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IKBKE、YAP1和TEAD2在结直肠癌中的表达及临床意义
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作者 舒莉珊 赵洋 +3 位作者 吴宁琪 刘梦梦 吴琼 欧玉荣 《浙江医学》 CAS 2024年第9期943-949,I0006,共8页
目的探讨核因子κb激酶亚基ε的抑制剂(IKBKE)、Yes相关蛋白1(YAP1)和转录增强结构域转录因子2(TEAD2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其临床意义。方法收集2016年1月至2017年12月在蚌埠医科大学第一附属医院手术切除的142例CRC组织及对... 目的探讨核因子κb激酶亚基ε的抑制剂(IKBKE)、Yes相关蛋白1(YAP1)和转录增强结构域转录因子2(TEAD2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其临床意义。方法收集2016年1月至2017年12月在蚌埠医科大学第一附属医院手术切除的142例CRC组织及对应癌旁组织,采用免疫组化法检测标本中IKBKE、YAP1和TEAD2的表达情况。分析3种蛋白在CRC组织中表达的相关性,分析蛋白阳性率与患者临床病理参数及预后的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,比较这些蛋白不同表达情况患者的生存差异。采用Cox回归分析影响患者预后的危险因素。结果CRC组织中IKBKE、YAP1和TEAD2的阳性率均显著高于癌旁组织(65.5%比9.9%,73.9%比14.1%,66.9%比8.5%,均P<0.05)。IKBKE的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、肿瘤-淋巴结-远处转移(TNM)分期有关,YAP1和TEAD2的表达均与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关。Spearman秩相关分析显示CRC组织中IKBKE与YAP1、TEAD2表达均呈正相关(均P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析显示IKBKE、YAP1和TEAD2阳性表达组的总生存率降低。Cox回归分析显示IKBKE、YAP1和TEAD2阳性、肿瘤分化程度高、TNM分期高是CRC患者预后的独立危险因素。结论CRC中IKBKE、YAP1和TEAD2阳性表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、转移等因素有关,可能成为CRC治疗的潜在靶点;检测这3个蛋白的表达有助于评估预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 核因子κb激酶亚基ε的抑制剂 Yes相关蛋白1 转录增强结构域转录因子2 预后
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补阳还五汤通过调控PI3K/Akt、JAK2/STAT3信号促进BMSC趋化迁移对外伤性脊髓损伤大鼠神经元活性及认知功能的影响 被引量:1
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作者 宋颖军 李旭 +1 位作者 刘小舟 张国福 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第17期4206-4213,共8页
目的研究补阳还五汤通过调控磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、内源性酪氨酸激酶(JAK)2/信号传导和转录启动因子(STAT)3信号促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)趋化迁移对外伤性脊髓损伤大鼠的神经元活性及认知功能的影响。方法选取健... 目的研究补阳还五汤通过调控磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、内源性酪氨酸激酶(JAK)2/信号传导和转录启动因子(STAT)3信号促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)趋化迁移对外伤性脊髓损伤大鼠的神经元活性及认知功能的影响。方法选取健康大鼠53只,随机分为健康组(健康大鼠常规饲养)、损伤组(建立脊髓损伤模型)、干预组(补阳还五汤治疗)、对照组(甲泼尼龙治疗),每组12只,剩余5只大鼠用于补阳还五汤含药血清制备。流式细胞术鉴定BMSCs细胞。Transwell小室法测大鼠BMSCs迁移。高架十字迷宫和Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能。苏木素-伊红(HE)染色检测脊髓组织病理形态。TUNEL测脊髓组织神经细胞凋亡。免疫组化检测p-JAK2、p-STAT3。Western印迹测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt。结果传代后的培养细胞呈旋窝状或放射状贴壁生长,细胞多呈星形、梭形或三角状,培养3代后,细胞贴壁加快、形态均一,呈旋窝状或单层放射状生长。培养细胞表面抗原CD29、CD90为阳性,CD31、CD45为阴性,提示其为BMSCs细胞。与健康组相比,损伤组总路程、进入开臂次数、穿越平台次数显著降低,不同时间的潜伏期显著升高(P<0.05)。与损伤组相比,干预组与对照组总路程、进入开臂次数、穿越平台次数显著升高,不同时间的潜伏期显著降低(P<0.05)。干预组与对照组各指标对比无统计学差异(P>0.05)。健康组脊髓组织结构完整。损伤组脊髓组织疏松水肿,有细胞空泡变性产生。相较于损伤组,干预组与对照组大鼠脊髓组织病理形态有所改善。与健康组相比,损伤组BMSCs、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt显著降低,神经细胞凋亡率、p-JAK2、p-STAT3显著升高(P<0.05)。与损伤组相比,干预组BMSCs、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt显著升高,神经细胞凋亡率、p-JAK2、p-STAT3显著降低(P<0.05)。干预组与对照组各指标水平无统计学差异(P>0.05)。结论补阳还五汤通过激活PI3K/Akt通路抑制JAK2/STAT3信号通路的激活,促进BMSCs的迁移,减轻神经细胞的凋亡,起到神经保护的作用,从而改善脊髓损伤大鼠的认知功能。 展开更多
