药物性胆汁淤积肝胆生化指标的对比研究及ROC曲线分析

目的探讨并对比研究药物性胆汁淤积的肝胆生化指标的特征及诊断价值。方法收集2012年1月至2019年7月因药物性肝损伤(DILI)、胆总管结石(CBDS)或原发性胆汁性胆管炎(PBC)相关性胆汁淤积入住于山西医科大学第二医院的病例,共135例,分为3组,记录每组肝胆生化指标TBA、TBil、5′-NT、γ-GT、ALP、ALT和AST。运用SPSS软件,进行正态性检验、单因素方差分析、秩和检验、卡方检验和ROC曲线分析。结果DILI组TBA水平显著高于PBC组和CBDS组(P>0.05)。DILI组TBil水平显著高于PBC组(P<0.05),与CBDS组差异无统计学意义(P>0.05)。DILI组γ-GT水平显著低于CBDS和PBC组(P<0.05)。DILI组5′-NT水平显著低于CBDS组(P<0.05),与PBC组差异无统计学意义(P>0.05)。DILI组ALP水平与PBC和CBDS组间差异无统计学意义(P>0.05)。DILI组ROC曲线分析显示血清TBA的曲线下面积为0.990,P=0.000,Cut-Off值为120.2μmol/L,灵敏度97.4%,特异度100%。DILI组血清ALP与γ-GT倍值比的ROC曲线下面积为0.930,P=0.000,Cut-Off值为0.74(1∶1.35),灵敏度89.5%,特异度89.5%。DILI组血清TBil的ROC曲线下面积为0.751,P=0.000,Cut-Off值为171.62μmol/L,灵敏度100%,特异度55.8%。DILI组血清ALP、5′-NT和γ-GT水平的ROC曲线分析无意义。结论药物性胆汁淤积的TBA水平显著高于其他胆汁淤积,以及γ-GT水平显著低于其他胆汁淤积极有可能是其标志性表现,其次,5′-NT水平显著低于CBDS相关性胆汁淤积,与PBC相似,ALP水平在常见胆汁淤积病种间无差异。TBA水平和ALP与γ-GT的倍值比的Cut-Off值对药物性胆汁淤积的诊断有极高准确性,灵敏度和特异度极佳。

毛细管电泳法快速测定大鼠血浆中丙吡胺游离药物和总药物浓度及血浆蛋白结合率

目的:建立一个全新、简单、快速的高效毛细管电泳方法,不需要对血浆样品进行任何前处理,血浆样品直接进样测定丙吡胺在大鼠血浆中的游离药物浓度和总药物浓度及血浆蛋白结合率。方法:采用40.2 cm未涂层石英毛细管(75μm×375μm,有效长度30 cm),分别以p H 7.4的20 mmol·L^(-1)磷酸盐缓冲溶液和含有50 mmol·L^(-1)三羟甲基氨基甲烷(Tris)的20 mmol·L^(-1)磷酸盐缓冲溶液作为缓冲体系,测定游离药物浓度和总药物浓度。采用3.447 k Pa压力直接进血浆样品5 s,分离电压15 k V,温度20℃,检测波长190 nm。结果:方法的专属性强,在线测定血浆中总药物浓度时,丙吡胺与蛋白的结合得到充分破坏并与血浆蛋白成分在5 min内达到基线分离,丙吡胺在血浆中总质量浓度分别在1.0~20.0μg·m L^(-1)和20.0~200.0μg·m L^(-1)的低、高浓度区间内呈现良好的线性关系,相关系数分别为0.999 2和0.997 7,回收率为93.8%~110.7%。在体外血浆生物样品中,当预温孵的丙吡胺质量浓度为100、50、25、12.5、10μg·m L^(-1)时,血浆蛋白结合率平均值为86.7%、86.3%、86.4%、78.3%、74.7%。在体内血浆生物样品中,丙吡胺血浆蛋白结合率平均值范围在39.3%~91.5%。测定结果表明丙吡胺与大鼠血浆蛋白的结合具有一强、一弱2个结合位点,结合常数分别为5.3×10~4 mol^(-1)·L和1.2×10~2 mol^(-1)·L。绘制了大鼠在给药后24 h体内丙吡胺游离和总药物浓度的药时曲线。结论:利用所建立的新方法,将含丙吡胺的血浆生物样品直接进样,高效、快速地测定了大鼠体内外血浆生物样品中丙吡胺的游离药物和总药物浓度。新建立的方法灵敏,高效快速,操作简单,耗样量少,价廉,有潜在的广泛的应用价值。