气管切开气道湿化给药对气管粘膜纤毛损伤的研究

目的探讨气管切开气道湿化给药对气管粘膜纤毛的影响。方法使用不同浓度的硫酸庆大霉素 生理盐水溶液给气管造口后的家兔进行气管滴药 ,在用药的第 7天和第 1 4天取其气管粘膜进行扫描电镜观察 ,同时以生理盐水作对照。结果用药第 7天即有不同程度的气管粘膜纤毛损伤性改变 ,表现为纤毛脱落、缺失、断裂、方向混乱、倒伏、变短和参差不齐 ,其气管粘膜纤毛受损面积显著大于生理盐水组 ;用药第 1 4天 ,气管粘膜纤毛损伤加剧 ,表现为部分区域纤毛大片脱落 ,其气管粘膜纤毛受损面积也显著大于生理盐水组。结论使用传统的气道湿化液———庆大霉素加生理盐水 ,对气管粘膜纤毛会造成不同程度的损伤 ,破坏气管粘膜上皮表面粘液纤毛清除功能 ,从而造成痰液潴留 。

气管黏膜上皮细胞无血清培养的初步实验研究

目的:探讨应用无血清培养液培养气管黏膜上皮细胞的可行性。方法:取4只Beagle犬的气管黏膜,在无血清培养基中分别采用酶消化分散法、机械分散法、组织块培养法行气管黏膜上皮细胞的体外培养,于培养后的第10天、第14天和第16天行细胞学观察、扫描电镜观察和纤毛运动频率的测量。结果:酶消化分散法和机械分散法培养的气管黏膜上皮细胞生长缓慢,无纤毛长出。组织块培养法培养的气管黏膜上皮细胞增殖较旺盛,有纤毛生长。纤毛摆动频率最大值为9.33Hz,最小值为3.85Hz,平均(6.8±0.52)Hz。结论:应用无血清培养液可进行气管黏膜纤毛上皮细胞的体外培养。组织块培养法培养的纤毛上皮细胞的分化能力保持较好。

大鼠溺死后气管纤毛变化的扫描电镜观察

应用扫描电镜对大鼠溺死后不同时间气管纤毛病理变化进行了观察，发现溺死大鼠气管纤毛局部紊乱，杯状细胞顶端开口增多，纤毛表面粘附有较多的絮网状结构．随死后时间延长，纤毛出现粘结、倒伏、结构破坏、消失等死后变化．结果表明，用扫描电镜观察上述变化有助于溺死死因诊断和死后经过时间的推断．

小鼠鼻腔及气管黏膜上皮细胞的构成和纤毛反应性比较研究

目的比较小鼠鼻腔及气管黏膜上皮细胞的构成以及纤毛摆动频率对外源性刺激的反应性。方法 采用酶消化法获取小鼠鼻腔及气管黏膜纤毛细胞,观察纤毛细胞的得率以及ATP和苯扎溴铵对纤毛摆动频率的影响;采用免疫组化染色及扫描电镜观察鼻腔及气管黏膜上皮的细胞构成。结果 ①培养细胞中小鼠鼻甲的纤毛细胞得率可达(45±5)%,气管组织仅有(15±5)%;②免疫组化染色鼻腔及气管黏膜上皮细胞均有乙酰化α-tubulin阳性表达,鼻腔的纤毛细胞层更连续,细胞更密集;③100μmol/LATP均能引起鼻甲及气管的纤毛摆动频率增加,增加率分别为235.06%和118.49%;0.005%苯扎溴铵均能使2个部位的纤毛摆动频率下降,降至原有频率的50.31%和8.27%。2组频率比较差异均有统计学意义,P值分别为0.013和0.004;④扫描电镜观察,鼻腔黏膜上皮中纤毛细胞的比例(90%)明显高于气管上皮纤毛细胞比例(30%～40%)。结论 小鼠鼻腔和气管黏膜上皮中纤毛细胞的比例存在明显差异;2个部位的纤毛摆动频率对外源性刺激的反应程度存在明显差异;从纤毛细胞的数量上看,鼻腔远远高于气管,其中鼻甲是个不容忽视的丰富资源。

