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Cross-Flow VIV-Induced Fatigue Damage of Deepwater Steel Catenary Riser at Touch-Down Point 被引量:3
1
作者 王坤鹏 唐文勇 薛鸿祥 《China Ocean Engineering》 SCIE EI CSCD 2014年第1期81-93,共13页
A prediction model of the deepwater steel catenary riser VIV is proposed based on the forced oscillation test data, taking into account the riser-seafloor interaction for the cross-flow VIV-induced fatigue damage at t... A prediction model of the deepwater steel catenary riser VIV is proposed based on the forced oscillation test data, taking into account the riser-seafloor interaction for the cross-flow VIV-induced fatigue damage at touch-down point (TDP). The model will give more reasonable simulation of SCR response near TDP than the previous pinned truncation model. In the present model, the hysteretic riser-soil interaction model is simplified as the linear spring and damper to simulate the seafloor, and the damping is obtained according to the dissipative power during one periodic riser-soil interaction. In order to validate the model, the comparison with the field measurement and the results predicted by Shear 7 program of a full-scale steel catenary riser is carried out. The main induced modes, mode frequencies and response amplitude are in a good agreement. Furthermore, the parametric studies are carried out to broaden the understanding of the fatigue damage sensitivity to the upper end in-plane offset and seabed characteristics. In addition, the fatigue stress comparison at TDP between the truncation riser model and the present full riser model shows that the existence of touch-down zones is very important for the fatigue damage assessment of steel catenary riser at TDP. 展开更多
关键词 VIV steel catenary riser touch-down point riser-soil interaction fatigue damage
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建筑物和设施外露防雷引引下线防接触电压措施研究
2
作者 严岩 郁国卿 +1 位作者 顾宇丹 黄建忠 《建筑电气》 2024年第10期52-55,共4页
分析3部现行国家标准中关于防雷引下线防接触电压的技术条文,研究人员可以接触到的外露引下线防接触电压措施;结合上海世博源这一实际工程案例,从安全可靠、经济合理、切实可行的角度出发,提出建筑物或设施外露防雷引下线防接触电压的... 分析3部现行国家标准中关于防雷引下线防接触电压的技术条文,研究人员可以接触到的外露引下线防接触电压措施;结合上海世博源这一实际工程案例,从安全可靠、经济合理、切实可行的角度出发,提出建筑物或设施外露防雷引下线防接触电压的措施要求。 展开更多