关键词 补阳还五汤 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶b(PI3K/Akt) 内源性酪氨酸激酶(JAK)2/信号传导和转录启动因子(STAT)3 骨髓间充质干细胞(bMSCs)趋化迁移 神经元活性 认知功能
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miR-21通过PTEN/AKT/TFEB通路对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响
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作者 郭俊玲 吴曼 +1 位作者 李颖 陈智 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第15期2766-2772,共7页
目的:探讨microRNA-21(miR-21)对心肌梗死诱导的心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响机制。方法:SD大鼠采用结扎左冠状动脉前降支法建立心肌梗死模型,造模成功后分为模型组、重组腺相关病毒血清型9(rAAV9)-NC组、rAAV9-anti-miR-21组、rAAV9-a... 目的:探讨microRNA-21(miR-21)对心肌梗死诱导的心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响机制。方法:SD大鼠采用结扎左冠状动脉前降支法建立心肌梗死模型,造模成功后分为模型组、重组腺相关病毒血清型9(rAAV9)-NC组、rAAV9-anti-miR-21组、rAAV9-anti-miR-21+BpV组,每组12只;另取12只大鼠作为假手术组。rAAV9-anti-miR-21组、rAAV9-NC组分别尾静脉注射含miR-21 antagomir及其阴性对照的腺病毒进行干预,rAAV9-anti-miR-21+BpV组大鼠尾静脉注射rAAV9-anti-miR-21的同时以0.2 mg/kg腹腔注射磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)抑制剂BpV,假手术组和模型组经腹腔和尾静脉注射等体积的生理盐水,每日1次,连续干预2周。经胸超声心动图检测大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD),并计算左心室射血分数(LVEF)和短轴缩短分数(FS);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清氨基末端脑钠尿肽前体(NT-proBNP)水平;取左心室并称重,计算左心室质量指数(LVMI);马松(Masson)染色观察心肌组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测左心室组织miR-21、PTEN、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平;透射电子显微镜观察心肌组织自噬情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测左心室组织自噬和PTEN/蛋白激酶B(AKT)/转录因子EB(TFEB)通路相关蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠LVEDD、LVESD、血清NT-proBNP水平、LVMI、心肌胶原体积分数(CVF)、miR-21和CollagenⅠ、CollagenⅢ的mRNA水平以及p62蛋白水平、p-AKT/AKT比值升高,LVEF、FS、PTEN的mRNA和蛋白水平、自噬空泡的数量以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、TFEB蛋白水平下降(P<0.05);与模型组比较,rAAV9-anti-miR-21组大鼠LVEDD、LVESD、血清NT-proBNP水平、LVMI、CVF、miR-21和CollagenⅠ、CollagenⅢ的mRNA水平、p62蛋白水平、p-AKT/AKT比值下降,LVEF、FS、PTEN的mRNA和蛋白水平、自噬空泡的数量以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、TFEB蛋白水平升高(P<0.05);而敲低miR-21基础上应用PTEN抑制剂下调PTEN表达可降低自噬,减弱敲低miR-21对心力衰竭大鼠心肌纤维化的抑制作用。结论:miR-21在心肌梗死后心力衰竭大鼠模型中的高表达可能通过下调PTEN、激活AKT、抑制TFEB的核易位,进而抑制自噬,促进心肌纤维化。 展开更多
关键词 心肌梗死 心力衰竭 MICRORNA-21 心肌纤维化 自噬 磷酸酶-张力蛋白同源物基因/蛋白激酶b/转录因子Eb通路 实验研究
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miR-199a-5p通过靶向JunB介导心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的作用机制