白虎定喘口服液药效研究

为验证新兽药白虎定喘口服液的药效作用,进行了鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)鸡胚增殖抑制试验、气管纤毛运动试验及SPF雏鸡人工感染IBV疗效试验。将试验药液与等量IBV液混合作用后,接种11日龄SPF鸡胚,37℃孵育168h,取存活鸡胚肾脏进行IBV的RT-PCR检测,结果表明,药物组168h鸡胚存活率为80%,阳性对照组为20%,两组间差异显著(P<0.05);试验药物组RT-PCR检测无目的条带出现,而阳性对照组有目的条带出现。40日龄SPF鸡连续用药3d后,气管内注入0.02mL墨汁,测量1min内墨汁移动的距离,结果表明药物组墨汁移动距离极显著大于生理盐水对照组(P<0.01)。17日龄SPF鸡用IBV-M41滴鼻,0.3mL/只,24h后开始灌服药液,1mL/kg,连用5d,结果表明,试验药物组与攻毒对照组在临床症状计分、痊愈率上均存在显著差异(P<0.05);试验组气管黏膜组织切片未见明显病变,而阳性对照组有明显病理变化。以上试验结果表明,白虎定喘口服液对IBV具有较好的体外抑制作用,可显著促进气管纤毛的运动,对鸡传染性支气管炎(IB)具有较好的临床防制效果。

实验性溺死兔气管及肺组织扫描电镜形态学观察

应用光镜和扫描电镜对溺死家兔气管及肺组织进行对比实验观察．结果表明：①扫描电镜下溺死实验兔气管及肺组织具有溺死特有的形态学改变，即气管纤毛大片状倒伏、排列紊乱和部分缺失；肺组织有清晰可见的肺泡扩张、肺泡壁断裂、出血及肺泡腔内纤维蛋白网形成．该特征对于生前溺死和死后入水的法医学鉴别诊断具有十分重要的意义．②扫描电镜下肺内检见的硅藻具有表面立体感强和细微结构清晰的特点，有助于硅藻的准确分类，对落水点的推测具有一定价值．

支气管扩张患者气管黏膜纤毛结构、功能及气道重塑相关血液指标的变化观察

目的观察支气管扩张患者的气管黏膜纤毛结构、功能及气道重塑相关血液指标变化的研究。方法选取2015年7月-2016年8月期间本院呼吸内科收治的60例支气管扩张患者为观察组,同期选取60例健康人员为对照组,比较两组患者的气管黏膜纤毛结构、功能及气道重塑相关血液指标,同时将观察组患者在不同Reid分级和疾病分期中的指标检测结果进行比较。结果观察组患者的气管黏膜纤毛结构指标和气道重塑血液指标明显高于与对照组,而黏膜纤毛功能指标均明显低于对照组,并且上述检测指标在观察组中不同Reid分级和疾病分期的患者之间也存在显著性差异,P均<0.05。结论支气管扩张患者气管黏膜纤毛结构、功能及气道重塑相关血液指标呈现明显异常的状态,且上述指标对于疾病的严重程度和分期也有一定的反应价值,可作为此类患者的重要监测指标。

丙泊酚对离体兔气管黏膜上皮纤毛运动的影响

目的观察不同浓度的丙泊酚对体外培养的兔气管黏膜上皮细胞纤毛运动的影响,探讨一氧化氮(NO)在丙泊酚影响纤毛运动中的作用。方法无菌条件下从健康新西兰兔获取离体气管标本,分离上皮组织培养7～8d后观察。以Hank平衡盐溶液(HBSS)将丙泊酚的终浓度分别稀释为1、10、20、50、100、200μg/ml。将组织块随机分为8组,前7组分别加入HBSS(P0)和上述6种浓度的丙泊酚(P1、P2、P3、P4、P5、P6),第8组(P7)在加入0.1mmol/L的一氧化氮合酶(NOS)总抑制剂——L-NMMA后再以200μg/ml丙泊酚处理。在加药前(T0),加药后1min(T1)、5min(T2)、10min(T3)、20min(T4)、30min(T5),采用高速数码摄像系统采集纤毛摆动图像,通过IPLabV3.65软件分析,计算纤毛摆动频率(ciliarybeatfrequency,CBF),分别进行组内和组间对比。结果①P0组、P1组和P2组的CBF值在各时点与各自的基础值比较均无明显变化;P1组和P2组的CBF值与P0组相应时间点相比无明显变化;②P3组CBF在T1时点比基础值和P0组T1时点值明显升高(P<0.05);在随后的各个观察时点与基础值及P0组相应时间点比较无明显变化;③P4、P5、P6组加药后各个观察时点的CBF均明显高于基础值和P0组各时点值(P<0.05);④P7组加药后各时点的CBF值与基础值相比均无明显变化。结论50μg/ml以上浓度的丙泊酚可促进纤毛摆动,50、100、200μg/ml浓度的丙泊酚可能通过促进NO合成和释放而加速离体纤毛运动。

