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板蓝根多糖对NF-κB活性的作用 被引量:21
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作者 吴慧平 陈建伟 +2 位作者 李祥 戴晓明 哈团柱 《药物生物技术》 CAS CSCD 2001年第5期276-278,共3页
观察板蓝根多糖对核因子 κB(nuclearfactorKappaB ,NF κB)核结合活性的影响。以内毒素 (LPS)刺激J744 .a .1小鼠的巨噬细胞株 ,可诱生出较高的NF κB与DNA结合活性 ,分别采用LPS预刺激、LPS后刺激和LPS与板蓝根多糖同时刺激等 3种方... 观察板蓝根多糖对核因子 κB(nuclearfactorKappaB ,NF κB)核结合活性的影响。以内毒素 (LPS)刺激J744 .a .1小鼠的巨噬细胞株 ,可诱生出较高的NF κB与DNA结合活性 ,分别采用LPS预刺激、LPS后刺激和LPS与板蓝根多糖同时刺激等 3种方法对其处理 ,分离核蛋白 ,进行NF κB与DNA结合活性测定 ,结果用光密度扫描定量分析。板蓝根多糖在 3种情况下均可降低LPS刺激所致的NF 展开更多
关键词 板蓝根多糖 核因子(NF-κB)
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肝动脉热化疗栓塞术后患者血清新喋呤和T淋巴细胞rDNA转录活性的改变 被引量:4
2
作者 黄文 周殿元 +2 位作者 王继德 许刚 张卫民 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2003年第4期368-370,共3页
目的 研究原发性肝癌患者肝动脉热化疗栓塞术前后血清新喋呤和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的变化及其临床意义。方法 分别用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)和核仁形成区相关蛋白银染技术测定45例中晚期肝癌行肝动脉热化疗栓塞术治疗前后... 目的 研究原发性肝癌患者肝动脉热化疗栓塞术前后血清新喋呤和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的变化及其临床意义。方法 分别用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)和核仁形成区相关蛋白银染技术测定45例中晚期肝癌行肝动脉热化疗栓塞术治疗前后血清新喋呤和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的改变,并与健康对照组比较分析。结果 肝癌组治疗前新喋呤增高,外周血T淋巴细胞rDNA转录活性降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);行肝动脉热化疗栓塞术后,患者血清新喋呤降低,外周血T淋巴细胞rDNA转录活性增高,治疗前后有显著性差异(P<0.05);应用免疫调节剂(r-IL-2和r-IFN)组较未用组血清新喋呤下降和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性升高更显著。结论 检测原发性肝癌患者血清新喋呤和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的情况,有助于了解病人的免疫状况,肝动脉热化疗栓塞术能改善机体免疫功能,给予合理的过继免疫治疗能增强这种作用。 展开更多
关键词 肝动脉热化疗栓塞术 术后 血清 新喋呤 T淋巴细胞rDNA转录活性 原发性肝癌
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PAX3对靶基因MITF转录活性调控的实验研究 被引量:4
3
作者 张华 常尚揆 +3 位作者 冯永 钱敏飞 李吉平 张淳 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期505-509,共5页
目的探讨配对盒基因(pair box 3,PAX3)突变对小眼球畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因转录活性的影响及其在I型Waardenburg综合征(Waardenburg syndrome,WS)发病中的作用。方法野生型PAX3及... 目的探讨配对盒基因(pair box 3,PAX3)突变对小眼球畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因转录活性的影响及其在I型Waardenburg综合征(Waardenburg syndrome,WS)发病中的作用。方法野生型PAX3及其致病突变H80D和H186fsX5表达质粒瞬时转染293T细胞,应用荧光素酶活性检测系统对MITF报告基因活性检测,观察野生/突变PAX3蛋白对其靶基因MITF转录活性的调控作用及二个突变蛋白对野生PAX3蛋白功能的影响;应用生物素标记的含序列attaat的DNA寡核苷酸链探针分别沉淀PAX3、H80D和H186fsX5蛋白,检测野生/突变PAX3蛋白与靶基因MITF启动子的结合力。结果尽管H80D蛋白仍残余部分功能可增加MITF启动子转录活性,但与野生PAX3蛋白相比,二者差异有显著统计学意义(P<0.01),而H186fsX5蛋白则完全失去调控MITF启动子转录活性作用(P<0.01);二者均未对野生PAX3蛋白功能产生显性负效应作用(P>0.05)。突变H80D蛋白与野生PAX3蛋白均可与MITF启动子特异DNA序列attaat结合,而突变H186fsX5蛋白则不能与之结合。结论 H80D和H186fsX5影响靶基因MITF转录活性,使其表达下调、黑色素合成减少,以单倍体剂量不足效应致I型WS。 展开更多
关键词 WAARDENBURG综合征 配对盒基因 基因突变 小眼球畸形相关转录因子
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熊果酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响及机制研究 被引量:5
4
作者 王文隆 邓洁 +6 位作者 赵崇强 张双双 赵俊燕 白融 张存泰 林立 吕家高 《心肺血管病杂志》 CAS 2013年第5期624-627,共4页
