黑果枸杞和黄果枸杞的广泛靶向代谢组学分析

目的:全面分析和鉴定枸杞果实中的代谢物,比较不同品种间代谢物的差异,为深入挖掘和利用不同品种枸杞提供参考。方法:以黑果枸杞和黄果枸杞干果为材料,利用超高效液相色谱-串联质谱进行广泛靶向代谢组学分析,鉴定和比较两种枸杞的代谢物。结果:两种枸杞果实中共检测出1098种代谢产物,包括氨基酸及其衍生物、酚酸、黄酮、生物碱、脂质等12类,其中酚酸、黄酮和生物碱3类代谢产物占比最高。通过主成分分析和聚类分析发现,黄果枸杞与黑果枸杞相比,存在235种差异代谢物上调和252种差异代谢物下调。京都基因与基因组百科全书富集分析发现,不同品种枸杞间的差异代谢物主要涉及黄酮生物合成,托烷、哌啶和吡啶生物碱的生物合成,次生代谢物的生物合成,ABC转运等途径。结论:不同品种对枸杞代谢物的含量影响较大,本研究结果对黑枸杞和黄枸杞的开发和利用提供一定的理论指导。

黑果枸杞叶总黄酮的体外抗氧化活性研究

通过测定黑果枸杞叶总黄酮的还原能力,以及对小鼠血清羟自由基清除能力、小鼠红细胞溶血性、小鼠肝组织脂质过氧化产物MDA生成的影响,探讨黑果枸杞总黄酮的体外抗氧化活性。结果表明:黑果枸杞总黄酮在化学本质上具有一定的抗氧化能力,能显著抑制小鼠红细胞溶血,IC50为0.124mg/mL;能增强小鼠血清抗活性氧能力,抑制小鼠肝组织脂质过氧化产物MDA生成,并显示出一定的量效关系。说明黑果枸杞叶总黄酮在一定浓度范围内具有抗氧化活性。

大孔树脂分离纯化黑果枸杞总黄酮的研究

目的:研究大孔树脂分离纯化黑果枸杞总黄酮的工艺条件及参数。方法:利用单因素试验和多因素正交试验研究大孔树脂分离纯化黑果枸杞总黄酮的最佳工艺条件。结果:AB-8犁大孔树脂分离纯化黑果枸杞总黄酮的最佳工艺条件为:上样液浓度0.200mg/ml,流速2ml/min,pH5;以95%的乙醇洗脱,流速4ml/min,用量为5倍柱床体积。AB-8树脂的饱和吸附量为0.64691mg/g树脂,重复利用9次吸附最仍然很好。采用该工艺分离纯化黑果枸杞总黄酮含量达28%。结论:AB-8树脂分离纯化黑果枸杞总黄酮效果较好,工艺的重复性和稳定性良好,适合于工业化生产。

黑枸杞花色苷提取工艺的优化

以总花色苷含量和DPPH·清除率为评价指标,在考察总花色苷含量测定方法的基础上,对黑枸杞花色苷的提取工艺进行优化。经单因素实验和L9(34)正交实验,选择提取方式为静置法,提取溶剂为1%甲酸,提取温度为75℃,料液比为1∶30 g/m L,每次提取时间为1 h和提取次数为3次。优化工艺的总花色苷含量和DPPH·清除率分别达到(450.55±5.91)mg/100 g DW和72.53%±0.60%,相比基础工艺分别提高了17.22%和21.96%。

响应面法优化超声辅助提取黑果枸杞叶片总黄酮的工艺研究

采用单因素试验,研究乙醇浓度、料液比、超声时间、超声温度及超声功率对总黄酮提取率的影响,依据Box-Behnken的中心组合设计,采用四因素三水平响应面法优化从黑果枸杞叶中提取总黄酮的最佳工艺条件。结果表明:最佳工艺为,乙醇提取浓度为70%,超声功率400 W,料液比为1∶25,超声提取温度58℃,黑果枸杞叶片总黄酮的平均得率为1.62%。与理论预测值的相对误差为1.22%。说明响应面法优化超声提取黑果枸杞叶片总黄酮的工艺条件稳定可行。

