毛头牛蒡子总木脂素有效部位的化学成分研究

研究毛头牛蒡子总木脂素有效部位中的化学成分,采用紫外分光光度法测定其中总木脂素含量,采用高效液相色谱法测定其中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,结果表明,毛头牛蒡子总木脂素有效部位中总木脂素含量为95.68%,牛蒡苷含量为55.71%,牛蒡苷元含量为2.99%。通过对毛头牛蒡子总木脂素有效部位中化学成分进行分析,为进一步研究其活性打下相关基础。

波棱瓜子总木脂素对APAP诱导肉鸡急性肝损伤的保护作用

为探究波棱瓜子总木脂素提取物对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)所致鸡肝损伤的保护作用,将50只白羽肉鸡分为溶媒对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)、APAP模型对照组、波棱瓜子总木脂素低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组。各组受试鸡均灌胃相应溶媒或药物,连续7 d,于末次给药后2 h,除溶媒对照组外,其余各组受试鸡腹腔注射400 mg/kg APAP进行急性肝损伤造模。APAP造模16 h后对受试动物进行肝脏系数和血清的生化指标测定,HE组织病理切片观察肝组织损伤情况。结果显示,与APAP模型对照组比较,波棱瓜子总木脂素各剂量组的肝脏系数显著降低(P<0.01),血清谷草转氨酶(AST)含量明显下降(P<0.01),血清谷丙转氨酶(ALT)含量明显下降(低、高剂量组P<0.05,中剂量组P<0.01)。组织病理学检查结果显示,波棱瓜子总木脂素各剂量组肝细胞坏死的程度和范围比APAP模型对照组减轻。表明波棱瓜子总木脂素对APAP诱导的白羽肉鸡急性肝损伤具有一定的保护作用。

波棱瓜子总木脂素的急性和亚慢性毒性试验

旨在用小鼠急性毒性试验和大鼠亚慢性毒性试验评价波棱瓜子总木脂素的安全性。在24只ICR小鼠急性经口毒性试验中,设单次最大给药量(5000 mg/kg),给药后连续观察7 d;在亚慢性毒性试验中,40只SD大鼠分为对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)和波棱瓜子总木脂素低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)和高(400 mg/kg)剂量组进行灌胃给药,每天1次,连续给药30 d,灌胃结束后测定大鼠体重、采食量、血液指标、生化指标、脏器系数和病理组织学变化。结果:在小鼠急性毒性试验中,波棱瓜子总木脂素对ICR小鼠的LD50>5000 mg/kg,按照外源化合物急性毒性分级标准波棱瓜子总木脂素属于实际无毒;大鼠亚慢性毒性试验中,与对照组比较,波棱瓜子总木脂素各剂量组体重、采食量、血液学、血液生化学、脏器系数均无显著差异(P>0.05),组织病理学检查结果未见与波棱瓜子总木脂素毒性有关的病理变化。综上,波棱瓜子总木脂素临床合理剂量使用安全性高。

石蝉草总木脂素含量测定方法建立及提取工艺优选

[目的]建立石蝉草总木脂素含量测定的方法并通过正交试验优选石蝉草总木脂素的最佳提取工艺。[方法]以五味子乙素为对照品绘制标准曲线,采用变色酸-硫酸显色体系,紫外-可见分光光度法测定石蝉草乙醇提取物中总木脂素含量;采用L_(9)(3^(4))正交试验法,以总木脂素含量为考察指标,优选石蝉草总木脂素的提取工艺。[结果]五味子乙素在4.00~24.00μg/mL线性关系良好(R^(2)=0.9961),平均回收率为97.68%,RSD为1.11%,石蝉草总木脂素优化的提取工艺为8倍量80%乙醇回流提取3次,每次2 h。[结论]该含量测定方法准确、简便、经济,适用于石蝉草总木脂素的含量测定,优选得到的提取工艺可为石蝉草总木脂素的提取提供参考。