目的:使用熊果酸(ursolic acid,UA)干预大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC),观察对信号转导与转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)磷酸化蛋白(P-STAT3)表达的影响,观察其对V... 目的:使用熊果酸(ursolic acid,UA)干预大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC),观察对信号转导与转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)磷酸化蛋白(P-STAT3)表达的影响,观察其对VSMC增殖和迁移能力的影响,并探讨可能的机制。方法:应用不同浓度的UA干预VSMC,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况,采用划痕实验观察各组细胞的迁移能力变化,采用Western Blot法检测各组细胞P-STAT3及T-STAT3蛋白的表达改变。结果:10μmol/L或25μmol/L UA可下调VSMC中P-STAT3蛋白的表达;UA可显著抑制细胞的增殖率,当药物浓度为10μmol/L或25μmol/L时,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且25μmol/L组与10μmol/L组组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果显示药物干预后的细胞迁移能力受到抑制。结论:UA可能通过下调P-STAT3表达抑制VSMC的增殖及迁移能力。 展开更多
关键词 熊果酸 血管平滑肌细胞 信号转导与转录激活因子3 增殖 迁移
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基因沉默及其克服策略 被引量:3
5
作者 叶爱华 吴延军 杨莉 《中国农学通报》 CSCD 2003年第1期81-83,120,共4页
基因沉默现象是导致转基因不能正常表达的主要原因。基因沉默发生在两种水平上。一种是由于DNA甲基化、异染色质化以及位置效应等引起的转录水平上的基因沉默 ;另一种是转录后基因沉默 ,有活跃的启动子 ,能转录外源基因 ,核内有正常水平... 基因沉默现象是导致转基因不能正常表达的主要原因。基因沉默发生在两种水平上。一种是由于DNA甲基化、异染色质化以及位置效应等引起的转录水平上的基因沉默 ;另一种是转录后基因沉默 ,有活跃的启动子 ,能转录外源基因 ,核内有正常水平的mRNA ,细胞质不积累mRNA。消除甲基化的影响 ,避免使用同源和重复序列和使用核基质结合序列可有效克服基因沉默。 展开更多
关键词 基因沉默 转录水平 核基质 结合序列 植物 遗传转化技术
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PFKFB3在肝癌中的表达及其临床意义 被引量:3
6
作者 吴二斌 李莉华 郭子健 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第6期508-511,共4页
目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PFKFB3在42例HCC组织及其对应癌旁组织中的表达情况,并研究其与临床病理参数... 目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PFKFB3在42例HCC组织及其对应癌旁组织中的表达情况,并研究其与临床病理参数(性别、年龄、肿瘤直径、淋巴转移、静脉癌栓、治疗前甲胎蛋白、分化程度及肝内转移)间的关系,采用Kaplan-Meier法分析PFKFB3 mRNA表达对HCC患者生存的影响。结果 HCC和癌旁组织中PFKFB3 mRNA的阳性表达率分别为73.81%(31/42)和52.38%(22/42),相对表达量为1.075±0.171和0.877±0.451,HCC组织中PFKFB3mRNA的阳性表达率及相对表达量均高于癌旁组织(P<0.05);PFKFB3 mRNA的表达与肿瘤TNM分期、分化程度、肝内转移及总生存期有关(P<0.05)。结论 PFKFB3在HCC的发生发展中发挥作用,且影响肝癌的分化、转移并提示肝癌患者预后不佳;可作为评估HCC恶性程度的生物学指标。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖激酶-2 果糖双磷酸酶-2同工酶3 肝细胞癌 逆转录-聚合酶链反应 预后
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TLR4/MyD88信号通路在树突状细胞-肾癌786-0细胞株融合瘤苗中的作用 被引量:2
7
作者 谭小军 胡自力 刘富 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1576-1581,共6页
目的探讨TOLL样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)信号通路在树突状细胞(dentric cell,DC)-肾癌786-0细胞融合瘤苗中的变化及作用。方法用正常人外周血诱导不成熟的树突状细胞... 目的探讨TOLL样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)信号通路在树突状细胞(dentric cell,DC)-肾癌786-0细胞融合瘤苗中的变化及作用。方法用正常人外周血诱导不成熟的树突状细胞(immature dentric cell,imDC),利用聚乙二醇法(PEG)制成imDC-肾癌-786-0细胞融合瘤苗;用透射电镜观察imDC融合前后变化情况;RT-PCR检测单纯imDC组,肾癌786-0细胞组,imDC-肾癌-786-0融合瘤苗组在6、12、24、48 h中TLR4及MyD88 mRNA变化情况;用激光共聚焦检测imDC中核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在融合前后转位情况;流式细胞仪检测imDC在融合前后CD86、HLA-DR变化;噻唑盐(MTT)法检测各组体外刺激T淋巴细胞的增殖能力及刺激的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的杀瘤活性。