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作者 郑茜 张勇 +1 位作者 杨东伟 王东伟 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第4期636-642,共7页
目的:观察miR-199a-5p对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、Antagomir对照组、Antagomir组、Agomir对照组及Agomir组。除假手术组(18只)外,其余组大鼠采用... 目的:观察miR-199a-5p对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、Antagomir对照组、Antagomir组、Agomir对照组及Agomir组。除假手术组(18只)外,其余组大鼠采用持续14 d结扎左冠状动脉前降支诱导构建心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,成功诱导94只心力衰竭大鼠,剔除4只,随机分组,每组大鼠18只。分别给予Antagomir对照组、Antagomir组、Agomir对照组及Agomir组大鼠心肌内注射2×1010PFU/mL miR-199a-5p Antagomir对照液、Antagomir液、Agomir对照液及Agomir稀释液各100μL,假手术组与模型组大鼠均等量注射生理盐水。2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色法检测心肌组织病理损伤情况;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色法检测心脏缺血部位细胞凋亡水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组大鼠心肌组织中miR-199a-5p、转录因子活化蛋白激酶B(JunB)基因相对表达水平;双荧光素酶试验验证miR-199a-5p与JunB的靶向关系;免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠心肌组织内活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-Caspase 3)、JunB、淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积增加,组织结构不完整,心肌细胞排列错乱不规则,炎性细胞浸润,细胞间有明显凋亡,miR-199a-5p基因及Cleaved-Caspase 3、Bax蛋白表达水平升高,JunB mRNA及JunB、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,Antagomir对照组及Agomir对照组大鼠心肌病理组织学变化、相关基因和蛋白相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Antagomir组大鼠心肌组织病理情况显著改善,miR-199a-5p基因及Cleaved-Caspase 3、Bax蛋白表达水平降低,JunB mRNA及JunB、Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05);Agomir组大鼠心肌组织病理损伤加重,miR-199a-5p基因及Cleaved-Caspase 3、Bax蛋白表达水平升高,JunB mRNA及JunB、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。JunB为miR-199a-5p的靶基因。结论:miR-199a-5p可诱导心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡,可能与靶向抑制JunB表达有关。 展开更多
关键词 心力衰竭 miR-199a-5p 转录因子活化蛋白激酶b 靶向 心肌细胞凋亡 大鼠 实验研究
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滋阴明目方通过Akt/FoxO1/FasL通路抑制感光细胞凋亡治疗视网膜色素变性的机制研究
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作者 艾民 李丹阳 +3 位作者 周派 彭俊 杨毅敬 彭清华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2024年第2期206-212,共7页
目的观察滋阴明目方对视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)小鼠视网膜组织中磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)、叉头框蛋白1(forkhead box transcription factor O1,FoxO1)以及凋亡相关因子配体(Fas ligand... 目的观察滋阴明目方对视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)小鼠视网膜组织中磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)、叉头框蛋白1(forkhead box transcription factor O1,FoxO1)以及凋亡相关因子配体(Fas ligand,FasL)表达的影响,探讨滋阴明目方抑制感光细胞凋亡的机制。方法将60只rd10小鼠随机分为模型组、滋阴明目方低剂量组[10 g/(kg·d)]、滋阴明目方中剂量组[20 g/(kg·d)]、滋阴明目方高剂量组[40 g/(kg·d)]、维生素A组[5 g/(kg·d)],每组12只;选取12只C57小鼠作为空白对照组(等量生理盐水),每组连续干预28 d。