Plackett-Burnman联合响应面法优化黑果枸杞黄酮提取工艺及抗氧化性研究

Plackett-Burnman(PB)联合响应面法优化黑果枸杞黄酮提取工艺并评价其抗氧化性。依次通过PB实验设计、最陡爬坡实验设计研究了5种影响因素对提取率的影响,确定了显著性影响因素及响应面中心,采用Box-Behnken(BB)实验设计优化了提取工艺;采用FRAP法及ABTS、DPPH法评价了黑果枸杞黄酮的抗氧化性,并与抗坏血酸进行了平行比较。结果表明,最佳提取工艺参数为:51%乙醇(体积分数)与原料之比为30:1(mL/g),62℃、240 W超声辅助提取42 min,提取率可达42.0974 mg/g(原料),与理论预测值的相对标准偏差为3.24%;FRAP法及ABTS、DPPH法均表明,黑果枸杞总黄酮还原力强于抗坏血酸,其对ABTS、DPPH自由基清除的IC_(50)分别为0.0252、0.0272 mg/mL,均较抗坏血酸强,且二者抗氧化性均与浓度呈量效关系,为开发黑果枸杞资源、拉长其产业链提供了一定的理论基础。

刈割对NaCl胁迫下枸杞幼苗生物量、总黄酮及K^+、Na^+含量的影响

以不施用NaCl处理为对照,研究了盆栽试验条件下刈割1次、刈割2次处理及0,0.3,0.6,0.9g/kg4个NaCl胁迫水平(分别以S0、S1、S2和S3表示)对中华枸杞和黑枸杞幼苗生物量、总黄酮及K+和Na+含量的影响。结果表明:不同浓度NaCl胁迫下,刈割2次处理中华枸杞与黑枸杞幼苗总生物量显著增加,分别比刈割1次处理增加0.50~2.33g/盆和0.96~5.20g/盆,且NaCl水平越高,差异越明显;不同刈割措施下,中华枸杞均以S2处理总黄酮含量最高,为9.56~12.8mg/g,黑枸杞在刈割2次和刈割1次时,总黄酮含量分别以S1和S3处理最大,为8.52mg/g,15.8mg/g和9.18mg/g,且刈割2次处理总体有利于中华枸杞和黑枸杞总黄酮的累积;不同刈割措施下,中华枸杞与黑枸杞幼苗K+、Na+含量均以幼叶高于嫩茎,中华枸杞叶、茎中Na+含量以S2处理最高,黑枸杞则以S3处理最高;高浓度NaCl胁迫下(S2与S3处理),枸杞叶中的K+/Na+比值均以中华枸杞小于黑枸杞。

白刺果汁和黑果枸杞果汁中花色苷与总多酚的测定

实验采用紫外-可见光分光光度法测定白刺果汁和黑果枸杞果汁中的花色苷和总分酚的含量，白刺果汁中含有花色苷和总多酚分别是0．08mg／mL、5．644mg／mL，黑果枸杞果汁含有花色苷和总多酚分别是0．43mg／mL、3．186mg／mL。该方法操作简单、灵敏度高，适宜检测花色苷和总多酚的含量。该实验为以后的白刺果汁和黑果枸杞果汁的开发与利用提供理论依据。

黑枸杞总黄酮稳定性的研究

采用微波辅助提取黑枸杞中总黄酮,研究光照、温度、pH、金属离子、氧化剂、还原剂和食品添加剂对黑枸杞黄酮稳定性的影响。结果表明:黑枸杞黄酮在避光、温度低于70℃及pH为6.0~8.0的条件下较稳定,70℃以上温度和长时间自然光照均明显影响黑枸杞黄酮的稳定性;金属离子Na^+、K^+、Mg^(2+)、Ca^(2+)对黑枸杞黄酮稳定性均无明显影响,Fe^(3+)、Fe^(2+)、Al^(3+)、Cu^(2+)影响其稳定性;氧化剂H_2O_2、还原剂Na_2SO_3以及食品添加剂维生素C、柠檬酸和苯甲酸钠对黑枸杞黄酮稳定性均有明显影响,而葡萄糖和蔗糖对黑枸杞黄酮稳定性无影响。