五加五味软胶囊研制与质量评价

研究五加五味软胶囊的制备工艺,并对其进行质量评价.以基质、药粉粒度、助悬剂、助溶剂以及其他辅料为单因素筛选最佳处方;以胶囊收率、扎囊现象为评价指标,以软胶囊机进料口、温度、转速等考察因素,采用正交试验筛选制备工艺,并对产品进行质量评价研究.采用豆油作为内容物基质,药粉过100目筛,助悬剂蜂蜡用量为4%,助溶剂吐温-80用量为0.5%,囊壳配比明胶∶甘油∶纯化水为1.0∶0.35∶1.0,静置24 h.制备工艺条件为进料口温度50℃,转速比1.75∶1,晾晒干燥时间6 h.制备的五加五味软胶囊囊壳呈现淡黄色,内容物呈现黄色,软胶囊均完整光洁,无黏结、变形、渗漏,偶见有囊壳破损的现象.装量差异限度在±10%,崩解时限小于60 min.五加五味软胶囊中含五味子醇甲、五味子甲素、五味子甲素和紫丁香苷的量分别为(3.66±0.03)、(0.56±0.01)、(1.67±0.01)mg/g和(1.42±0.01)mg/g.本制备工艺所得的软胶囊质量稳定可控,有利于发挥两药的协同作用,具有广阔的市场前景.

五味子总木脂素超声波微波协同辅助提取工艺及其主要成分含量

目的 优化五味子中总木脂素的提取工艺,并对其主要成分进行含量测定。方法 以提取时间、料液比、微波功率和超声波功率为单因素,研究各因素对五味子总木脂素得率的影响;在此基础上,按L9(34)设计正交试验,对超声波微波协同辅助提取工艺进行优化;采用超高效液相色谱(ultra-high performance liquid chromatography,UPLC)法对主要成分进行含量测定。结果 五味子总木脂素最优提取工艺为:提取溶剂为80%的乙醇,料液比为1∶20,提取温度为60℃,微波功率为150 W,超声波功率为200 W,提取时间为30 min。在此条件下所得五味子总木脂素的含量和得率分别为48.31%和8.55%,五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素7个化学成分含量分别为4.22%、1.04%、0.28%、0.88%、1.60%、1.71%和0.05%。结论 该方法准确性及重现性好,提取时间短,效率高,操作简便,可为后续五味子总木脂素功能性及其机制研究提供参考。

藏药波棱瓜子总木脂素对ANIT诱导的小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的小鼠肝内胆汁淤积(intrahepatic cholestasis,IC)型肝损伤的保护作用及其作用机制。方法 将70只小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组、TLHPS各剂量组,各组连续给药7 d,在第5天给药2 h后,除正常组灌胃橄榄油溶液外,其余各组小鼠给予ANIT溶液造模。之后按照原剂量继续给药,造模48 h后,对各组小鼠进行摘眼球采血,并摘取肝脏。检测各组小鼠血清中肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA);炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及肝脏抗氧化应激因子谷胱甘肽(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT);采用HE染色检测肝脏病理变化;Western Blot法检测小鼠肝组织中NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组肝脏受损情况严重,ALT、AST、ALP酶活力明显升高(P<0.01),DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显升高(P<0.01),CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显降低(P<0.01),NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,联苯双酯组及TLHPS各给药组ALT、AST、ALP酶活力明显降低(P<0.01),DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显降低(P<0.01),CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显升高(P<0.05,P<0.01),NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。与联苯双酯组比较,TLHPS(0.4 g·kg^(-1))组ALT、AST、ALP、TBA、TBIL、DBIL含量明显升高(P<0.05,P<0.01),TLHPS各给药组SOD含量明显降低(P<0.01),TLHPS(0.05 g·kg^(-1))给药组JNK、p38、IL-1β蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01),TLHPS(0.4、0.2、0.1 g·kg^(-1))给药组NF-κB蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01),其余各组差异均无统计学意义。病理切片显示TLHPS能改善肝脏受损情况。结论 TLHPS对IC型肝损伤存在保护作用,其作用机制可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB、NLRP3及JNK/p38MAPK通路,从而抑制炎症反应及改善小鼠肝脏氧化应激损伤有关。

响应面法优化竹叶椒总木脂素的超声提取工艺

目的:优化竹叶椒总木脂素的超声提取工艺。方法:以竹叶椒总木脂素得率为指标,在单因素实验的基础上,采用响应面设计方法对影响木脂素得率的乙醇质量分数、液料比、提取温度、超声功率进行优化。结果:最优工艺条件为乙醇质量分数79.6%,料液比20∶1,功率为150W,温度为67.0℃时,总木脂素提取率为3.406%,实验结果与模型预测值相符。结论:利用响应面法分析结果可靠,得到竹叶椒木脂素超声辅助提取的最优工艺条件。

