分光光度法测定杜仲雄花和叶中的总黄酮

采用NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH显色法和AlCl_3比色法分别测定杜仲雄花和杜仲叶中总黄酮,研究杜仲中总黄酮含量测定的最佳方法,并对杜仲雄花和杜仲叶中总黄酮含量差异进行分析。结果表明:NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH显色法干扰严重,测定结果偏高,AlCl_3比色法操作简便,重复性好,结果合理,在5.0~30μg·m L^(-1)范围内,芦丁浓度与吸光度呈良好线性关系(R^2=0.999 7),平均加样回收率达99.27%,RSD为1.21%,适合杜仲中总黄酮含量的大量测定;杜仲雄花和杜仲叶中总黄酮测定结果显示,不同材料间总黄酮含量差异较大,且雄花中总黄酮含量明显高于叶,为杜仲资源的开发利用提供了一定的参考。

荞麦花叶总黄酮的舒张血管作用及其机制

目的探讨荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对大鼠离体胸主动脉的舒张作用与机制。方法采用离体血管环灌流装置,经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变化;激光扫描共聚焦显微镜技术检测血管平滑肌细胞内钙浓度。结果在苯肾上腺素(phenylephrine,PE)10-6mmol.L-1或KCl60 mmol.L-1预收缩的保留内皮和去除内皮的血管环中,TFBFL均能够浓度依赖性的引起血管舒张;相对于去除内皮的血管环,TFBFL对保留内皮的血管环的舒张作用更明显。保留内皮的血管环用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME(100mmol.L-1)预孵后,TFBFL诱导的血管舒张作用明显减弱。在无钙灌流液中,用KCl 60 mmol.L-1去极化去除内皮的血管环后,逐渐加入Ca2+,使血管环呈浓度依赖性收缩;TFBFL(0.8 mg.L-1)孵育10 min后可使CaCl2的量效曲线向下移位且可使PE在无钙灌流液中诱导的血管环最大收缩幅度明显降低。激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内钙的结果表明,TFBFL浓度依赖性(0.4、0.8 mg.L-1)的抑制了静息状态平滑肌细胞质内钙浓度的升高。结论 TFBFL能够浓度依赖性舒张大鼠胸主动脉,其作用机制可能是降低细胞内游离Ca2+浓度;对于保留内皮的血管环,TFBFL也作用于血管内皮细胞,促进一氧化氮的释放,引起血管舒张。

吸光光度法测定荞麦花叶中总黄酮

荞麦花叶样品经由乙醚浸泡除杂,用甲醇索式抽提,并以芦丁为对照品,采用吸光光度法测定总黄酮的含量.建立了芦丁浓度与吸光度关系的回归方程,方法的回收率为99.2%～108.2%,精密度为0.35%.此方法操作简单易行,结果稳定可靠.

鬼箭锦鸡儿花和叶中总黄酮含量的测定

利用分光光度法,以芦丁为对照品,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色方法,在最大吸收波长510 nm处对青海不同产地的藏药鬼箭锦鸡儿花和叶中的总黄酮含量进行测定,建立了藏药鬼箭锦鸡儿花和叶中总黄酮含量的测定方法。芦丁测定的线性方程是A=0.0117c-0.0002,相关系数r=0.9998(n=6),测得方法的平均回收率为100.2%(n=6),RSD=1.24%。实验结果显示该方法测定样品的结果准确可靠、快速、重现性好。

荞麦花叶总黄酮对2型糖尿病大鼠心肌纤维化的保护作用及其机制

目的:探讨荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对2型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)加高脂饲料的方法建立2型糖尿病大鼠模型。造模成功的12只大鼠随机分为模型(DM)组(n=6)和TFBFL治疗组(n=6),同时设正常对照组(n=8),正常对照组和DM组大鼠给予10mL·kg-1·d-1纯净水灌胃;TFBFL治疗组大鼠给予200mL·kg-1·d-1 TFBFL灌胃。各组大鼠每天给药1次,连续8周。检测各组大鼠体质量(BW)、心脏质量指数(HWI)、血糖水平(FBG)及心功能指标[心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左心室舒张期末压(LVEDP)和左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)]。电镜下观察各组大鼠心肌细胞超微结构,Masson染色观察各组大鼠心肌组织中的胶原水平,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中TGF-β1蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,DM组大鼠HWI、FBG和LVEDP明显升高(P<0.05或P<0.01),而BW、LVSP、HR和±dp/dtmax则明显降低(P<0.05或P<0.01);与DM组比较,TFBFL组大鼠FBG和LVEDP水平明显降低(P<0.01),而LVSP、HR和±dp/dtmax明显升高(P<0.05或P<0.01)。TFBFL组大鼠BW和HWI与DM组比较差异无统计学意义(P>0.05)。电镜下观察和Masson染色检测,与DM组比较,TFBFL组大鼠心肌组织形态明显改善,胶原水平降低。Western blotting检测,与正常对照组比较,DM组大鼠心肌组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与DM组比较,TFBFL组大鼠心肌组织中TGF-β1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:TFBFL对2型糖尿病大鼠心肌纤维化具有保护作用,其机制与抑制心肌组织中TGF-β1表达有关联。

荞麦花叶总黄酮对心律失常大鼠心肌细胞凋亡及Wnt/β-catenin/PPARγ通路的影响

探讨荞麦花叶总黄酮对心律失常大鼠心肌细胞凋亡及Wnt/β-连锁蛋白(β-catenin)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)通路的影响。将SD大鼠随机分为对照组、模型组、荞麦花叶总黄酮低剂量(20 mg·kg^(-1))组、荞麦花叶总黄酮中剂量(40 mg·kg^(-1))组、荞麦花叶总黄酮高剂量(80 mg·kg^(-1))组、盐酸普萘洛尔(2 mg·kg^(-1))组,每组12只大鼠,通过舌下静脉注射1 mL·kg^(-1)的0.002%乌头碱,将除对照组外的其余各组大鼠制备为心律失常模型,以药物分组干预处理后,检测各组大鼠心律失常情况、心肌细胞凋亡、心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平、心肌组织凋亡及Wnt/β-catenin/PPARγ通路相关蛋白表达。相比对照组,模型组大鼠心律失常评分、室性早搏次数、室颤持续时间、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、血清IL-6及PGE2水平、心肌组织Bax、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平显著升高,心肌组织GSH-Px及CAT水平、心肌组织Bcl-2、PPARγ蛋白表达水平显著降低;相比模型组,药物干预组大鼠心律失常评分、室性早搏次数、室颤持续时间、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、血清IL-6及PGE2水平、心肌组织Bax、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平降低,心肌组织GSH-Px及CAT水平、心肌组织Bcl-2、PPARγ蛋白表达水平升高,且荞麦花叶总黄酮各组呈剂量依赖性;荞麦花叶总黄酮高剂量组与盐酸普萘洛尔组相比,大鼠各指标水平差异无统计学意义。荞麦花叶总黄酮可抑制Wnt/β-catenin通路激活,上调PPARγ表达,减轻心律失常大鼠心肌组织氧化应激及炎症损伤,减弱心肌细胞凋亡,改善大鼠心律失常症状。