Advances in Studies on Total Flavone of Abelmoschus manihot(L.)Medic.

Flos Abelmoschus manihot has a long history of application.Recent studies show that total flavone of A.manihot(L.)Medic(TFA)has a wide range of pharmacological activity.This article is a review mainly on chemical composition,method of determination and pharmacologic action of TFA,and it raises research and development direction.

Total flavone of Abelmoschus manihot suppresses epithelial-mesenchymal transition via interfering transforming growth factor-β1 signaling in Crohn's disease intestinal fibrosis

AIM To explore the role and mechanism of total flavone of Abelmoschus manihot(TFA) on epithelial-mesenchymal transition(EMT) progress of Crohn's disease(CD) intestinal fibrosis.METHODS First,CCK-8 assay was performed to assess TFA on the viability of intestinal epithelial(IEC-6) cells and select the optimal concentrations of TFA for our further studies.Then cell morphology,wound healing and transwell assays were performed to examine the effect of TFA on morphology,migration and invasion of IEC-6 cells treated with TGF-β1.In addition,immunofluorescence,real-time PCR analysis(q RT-PCR) and western blotting assays were carried out to detect the impact of TFA on EMT progress.Moreover,western blotting assay was performed to evaluate the function of TFA on the Smad and MAPK signaling pathways.Further,the role of co-treatment of TFA and si-Smad or MAPK inhibitors has been examined by q RTPCR,western blotting,morphology,wound healing andtranswell assays.RESULTS In this study,TFA promoted transforming growth factor-β1(TGF-β1)-induced(IEC-6) morphological change,migration and invasion,and increased the expression of epithelial markers and reduced the levels of mesenchymal markers,along with the inactivation of Smad and MAPK signaling pathways.Moreover,we revealed that si-Smad and MAPK inhibitors effectively attenuated TGF-β1-induced EMT in IEC-6 cells.Importantly,co-treatment of TFA and si-Smad or MAPK inhibitors had better inhibitory effects on TGF-β1-induced EMT in IEC-6 cells than either one of them.CONCLUSION These findings could provide new insight into the molecular mechanisms of TFA on TGF-β1-induced EMT in IEC-6 cells and TFA is expected to advance as a new therapy to treat CD intestinal fibrosis.

Effects of Total Flavone of Abelmoschl Manihot L.Medic on the Function of Platelets and Its Mechanism

Objective: To study the effects of total flavone of Abelmoschl Manihot L.Medic (TFA) on the function of platelets and to explore its mechanism. Methods: Rat models of artery-veins bypassing thrombus formation were used. The platelets of rabbits were collected. Platelet aggregation was induced by collagen and intracellular calcium ion concentration ([Ca 2+ ]i) was assayed by Fura-2 method. Results: TFA (25, 50, 100 mg/kg) significantly and dose-dependently reduced the weight of thrombus. TFA (0.025, 0.05, 0.1 mg/ml) possessed dose-dependant inhibitory effects on rabbits' platelet aggregation induced by collagen. TFA significantly reduced the resting and CaCl 2-induced increase of free intracellular calcium concentration ([Ca 2+ ]i) in rabbit platelet in vitro . Conclusion: TFA has an antiplatelet effect via the inhibition on the influx of Ca 2+ .

Total Flavonoids from Flowers of Abelmoschus manihot for Amelioration of α-naphthylisothiocyanate-induced Cholestasis by Regulating Expression of Transporters

Objective To explore the molecular mechanisms of the total flavonoids extracted from the flowers of Abelmoschus manihot（TFA） against α-naphthylisothiocyanate（ANIT）-induced cholestasis. Methods The hepatoprotective activities of TFA（125, 250 and 500 mg/kg） were investigated on ANIT-induced cholestatic liver injury in rats. Serum levels of alanine aminotransferase（ALT）, aspartate aminotransferase（AST）, total bilirubin（TBIL）, total bile acid（TBA）, and bile flow were measured to evaluate the protective effect of TFA. Furthermore, the hepatic m RNA and protein levels of transports, multidrug resistance-associated protein 2（MRP2）, bile salt export pump（BSEP）, and Na＋-taurocholate cotransporting polypeptide（NTCP） were investigated to elucidate the protective mechanisms of TFA against ANIT-induced cholestasis. Results Pretreatment of TFA significantly and dose-dependently decreased the ANIT-induced elevation of serum ALT, AST, TBIL, and TBA levels and increased the ANIT-induced suppression of bile flow. Moreover, TFA was found to increase the expression of liver MRP2, BSEP, and NTCP in both protein and m RNA levels in ANIT-induced liver injury in rats with cholestasis. Conclusion TFA exerts a therapeutic effect on ANIT-induced liver injury in rats with cholestasis, possibly through regulating the expressions of hepatic transporters.