关键词 雷电 建筑物 设施 引下线 接触电压 防护措施 标准 世博源
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应用nested和touch down PCR技术分离牦牛CAPN1大亚基基因EST 被引量:6
3
作者 蔡欣 吴建平 +3 位作者 徐明旭 张利平 汪虹英 刘雅楠 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第2期14-18,共5页
 钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因。根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-downPCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株...  钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因。根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-downPCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株,通过PCR扩增、限制性酶切和测序分析鉴定阳性克隆。分离到的基因片段为牦牛CAPN1大亚基的部分编码序列,在GeneBank中的注册号为AY197555,与奶牛、人、食蟹猴、小鼠、绵羊以及大鼠相应序列的同源性分别为98%,89%,89%,83%,96%和81%,在不同物种之间具有较强的保守性。CAPN1基因EST的分离为进一步研究牦牛CAPN1基因奠定了基础。此研究表明,在总RNA质量不理想的情况下,同时采用这2种技术可以较大限度地获取目的序列。 展开更多
关键词 nested和touch-down PCR EST分离 CAPN1大亚基基因 牦牛
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鸡端粒酶RNA基因的克隆 被引量:1
4
作者 郑梅竹 时东方 +3 位作者 潘风光 艾永兴 王秋悦 刘春明 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期865-868,共4页
本研究采用扩增条件优化的PCR扩增技术,以MDCC-MSB1细胞基因组DNA为模板扩增出鸡端粒酶RNA(chicken telomerase RNA,chTR)全长基因,克隆到pMD18-T载体中,经酶切鉴定和PCR鉴定后测定序列。序列分析表明所克隆的鸡端粒酶RNA基因全长465bp... 本研究采用扩增条件优化的PCR扩增技术,以MDCC-MSB1细胞基因组DNA为模板扩增出鸡端粒酶RNA(chicken telomerase RNA,chTR)全长基因,克隆到pMD18-T载体中,经酶切鉴定和PCR鉴定后测定序列。序列分析表明所克隆的鸡端粒酶RNA基因全长465bp,其中模板区的11个核苷(5'-CUAACC-CUAAU-3')合成端粒亚单位(TTAGGG)n。chTR基因的克隆为进一步研究chTR在马立克氏病发病过程中的作用以及马立克氏病的发病机制提供可能的序列基础。 展开更多
关键词 鸡端粒酶RNA基因 基因克隆 touch-down PCR
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大鼠睾丸组织uPA基因启动子区的克隆与分析 被引量:1
5
作者 刘燕 熊锦文 +2 位作者 陈丽刚 田永红 熊承良 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期520-525,共6页
目的:克隆大鼠睾丸组织uPA基因的启动子区并对该序列进行分析。方法:从大鼠睾丸组织中提取基因组DNA,以其为模板设计uPA基因引物,运用降落PCR法扩增uPA基因5'端上游的真核转录调控序列。测序得到的PCR产物用启动子区的分析软件分析... 目的:克隆大鼠睾丸组织uPA基因的启动子区并对该序列进行分析。方法:从大鼠睾丸组织中提取基因组DNA,以其为模板设计uPA基因引物,运用降落PCR法扩增uPA基因5'端上游的真核转录调控序列。测序得到的PCR产物用启动子区的分析软件分析,并与其DNA序列进行比对。结果:得到的uPA基因长度为1572bp(登录号X65651)。经软件分析:该序列包含uPA基因完整的开放阅读框(ORF)、21bp的外显子部分,1551bp区域为转录起始的上游部分在其5'端UTR区的-30bp位置有一个不典型的TATA盒,其上游有非常明显的GC盒及启动子区常见的AP1(activeprotein1)、SP1等结合位点。结论:成功克隆了大鼠睾丸组织uPA基因启动子区。分析表明,该片段包含真核转录调控区域、不典型的TATA盒、典型的GC盒及启动子区所常见的AP1、SP1等结合区域。 展开更多
关键词 大鼠 睾丸组织 尿激酶纤溶酶原激活因子(uPA) touch-down PCR 启动子区 真核转录调控区域