河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量比较

测定河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷含量。采用分光光度法测定连翘叶中总木脂素含量,结果显示山西连翘叶高于河南连翘叶总木脂素含量。采用高效液相色谱法(HPLC)测定连翘叶中连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量。连翘酯苷A平均回收率为99.6%,RSD为1.23%;连翘酯苷B平均回收率为101.3%,RSD为1.74%;连翘苷平均回收率为102.3%,RSD为2.58%;连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷的含量较高,并且不同产地连翘叶中连翘苷含量差异较大;另外对于富含连翘酯苷和连翘苷的连翘叶能否代替果实或者与果实合并用药有待于进一步研究。

离子液体超声波辅助法提取杜仲皮总木脂素的工艺研究

采用离子液体(ILs)超声波辅助法提取杜仲皮总木脂素,考察了ILs种类、料液比、溶剂浓度、提取温度、提取时间、浸泡时间、提取次数对杜仲皮总木脂素得率的影响,采用响应面法优化提取工艺。结果表明,超声波辅助离子液体提取杜仲皮总木脂素的最佳工艺为:0.87 mol/L的[C_4mim]BF_4溶液,液料比18∶1 m L/g,浸泡时间2 h,提取1次,提取温度54℃,提取时间30 min,总木脂素得率11.03%。此法快速、高效、简单、重现性好。

炮制对五味子中木脂素的影响

目的比较五味子不同炮制品中木脂素的差别。方法采用薄层色谱方法、紫外分光光度法、高效液相色谱法比较了五味子不同炮制品中总木脂素、五味子醇甲、五味子乙素的差别。结果从薄层色谱上看,生五味子、醋五味子及酒五味子无明显的差别,而总木脂素、五味子醇甲、五味子乙素均以酒五味子中的量稍高。结论五味子经过炮制后,能增加其中所含的木脂素类成分的量。

用大孔树脂提取和纯化五味子总木脂素

目的以五味子中有效成分五味子醇甲、五味子甲素及五味子乙素含量为考察指标,筛选分离纯化五味子总木脂素的最佳树脂;研究不同大孔吸附树脂及其不同的工艺条件对总木脂素分离纯化的影响;建立五味子总木脂素的纯化方法。方法大孔吸附树脂与阴离子交换树脂(脱色树脂)联合使用,采用静态与动态的吸附-解吸两种模式进行纯化;通过动态吸附曲线观察吸附量及洗脱能力;利用HPLC法验证纯化后五味子醇甲、五味子甲素及五味子乙素的含量;上样吸附后,用5倍量柱床体积的水洗除杂,再用体积分数为95%的乙醇洗脱,用量为6倍量柱床体积。结果弱极性树脂AB-8适合用于五味子总木脂素的纯化;纯化后,五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素3种有效成分含量的质量分数之和由1.197%提高到14.92%,总转移率为72.3%。结论用大孔树脂提取和纯化五味子总木脂素的方法在保留五味子中有效成分的同时,显著降低固形物得率,可用于工业推广。

瑞香狼毒总木脂素的体外抗肿瘤活性

研究了瑞香狼毒总木脂素的体外抗肿瘤作用.用MTT比色分析法、集落形成法对瑞香狼毒总木脂素的体外抗肿瘤活性进行研究,并与长春新碱的活性进行了比较.瑞香狼毒总木脂素成分对肿瘤细胞株SGC-7901,HEP-7402和HL-60的增殖及克隆形成具有较强的抑制作用,其体外抗肿瘤活性高于或接近于长春新碱,证明瑞香狼毒总木脂素成分具有较强的体外抗肿瘤作用.

不同产地五味子药材中木脂素类成分比较

目的通过测定不同产地五味子药材中五味子醇甲、五味子乙素、总木脂素的含量,评价不同产地五味子药材的质量。方法利用高效液相色谱法同时测定五味子药材中五味子醇甲及五味子乙素的含量。采用梯度洗脱法,流动相为甲醇-水,色谱柱为Lichrospher5-C18(4.6mm×250mm,5μm);检测波长为250nm;柱温为30℃;流速为1mL.min-1。利用分光光度法测定五味子药材中总木脂素的含量,以五味子乙素为对照品,于570nm波长处测定吸光度。结果所测的五味子药材中五味子醇甲的含量均高于0.50%,五味子乙素的含量均高于0.25%。所测的五味子药材中总木脂素的含量均高于3.70%。结论五味子醇甲及总木脂素含量以黑龙江产五味子药材中含量最高,五味子乙素含量以辽宁产五味子药材中含量最高。