菜芙蓉花黄酮微胶囊的制备工艺及其贮藏稳定性

为提高菜芙蓉花黄酮的贮藏稳定性,扩展其应用范围,以菜芙蓉花黄酮提取液为芯材、β-环糊精为壁材,采用超声辅助包埋-冷冻干燥法制备菜芙蓉花黄酮微胶囊,通过单因素和响应面试验确定微胶囊制备工艺参数,利用扫描电镜、红外光谱和抗氧化活性对其进行表征,并考察不同温度、湿度、光照和氧气贮藏条件对菜芙蓉花黄酮微胶囊保留率的影响。结果表明:黄酮微胶囊最佳制备工艺为超声功率210 W、超声温度56℃、超声时间40 min、芯壁比1.6 mL:1 g,在此条件下制备的微胶囊的黄酮包埋率为96.89%;制备的微胶囊呈无定型玻璃状,红外光谱分析显示菜芙蓉花黄酮被壁材包裹,具有较好的抗氧化能力。微胶囊化能够有效提高菜芙蓉花黄酮的稳定性,可为新型食品天然抗氧化剂的开发应用提供理论依据。

黄葵素通过核因子κB信号改善老年糖尿病大鼠心肌缺血再灌注的研究

目的:探讨黄葵素对糖尿病心肌缺血再灌注老年大鼠的影响及其作用机制。方法:将老年大鼠按照简单随机法分为假手术组(只穿线不结扎)、模型组(构建糖尿病心肌缺血再灌注模型)、黄葵素低剂量组(75 mg/kg的黄葵素)、黄葵素高剂量组(150 mg/kg的黄葵素)、抑制剂组(10 mg/kg的核因子κB抑制剂BAY11-7082),高剂量+抑制剂组(150 mg/kg的黄葵素+10 mg/kg BAY11-7082)。观察比较大鼠心功能指标、心肌梗死面积、血清指标含量、心肌细胞凋亡率、心肌组织相关蛋白表达。结果:与模型组比较,黄葵素低剂量、黄葵素高剂量组、抑制剂组、高剂量+抑制剂组大鼠心肌梗死面积、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、原位末端转移酶标记法(Tunel)阳性细胞率、磷酸化核因子κB(p-NF-κB p65)、裂解胱天蛋白酶-3(Cl-caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平均显著降低(均P<0.05),左室射血分数(LVEF)、核因子κB抑制蛋白(IκBα)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)水平均显著升高(均P<0.05);与高剂量组比较,高剂量+抑制剂组大鼠心肌梗死面积、cTnT、CK-MB、LDH、MDA、Tunel阳性细胞率、p-NF-κB p65、Cl-caspase-3、Bax水平均显著降低(均P<0.05),LVEF、IκBα、Bcl-2水平均显著升高(均P<0.05)。结论:黄葵素可能通过调节核因子κB信号抑制心肌细胞凋亡、氧化应激改善糖尿病心肌缺血再灌注老年大鼠心功能。

黄蜀葵花总黄酮介导AKT1信号通路拮抗HepG-2细胞脂质沉积研究

目的:探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对棕榈酸(PA)诱导HepG-2细胞脂质沉积模型的干预效应及机制。方法:体外培养人肝源HepG-2细胞,应用PA处理以构建细胞脂质沉积模型,然后从黄蜀葵花中提取TFA,以TFA或蛋白激酶B(AKT)抑制剂作为干预剂,对PA诱导的细胞脂质沉积模型进行预处理,应用油红O染色、酶联免疫吸附实验和免疫印迹实验(Western blotting)检测细胞脂质代谢、AKT1和脂联素(APN)信号通路蛋白表达水平。结果:与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预后,细胞脂质沉积程度(%)、游离脂肪酸(FFAs)和甘油三酯(TG)水平降低,而APN水平升高(P<0.05)。Western blotting实验显示PA模型组AKT1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)表达水平上调而APN和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)水平下调(P<0.05)。与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预显示AKT1下调而APN水平上调,其下游信号GSK3β表达上调而SREBP-1表达下调(P<0.05)。结论:TFA拮抗PA诱导的HepG-2细胞脂质沉积可能与其介导AKT1抑制及APN信号通路激活有关。

