黄中根和根茎总蒽醌含量差异较大,根和根茎中三年生样本含量最高分别为30.15、25.14 mg·g^(-1);一年生最低为17.38、10.3 mg·g^(-1)。同一生长年限的唐古特大黄总蒽醌以五种蒽醌类成分计在根中含量高于根茎。结论:生长年限对栽培唐古特大黄中总蒽醌含量有明显影响,对栽培唐古特大黄的栽培年限和采收有一定指导。

正交试验法优选大黄丁产地趁鲜加工工艺

为了优选大黄丁产地趁鲜加工工艺,采用正交试验法考察圆片厚度、初干温度、干燥程度、复干温度4个因素对大黄丁水分、游离蒽醌、总蒽醌、干燥时长的影响。结果表明,4个因素对大黄丁总蒽醌含量的影响均不显著;圆片厚度、初干温度对大黄丁游离蒽醌含量影响显著;干燥程度对大黄丁水分影响极显著;各因素对大黄丁总干燥时长影响显著或极显著。大黄丁产地趁鲜加工最佳工艺为将处理好的鲜大黄根茎横切为厚12 mm的圆片,于60℃干燥至含水量60%,再将圆片按长宽各12 mm切丁,然后70℃干燥至含水量13%以下。以该加工工艺生产大黄丁,游离蒽醌含量较高,干燥用时较短,总蒽醌含量无显著下降。

虎杖中抗氧化成分的提取分离及其活性研究

提取了虎杖中具有抗氧化活性的总蒽醌(TA),并从总蒽醌中依次分离出强酸成分(SAP)、中酸成分(MAP)和弱酸成分(WAP)。然后采用二苯代苦味酰自由基(DPPH)法对不同质量浓度的TA、SAP、MAP和WAP进行了抗氧化活性测定。TA、SAP、MAP和WAP质量浓度分别为0.2 g/L、0.5 g/L、0.8 g/L、1.2 g/L时,对自由基的最大清除率依次分别为:29.5%、67.1%、85.7%、87.5%;34.0%、74.2%、86.5%、95.4%;9.8%、24.0%、35.2%、47.3%;6.5%、11.1%、19.6%、19.9%。TA、SAP、MAP和WAP对自由基均有程度不同的清除作用,其中SAP的效果最佳,当其质量浓度为1.2 g/L时,最大清除率可高达95.4%。

D301大孔树脂分离纯化大黄总蒽醌的研究

目的:研究D301大孔树脂对大黄总蒽醌的吸附性能及其分离纯化的工艺参数。方法:以大黄总蒽醌中的代表成分大黄素为考察指标,采用HPLC测定大黄素的含量。结果:D301树脂对大黄总蒽醌的适宜交换吸附条件为,药液质量浓度为0.5 g.mL-1,pH为9,流速为1 BV.h-1;洗脱剂用0.10 mol.L-1盐酸、75%乙醇,解吸效果较好。结论:D301树脂交换吸附大黄总蒽醌的纯化方法可取,具有良好的应用前景。

大黄蒽醌衍生物对大鼠结肠及LoVo细胞水通道蛋白4表达的调节效应

目的探讨大黄总蒽醌对SD大鼠的泻下效应及对结肠水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达的影响及大黄酸、大黄素对体外培养LoVo细胞AQP4的调节效应。方法雄性SD大鼠24只随机分为正常对照组、大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组,分别予大黄总蒽醌悬液或蒸馏水灌胃5天,观察大鼠结肠粪便含水量;应用Western blot、RT-PCR方法观察其近端结肠AQP4表达的变化。体外培养LoVo细胞并予不同浓度大黄酸/大黄素含药培养液作用24 h及大黄酸/大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间作用,采用Western blot及RT-PCR检测AQP4蛋白及mRNA的表达。结果大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组作用后,大鼠结肠内粪便含水量明显增加,同时其近端结肠AQP4表达降低且表现为量效关系。大黄酸/大黄素能够显著下调体外培养LoVo细胞的AQP4蛋白及mRNA表达,且表现为剂量-效应及时间-效应关系。结论大黄总蒽醌在发挥泻下作用的同时,能够有效下调大鼠近端结肠AQP4的表达;大黄酸、大黄素可抑制体外培养Lo- Vo细胞AQP4的表达,可能是大黄泻下作用机制之一。