金水六君煎对慢性支气管炎模型小鼠气管粘膜影响的研究

目的：研究金水六君煎对慢性支气管炎模型小鼠气管粘膜的影响。方法：用金水六君煎为慢性支气管炎模型小鼠灌胃，取小鼠气管并在扫描电镜下观察气管内粘膜及纤毛的情况。结果：与对照组比较，金水六君煎组小鼠气管内纤毛脱落、倒伏、粘连轻于对照组。结论：金水六君煎可防止慢性支气管炎模型小鼠气管纤毛的脱落、倒伏及粘连。

血管化肋软骨结合纤毛化内皮内壁的人工气管重建

目的探讨血管化肋软骨结合纤毛化内皮内壁合成人工气管重建气管长段及特殊缺损的可行性,建立与天然气管的生理结构、功能更接近的人工气管模型。方法以8例新西兰白兔为动物实验模型,I期颈部双层带血供筋膜包埋培养自体肋软骨和鼻中隔黏膜,II期人工气管原位移植,术后定期评估生理、呼吸及病理学等指标。结果 8例实验兔II期术后平均存活时间21.9 d,死亡原因为呼吸困难。人工气管组织解剖可见瘢痕增生,无塌陷,有弹性和硬度。组织病理可见肋软骨和气管环软骨在组织学上有较高相似度;肋软骨在带血供筋膜包裹培养下均未被吸收,仍可见肋软骨组织;鼻中隔黏膜在体内加压及带血供筋膜营养下继续分化,HE染色切片下可见人工气管内壁覆有上皮样组织。结论肋软骨可作为制备人工气管塑形材料;包裹肋软骨的带血供筋膜可提供充足的血供,弥补了游离培养肋软骨致其吸收的缺陷;鼻中隔黏膜在体内加压及带血供筋膜的营养下,有望模拟气管纤毛上皮,从而发挥其与气管内壁相似的生物学特性。

利多卡因对大鼠气道黏膜表面结构的影响

目的:探讨利多卡因对大鼠气道黏膜表面结构的影响。方法:将25只Wistar大鼠随机分为正常对照组5只、利多卡因组20只,经大鼠气管穿刺注入利多卡因,并在2、24、48、72h4个时间点处死大鼠5只。取气管后1/3段的腹侧部,做扫描电镜观察大鼠气道黏膜表面结构。结果:利多卡因组均出现不同程度的黏液分泌增加,黏稠度增加,纤毛倒伏、粘着在一起、排列紊乱、部分断裂缺失。结论:利多卡因可对大鼠气道黏膜表面结构造成损害,但其可自我修复。

大鼠气管发生的形态学观察

本实验对胚胎第15天至出生后30天的大鼠气管上皮的发生过程进行了观察。证实胚胎第15天的气管上皮为假复层上皮,细胞表面有少量微绒毛;胚胎第17天,气管上皮出现典型的杯状细胞;胚胎第19天出现纤毛细胞;出生5天以后,上皮细胞增殖、聚集并内陷,形成气管腺。杯状细胞的粘液颗粒主要是中性粘多糖,气管腺的粘液颗粒为酸性粘多糖和中性粘多糖。实验结果表明:在胚胎期和生后早期,粘液纤毛运送系主要由纤毛细胞和杯状细胞等组成,出生5天以后,粘液纤毛运送系统主要由纤毛细胞和气管腺组成。