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液压驱动单腿跳跃机器人柔顺着地分析与控制 被引量:10
6
作者 陈志伟 金波 +2 位作者 朱世强 庞云天 陈刚 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第3期537-544,共8页
为缓解液压驱动足式机器人动态步态行走时着地瞬间足端冲击对机器人系统及其运动控制的影响,提出了一种基于关节运动规划的机器人柔顺着地控制方法。以液压驱动单腿跳跃机器人为研究对象,分析机器人足端着地冲量,通过选择合适的机器人... 为缓解液压驱动足式机器人动态步态行走时着地瞬间足端冲击对机器人系统及其运动控制的影响,提出了一种基于关节运动规划的机器人柔顺着地控制方法。以液压驱动单腿跳跃机器人为研究对象,分析机器人足端着地冲量,通过选择合适的机器人着地姿态和减小机器人着地前足端速度实现机器人柔顺着地,为此在空中相进行余弦速度曲线关节运动轨迹规划,以及着地相进行余弦函数关节运动轨迹规划。将该方法分别应用于基于MATLAB/Simulink软件建立的仿真模型和试验样机进行单腿竖直跳跃控制实验,仿真和试验结果显示采用该方法的机器人跳跃控制消除了足端着地瞬间地面作用力在膝关节液压缸无杆腔形成的液压冲击,实验结果表明提出的基于关节运动规划的机器人柔顺着地控制方法合理可行。 展开更多
关键词 机器人 液压驱动 单腿跳跃 柔顺着地
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我国现役优秀男子跳远运动员关键运动技术特征研究 被引量:11
7
作者 苑廷刚 黄乐 +5 位作者 王国杰 李爱东 郑富强 王泽峰 胡水清 米奕祥 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2015年第4期28-35,共8页
为了更好地理解和掌握我国现役优秀男子跳远运动员的关键运动技术特征,采用文献资料研究、二维录像解析、对比分析和数理统计等研究方法,获取"2014年清华精英赛"前6名我国现役男子优秀跳远运动员的助跑最后2步的步长、步速、... 为了更好地理解和掌握我国现役优秀男子跳远运动员的关键运动技术特征,采用文献资料研究、二维录像解析、对比分析和数理统计等研究方法,获取"2014年清华精英赛"前6名我国现役男子优秀跳远运动员的助跑最后2步的步长、步速、踏板精度、质心速度、踏板和起跳瞬间速度和起跳角度等关键运动技术参数,结合部分世界级优秀男子跳远运动员的关键技术参数的比较研究,获得我国现役优秀男子跳远运动员的整体关键技术特征。研究表明,1)我国男子跳远运动员助跑最后2步速度接近世界高水平运动员,平均为10.53±0.15m/s,且加速积极,速度下降率较低,平均为0.62%±0.23%;2)除李金哲以外,其余运动员最后2步步长变化符合"大-小"的国际主流技术;3)步长变化率较小,平均为7.74%±7.74%,其值随成绩的提升有增大趋势(r=0.642,P>0.05);4)踏板精度较低,平均为0.13±0.05m,还有一定提升空间;5)助跑水平速度的损失和离板瞬间垂直速度的获得主要发生在踏板至最大缓冲阶段,并且二者在此阶段的增减率上存在显著性正相关关系(r=0.880,P<0.05);6)我国运动员由于踏板至最大缓冲阶段水平速度损失率和垂直速度增长率较低,平均为6.91%±2.32%和63.04%±9.96%,低于世界高水平运动员的15.64%±3.33%和70.21%±13.03%,从而对与成绩呈正相关关系的水平速度损失率和垂直速度转化率产生影响,进而对腾起垂直速度和腾起角度的获得带来难度,从整体上制约了成绩的提升。 展开更多
关键词 跳远最后2步 踏板精度 质心速度 腾起初速度 腾起角度
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从第29届奥运会看踏板精度和三跳比例对世界优秀三级跳远运动员成绩的影响 被引量:15
8
作者 苑廷刚 李爱东 +1 位作者 李汀 李厚林 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2010年第9期55-65,共11页
通过文献研究法、运动现场录像法和视频图像分析法研究分析了第29届奥运会男女三级跳远决赛所有运动员有效跳次的成绩、踏板精度、三跳距离和比例特征。研究结果获得了踏板精度和成绩之间的相关关系,男、女运动员踏板精度的差异性,三跳... 通过文献研究法、运动现场录像法和视频图像分析法研究分析了第29届奥运会男女三级跳远决赛所有运动员有效跳次的成绩、踏板精度、三跳距离和比例特征。研究结果获得了踏板精度和成绩之间的相关关系,男、女运动员踏板精度的差异性,三跳距离和所占的比例特征,三跳距离和比赛成绩之间的相关关系,不同成绩阶段的三跳距离和比例特征,并得出了相应的研究结论。旨在对我国男、女三级跳远项目的更好发展提供理论上的支持和帮助。 展开更多