大黄总蒽醌乙醇提取工艺优化实验

目的研究中药大黄总蒽醌的最佳醇提工艺。方法以总蒽醌含量为考察指标,单因素考察筛选适合提取大黄蒽醌类成分的温度、粒度、醇浓度,并采用L9(34)正交实验进一步筛选得出最佳乙醇提取工艺,测定方法以紫外-可见分光光度法为主。结果以总蒽醌量计,蒽醌提取温度以100℃、粒度以10目及60目、醇浓度以60%为好;正交实验各因素对实验结果影响大小为乙醇浓度>回流时间>加醇量>浸泡时间。结论大黄蒽醌最佳提取工艺为过10目筛大黄粉末,以70%乙醇12倍药量,无浸泡100℃回流提取0.5h,提取次数为3次。

决明子总蒽醌的水提和醇提工艺比较研究

目的比较决明子总蒽醌的水提和醇提工艺,确定提取决明子总蒽醌的最佳工艺。方法采用正交实验法,分别在水提工艺中考察了浸泡时间、提取时间、提取次数和固液比,在醇提工艺中考察了乙醇浓度、提取温度、提取时间和固液比对决明子总蒽醌提取率的影响。用紫外-可见分光光度法测定总蒽醌的含量。结果总蒽醌的提取量方面醇提效果明显优于水提。在醇提的考察因素中,乙醇浓度、提取时间和固液比对总蒽醌的提取有显著影响(P<0.05)。结论决明子总蒽醌提取的最佳工艺为8倍用量的50%乙醇在80℃下提取2h,提取次数2次。

不同干燥方式对核桃青皮品质的影响

采用晒干、阴干、热风干燥、微波干燥和中短波红外干燥对核桃青皮进行干燥处理,研究不同干燥方式对核桃青皮含水率、色差、总酚、总黄酮和蒽醌类物质含量及干燥时间的影响。结果表明:干燥至恒重时,微波干燥所用时间最短,为0.4 h,干燥速率显著高于其他干燥方式(p<0.05);中短波红外干燥次之,时间为8 h。晒干所得的青皮中总酚、总黄酮和蒽醌类物质含量最高,分别为46.98、13.79和5.37 mg/g,显著高于其它干燥方式(p<0.05);中短波红外干燥得到的核桃青皮中总酚、总黄酮、蒽醌类含量分别为43.13、12.23和4.36 mg/g。50℃热风干燥后的核桃青皮粉末色泽最浅,ΔE~*值为65.05;中短波红外干燥次之,ΔE~*值为67.98。综合比较五种干燥方式,晒干得到的产品品质最好,但受天气影响较大;阴雨天气下,50℃热风与中短波红外干燥后的核桃青皮品质没有明显差距,但中短波红外干燥时间仅为50℃热风的1/3,效率更高,更适合核桃青皮的干燥。

大黄总蒽醌纯化工艺的研究

目的 :研究 4种不同纯化方法对大黄提取液中总蒽醌富集的效果。方法 :以纯化液的固体物收率和总蒽醌的含量为指标 ,对明胶沉淀法、醇调 pH值法、聚酰胺法以及大孔吸附树脂法的纯化作用进行比较。 结果 :4种纯化方法所得纯化液的固体物收率明显降低 ,而对总蒽醌的保留率具有显著的差异 ,以ResinⅠ、Ⅱ两种大孔吸附树脂最高 (93.2 1% ,95 .6 3% )。结论 :大孔吸附树脂对大黄总蒽醌具有较强的富集作用。

微波萃取与常规提取方法对大黄总蒽醌提取率的影响

试验研究了大黄总蒽醌的微波辅助提取、超声提取和索氏提取方法,并利用分光光度法测定了提取液中总蒽醌的含量。结果表明:微波辅助提取法的提取率最高(1 91%),是超声法的1 13倍,是索氏提取法的1 29倍。微波辅助提取法仅需10min,而索氏法和超声法分别需要90,30min。微波辅助提取法用于中药大黄的提取,具有高效、省时的特点。