结果透射电镜显示融合细胞中imDC转变为mDC;TLR4及MyD88 mRNA在肾癌中不表达,在单纯imDC中呈低表达(TLR4/β-actin灰度比值0.40±0.03,MyD88/GAPDH灰度比值0.33±0.03),在融合瘤苗组中6 h表达最强(TLR4/β-actin灰度比值0.73±0.18,MyD88/GAPDH灰度比值为0.45±0.18),明显强于各组(P<0.05),此后在融合细胞中逐渐减弱,48 h基本不表达;激光共聚焦显示NF-κB在融合前位于imDC细胞质,融合后转移至细胞核;流式细胞仪提示融合瘤苗HLA-DR、CD86表达分别为81%、80%,明显高于imDC组(63%、59%)及肾癌细胞组(P<0.05);MTT法示融合疫苗在体外刺激T淋巴细胞增殖能力[D(570)值(1.95±0.22)]强于imDC组(1.31±0.35)及肾癌786-0组(1.28±0.33)(P<0.05),并且其诱导产生的CTLs对自体肾癌细胞具有显著的杀伤活性。结论 TLR4/MyD88-NF-κB信号通路在imDC与肾癌786-0细胞融合过程中促使树突状细胞成熟发挥了非常重要的作用,并且此信号通路能促使树突状细胞功能发生转变。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 树突状细胞 肾癌 融合瘤苗 核转录因子 半定量RT—PCR
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股密葆含药血清对成骨细胞分化成熟的影响及其作用机制 被引量:2
8
作者 宋奕 丁道芳 +4 位作者 李玲慧 杜国庆 刘锦涛 詹红生 姜宏 《中医正骨》 2014年第3期9-13,共5页
目的:探讨股密葆含药血清对成骨细胞分化成熟的影响及其作用机制。方法:将20只2月龄雌性SD大鼠随机分成4组,对照组8只,高、中、低浓度股密葆组各4只。对照组按10 mL·kg-1体质量以生理盐水灌胃,高浓度组按10 mL·kg-1体质量以2 ... 目的:探讨股密葆含药血清对成骨细胞分化成熟的影响及其作用机制。方法:将20只2月龄雌性SD大鼠随机分成4组,对照组8只,高、中、低浓度股密葆组各4只。对照组按10 mL·kg-1体质量以生理盐水灌胃,高浓度组按10 mL·kg-1体质量以2 430 mg·mL-1股密葆混悬液灌胃,中浓度组按10 mL·kg-1体质量以1 215 mg·mL-1股密葆混悬液灌胃,低浓度组按10mL·kg-1体质量以607.5 mg·mL-1股密葆混悬液灌胃。每天灌胃1次,连续3 d。末次灌胃后1 h提取各组实验大鼠含药血清,低温保存备用。将10只新生SD大鼠处死,取其颅骨,采用多次酶消化法分离出成骨细胞。将第1代成骨细胞分别在含有对照组大鼠血清及高、中、低浓度股密葆含药血清的培养基中培养1周后,采用染色法检测碱性磷酸酶表达情况,采用Western Blotting法检测Ⅰ型胶原、Runt相关转录因子2、β连环素及转录因子4的蛋白表达情况。结果:①成骨细胞中碱性磷酸酶的表达。与对照组比较,各浓度股密葆含药血清组碱性磷酸酶染色较深,其中中浓度组染色最深。②成骨细胞中Ⅰ型胶原蛋白的表达。对照组、高浓度组、中浓度组、低浓度组Ⅰ型胶原蛋白的表达量比较,差异有统计学意义[(1.172±0.047),(2.023±0.131),(2.792±0.737),(2.235±0.525),F=6.466,P=0.016]。组间两两比较,中浓度组、低浓度组高于对照组(P=0.003,P=0.022);高浓度组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.052);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。③成骨细胞中Runt相关转录因子2蛋白的表达。各组Runt相关转录因子2蛋白的表达量比较,差异有统计学意义[(1.968±0.263),(2.255±0.286),(2.675±0.181),(2.652±0.211),F=6.066,P=0.019]。组间两两比较,中浓度组、低浓度组高于对照组(P=0.007,P=0.008);高浓度组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.180);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。④成骨细胞中β连环蛋白的表达。各组β连环蛋白表达量比较,差异有统计学意义[(1.571±0.140),(2.264±0.265),(2.783±0.432),(2.860±0.576),F=6.980,P=0.013]。组间两两比较,中、低浓度组均高于对照组(P=0.005,P=0.004);高浓度组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.061);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。⑤成骨细胞中转录因子4蛋白的表达。各组转录因子4蛋白表达量比较,差异有统计学意义[(3.268±0.298),(3.941±0.360),(4.446±0.443),(4.186±0.249),F=6.431,P=0.016]。组间两两比较,高、中、低浓度组均高于对照组(P=0.044,P=0.003,P=0.012);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:适当浓度股密葆含药血清可促进成骨细胞的分化,其作用机制或许与Wnt/β连环素信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 股骨头坏死 成骨细胞 股密葆 含药血清 碱性磷酸酶 胶原Ⅰ型 Runt相关转录因子2 Β连环素 转录因子4
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高脂饲养大鼠脂肪组织抵抗素、脂联素及其受体的表达 被引量:1
9
作者 李春霖 龚燕平 +5 位作者 田慧 陆菊明 母义明 李明 肖彧君 潘长玉 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第6期701-704,共4页