关键词 奥运会 29届 三级跳远 成绩 踏板精度 三跳距离 三跳百分比 相关系数 差异显著性
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降落PCR法快速检测高羊茅转基因植株 被引量:6
9
作者 田路明 黄丛林 +2 位作者 张秀海 张潞生 吴忠义 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第3期85-87,共3页
通过CTAB微量提取高羊茅(Festuca arundinacea)转基因再生植株基因组DNA。用9600型PCR仪器设计降落PCR反应程序,对高羊茅转基因植株两个片段OSISAP1(495bp)和GFP-nos(1 000bp)进行扩增;同时进行了PCR扩增的初步检测。结果表明降落PCR法... 通过CTAB微量提取高羊茅(Festuca arundinacea)转基因再生植株基因组DNA。用9600型PCR仪器设计降落PCR反应程序,对高羊茅转基因植株两个片段OSISAP1(495bp)和GFP-nos(1 000bp)进行扩增;同时进行了PCR扩增的初步检测。结果表明降落PCR法能快速准确检测转基因植株;而且更适合多个基因片段同时检测,从而提高PCR分子检测的效率,以提高转基因植株鉴定效率。 展开更多
关键词 CTAB 降落PCR 转基因植株
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孕妇血浆中游离胎儿DNA短串联重复序列检测 被引量:6
10
作者 陈晓蕾 李新伟 +3 位作者 李杨 陈辉 雷冬梅 李晓文 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第4期589-591,共3页
目的:建立一种简便、不依赖于胎儿性别和父本DNA的无创性产前诊断方法。方法:应用降落PCR和二次PCR扩增技术,结合母源DNA对照,以34例孕妇外周静脉血血浆作为标本,口腔上皮细胞拭子作为母源对照,孕妇配偶外周血DNA作为父源对照,检测正常... 目的:建立一种简便、不依赖于胎儿性别和父本DNA的无创性产前诊断方法。方法:应用降落PCR和二次PCR扩增技术,结合母源DNA对照,以34例孕妇外周静脉血血浆作为标本,口腔上皮细胞拭子作为母源对照,孕妇配偶外周血DNA作为父源对照,检测正常孕妇血浆中游离胎儿DNAD17S1293、D21S11及DXS8377等基因位点。结果:34例孕妇血浆DNA中均检出非母源性等位基因条带,其中17例经父源DNA验证。结论:采用降落PCR和二次PCR扩增技术,可以提高孕早期微量游离胎儿DNA的扩增效率,准确、快捷地获得不依赖于父本DNA的胎儿遗传信息。 展开更多
关键词 胎儿DNA 短串联重复序列 降落PCR
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凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)Hsp70基因PCR扩增及序列分析 被引量:3
11
作者 吴任 谢数涛 +1 位作者 张其中 许忠能 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期428-433,共6页
 目的:为获得凡纳滨对虾的热休克蛋白70(Hsp70)基因并分析其基因序列.方法:根据GenBank中斑节对虾(Penaeusmonodon)Hsp70基因的cDNA序列,设计引物,对经高盐法提取的凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)基因组DNA,采用优化的降落PCR(TouchD...  目的:为获得凡纳滨对虾的热休克蛋白70(Hsp70)基因并分析其基因序列.方法:根据GenBank中斑节对虾(Penaeusmonodon)Hsp70基因的cDNA序列,设计引物,对经高盐法提取的凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)基因组DNA,采用优化的降落PCR(TouchDownPCR)程序,扩增凡纳滨对虾Hsp70基因的全长序列.结果:PCR扩增得到一条长1983bp的目的DNA片段,回收纯化该片段并测定其核酸序列.用DNAman软件分析发现,该核酸序列中不含内含子,编码区全长为1959bp;经BLASTn和BLASTx软件分析发现,该编码区核苷酸序列与斑节对虾、罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)的Hsp70基因序列的相似性分别为97%和62 2%.根据核苷酸序列所推导出的Hsp70氨基酸序列,其与斑节对虾、罗氏沼虾的相似性分别为99 9%和92 6%.结论:成功地从凡纳滨对虾基因组DNA中直接扩增出Hsp70基因的全长编码区序列. 展开更多
关键词 HSP70基因 全长编码序列 降落PCR 凡纳滨对虾