黄蜀葵花总黄酮抗氧化及抗抑郁作用研究

对黄蜀葵花总黄酮抗氧化和抗抑郁作用进行研究。采用小鼠强迫游泳实验(FST)、悬尾实验(TST)、旷场实验(OFT)作为行为学实验模型考察黄蜀葵花总黄酮的抗抑郁作用;利用试剂盒检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)的含量考察黄蜀葵花总黄酮体内抗氧化作用;采用高效液相色谱法测定小鼠血清中色氨酸(Trp)、犬尿氨酸(Kyn)的含量及比值。结果表明:与普通组相比,黄蜀葵花总黄酮各组有效缩短了小鼠TST、FST的静止时间;黄蜀葵花总黄酮高剂量组(200 mg/kg)能有效降低小鼠血清中MDA质量含量,改善小鼠血清中SOD活力,提高小鼠血清中Trp/Kyn的比值。黄蜀葵花黄酮具有抗抑郁作用,其作用机制可能与黄酮的抗氧化作用、色氨酸与犬尿氨酸的代谢途径有关。

菜芙蓉醇提物金丝桃苷含量测定及对肿瘤细胞生长抑制作用

[目的]建立测定菜芙蓉（Abelmoschus manihot（L.）Medic）醇提物金丝桃苷含量的方法以及研究菜芙蓉醇提物对Hela肿瘤细胞生长的抑制效果。[方法]采用体积分数为80%的乙醇提取总黄酮,HPLC法测定菜芙蓉不同植株部位中金丝桃苷含量。色谱柱为伊利特C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液（V/V,60∶40）,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,检测波长为360 nm和进样量为10μl。另外,MTT法测定菜芙蓉提取物体外抗Hela肿瘤细胞活性。[结果]金丝桃苷在0.040.4 mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 8。菜芙蓉不同部位金丝桃苷含量分布为：花〉叶〉茎〉根〉籽,花中平均含量最高达4.002%。平均回收率和RSD值分别为99.23%和1.08%（n=6）。菜芙蓉黄酮提取物能够有效地抑制Hela细胞的生长,IC50约为228μg/ml。[结论]该方法准确、简便、重复性好,可作为菜芙蓉金丝桃苷定量分析方法;菜芙蓉总黄酮具有抑制肿瘤细胞生长的作用。

中药黄蜀葵花化学成分的分离与鉴定(Ⅱ)

目的研究中药黄蜀葵(Abelmoschus manihot(L.)Medic.)花的化学成分,为进一步开发利用该植物资源提供依据。方法采用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱以及高效液相色谱等手段进行分离纯化,并通过理化性质与光谱分析鉴定化合物的结构。结果从黄蜀葵花体积分数为95%的乙醇提取物的大孔吸附树脂洗脱物中分离鉴定了9个以槲皮素为母核的黄酮类化合物,分别为槲皮素(quercetin,1)、金丝桃苷(hyperoside,2)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside,3)、槲皮素-3-O-β-D-6″-乙酰葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-6″-acetylglucopyr-anoside,4)、槲皮素-3-O-刺槐糖苷(quercetin-3-O-robinoside,5)、槲皮素-3-O-芸香糖苷(quercetin-3-O-rutinoside,6)、槲皮素-3-O-β-D-木糖基-(1→2)-β-D-半乳糖苷(quercetin-3-O-β-D-xylopyranosyl(1→2)-β-D-galactopyranoside,7)、槲皮素-3′-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3′-O-β-D-glucopyranoside,8)以及槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside,9)。结论化合物4、5、7和9为首次从秋葵属植物中分离得到。

黄蜀葵花黄酮成分的研究

目的 :对黄蜀葵花 (AbelmoschusmanihotL Medic)总黄酮进行化学成分的研究。方法 :利用色谱和分部结晶方法进行成分分离 ,根据物理化学性质和波谱学手段对化合物进行结构鉴定。结果 :分离到 4个黄酮醇单糖苷 ,分别鉴定为棉皮素 3′ O β 葡萄糖苷 (Gossypetin 3′ O β glucoside ,1) ,异槲皮苷 (Isoquercetin ,2 ) ,金丝桃苷 (Hyperoside ,3)和槲皮素 3′ 葡萄糖苷 (Quercetin 3′ glucoside ,4 )。结论 :其中 1为新化合物 ,2为从该植物中首次分得。

