知母总皂苷对慢性温和应激小鼠的保护作用及机制研究

目的探讨知母总皂苷(total timosaponin,TT)对慢性温和应激模型小鼠的保护作用并分析其可能的作用机制。方法建立小鼠慢性温和应激模型,测量小鼠对蔗糖水的摄取量,采用避暗实验考察小鼠学习记忆能力,放射免疫法测定小鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇含量,酶联免疫法测定海马脑源性神经生长因子(BDNF)含量。结果 TT(25、50 mg.kg-1,qd×21 d)可显著增加慢性温和应激模型动物的蔗糖水消耗量,延长动物逃避潜伏时间、减少逃避错误次数。生化结果显示,TT能够降低血浆ACTH和皮质醇的含量,提高海马组织内BDNF含量。结论 TT能够改善慢性温和应激模型小鼠的抑郁状态和学习记忆能力,其机制与抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴功能亢进以及提高模型动物海马BDNF含量有关。

知母总皂苷抗实验性抑郁作用的研究

目的研究知母总皂苷(total timosaponin,TT)的抗抑郁作用及其机制。方法采用小鼠强迫游泳实验,获得性无助实验,慢性温和应激模型,育亨宾毒性增强实验以及5-羟色胺酸诱导甩头实验等多种动物模型考察TT的抗实验性抑郁作用及其可能的机制。结果在小鼠强迫游泳实验中,TT(25,50mg·kg-1,qd×14d)可明显缩短小鼠的不动时间,且对自主活动无明显影响;TT(12.5,25,50mg·kg-1,qd×14d)可显著减少获得性无助小鼠的逃避错误次数;TT(25,50mg·kg-1,qd×21d)可显著增加慢性温和应激模型动物的活动次数以及蔗糖水消耗量;TT(50mg·kg-1,qd×14d)可提高育亨宾给药后4h的小鼠死亡率;并且显著增加5-羟色胺酸诱导小鼠的甩头次数。结论TT在多种抑郁模型上具有一定的抗抑郁作用,可能与增强去甲肾上腺素能及5-羟色胺能神经系统有关。

知母总皂苷对甲亢模型小鼠影响的实验研究

目的:探讨知母总皂苷对甲亢模型小鼠的影响。方法:小鼠每天皮下注射左旋甲状腺素钠350μg·kg-1造模,随机分为模型组、知母总皂苷(50、100、200 mg·kg-1)不同剂量组、阳性对照他巴唑(0.01 g·kg-1)组,另设正常对照组。观察并比较动物体重、心率、自发活动;RIA法测定血清T3、T4含量的变化。结果:与正常组比较,模型组动物体重增长明显减慢、心率加快、自发活动增加,血清T3、T4水平显著提高(P<0.05)。与模型组比较,知母总皂苷低、中剂量组及他巴唑组体重增长明显加快(P<0.05),知母总皂苷中剂量组心率减慢、自发活动减少(P<0.05),知母总皂苷中剂量组和他巴唑组血清T4水平明显降低(P<0.05)。结论:知母总皂苷在一定剂量范围内具有改善实验性甲亢动物模型症状、降低血清甲状腺素水平的作用。

大孔树脂吸附知母总皂苷的动力学与热力学研究

目的:研究大孔树脂吸附知母总皂苷的动力学与热力学特征。方法:通过静态和动态吸附解吸试验筛选出纯化知母总皂苷的大孔树脂类型,确定了AB-8树脂纯化知母总皂苷的吸附动力学模型、等温吸附模型和热力学参数。结果:可用拟二级动力学方程很好地描述吸附动力学过程,可用Langmuir方程较好地拟合等温吸附热力学过程。结论:吸附过程为吸热反应,自发进行,高温有利于吸附,吸附速率主要由颗粒内扩散控制。

大孔树脂纯化知母总皂苷的工艺研究

目的:考察大孔树脂纯化知母总皂苷的工艺。方法:以知母总皂苷含量为指标,采用正交试验确定乙醇浓度、乙醇用量和提取时间;考察大孔树脂型号、上样浓度、吸附流速、上样体积、除杂溶媒、洗脱溶剂浓度及其体积对纯化结果的影响。结果:选取工艺为12倍量50%乙醇提取,每次2.0 h,提取2次,提取液过AB-8型大孔吸附树脂柱(树脂径高比为1∶8),吸附流速1 mL.min-1,6BV0.2 mol.L-1NaOH溶液洗涤,再用蒸馏水洗至流出液呈中性,3BV 80%乙醇洗脱。结论:该工艺稳定可行,可用于知母总皂苷的提取与纯化。