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蓖麻毒蛋白A链基因克隆与重复表达载体构建 被引量:2
12
作者 黄凤兰 李国瑞 +2 位作者 萨日娜 陈永胜 阎秀峰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期167-172,共6页
利用降落PCR的方法,从蓖麻基因组DNA中克隆毒蛋白A链基因的560bp片段;利用一步法将该基因的2个正义片段和2个反义片段分别与pB I-121质粒连接,构建含该基因的正义重复和反义重复表达载体,为利用共抑制技术抑制蓖麻毒蛋白A链基因表达的... 利用降落PCR的方法,从蓖麻基因组DNA中克隆毒蛋白A链基因的560bp片段;利用一步法将该基因的2个正义片段和2个反义片段分别与pB I-121质粒连接,构建含该基因的正义重复和反义重复表达载体,为利用共抑制技术抑制蓖麻毒蛋白A链基因表达的研究奠定基础。 展开更多
关键词 蓖麻毒蛋白 重复表达载体 降落PCR 一步法 共抑制
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高GC含量DNA模板的PCR扩增 被引量:6
13
作者 邢玉华 戴素琴 +5 位作者 刘体颜 王微 谭俊杰 曲国龙 刘刚 陈惠鹏 《生物技术通讯》 CAS 2013年第5期645-649,共5页
目的:探索高GC含量DNA的PCR扩增条件,为扩增达托霉素生物合成基因簇及拼接奠定基础。方法:在PCR扩增体系中,使用高保真的聚合酶及添加不同浓度的DMSO、7-deaza-dGTP等增强剂,并选择合适的PCR循环程序,优化富含GC的DNA的PCR扩增条... 目的:探索高GC含量DNA的PCR扩增条件,为扩增达托霉素生物合成基因簇及拼接奠定基础。方法:在PCR扩增体系中,使用高保真的聚合酶及添加不同浓度的DMSO、7-deaza-dGTP等增强剂,并选择合适的PCR循环程序,优化富含GC的DNA的PCR扩增条件。结果:向反应体系中额外添加1%~4%的DMSO可以显著提高富含GC的DNA的PCR扩增产物量,但会降低其特异性;7-deaza-dGTP可以提高扩增产物的特异性及保真度,但产量会有所下降。应用touch down PCR并在体系中添加7-deaza-dGTP能够提高扩增产物的特异性和产率,增加扩增的保真度。结论:应用优化的PCR扩增条件将所有达托霉素生物合成基因簇分段扩增出来,并可扩增出长达6 kb的片段,且序列完全正确,可以进行后续拼接。 展开更多
关键词 达托霉素生物合成基因 高GC含量DNA PCR添加剂 touch down PCR
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非线性海床土对钢悬链式立管触地点动力响应和疲劳损伤影响分析 被引量:7
14
作者 常爽 黄维平 杨超凡 《海洋工程》 CSCD 北大核心 2017年第2期67-74,82,共9页
基于钢悬链式立管(SCR)动力分析程序CABLE3D,采用大挠度柔性梁理论建立SCR的运动方程,将线性海床模型扩展为考虑海床土吸力的非线性海床模型,采用非线性有限元方法对控制方程进行离散,时域内积分采用Newmark-β法,开发出新的计算程序。... 基于钢悬链式立管(SCR)动力分析程序CABLE3D,采用大挠度柔性梁理论建立SCR的运动方程,将线性海床模型扩展为考虑海床土吸力的非线性海床模型,采用非线性有限元方法对控制方程进行离散,时域内积分采用Newmark-β法,开发出新的计算程序。通过算例分析上部浮体垂荡运动幅值、海床土剪切强度、海床土剪切强度梯度对SCR触地点区域动力响应和疲劳损伤的影响。分析结果表明:SCR触地点区域动力响应和疲劳损伤对上部浮体垂荡运动幅值和海床土剪切强度的变化较为敏感,疲劳损伤在触地点区域最大,远大于悬垂段和流线段,在设计过程中应采取一定的加强措施。 展开更多
关键词 钢悬链式立管 非线性海床 触地点区域 动力响应 疲劳损伤
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利用梯度PCR和降落PCR扩增CIRP基因的比较 被引量:12
15
作者 李玉恒 赵明慧 +7 位作者 赵紫阳 李峥 袁雪 李昌盛 林增 胡婧 李俭 李士泽 《黑龙江八一农垦大学学报》 2011年第5期46-49,75,共5页
提取SD大鼠总RNA,同时应用降落PCR和梯度PCR在常规PCR反应体系和低模板浓度PCR反应体系中扩增CIRP基因片段,对两种方法的扩增效果进行比较。结果表明:降落PCR法可以通过一次反应即顺利扩增出CIRP基因特异性条带,并且在模板浓度降低后也... 提取SD大鼠总RNA,同时应用降落PCR和梯度PCR在常规PCR反应体系和低模板浓度PCR反应体系中扩增CIRP基因片段,对两种方法的扩增效果进行比较。结果表明:降落PCR法可以通过一次反应即顺利扩增出CIRP基因特异性条带,并且在模板浓度降低后也能扩增出产物;梯度PCR法扩增结果不稳定,不但有非特异性条带出现而且不能检测出低浓度模板的存在。结论:降落PCR省略了梯度PCR摸索最适退火温度的过程,并且其灵敏度和特异性均高于梯度PCR。 展开更多