藏药黑果枸杞开发利用的研究

本文论述了黑果枸杞的资源分布、营养成分、果实色素、化学成分和开发前景。

黑果枸杞中黄酮类化合物及其生物活性的研究进展

黑果枸杞是一种独特的药食两用植物,具有很大的开发潜力。本文主要阐述黑果枸杞中黄酮类化合物的研究现状及生物活性,以期为黑果枸杞的进一步开发和利用提供参考依据。

响应面分析法优化黑果枸杞总花色苷提取工艺及结构鉴定

以新疆产黑果枸杞为原料,采用溶剂浸提法提取黑果枸杞总花色苷。通过Box-Behnken响应面实验设计和DesignExpert8.0.6分析软件,以浸提温度、浸提时间、乙醇浓度和液料比四个因素为自变量,浸提液吸光度A为响应值,研究各个变量及其交互作用对黑果枸杞总花色苷浸提率的影响。模拟得到回归方程,并确定最佳工艺条件为:浸提温度58℃、浸提时间74min、乙醇浓度65%、液料比55:1(m L/g)。总花色苷纯化分级后,利用超高效液相色谱-电喷雾串联高分辨质谱(UPLC-DAD-ESI-QTOF-MS/MS)技术对其中流分HG-15进行研究。结果表明,黑果枸杞总花色苷HG-15流分中含有矮牵牛素-3-O-(6-O-对香豆酰)芸香糖苷-5-O-葡萄糖苷(Petunidin-3-O-(6-O-p-coumaryl)-rutinoside-5-O-glucoside)、锦葵素-3-反-对香豆酰芸香糖苷-5-O-葡萄糖糖苷(Malvidin-3-trans-pcoumaryl-rutinoside-5-O-glucoside)、飞燕草素-3-O-(6-O-乙酰)葡萄糖苷(Delphinidin-3-O-(6-Oacetyl)-glucoside)等六种主要花色苷。

柴达木黑果枸杞抗氧化物组分分析

为探究柴达木盆地黑果枸杞抗氧化物质含量与特性,利用福林酚法、分光光度法和反相高效液相色谱—二极管阵列检测法等方法对柴达木盆地成熟黑果枸杞干果进行检测。结果表明:柴达木盆地黑果枸杞中总多酚、总黄酮和维生素E的质量分数分别为17.92 mg·g^-1、2.39%和0.51 mg·g^-1;共检测到12种花青素类化合物,矮牵牛素(m/z317)、飞燕草素(m/z303)、锦葵素(m/z331)和矢车菊素(m/z287)是其主要的母核物质,并通过进一步分析花青素结构,对其中10种花青素类化合物命名;不同地区黑果枸杞多酚和花青素的质量分数及各组分占比均不同。研究结果为柴达木盆地黑果枸杞的人工选育栽培和开发利用提供了数据支撑和理论基础。

响应面法优化超声波-微波协同提取黑果枸杞叶总黄酮工艺

利用响应面法对超声波-微波协同提取黑果枸杞叶总黄酮的工艺进行优化,在单因素试验基础上,以微波功率、液料比、提取时间、乙醇浓度为主要因素,总黄酮提取率为响应值,通过响应面分析法进行四因素三水平BoxBehnken试验对提取条件进行优化。结果显示,各因素对黑果枸杞叶总黄酮提取率相对影响程度为:液料比>乙醇浓度>提取时间>微波功率。且液料比18.9∶1(mL/g),乙醇浓度69%,提取时间9.9 min,微波功率175 W为最佳提取条件,此时黑果枸杞叶总黄酮提取率为(0.997±0.015)%。理论预测值为1.01%,结果与预测值基本符合,证明该模型有效,工艺稳定可行。

Box-Behnken设计响应面法优化黑果枸杞总黄酮纯化工艺

目的应用Box-Behnken设计响应面法优化黑果枸杞总黄酮纯化工艺条件及相关参数。方法考察6种大孔吸附树脂静态、动态吸附和解吸性能,用单因素试验分别对上样浓度、上样体积、上样pH、洗脱液浓度、洗脱液体积和洗脱流速进行考察,以黑果枸杞总黄酮纯化后含量为指标,再从6个单因素中选出对解吸附试验影响最显著的3个因素进行三因素三水平Box-Behnken设计响应面实验。结果NKA-9型大孔树脂为纯化黑果枸杞总黄酮的最佳树脂,最佳纯化工艺条件为总黄酮提取液浓度为4 mg/mL,pH为4.0,按5 BV进行上样,再用3 VB的80%乙醇在2 mL/min流速下进行洗脱,黑果枸杞总黄酮含量可以从4.54%提高到43.19%。结论此工艺对黑果枸杞总黄酮的纯化效果较好,工艺简单且稳定性良好,适用于工业化生产。

黑果枸杞中总黄酮的降脂活性研究

目的研究黑果枸杞中总黄酮提取物对高脂血症SD大鼠的降血脂作用。方法选取造模成功的SD大鼠60只,随机分为6组(n=10),分别为正常对照组(NC组)、高脂血症模型组(MC组)、辛伐他汀组(3.3 mg/kg,S组)以及黑果枸杞总黄酮粗提物高剂量组(100 mg/kg,HF组)、中剂量组(50 mg/kg,MF组)和低剂量组(25 mg/kg,LF组)。连续灌胃给药4周,正常组喂养普通大鼠饲料,其余组喂养高脂饲料,给药结束后,采用酶标仪检测血清和肝组织液中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的浓度以及SD大鼠试验前后的体重变化率和肝指数等指标。结果黑果枸杞总黄酮中、高剂量组大鼠的血清和肝组织中TG、TC和LDL-C值与模型组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与高脂血症模型组相比,黑果枸杞总黄酮粗提取物中、高剂量组大鼠的血清和肝组织中HDL-C值增高,差异有统计学意义(P<0.05);同辛伐他汀组与高脂血症模型组比较,黑果枸杞总黄酮粗提取物中、高剂量组肝指数显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黑果枸杞总黄酮粗提物对患有高脂血症的SD大鼠有较好的降脂活性。