目的阐明抵抗素、脂联素及其受体在胰岛素抵抗发生中的作用。方法30只Wistar雄性大鼠随机分为对照组和高脂组。用逆转录聚合酶链反应和Southern blot方法分析抵抗素、脂联素和脂联素受体表达的改变。结果高脂组大鼠体重明显增加,空腹血... 目的阐明抵抗素、脂联素及其受体在胰岛素抵抗发生中的作用。方法30只Wistar雄性大鼠随机分为对照组和高脂组。用逆转录聚合酶链反应和Southern blot方法分析抵抗素、脂联素和脂联素受体表达的改变。结果高脂组大鼠体重明显增加,空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇、总游离脂肪酸、胰岛素和HOMA胰岛素抵抗指数明显高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇明显低于对照组,糖耐量和胰岛素耐量明显下降(P均<0.01)。高脂组脂肪组织抵抗素和脂联素的表达均明显下降(P<0.01);脂联素受体1的表达呈下降趋势,但与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。结论抵抗素和脂联素表达的下降在高脂饮食导致的胰岛素抵抗的发生中起着重要作用,脂联素受体1水平的降低可能是脂联素敏感性降低的重要原因之一。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 高脂对脂肪细胞因子的影响 逆转录聚合酶链反应 高脂饲养 脂联素 脂联素受体 抵抗素
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Down-regulation of STAT3 expression by vector-based small interfering RNA inhibits pancreatic cancer growth 被引量:6
10
作者 Chen Huang Guang Yang +3 位作者 Tao Jiang Jun Cao Ke-Jian Huang Zheng-Jun Qiu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第25期2992-3001,共10页
AIM:To evaluate the effect of RNA interference (RNAi) mediated silence of signal transduction and activation of transcription (STAT)3 on the growth of human pancreatic cancer cells both in vitro and in vivo.METHODS:ST... AIM:To evaluate the effect of RNA interference (RNAi) mediated silence of signal transduction and activation of transcription (STAT)3 on the growth of human pancreatic cancer cells both in vitro and in vivo.METHODS:STAT3 specific shRNA was used to silence the expression of STAT3 in pancreatic cancer cell line SW1990.The anti-growth effects of RNAi against STAT3 were studied in vitro and in experimental cancer xenografts in nude mice.The potential pathways involved in STAT3 signaling were detected using reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting.RESULTS:The expression of the STAT3 was inhibited using RNAi in SW1990 cells.RNAi against STAT3 inhibited cell proliferation,induced cell apoptosis and significantly reduced the levels of CyclinD1 and Bcl-xL when compared with parental and control vector-transfected cells.In vivo experiments showed that RNAi against STAT3 inhibited the tumorigenicity of SW1990 cells and significantly suppressed tumor growth when it was directly injected into tumors.CONCLUSION:STAT3 signaling pathway plays an important role in the progression of pancreatic cancer,and silence of STAT3 gene using RNAi technique may be a novel therapeutic option for treatment of pancreatic cancer. 展开更多
关键词 Signal transduction and activation of tran-scription 3 RNA interference Pancreatic cancer GROWTH
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TTF-1、EGFR肿瘤浸润性树突状细胞在肺腺癌中的表达情况及其临床意义 被引量:4
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作者 姜明明 邸庆国 +2 位作者 买智涛 万善志 孙宝华 《癌症进展》 2018年第3期321-323,348,共4页