HPLC-ELSD法同时测定知母总皂苷中知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ

目的建立同时测定知母总皂苷中知母皂苷BII和知母皂苷BIII含量的HPLC-ELSD法。方法 Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%甲酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;柱温:30℃;载气流速:3.0 L/min;漂移管温度:85℃;进样量:20μl。结果知母皂苷BII与知母皂苷BIII分离度良好,线性关系良好,平均回收率分别为98.7%和97.5%。结论该方法简便,准确,可靠,对知母总皂苷的质控和评价具有参考价值。

HPLC-ELSD同时测定知母药材中3种主要皂苷含量

目的:首次建立同时测定知母药材中3种主要皂苷含量的HPLC-ELSD法。方法:采用Diamonsil C18(2)柱(250×4.6mm,5um),流动相为甲醇(A)-水(B),梯度洗脱;流速1.0m L·min^(-1);柱温30℃;蒸发光散射检测器雾化器流速2.0L·min^(-1);漂移管温度50℃;进样量10u L。结果:知母皂苷O、知母皂苷BII、知母皂苷BI浓度分别在64.13~1026μg·mL^(-1)(r=0.9989)、57.15~1028μg·mL^(-1)(r=0.9965)、67.32~1077μg·mL^(-1)(r=0.9998)的范围内呈良好的线性关系。加样回收率平均值为99.43%~102.8%,RSD为1.78%~2.58%。结论:该含量测定方法简便,准确,可靠,能同时测定知母皂苷O、知母皂苷BII、知母皂苷BI 3种有效成分含量。

知黄复方抗心肌肥厚的处方筛选及抗小鼠心力衰竭作用考察

目的确定知黄复方中知母总皂苷与黄芪总皂苷合用抗心肌肥厚的最佳配比,通过概率和法证明处方的合理性;进行初步药效学试验。方法采用正交设计法。小鼠每天分早晚2次皮下注射盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline)1 mg.kg-1,连续给药14 d造成心肌肥厚模型,测定通过正交配比;药效学试验采用知母总皂苷与黄芪总皂苷最佳剂量配比为(25+100)mg.kg-1组成知黄复方,用前述方法造模,14 d后分别于不同时间测定各组小鼠的心率、跑步时间、游泳时间、缺氧存活时间和心指数。结果从正交分析可知,知母总皂苷的极差(R)>黄芪总皂苷的极差,知母总皂苷与知母总皂苷+黄芪总皂苷组成的复方相比P>0.05,黄芪总皂苷与知母总皂苷+黄芪总皂苷组成的复方相比P<0.05;知母总皂苷与黄芪总皂苷合用剂量组的心指数最小,由金氏概率和法得到Q=1.17;知母总皂苷、黄芪总皂苷及知母总皂苷与黄芪总皂苷组成的复方均可减慢模型小鼠的心率;知母总皂苷与黄芪总皂苷组成的复方均可延长小鼠的跑步时间、游泳时间和缺氧存活时间,可显著降低模型小鼠心指数。结论黄芪总皂苷对盐酸异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚具有显著的抑制作用;知母总皂苷与黄芪总皂苷在所选择剂量范围内的理论最佳配比为(25+100)mg.kg-1;知母总皂苷与黄芪总皂苷组成的复方有抗盐酸异丙肾上腺素所致小鼠心力衰竭作用。

比色法测定大蒜提取物中大蒜总皂苷含量

目的:建立一种大蒜提取物中总皂苷含量的测定方法。方法:以知母皂苷A-Ⅲ为对照品,香草醛-高氯酸比色法测定大蒜提取物中总皂苷含量。结果:知母皂苷A-Ⅲ在20.16～181.44μg与吸光度呈良好线性关系,回归方程为Y=4.839X+0.066,r=0.999 5(n=9),平均回收率100.6%,RSD 1.5%。结论:该方法简单,准确性、重复性良好,可作为大蒜提取物中总皂苷质量控制方法。