正交试验设计优化杜仲总木脂素提取工艺

目的筛选出提取杜仲总木脂素的最佳工艺。方法采用正交试验设计,超声提取,以提取时间、甲醇浓度、溶媒用量为因素,采用紫外分光光度法对杜仲木脂素含量进行检测,确定最佳提取条件。结果优选的最佳工艺条件为:甲醇浓度75%,溶媒用量为8倍,提取时间40 min。结论杜仲总木脂素提取工艺的优化为杜仲总木脂素进一步研究提供了参考。

五味子总木脂素的分离纯化与体外抗肿瘤活性的研究

目的:对五味子总木脂素进行提取分离,并对该有效部位进行体外抗肿瘤作用初步研究。方法:通过硅藻土-索氏提取法分离纯化五味子总木脂素,采用MTT法测定总木脂素对人乳腺癌细胞系MCF-7、肝癌细胞系HepG2和人食管癌细胞系9706的体外抗肿瘤作用。结果:五味子总木脂素有效部位产率和含量分别为17.7%和11.7%,体外细胞实验表明该部位对人乳腺癌细胞系MCF-7、肝癌细胞系HepG2的抑制效果显著。结论:硅藻土-索氏提取法适用于五味子总木脂素的分离纯化,五味子总木脂素具有一定的体外抗肿瘤活性。

大孔树脂纯化五味子总木脂素、总三萜工艺研究

目的考察大孔树脂纯化五味子总木脂素总三萜的最佳工艺。方法比较了5种不同类型大孔树脂对五味子总木脂素、总三萜、五味子醇甲的吸附解析性能,确定适宜的树脂类型和最佳纯化工艺条件。结果 AB-8型树脂吸附解析效果最好;最佳工艺条件:上样液浓度1.5 mg/mL,最大上样量7BV,蒸馏水洗脱体积9BV,洗脱溶剂为30%乙醇(9BV)+80%乙醇(10BV);纯化后终产品中总木脂素、总三萜、五味子醇甲的质量分数分别为39.55%、13.96%、8.95%。结论本文所报道的梯度洗脱法可显著提高终产品中总木脂素、总三萜、五味子醇甲的质量分数,验证了其工业生产的可能。

五味子总木脂素对大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的观察不同浓度五味子总木脂素对体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞生长的影响。方法体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞,采用MTT方法,检测不同浓度五味子总木脂素作用24、48、72h时,对其生长的影响。结果五味子总木脂素浓度在25μg/ml时抑制细胞生长不明显;在24h时,药物浓度在100μg/ml(P<0.05)和200μg/ml(P<0.01)表现为抑制作用;在48h和72h时,50、100、200μg/ml抑制作用都很明显(P<0.01)。结论高浓度五味子总木脂素对体外培养C6细胞的生长起到了抑制作用,提示五味子总木脂素可能在治疗脑胶质瘤方面发挥一定作用。

五味子果梗总木脂素超声提取工艺的响应面优化

目的对超声辅助提取北五味子果梗中总木脂素的工艺条件进行优化。方法通过单因素试验,考察提取时间、提取温度、料液倍数等因素对超声辅助提取北五味子果梗中总木脂素提取率过程的影响。并在此基础上,进行中心组合设计,以北五味子果梗中总木脂素的得率为响应值,采用响应面法分析研究各因素及其交互作用对北五味子果梗中总木脂素得率的影响[1]。结果试验优化得出超声辅助提取北五味子果梗中总木脂素的最佳工艺为提取温度35℃,提取时间33.53 min,料液倍数100倍。结论应用响应面优化法能够快速方便的得到北五味子果梗总木脂素超声辅助提取的较优工艺,所建立的模型预测良好,为五味子果梗的开发利用提供了科学依据。

肉豆蔻总木脂素纯化工艺及其抗炎活性研究

目的优化肉豆蔻总木脂素的纯化工艺并对其抗炎活性进行研究。方法采用大孔吸附树脂法富集纯化肉豆蔻总木脂素,以吸附率、解吸率及总木脂素含量为指标,考察树脂型号、洗脱剂浓度、上样量及洗脱剂用量等相关参数;采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,通过测定肿胀度、抑制率考察其抗炎活性。结果总木脂素的纯化采用AB-8型树脂,取粗提物干膏1 g溶解后作为上样液,加入40 m L(含树脂16 g)预处理的树脂,静态吸附12 h,上柱,以2 BV/h流速,先用30%乙醇洗脱至无色,再用70%乙醇300 m L洗脱,收集70%乙醇洗脱液,纯度可达45.8%。肉豆蔻总木脂素高、中、低剂量组的肿胀度与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论总木脂素纯化工艺稳定、重复性好,肉豆蔻总木脂素具有明显的抗炎活性。