关键词 降落PCR 梯度PCR 退火温度 CIRP基因
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钢悬链线立管与海底相互作用弹性基础梁模拟方法研究 被引量:7
16
作者 孟庆飞 黄维平 《海洋工程》 CSCD 北大核心 2013年第4期74-78,共5页
采用弹性基础梁模型,模拟钢悬链线立管(steel catenary riser,SCR)与海床土的相互作用,推导了弹性基础梁模型的有限元公式,基于该模型编制了钢悬链式立管的动力分析程序,在此基础上,分析了在浮体运动及环境载荷作用下,钢悬链线立管触地... 采用弹性基础梁模型,模拟钢悬链线立管(steel catenary riser,SCR)与海床土的相互作用,推导了弹性基础梁模型的有限元公式,基于该模型编制了钢悬链式立管的动力分析程序,在此基础上,分析了在浮体运动及环境载荷作用下,钢悬链线立管触地点区域的动力响应特征,并与弹簧支撑模型进行了比较。研究表明,弹性基础梁模型对单元长度的敏感性较低,可采用较长的单元,从而减少计算量。 展开更多
关键词 弹性基础梁 钢悬连线立管 海床 触地点
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钢悬链式立管涡激振动流固耦合非线性分析方法研究 被引量:7
17
作者 刘娟 黄维平 《振动与冲击》 EI CSCD 北大核心 2014年第3期41-45,共5页
随着油气资源勘探和开发活动不断向深海发展,钢悬链式立管(SCRs)成为深海浮式生产系统油气输送的首选立管,涡激振动是钢悬链式立管设计的核心问题。运用柔性索理论,采用具有弯曲刚度的大挠度细长梁模型模拟SCR,并根据提出的钢悬链式立... 随着油气资源勘探和开发活动不断向深海发展,钢悬链式立管(SCRs)成为深海浮式生产系统油气输送的首选立管,涡激振动是钢悬链式立管设计的核心问题。运用柔性索理论,采用具有弯曲刚度的大挠度细长梁模型模拟SCR,并根据提出的钢悬链式立管非锁定区考虑流固耦合的两向涡激振动模型,研究立管尤其是触地点处的涡激振动特性,算例表明,考虑流固耦合的两向涡激振动模型能够较好的模拟钢悬链式立管的涡激振动,可进行均匀流场中涡激振动的研究分析;钢悬链式立管触地点处的涡激振动响应较大且复杂,应作为SCR涡激振动研究的关键点。 展开更多
关键词 钢悬链式立管 涡激振动 大挠度细长梁 触地点 流固耦合
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一步3′RACE快速构建鸡MnSOD全长cDNA克隆 被引量:1
18
作者 卜友泉 罗绪刚 +1 位作者 刘彬 李素芬 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期519-521,共3页
将触减PCR与3′cDNA末端快速扩增(rapidamplificationofcDNAends,RACE)技术进行结合,仅用一条特异性引物和一条通用引物,成功地实现了从3′末端cDNA库对鸡含锰超氧化物歧化酶(manganese-containingsu peroxidedismutase,MnSOD)全长cDNA... 将触减PCR与3′cDNA末端快速扩增(rapidamplificationofcDNAends,RACE)技术进行结合,仅用一条特异性引物和一条通用引物,成功地实现了从3′末端cDNA库对鸡含锰超氧化物歧化酶(manganese-containingsu peroxidedismutase,MnSOD)全长cDNA的一步3′RACE快速构建。与常规使用的末端PCR或亚克隆方法相比,该法具有快速、省时、经济和特异性好的优点。 展开更多
关键词 RACE 触减PCR MNSOD CDNA
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Establishment of microsatellite-based triplex PCR for parentage analysis of Chinese shrimp Fenneropenaeus chinensis 被引量:4
19
作者 GAO Huan KONG Jie +3 位作者 HU Ping MENG Xianhong LUAN Sheng ZHANG Tianshi 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2007年第2期65-74,共10页