目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)、表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤浸润性树突状细胞(TIDC)在肺腺癌中的表达情况及其临床意义。方法回顾性收集肺腺癌患者100例,比较肿瘤组织和癌旁组织中EGFR、TTF-1、TIDC表达水平,同时分析肿瘤组织中E... 目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)、表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤浸润性树突状细胞(TIDC)在肺腺癌中的表达情况及其临床意义。方法回顾性收集肺腺癌患者100例,比较肿瘤组织和癌旁组织中EGFR、TTF-1、TIDC表达水平,同时分析肿瘤组织中EGFR、TTF-1、TIDC与肺腺癌患者肿瘤分化程度和TNM分期的关系。结果肿瘤组织中TIDC数密度、MHC-Ⅱ阳性DC、CD54阳性DC均明显低于癌旁组织,TTF-1阳性率、EGFR突变率均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01);肿瘤细胞为中低分化及TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者TIDC数密度、MHC-Ⅱ阳性DC、CD54阳性DC均低于高分化患者及Ⅰ~Ⅱ期患者,TTF-1阳性率、EGFR突变率均高于高分化患者及Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 TIDC在肿瘤组织中表达水平较低,且多为不成熟的调节性DC细胞,TTF-1在肺腺癌中表达水平较高,EGFR突变率增高。EGFR、TTF-1、TIDC均与临床分期和肿瘤细胞分化程度有关。 展开更多
关键词 肺腺癌 肿瘤浸润性树突状细胞 表皮生长因子受体 甲状腺转录因子-1
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基于SOCS1/JAK-STAT3通路探究雷公藤红素治疗特应性皮炎小鼠的作用机制 被引量:3
12
作者 段垚 朱立宏 董延萍 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第2期290-297,共8页
目的:基于细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)/Janus激酶(JAK)/信号转导子和转录激活物3(STAT3)通路,初步探究雷公藤红素治疗特应性皮炎(AD)的机制。方法:取C57BL/6小鼠,耳背部涂布卡泊三醇(MC903)诱导建立AD模型,并随机分为模型组、雷... 目的:基于细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)/Janus激酶(JAK)/信号转导子和转录激活物3(STAT3)通路,初步探究雷公藤红素治疗特应性皮炎(AD)的机制。方法:取C57BL/6小鼠,耳背部涂布卡泊三醇(MC903)诱导建立AD模型,并随机分为模型组、雷公藤红素组、SOCS1基因低表达(si-SOCS1)组、雷公藤红素+si-SOCS1(联合)组、si-SOCS1阴性对照(si-NC)组,每组10只,另取10只正常C57BL/6小鼠作为正常对照组。给予一定剂量药物干预治疗后,观察小鼠症状,对抓挠行为和皮炎症状进行评分;ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和免疫球蛋白E(IgE);HE染色观察耳部组织病理变化;取耳部皮肤组织,免疫组化法检测SOCS1及T淋巴细胞表面标志物CD3阳性表达;RT-qPCR法检测SOCS1及上游靶基因-miR-155表达;Western blotting法检测SOCS1/JAK-STAT3通路蛋白及下游炎症相关蛋白IL-17、RORγt、IL-23、IL-6表达。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠耳部皮肤增生、水肿充血及炎症浸润等病理损伤加重,皮炎症状评分、搔抓次数、血清炎症因子、CD3阳性表达、JAK-STAT3通路蛋白及炎症相关蛋白表达、miR-155表达升高(P<0.05),SOCS1基因及蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组相比,si-SOCS1组小鼠耳部皮肤组织损伤进一步加重,AD症状评分、搔抓次数、血清炎症因子、CD3阳性表达、JAK-STAT3通路蛋白、炎症相关蛋白表达进一步升高,SOCS1基因及蛋白表达进一步降低(P<0.05);雷公藤红素组小鼠耳部皮肤组织SOCS1基因及蛋白表达升高(P<0.05),血清炎症因子、miR-155、JAK-STAT3通路蛋白及炎症相关蛋白、CD3阳性表达、AD皮炎症状评分、搔抓次数降低(P<0.05)。与雷公藤红素组相比,联合组小鼠皮炎症状评分、搔抓次数、血清炎症因子、CD3阳性表达、JAK-STAT3通路蛋白及炎症相关蛋白表达、miR-155表达升高(P<0.05),SOCS1基因及蛋白表达降低(P<0.05)。结论:雷公藤红素可通过上调SOCS1表达,抑制JAK-STAT3通路激活,阻断T淋巴细胞活化,改善AD小鼠皮肤炎症症状。 展开更多
关键词 雷公藤红素 细胞因子信号转导抑制因子1 JANUS激酶 信号转导子和转录激活物3 特应性皮炎
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HCV5'端非编码区cDNA的体外转录 被引量:1
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作者 李刚 姚集鲁 +2 位作者 彭文伟 王斌 陈青 《中国病毒学》 CSCD 1996年第4期332-337,共6页
采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从广东省一例慢性丙型肝炎病人血清中获得丙型肝炎病毒(HCV)5'端非编码区(5'NCR)302bp的cDNA片段,经补齐和提纯后插入pUC19质粒,获得的重组体pUN进行序列测定... 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从广东省一例慢性丙型肝炎病人血清中获得丙型肝炎病毒(HCV)5'端非编码区(5'NCR)302bp的cDNA片段,经补齐和提纯后插入pUC19质粒,获得的重组体pUN进行序列测定。将pUN的目的基因亚克隆进体外转录载体pSPORTI多克隆位点的EooRI和PstI切点之间,所得重组体pSN线性化后由T_7RNA多聚酶及SP6RNA多聚酶引导体外转录反应,产物经凝胶电泳及特异引物RT-PCR,证实SP6引导的是正义RNA,T7合成的是反义RNA,其大小分别力429bp和362bp。并证实所得RNA力HCV5'NCRcDNA转录而来。获得的HCV5'NCRcDNA和RNA在常规逆转录和PCR步骤中用于设立有效的模板对照,对消除假用性及评估试剂有重要意义。同时,HCV5'NCR体外转录载体的构建可用于制各RNA探针和反义RNA,改进后还可作为定量PCR的竞争性模板。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 分子克隆 体外转录 CDNA