通过眼底照相观察小鼠眼底形态改变;进行视网膜电图检查并记录A波和B波振幅;HE染色观察病理形态学变化并测定外核层厚度;Western blot法检测小鼠视网膜组织p-Akt、FoxO1、FasL、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白(cysteine aspartate-specific protease,Caspase)-3和Caspase-8蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组小鼠视盘苍白、变形,血管萎缩,视网膜电图的A波与B波振幅均降低(P<0.01),视网膜结构模糊,各层界限不清,感光细胞大量丧失,外核层明显变薄(P<0.01),视网膜组织中p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.01),FoxO1、FasL、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,滋阴明目方中、高剂量组及维生素A组小鼠眼底血管较清晰,无视盘苍白表现;视网膜各层结构清晰,细胞排列相对整齐。与模型组、滋阴明目方低剂量组比较,滋阴明目方中、高剂量组的A波与B波振幅、视网膜外核层厚度均明显升高(P<0.01),维生素A组的B波振幅、视网膜外核层厚度明显升高(P<0.01);与滋阴明目方中剂量组比较,滋阴明目方高剂量组的A波与B波振幅、视网膜外核层厚度均明显升高(P<0.01),维生素A组的A波与B波振幅均明显降低(P<0.01);与滋阴明目方高剂量组比较,维生素A组的A波与B波振幅、视网膜外核层厚度均明显降低(P<0.01)。与模型组比较,滋阴明目方低、中、高剂量组和维生素A组p-Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.01),FoxO1、FasL和Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01),滋阴明目方中、高剂量组Caspase-8蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与滋阴明目方低剂量组比较,滋阴明目方高剂量组和维生素A组p-Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.01),滋阴明目方中、高剂量组FoxO1、FasL、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与滋阴明目方中剂量组比较,滋阴明目方高剂量组和维生素A组p-Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.01),滋阴明目方高剂量组FoxO1、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达水平明显降低(P<0.01),维生素A组FoxO1、FasL、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与滋阴明目方高剂量组比较,维生素A组p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.01),FoxO1、FasL、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论滋阴明目方可能通过调控Akt/FoxO1/FasL通路,增强p-Akt表达,抑制FoxO1及下游基因FasL、Caspase-3和Caspase-8的蛋白表达,从而减少rd10小鼠视网膜细胞的凋亡,保护视网膜结构和功能,延缓RP的进展。 展开更多
关键词 视网膜色素变性 滋阴明目方 磷酸化蛋白激酶b 叉头框蛋白1 凋亡相关因子配体 感光细胞 细胞凋亡
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KLF4在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中的表达及其作用机制研究 被引量:2
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作者 林志美 李建 +2 位作者 饶进 邹忠晴 余晓玲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期445-450,共6页
目的:探讨KLF4在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中的表达及其对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及作用机制。方法:选择弥漫性大B细胞淋巴瘤石蜡组织标本60例和淋巴结反应增生患者的淋巴结石蜡组织标本60例,免疫组化法测定... 目的:探讨KLF4在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中的表达及其对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及作用机制。方法:选择弥漫性大B细胞淋巴瘤石蜡组织标本60例和淋巴结反应增生患者的淋巴结石蜡组织标本60例,免疫组化法测定组织中KLF4表达。Western blot和RT-PCR测定弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系ly1细胞和人B淋巴母细胞系HMy2.CIR细胞中KLF4蛋白、mRNA水平。ly1细胞分为空白对照组(不转染病毒)、阴性对照组(转染阴性对照病毒)和过表达KLF4组(转染过表达KLF4病毒),Western blot和RT-PCR测定ly1细胞中KLF4蛋白、mRNA水平,CCK-8测定转染后ly1细胞增殖情况,Transwell小室法测定转染后ly1细胞侵袭和迁移能力,Western blot法测定转染后三组ly1细胞Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白水平。