中药黄蜀葵花化学成分的分离与鉴定(Ⅲ)

目的研究中药黄蜀葵(Abelmoschus manihot(L.)Medic)花的化学成分。方法采用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱以及HPLC等手段进行分离纯化,并通过理化性质与光谱分析方法鉴定了化合物的结构。结果从黄蜀葵花体积分数为95%的乙醇提取物中分离鉴定了9个化合物,分别为棉皮素8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(gossypetin 8-O-β-D-glucuronide,1)、棉皮素-O-β-D-葡萄糖-8-O-β-D-葡萄糖醛酸(gossypetin 3-O-β-glucopyranoside-8-O-β-glucuronopyranoside,2)、棉皮素3'-O-β-D-葡萄糖苷(gossypetin 3'-O-β-D-glucopyranoside,3)、tiliroside(4)、山奈酚3-O-[(3″-O-乙酰基-6″-O-(E)-对羟基桂皮酰基)]-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol 3-O-[3″-O-acetyl-6″-O-(E)-p-cou-maroyl)]-β-D-glucopyranoside,5)、槲皮素3-O-[β-D-木糖基(1→2)-(-L-鼠李糖基(1→6)]-O-β-D-半乳糖苷(quercetin 3-O[β-D-xylopyranosyl(1→2)-α-L-rhamnopyranosyl(1→6)-β-D-galactopyrano-side,6)、4-羟基苯甲酸β-D-葡萄糖酯(4-hydroxybenzoic acidβ-D-glucose ester,7)、原儿茶酸(proto-catechuic acid,8)、原儿茶酸3-O-β-D-葡萄糖苷(protocatecheuic acid 3-O-β-D-glucoside,9)。结论其中化合物2、4-9为首次从秋葵属中分离得到,并首次报道了化合物5、6、9在DMSO-d6中的光谱数据。

黄蜀葵总黄酮对大鼠急性不完全脑缺血损伤的保护作用

目的 :研究黄蜀葵总黄酮 (TFA)对大鼠急性不完全脑缺血损伤的保护作用。方法 :60只Wistar大鼠随机分成假手术组、生理盐水 (NS)对照组、TFA组和EGB阳性对照组 ,采用结扎双侧颈总动脉制作急性不完全性脑缺血模型 ,观察脑缺血后脑组织含水量、脑血管通透性和病理学改变。结果 :5 0 ,10 0mg·kg-1TFA和 10 0mg·kg-1EGB ,可明显抑制脑水肿的发生 ,与NS组相比 ,可明显改善脑组织病理学的改变。结论

黄蜀葵花的研究进展

黄蜀葵花为锦葵科秋葵属植物黄蜀葵Abelmoschus manihot(L.)Medic.的干燥花,民间应用历史悠久。近年来研究表明黄蜀葵花的黄酮类成分具有广泛的药理活性,本文对黄蜀葵花化学成分、提取方法、含量测定及药理作用的研究现状作一综述,提出了今后的研究和发展方向。

响应面分析法优化黄蜀葵花中金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素提取工艺的研究

采用响应面优化黄蜀葵花中金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素的提取工艺。在超声功率、提取时间、乙醇浓度、提取温度、料液比的单因素实验基础上,固定提取温度50℃、料液比0.1∶15 g/m L,利用响应面分析法优化,建立二次多项式回归方程模型,确定最佳提取工艺为:超声功率340 W、提取时间60 min、乙醇浓度为60%。经工艺验证,金丝桃苷得率为4.97 mg/g,异槲皮苷得率为4.84 mg/g、槲皮素得率为2.02 mg/g,与理论值的相对误差分别为2.5%、4.5%、6.9%。采用响应面设计分析得到最佳提取工艺条件具有较高的实用价值,可为工业化提取提供理论参考。

黄蜀葵种子中资源性化学成分分析与利用价值探讨

分别采用气相色谱-质谱联用法、超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法、紫外可见分光光度法、粗纤维测定法、BCA试剂盒法对黄蜀葵[Abelmoschus manihot(L.)Medic.]种子中的主要成分进行分析评价。结果表明,黄蜀葵种子含有丰富的脂肪酸类、可溶性总多糖、总纤维、可溶性蛋白、游离氨基酸类、核苷及碱基类成分,脂肪酸总量(棕榈油酸、棕榈酸、亚油酸、油酸、亚麻酸、硬脂酸)为55.47~102.17 mg/g,不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的78.01%~79.40%;可溶性总多糖、总纤维和可溶性蛋白含量分别为6.53%~6.68%、12.77%~14.26%、10.36%~14.51%;检出的19种游离氨基酸类和7种核苷及碱基类成分中,氨基酸类成分较为丰富100.82~101.51 mg/g,其中必需氨基酸约占游离氨基酸总量的25%;核苷类成分含量较低(3.01~3.11 mg/g)。研究结果为黄蜀葵种子的资源化利用提供了理论依据。