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急性髓系白血病基因危险度分层的临床研究 被引量:1
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作者 董颖 张雄 +2 位作者 龚燕玲 古茂群 曾权祥 《中国当代医药》 2018年第31期7-10,共4页
目的检测急性髓系白血病(AML)患者Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)、核磷蛋白1(NPM1)、Ⅲ型酪氨酸激酶(C-KIT)及髓系转录因子CCAAT增强子结合蛋白-a(CEBPA)基因表达情况,探讨基因突变者临床特征。方法选取2015年4月~2017年4月我院的80例AML患者... 目的检测急性髓系白血病(AML)患者Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)、核磷蛋白1(NPM1)、Ⅲ型酪氨酸激酶(C-KIT)及髓系转录因子CCAAT增强子结合蛋白-a(CEBPA)基因表达情况,探讨基因突变者临床特征。方法选取2015年4月~2017年4月我院的80例AML患者,检测骨髓染色体核型及基因突变情况,比较各基因突变患者的临床特征及预后相关指标。结果 80例AML患者中,染色体核型正常占比43.75%,异常占比56.25%;FLT3-ITD、NPM1、C-KIT-D861V、CEBPA基因突变阳性检出率分别为15.00%、17.50%、7.50%、8.75%,对应正常核型中检出率分别为25.71%、28.57%、0.00%、20.00%;FLT3-ITD基因突变阳性组骨髓原始细胞比例显著高于FLT3-ITD基因突变阴性组(P<0.05),而血红蛋白(Hb)浓度、免疫表型CD117及人类白细胞抗原DR(HLA-DR)表达阳性差异无统计学意义(P>0.05);NPM1基因突变、C-KIT-D861V基因突变阳性组与阴性组的骨髓原始细胞比例、Hb浓度、免疫表型CD117及HLA-DR表达阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);CEBPA基因双突变的Hb浓度显著高于阴性组(P<0.05),而骨髓原始细胞比例、免疫表型CD117及HLA-DR表达阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);FLT3-ITD突变阳性组的完全缓解(CR)率、1年无病生存(DFS)率及1年内总生存(OS)率均显著低于阴性组(P<0.05),NPM1突变、C-KIT-D861V突变、CEBPA双突变阳性组与阴性组在CR率、DFS率比较差异无统计学意义(P>0.05),但NPM1突变、CEBPA双突变阳性组的OS率显著高于阴性组(P<0.05),C-KIT-D861V突变阳性组的OS率显著低于阴性组(P<0.05)。结论 AML患者FLT3、NPM1、C-KIT、CEBPA不同基因突变者显示出一定程度不同临床特征,FLT3、C-KIT基因突变者预后不良,NPM1、CEBPA基因突变者预后良好。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 Fms样酪氨酸激酶3基因 核磷蛋白1基因 Ⅲ型酪氨酸激酶基因 髓系转录因子CCAAT增强子结合蛋白-a基因 基因突变
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褐飞虱羧酸酯酶基因cDNA片段的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 杨之帆 何光存 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第2期195-198,共4页
利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱羧酸酯酶基因编码区的cDNA片段,并进行了序列测定.结果表明,所克隆到的cDNA片段长度为396 bp,经BLAST查找比对发现,该片段所编码的氨基酸序列与来自铜绿蝇、家蝇、沟鼠、黑腹果蝇、线... 利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱羧酸酯酶基因编码区的cDNA片段,并进行了序列测定.结果表明,所克隆到的cDNA片段长度为396 bp,经BLAST查找比对发现,该片段所编码的氨基酸序列与来自铜绿蝇、家蝇、沟鼠、黑腹果蝇、线虫和埃及伊蚊的羧酸酯酶的片段存在高度同源性.Northern杂交分析显示,在褐飞虱取食抗性水稻后,羧酸酯酶基因表达水平明显升高.以上结果表明,羧酸酯酶基因的表达受抗性水稻的诱导,该基因在有毒化学物质解毒及增强褐飞虱对抗性水稻的耐受性方面可能起着重要作用. 展开更多
关键词 褐飞虱 RT-PCR 羧酸酯酶基因 Northem杂交分析
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Genome-Wide Identification and Characterization of the <i>Dof</i>Transcription Factor Gene Family in <i>Phaseolus vulgaris</i>L. 被引量:1
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作者 Tania Mayumi Ito Claudia Borsari Trevizan +1 位作者 Tiago Benedito dos Santos Silvia Graciele Hülse de Souza 《American Journal of Plant Sciences》 2017年第12期3233-3257,共25页