黑果枸杞叶黄酮降血脂及抗氧化活性的研究

目的:探讨黑果枸杞叶黄酮的降血脂及抗氧化活性。方法:昆明(KM)雄性小鼠72只适应环境1w后,随机分为6组(n=12只/组),即正常对照组、高脂模型组、辛伐他汀组,黄酮低、中、高剂量组。除正常对照组外,其他各组饲喂高脂饲料诱发高脂血症,每周的固定时间称量小鼠体质量1次,按体重更换1次剂量。试验第42d取血后解剖小鼠,检测血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C和T-AOC含量,以及肝组织匀浆SOD、GSH-Px酶活力和MDA含量。结果:与正常对照组相比,高脂模型组血浆TC、TG、HDL-C含量极显著升高(P<0.01),LDL-C含量极显著降低(P<0.01),说明高脂模型复制成功。与高脂模型组相比,黄酮灌胃组TC、TG和LDL-C含量极显著(P<0.01)降低,HDL-C含量极显著升高(P<0.05)。同时,血浆总T-AOC及肝组织匀浆SOD和GSH-Px酶活力显著升高(P<0.05),MDA产生极显著降低(P<0.01)。结论:黑果枸杞叶黄酮具有降血脂和抗氧化活性,可以作为预防动脉粥样硬化的新药来源。

黑果枸杞总黄酮对高脂模型小鼠抗氧化活性的影响

目的:研究黑果枸杞总黄酮的体内抗氧化活性。方法:利用高脂血症小鼠模型进行试验。结果:黑果枸杞总黄酮可以提高小鼠血浆T-AOC、肝脏GSH-Px、SOD酶活力,降低MDA生成量。结论:黑果枸杞总黄酮具有体内抗氧化生物活性,可以作为预防动脉粥样硬化的新药来源。

基于生物信息学探讨黑果枸杞总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制

本文旨基于生物信息分析揭示非酒精性脂肪肝的关键基因,并基于超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC/MS-MS)、生物信息及分子对接技术识别并探究黑果枸杞总黄酮成分及其治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)的作用机制,为其药效物质基础研究提供参考依据。本研究用GSE89632数据集,其中包括39名NAFLD患者和24名健康对照组。Limma包分析得到3375个差异基因,再通过WGCNA分析得到19个模块和95个最相关基因。黑枸杞总黄酮通过进行定性分析和靶点预测得到71个活性成分和375个相关基因。疾病基因和成分靶点基因交集得到24个基因,用CytoHubba筛选出10个Hub基因。通过DAVID数据库得到KEGG通路9条,GO分析条目33条。分子对接结果表明,大多数黑果枸杞总黄酮成分与关键靶点具有较好的结合力。生存分析结果中VEGF与HCC的生存分析密切相关。免疫细胞浸润相关性评估分析结果表明,Hub基因与幼稚B细胞、γδT细胞、单核细胞等8种免疫细胞相关。本研究揭示了非酒精性脂肪肝的关键基因、明确了黑果枸杞总黄酮成分、预测了黑枸杞总黄酮成分治疗非酒精性脂肪肝的作用机制并初步验证了其靶点,为深入阐明黑果枸杞总黄酮的药效物质基础及作用机制提供了实验及理论依据。

黑果枸杞及其白色果实F3′5′H基因启动子克隆及活性分析

通过3次染色体步移克隆出黑果枸杞及其白化果实F3′5′H基因的启动子片段并测序。分析发现2个启动子序列的同源性高达90.3%,对启动子序列进行预测,发现两者中均具有TATA-Box、CAAT-Box、TCrich repeats、WUN-motif、Sp1、Box I、G-box、skin-1motif及ARE元件。另外在黑果枸杞启动子中预测到与茉莉酸甲酯响应相关的元件TGACG-motif,而在黑果枸杞白化果实启动子中没有预测到。将2个启动子片段与GUS报告基因融合构建植物表达载体,利用农杆菌介导的瞬时转化法转化烟草叶片,通过组织化学染色来确定启动子的启动活性。结果表明2个启动子均具有启动活性,利用荧光定量对2个启动子所驱动的GUS基因的表达量进行了分析,结果表明黑果枸杞启动子所驱动的GUS基因的表达量是黑果枸杞白化果实的3.09倍。