黄蜀葵花中总黄酮的含量测定

目的 测定黄蜀葵花中总黄酮的含量。方法 以芦丁为对照品比色法测定。结果 回归方程A=0 .4 5 4 8C - 0 .0 174 0 (r=0 .9999) ,加样回收率为 96 .6 8% ,RSD =1.31%。结论 测定结果准确 。

菜芙蓉总黄酮纯化及其体内抗氧化性

为研究菜芙蓉总黄酮(TFA)的纯化条件及体内抗氧化性,采用AB-8大孔树脂静态吸附-洗脱工艺,控制纯化条件为上样液质量浓度0.1g/mL,pH值为3.5,解吸液乙醇体积分数为70%,解吸液体积与树脂质量比为20∶1(mL/g)。在最优纯化条件下,黄酮的质量分数提高到48.50%;与正常对照组相比,实验组小鼠器官指数无显著差异(P>0.05);小鼠血清和肝组织中MDA含量显著低于正常对照组(P<0.05),而CAT,GSH-Px和SOD活性均高于正常对照组且具有明显的量效关系。实验结果表明,TFA具有良好的体内抗氧化效果。

黄蜀葵花总黄酮对大鼠湿热型慢性肾炎的作用及其对红细胞免疫黏附功能的影响

目的观察黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot (L) Medic,TFA)对湿热型慢性肾炎的作用及其对红细胞免疫黏附功能的影响。方法采用葡萄球菌肠毒素B分次由尾静脉注射、牛血清清蛋白隔日灌胃及完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂分次皮下注射复制大鼠慢性肾炎湿热证模型。8周后模型复制成功,将大鼠分为模型组,泼尼松组,黄葵胶囊组,TFA高(694.4 mg/kg)、中(347.2 mg/kg)、低(173.6 mg/kg)剂量组,各组分别每日灌胃给药。连续给药4周后采用考马斯亮蓝法测定尿蛋白(urine pro-tein,UP),双缩脲法测定血清总蛋白(total protein,TP),溴甲酚绿法测定白蛋白(albumin,Alb)、苦味酸法测定血肌酐(creatinine,Cr),二乙酰一肟法测血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);聚乙二醇(polyethy-lene glycol,PEG)沉淀法测定血清循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC);酵母菌花环法测定红细胞免疫复合物(red blood cell-immune complex,RBC-IC)、红细胞补体C3b(red blood cell-complementC3b,RBC-C3b)花环率。结果 TFA各剂量组UP、Cr、CIC、RBC-IC显著降低,Alb、RBC-C3b显著升高;系膜细胞增殖和基质增生被显著抑制;TFA中剂量组BUN显著降低。与黄葵胶囊组比较,TFA高、中剂量组血Cr显著降低,其余各项指标均无显著性变化。结论 TFA能够提高湿热型慢性肾炎大鼠的红细胞免疫黏附功能、抑制系膜细胞增殖和基质增生,改善肾功能;TFA为黄葵胶囊的有效组分。

黄蜀葵提取物对大鼠背部深Ⅱ度烫伤的治疗作用

为观察黄蜀葵提取物(HSK)促进SD大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合作用,利用超级控温烫伤仪制备大鼠深Ⅱ度烫伤模型,以美宝湿润烧伤膏(MEBO)为阳性药,观察烫伤皮肤创面外涂HSK后开始结痂和脱痂时间、愈合时间、创面愈合率和瘢痕形成情况,并取烫伤部位全层皮肤做HE染色切片观察组织损伤和修复状况.结果显示:与模型组相比,HSK给药组大鼠烫伤创面开始结痂、脱痂及完全愈合的时间均明显缩短,各时间点创面愈合率显著提高,烫伤创面愈后瘢痕面积显著减小,烫伤皮肤病理形态显著改善.结果表明:HSK能显著促进烫伤创面的愈合,是一种良好的外用烫伤治疗药物.