响应面法优化藜麦麸皮皂苷最佳提取工艺及其α-葡萄糖苷酶抑制活性

采用响应面法优化了藜麦麸皮超声提取皂苷的最佳工艺,并考察了最佳提取工艺条件下提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。同时建立酶反应动力学方程对其抑制动力学进行分析,探讨了藜麦麸皮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制机制。实验结果表明,藜麦麸皮超声提取皂苷的最佳工艺条件为液料比15 mL/g,75%乙醇超声提取,超声时间1.5 h,超声温度45℃,在此条件下藜麦麸皮皂苷的提取得率为2.370%±0.022%。α-葡萄糖苷酶抑制活性实验表明提取物的抑制作用明显强于阳性药阿卡波糖(P<0.05),其IC_(50)值为0.620±0.057 mg/mL。酶动力学研究表明藜麦麸皮总皂苷提取物是一种可逆的混合性抑制类型。本研究为明确藜麦麸皮提取物的降低餐后血糖作用机理提供了参考,为藜麦麸皮的开发与利用提供了依据。

藜麦麸皮总皂苷的提取纯化工艺研究

采用溶剂回流提取法对藜麦麸皮中的总皂苷进行提取,以响应面实验对提取工艺进行优化。以吸附率和解析率为指标,筛选适合用于藜麦麸皮总皂苷纯化的大孔吸附树脂,并对纯化工艺进行优化。优化获得的提取工艺为:料液比1∶20.8,以72%乙醇在72℃提取147 min,皂苷得率可达到1.685%。经过比较,D101大孔吸附树脂的吸附率和解析率都高于HPD600、S-8和AB-8,故选其用作纯化研究,结果表明上样浓度为4 mg/m L,上样液p H6,上样流速为2 BV/h时吸附率最大;用90%乙醇,以2 BV/h的流速洗脱时,解析率最大,经浓缩和冻干所得的皂苷,其纯度达到43.6%。该研究结果为藜麦麸皮的高值利用及藜麦总皂苷生物活性研究和开发利用奠定了基础。

响应面法优化藜麦麸皮皂苷酸水解工艺

为了提高藜麦麸皮皂苷的抗氧化性,以DPPH·清除率为指标,对其酸水解工艺条件进行了响应面法优化。结果表明:影响藜麦麸皮皂苷酸水解的因素大小顺序为:水解时间>水解温度>盐酸浓度>液液比,优化的最佳工艺条件为:盐酸浓度4.8 mol/L、液液比1∶2(mL/mL)、水解温度80℃、水解时间2.5 h。此工艺条件下,藜麦麸皮皂苷水解产物对DPPH·的清除率为68.84%,较水解前清除率提高了2倍多。酸水解可有效提高藜麦麸皮皂苷清除自由基及抗氧化活性。

响应面法优化藜麦糠皂苷的提取及抗氧化活性

采用超声波浸提法提取皂苷,通过单因素试验考察液料比(A)、乙醇体积分数(B)和超声时间(C)对藜麦糠皂苷得率的影响,并采用Box-Behnken中心组合实验及响应曲面分析法优化藜麦糠皂苷的提取;同时采用还原Fe3+能力及清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基(·OH)和超氧阴离子(O2-·)能力分析藜麦糠皂苷抗氧化活性。结果表明,最佳提取工艺条件为液料比39∶1(m L/g),乙醇体积分数74%,超声时间33 min。在此条件下,皂苷得率为23.371 mg/g。抗氧化试验结果表明,藜麦糠皂苷有显著的抗氧化活性,且与皂苷的质量浓度呈剂量依赖性。

复合酶辅助提取藜麦种皮皂苷的工艺优化与结构鉴定

采用复合酶辅助乙醇提取藜麦种皮中皂苷,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化提取工艺,并鉴定其结构。结果表明:最佳提取工艺为复合酶(纤维素酶∶果胶酶质量比1∶1)添加量2.1%(以藜麦种皮质量为基准)、酶解时间1.0 h、酶解温度48℃、pH 4.8,在此条件下藜麦皂苷得率为(42.220±0.620)mg/g,比乙醇提取法、纤维素酶法和果胶酶法分别高15.935、6.647、8.531 mg/g。经鉴定,该化合物为美商陆酸3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1,3)-α-L-吡喃阿拉伯糖基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,分子式为C_(48)H_(76)O_(20)。

藜麦总皂苷的提取及其抗氧化活性研究

研究藜麦总皂苷体外抗氧化活性。采用超声波辅助乙醇提取法、D101大孔树脂纯化获得藜麦皂苷,维生素C为阳性对照,对纯化后藜麦总皂苷进行体外抗氧化研究。结果表明,藜麦总皂苷得率为4.88%,其纯度可达到63.44%。藜麦总皂苷的还原性及对超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH自由基清除率和对金属离子的螯合能力与藜麦总皂苷的浓度呈正相关。提示藜麦总皂苷具有一定的抗氧化活性。