The Dof (DNA-binding with one finger) proteins are a class of plant-specific transcription factors that can trigger several processes involved in plant growth and development, as well as in stress responses. Here, we ... The Dof (DNA-binding with one finger) proteins are a class of plant-specific transcription factors that can trigger several processes involved in plant growth and development, as well as in stress responses. Here, we performed a systematic bioinformatics analysis to characterize all Dof genes in common bean, which included analysis of the genome sequence, conserved protein domains, chromosomal locations, subcellular locations, phylogenetic relationships, gene duplications, and gene expression profiles in different tissues. Bioinformatics analysis revealed 36 putative genes related to PvDof that were classified into seven subfamilies (A, B1, B2, C1, C2, D1, and, D2) by comparative phylogenetic analysis. Based on our genome duplication analysis, a total of 36 genes were found to be distributed on all 11 chromosomes, and they expanded through gene duplication in tandem, suggesting the involvement of segmental duplication events in the evolutionary process. Synteny events and phylogenetic comparisons of the Dof proteins of common bean with those of A. thaliana, O. sativa, and G. max L. led to the identification of several orthologous and paralogous genes, which provided further insight into the diversity of the evolutionary characteristics of genes of this family in other plant species. Expression profiles revealed that most of the PvDof genes were expressed in different tissues, indicating that PvDof genes may be involved in various physiological functions during plant development. The results of this study provide additional information and potential biotechnological resources for further understanding the molecular basis of this gene family and consequently improvement of common bean crops. 展开更多
关键词 Common BEAN DNA-BINDING with One Finger (Dof) Domain Proteins tran-scription Factor
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创伤性休克致兔急性肺损伤中JAK/STAT通路的活化情况
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作者 史秀云 柳云恩 +8 位作者 张玉彪 佟昌慈 刘学磊 刘颖 丛培芳 施琳 金红旭 高燕 侯明晓 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期754-757,共4页
目的探讨创伤性休克致兔急性肺损伤(ALI)中Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)通路在不同时间点的表达变化情况。方法30只实验兔随机分为对照组、0h模型组、6h模型组、12h模型组和24h模型组,分别取得各组动物的血浆样本... 目的探讨创伤性休克致兔急性肺损伤(ALI)中Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)通路在不同时间点的表达变化情况。方法30只实验兔随机分为对照组、0h模型组、6h模型组、12h模型组和24h模型组,分别取得各组动物的血浆样本和肺组织样本,通过ELISA、Western blot以及实时荧光定量PCR等技术检测不同时间点髓过氧化物酶(MPO)、CC16、JAK和STAT的表达。结果MPO在模型组液体复苏后有所升高,但均低于对照组(P〈0.05),模型组肺组织CC16在0h表达明显升高,6h表达下降,12h表达继续下降,24h表达有所升高,差异具有统计学意义(P〈0.05)。同时模型组JAK2和STAT3表达也明显升高,模型组6h和12h表达下降(P〈0.05),24hSTAT表达有所下降,但与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.01)。结论创伤性休克致兔ALI中JAK/STAT通路的相关蛋白表达被活化。 展开更多
关键词 创伤性休克 急性肺损伤(ALI) Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)通路
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RET融合基因在鼻咽癌中的检测
