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肠出血性大肠杆菌O157∶H7 toxB基因缺失株的构建
1
作者
张雪寒
何孔旺
+11 位作者
赵攀登
栾晓婷
叶青
温立斌
倪艳秀
李彬
郭容利
王小敏
周俊明
俞正玉
茅爱华
吕立新
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第2期337-343,共7页
为了明确肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157∶H7大质粒pO157编码的蛋白质ToxB与O157∶H7在肠道黏附、定殖的关系,构建含有toxB基因同源臂的重组自杀性质粒pMEG375-BN-Kan-BC,转化SM10宿主菌获得重组SM10(pMEG37...
为了明确肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157∶H7大质粒pO157编码的蛋白质ToxB与O157∶H7在肠道黏附、定殖的关系,构建含有toxB基因同源臂的重组自杀性质粒pMEG375-BN-Kan-BC,转化SM10宿主菌获得重组SM10(pMEG375-BN-Kan-BC)。将SM10(pMEG375-BN-Kan-BC)与O157∶H7进行混合培养,通过同源重组,获得杂交toxB基因缺失株。用体外接种的HEp-2细胞和体内感染链霉素处理的小鼠,明确缺失株黏附定殖能力。经PCR和Western blot鉴定,toxB基因被卡那霉素(Kan+)选择标记基因表达盒所代替。O157∶H7(△toxB)生长特性与亲本株相比无明显差异。O157∶H7(△toxB)与亲本株相比,对HEp-2细胞的黏附能力降低了2倍。口服感染小鼠后,O157∶H7(△toxB)第3 d粪便排菌量仅为3.1×105 CFU,持续排菌11 d;而亲本株排菌量高达4.03×107 CFU,持续排菌时间超过14 d。
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关键词
肠出血性大肠杆菌O157∶H7
toxb基因
缺失株
小鼠
黏附
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题名
肠出血性大肠杆菌O157∶H7 toxB基因缺失株的构建
1
作者
张雪寒
何孔旺
赵攀登
栾晓婷
叶青
温立斌
倪艳秀
李彬
郭容利
王小敏
周俊明
俞正玉
茅爱华
吕立新
机构
江苏省农业科学院兽医研究所
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第2期337-343,共7页
基金
江苏省自然科学基金项目(BK2010068)
江苏省农业支撑计划-社会发展项目(BE2011771)
江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(09)106]
文摘
为了明确肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157∶H7大质粒pO157编码的蛋白质ToxB与O157∶H7在肠道黏附、定殖的关系,构建含有toxB基因同源臂的重组自杀性质粒pMEG375-BN-Kan-BC,转化SM10宿主菌获得重组SM10(pMEG375-BN-Kan-BC)。将SM10(pMEG375-BN-Kan-BC)与O157∶H7进行混合培养,通过同源重组,获得杂交toxB基因缺失株。用体外接种的HEp-2细胞和体内感染链霉素处理的小鼠,明确缺失株黏附定殖能力。经PCR和Western blot鉴定,toxB基因被卡那霉素(Kan+)选择标记基因表达盒所代替。O157∶H7(△toxB)生长特性与亲本株相比无明显差异。O157∶H7(△toxB)与亲本株相比,对HEp-2细胞的黏附能力降低了2倍。口服感染小鼠后,O157∶H7(△toxB)第3 d粪便排菌量仅为3.1×105 CFU,持续排菌11 d;而亲本株排菌量高达4.03×107 CFU,持续排菌时间超过14 d。
关键词
肠出血性大肠杆菌O157∶H7
toxb基因
缺失株
小鼠
黏附
Keywords
enterohemorrhagic Escherichia coli O157∶H7
toxb
gene
knockout strain
mouse
adherence
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肠出血性大肠杆菌O157∶H7 toxB基因缺失株的构建
张雪寒
何孔旺
赵攀登
栾晓婷
叶青
温立斌
倪艳秀
李彬
郭容利
王小敏
周俊明
俞正玉
茅爱华
吕立新
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2012
0
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