结果:弥漫性大B细胞淋巴瘤组织B细胞中KLF4阳性表达率(30.0%)低于对照组织B细胞(100.0%)(P<0.05)。ly1细胞中KLF4蛋白和mRNA水平低于HMy2.CIR细胞(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,过表达KLF4组ly1细胞中KLF4蛋白和mRNA水平升高(P<0.05),A值降低(P<0.05),侵袭和迁移细胞数降低(P<0.05),p-Akt、p-PI3K蛋白水平降低(P<0.05),空白对照组和阴性对照组ly1细胞中各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中KLF4水平降低,过表达KLF4可能通过PI3K/Akt信号通路抑制弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭迁移。 展开更多
关键词 人锌指转录因子Krüppel样因子4 弥漫性大b细胞淋巴瘤 磷脂酰肌醇激酶 蛋白激酶b 增殖 侵袭 迁移
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同型半胱氨酸血症诱导内皮细胞蛋白激酶C和核转录因子-κB的活化 被引量:1
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作者 徐志红 陆国平 吴春芳 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2007年第9期615-618,共4页
目的探讨内皮细胞蛋白激酶C(PKC)和核转录因子-κB(NF-κB)信号传导系统在调节高同型半胱氨酸(Hcy)血症发病过程中的作用。方法Hcy、PKC抑制剂或两者联合作用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)不同时间点后,用TransAMTM系统和凝胶电泳迁移率实验(... 目的探讨内皮细胞蛋白激酶C(PKC)和核转录因子-κB(NF-κB)信号传导系统在调节高同型半胱氨酸(Hcy)血症发病过程中的作用。方法Hcy、PKC抑制剂或两者联合作用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)不同时间点后,用TransAMTM系统和凝胶电泳迁移率实验(EMSA)法检测NF-κB P65的活性,蛋白质印迹技术分析相关蛋白的表达。结果EMSA和TransAMTM系统检测显示,在高浓度Hcy刺激下,HUVEC中NF-κB的活化高峰出现在作用0.5 h和6 h时;且伴有IκBα短暂快速的磷酸化(P<0.05);Hcy刺激0.5 h后PKC水平较对照组明显上升(P<0.05);予以PKC抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ(100 nmol/L)处理后,由Hcy所介导的NF-κB的激活作用和IκBα磷酸化效应几乎完全被抑制。结论Hcy能诱导HUVEC NF-κB系统活化,这些生物学效应是通过PKC信号通路来实现的;PKC抑制剂能显著抑制上述效应。 展开更多
关键词 高同种半胱氨酸血症 蛋白激酶C NF KAPPA b 转录因子 信号传导 内皮细胞
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番泻苷B抑制STAT3和ERK1/2活化对鼻咽癌CNE-2细胞生长、侵袭及裸鼠成瘤的影响 被引量:4
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作者 魏璐璐 吉文伟 黄维平 《临床与病理杂志》 2020年第3期547-555,共9页
目的:以鼻咽癌CNE-2细胞及其移植瘤小鼠模型为研究对象,探讨番泻苷B(Sennoside B)对鼻咽癌CNE-2细胞生长、侵袭及裸鼠成瘤的影响及其作用机制。方法:以5,10,20μmol/L处理CNE-2细胞后,采用BrdU染色法检测细胞增殖,Hoechst染色法检测细... 目的:以鼻咽癌CNE-2细胞及其移植瘤小鼠模型为研究对象,探讨番泻苷B(Sennoside B)对鼻咽癌CNE-2细胞生长、侵袭及裸鼠成瘤的影响及其作用机制。方法:以5,10,20μmol/L处理CNE-2细胞后,采用BrdU染色法检测细胞增殖,Hoechst染色法检测细胞凋亡,Transwel l检测细胞侵袭,划痕试验检测细胞迁移,蛋白质印迹法检测Ki-67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、caspase-9、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达情况及信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)和细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)的磷酸化情况;最后,建立荷瘤小鼠模型,分别腹腔注射25,50,100 mg/kg番泻苷B,30 d后检测肿瘤重量,并用免疫组织化学检测肿瘤组织中Ki-67和VEGF的表达。结果:体外实验示番泻苷B能剂量依赖性地降低BrdU阳性细胞率(P<0.05),抑制增殖蛋白Ki-67,PCNA表达(P<0.05),增加细胞凋亡率(P<0.05),上调凋亡蛋白caspase-3,caspase-9表达(P<0.05),抑制细胞侵袭和迁移能力(P<0.05),调节细胞上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白VEGF,E-cadherin和N-cadherin表达(P<0.05),并降低信号通路蛋白STAT3,ERK1/2的磷酸化水平(P<0.05)。体内实验示番泻苷B能明显减轻肿瘤重量(P<0.05),并下调肿瘤组织中Ki-67,VEGF的表达水平(P<0.05)。结论:番泻苷B通过抑制STAT3,ERK1/2的磷酸化激活,对鼻咽癌CNE-2细胞的生长、侵袭及裸鼠成瘤产生抑制作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 番泻苷b 信号转导与转录激活因子3 细胞外调节蛋白激酶