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作者 张晶 黄培钰 +1 位作者 严岳 张力 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2013年第4期305-309,共5页
目的筛查RET融合基因在鼻咽癌组织和细胞系中的表达情况。方法利用组织芯片通过荧光原位杂交(FISH)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测137例鼻咽癌组织和6株常见鼻咽癌细胞系中RET融合基因的表达情况。结果在鼻咽癌组织和细胞系中... 目的筛查RET融合基因在鼻咽癌组织和细胞系中的表达情况。方法利用组织芯片通过荧光原位杂交(FISH)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测137例鼻咽癌组织和6株常见鼻咽癌细胞系中RET融合基因的表达情况。结果在鼻咽癌组织和细胞系中均未发现RET基因出现断裂融合,同时在细胞系中亦未发现KIF5B/RET基因的表达。结论鼻咽癌中未发现RET融合基因的表达,RET基因在鼻咽癌发生、发展中并未起主导作用,或许不能作为治疗鼻咽癌的靶点,因此需要进行鼻咽癌全基因组分析。 展开更多
关键词 鼻咽癌 RET融合基因 荧光原位杂交 反转录聚合酶链式反应
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胃癌组织中HIF-1α、STAT3的表达变化及其与患者预后的关系 被引量:8
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作者 陈昌荣 徐桂芳 +5 位作者 周志华 管文贤 汪灏 孙琦 徐新运 张伟杰 《山东医药》 CAS 2014年第43期5-7,共3页
目的观察胃癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、信号传导与转录活化因子3(STAT3)的表达变化及其与患者预后的关系。方法免疫组化染色法检测123例份胃癌根治术切除的胃癌组织和53例份正常胃黏膜组织中的HIF-1α和STAT3。结果胃癌组织中H... 目的观察胃癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、信号传导与转录活化因子3(STAT3)的表达变化及其与患者预后的关系。方法免疫组化染色法检测123例份胃癌根治术切除的胃癌组织和53例份正常胃黏膜组织中的HIF-1α和STAT3。结果胃癌组织中HIF-1α、STAT3的阳性表达率分别为64.2%(79/123)和62.6%(77/123),与正常胃黏膜组织的39.6%(21/53)和43.4%(23/53)相比,P均<0.05。HIF-1α及STAT3的阳性表达与胃癌病理分化程度、肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移、TNM分期及有无血管侵袭有关(P均<0.05),HIF-1α、STAT3共同阳性表达率随胃癌TNM分期的升高而升高(r=0.377,P<0.05)。胃癌组织中HIF-1α与STAT3的表达呈正相关(r=0.335,P<0.05)。HIF-1α和STAT3阳性表达者术后5年生存率分别为21.9%和27.4%,阴性表达者分别为51.2%和41.5%,二者相比,P均<0.05。胃癌组织中HIF-1α阳性表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素(RR=2.162,P<0.05)。结论胃癌组织中HIF-1α、STAT3的阳性表达率升高,二者的表达呈正相关,HIF-1α、STAT3阳性表达者的预后差,HIF-1α阳性表达和TNM分期对评估胃癌患者的预后有一定价值。 展开更多
关键词 胃肿瘤 胃癌 缺氧诱导因子-1Α 信号传导与转录活化因子3
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稀有鮈鲫神经发育相关基因的克隆、同源性分析及组织分布 被引量:4
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作者 陈曦 洪响生 +2 位作者 吴慧敏 查金苗 覃剑晖 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期173-181,共9页
作为重要的本土模式鱼类,稀有鮈鲫神经发育相关的生物学背景几乎空白,导致其在神经毒性评价方面的应用受到限制。本文从稀有鮈鲫脑部克隆得到了神经发育相关的神经生长因子(nerve growth factor;ngf)、脑源性神经营养因子(brain-derived... 作为重要的本土模式鱼类,稀有鮈鲫神经发育相关的生物学背景几乎空白,导致其在神经毒性评价方面的应用受到限制。本文从稀有鮈鲫脑部克隆得到了神经发育相关的神经生长因子(nerve growth factor;ngf)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor;bdnf)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein;gfap)、髓鞘相关糖蛋白(myelin-associated glycoprotein;mag)、P0蛋白(myelin protein zero;mpz)、微管蛋白α1(α1-tubulin)和Y染色体性别决定基因10(SRY-box containing gene 10;sox10)等基因的片段,并对其进化树及表达谱进行了分析。序列分析表明,bdnf的核苷酸序列与鲫鱼、鲤鱼的同源性最高,均为98%;gfap、ngf、mag和α1-tubulin与斑马鱼的同源性最高,分别为95%、92%、92%和96%;mpz与黑头软口鲦的同源性最高,为94%;sox10与鳙鱼同源性最高,达97%。表达谱分析结果表明,ngf、bdnf、mag、mpz、α1-tubulin和sox10基因均在脑组织中表达量最高,gfap在脊髓中表达量最高,上述结果为这一模式鱼类在神经发育学和神经毒性效应评价方面的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 神经系统发育相关基因 稀有鮈鲫 克隆 同源性分析 组织分布
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