SD大鼠经口给予大黄总蒽醌的基因表达差异和肾脏毒性靶点研究

目的通过对肾脏基因的差异表达研究,对大鼠口服大黄总蒽醌肾脏毒性作用靶点提供科学推论。方法SD大鼠大黄总蒽醌4 500 mg.kg-1.d-1灌胃给药13周,选用大鼠全基因组芯片检测肾脏基因差异表达,使用荧光定量PCR手段对10条关键基因进行了差异表达确认。实验分为给药组和正常组(n=4),对基因芯片检测结果进行按生理通路聚类分析。结果研究发现有143条基因在给药组中发生上调,101条基因发生了下调。上调的基因中与糖脂代谢相关的有29条,免疫相关的有13条,肾脏解毒功能相关的有15条,与细胞周期调控、信号传导、内分泌调节相关的有24条,未知功能的有26条;下调的基因中与糖脂代谢相关的有12条,免疫相关的有11条,细胞周期调控、信号传导相关的有20条,肾功能相关的有25条,功能未知的为39条。结论大黄总蒽醌给药组基因芯片分析结果显示,caspase3和p53通路并不是造成细胞凋亡的主要原因。研究发现,p38 MAPK通路中,MAPK激酶6可能是某种程度上造成细胞损伤的原因。细胞周期调节相关通路研究表明,周期蛋白D1和周期素依赖性蛋白激酶1的下调可能是造成真核细胞周期调控受阻,进而产生增殖抑制作用的原因。

超声提取-分光光度法测定大黄中总蒽醌类化合物

大黄试样经乙醇(6+4)溶液超声提取3次,每次20min。以母核1,8-二羟基蒽醌为标样,在428 nm波长处,采用分光光度法测定其中总蒽醌的含量。在优化的试验条件下,1,8-二羟基蒽醌的质量浓度在50.0mg·L^(-1)以内与其吸光度呈线性关系。用此方法测定大黄中总蒽醌含量,所得平均提取率与回流提取法一致,加标回收率在99.7%～100.5%之间。

大黄总蒽醌对大鼠远端结肠AQP2表达的调节效应

目的:探讨大黄总蒽醌对大鼠远端结肠水通道蛋白2(aquaporin2,AQP2)表达的调节作用。方法:32只SD大鼠随机分为正常组,大黄总蒽醌低、中、高剂量组(0.14,2.5,4.5 g·kg^(-1)·d^(-1),灌胃),正常组给予生理盐水灌胃。大鼠5 d后麻醉处死,取全段结肠内粪便,干燥后检测粪便含水量;留取远端结肠,运用免疫组织化学、Western Not及RT-PCR检测远端结肠AQP2表达的变化。结果:低剂量组大鼠没有出现泻下现象,其远端结肠AQP2表达无显著差异;中剂量组(2.5 g·kg^(-1)·d^(-1))大鼠出现软便及稀便,高剂量组(4.5 g·kg^(-1)·d^(-1))大鼠出现稀便和水样便,粪便含水量显著性增加,其远端结肠AQP2表达亦显著降低(P<0.01)。结论:大黄总蒽醌能抑制大鼠远端结肠AQP2的转录与翻译、增加粪便的含水量,这可能是其泻下效应产生的机制之一。

大黄总蒽醌对SD大鼠灌胃给药的长期毒性研究

目的观察大黄总蒽醌对SD大鼠所发生的各种毒性反应 ,以评价大黄总蒽醌的安全性。方法大黄总蒽醌以 0、14 0、794、4 5 0 0mg/kg,ig ,1次 /d ,每周 6次 ,连续给药 2 6周。结果ig高剂量后 ,大鼠精神不佳 ,排稀便、软便 ,体重增长缓慢。在给药 11周时 ,高剂量组 1只大鼠濒临死亡。高剂量组红细胞计数、血红蛋白含量、红细胞压积和Na+ 显著低于对照组 ,而尿素氮、总胆固醇、尿酸、K+ 和Ca2 + 升高 ,尿 β 微球蛋白、总蛋白质等也显著升高。高剂量组肾脏均可见近曲小管上皮细胞不同程度肿胀变性。结论在该试验条件下 ,大黄总蒽醌对SD大鼠的毒性反应靶器官可能主要是肾脏 (特别是肾近曲小管 ) ,这种毒性反应是可逆的 ,对SD大鼠的安全剂量为 794mg/kg。