Through exploring the microsatellite primers from the random genome sequences of Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis), some microsatellite primers were obtained with rich polymorphic genetic information, and a ... Through exploring the microsatellite primers from the random genome sequences of Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis), some microsatellite primers were obtained with rich polymorphic genetic information, and a triplex PCR was established using three primers (RS1101, RS0683 and H081 primers). By adjusting the final concentration of Mg^2+, dNTP and primers, and using a touch-town PCR program, the optimum amplification parameters of PCR system were obtained, which could successfully amplify the three primers in a PCR reaction. In the denatured PAGE gel, the amplified DNA fragments of three primers RS1 101,RS0683 and H081 could be easily identified each other. For the triplex PCR system, the PPE (probabilities of paternity exclusion) is 0.967 9,and the DP (discrimination power) is 0.999 327.Using the triplex PCR to test ten individuals of a parentage and their parents, an individual was excluded from the parentage in all of the three microsatellite loci, which might be mixed into the parentage for some unknown reason such as factitious misplay. The triplex PCR will be of great practical value in identifying the parentages of F. chinensis. 展开更多
关键词 multiplex PCR touch-down PCR MICROSATELLITE parentage analysis Fenneropenaeus chinensis
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羊鲍(Haliotis ovina)和耳鲍(H.asinina)MtDNA COⅠ和COⅡ基因片段序列的比较研究 被引量:8
20
作者 黎中宝 Appleyard Sharon A. Elliott Nicholas G. 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期168-173,共6页
采用基因测序的方法,对我国海南产的羊鲍和耳鲍两个自然种群的COⅠ和COⅡ基因片段进行了PCR扩增和测序。结果表明,羊鲍和耳鲍COⅠ基因片段的核苷酸序列均为193bp,4种碱基组成非常相似,且其A+T的含量也非常相似,分别为45.08%和45.60%。... 采用基因测序的方法,对我国海南产的羊鲍和耳鲍两个自然种群的COⅠ和COⅡ基因片段进行了PCR扩增和测序。结果表明,羊鲍和耳鲍COⅠ基因片段的核苷酸序列均为193bp,4种碱基组成非常相似,且其A+T的含量也非常相似,分别为45.08%和45.60%。羊鲍和耳鲍COⅠ基因片段的核苷酸序列之间有29bp的差异,其中有8处发生碱基颠换,21处发生碱基转换,差异为15.03%,同源性为84.97%;羊鲍和耳鲍COⅡ基因片段的核苷酸序列均为157bp,羊鲍和耳鲍4种碱基组成差异较大,且其A+T的含量也不同,分别为59.24%和55.41%。羊鲍和耳鲍COⅡ基因片段的核苷酸序列之间有19bp的差异,其中3处发生碱基颠换,16处发生碱基转换,达到12.10%的差异,同源性为87.90%。分子变异分析表明羊鲍和耳鲍物种间的变异组成为0.50,变异百分数为100.00,羊鲍和耳鲍物种间的遗传分化显著(FST=1,P<0.001)。 展开更多
关键词 羊鲍 耳鲍 MtCOⅠ基因 MtCOⅡ基因 序列 Touch Down PCR
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