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多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗相关信号通路的研究进展
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作者 李潇 罗甜 余曦明 《医学综述》 CAS 2024年第8期902-907,共6页
多囊卵巢综合征(PCOS)是一种好发于青春期及育龄期女性的涉及诸多因素的内分泌代谢性疾病,临床主要表现为闭经、体胖、多毛痤疮以及妊娠率显著降低,但目前其病因病机尚不清楚。胰岛素抵抗(IR)与多种慢性非传染性疾病(高血压、糖尿病、... 多囊卵巢综合征(PCOS)是一种好发于青春期及育龄期女性的涉及诸多因素的内分泌代谢性疾病,临床主要表现为闭经、体胖、多毛痤疮以及妊娠率显著降低,但目前其病因病机尚不清楚。胰岛素抵抗(IR)与多种慢性非传染性疾病(高血压、糖尿病、心脑血管疾病、PCOS等)相关,目前已知磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B、肝激酶B1/AMP活化的蛋白激酶、沉默信息调节因子1/叉头框转录因子O1、Toll样因子4/核因子κB信号通路参与了PCOS伴IR(PCOS-IR)的作用机制,因此充分认识PCOS-IR的发病机制在疾病预防中有重要临床意义。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b信号通路 肝激酶b1/AMP活化的蛋白激酶信号通路 沉默信息调节因子1/叉头框转录因子O1信号通路 Toll样因子4/核因子κb信号通路
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LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡
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作者 樊翠 张娅薇 +3 位作者 杨蕊 吴肖婕 周嘉迪 薛江楠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期207-214,共8页
目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以... 目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变;应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类;采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率;采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果在JAK2 V617F突变的HEL细胞中,LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平,并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达,而对BAX的表达水平未见显著影响;LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖,促进HEL细胞凋亡。结论在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中,LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,进而抑制HEL细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 骨髓增殖性肿瘤 白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1) JAK2 V617F突变 Janus激酶(JAK) 信号转导子与转录激活子(STAT) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) 蛋白激酶b(AKT)
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PKB在类胰蛋白酶诱导基因表达中的作用
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作者 张滨 钱睿哲 +2 位作者 陆超 赵凤娣 殷莲华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期2097-2101,共5页
目的探讨蛋白激酶B(PKB)在类胰蛋白酶(tryptase)诱导基因表达中的作用。方法采用RT-PCR和Western blotting方法,检测tryptase对ECV304细胞PKB(Akt)的表达及其活性和对转录因子AP-1、NF-κB p65亚单位、JNK、p38MAPK、趋化因子IL-8表达... 目的探讨蛋白激酶B(PKB)在类胰蛋白酶(tryptase)诱导基因表达中的作用。方法采用RT-PCR和Western blotting方法,检测tryptase对ECV304细胞PKB(Akt)的表达及其活性和对转录因子AP-1、NF-κB p65亚单位、JNK、p38MAPK、趋化因子IL-8表达的影响。结果在ECV304中1μg/Ltryptase可使PKB蛋白质磷酸化水平增加并促进PKB、转录因子NF-κB P65亚单位、AP-1和趋化因子IL-8的表达,但对JNK、p38MAPK表达影响不大。PI3K特异性抑制剂LY294002可抑制PKB的表达增加,同时可抑制NF-κB P65亚单位和IL-8的表达增加;反义PKB质粒瞬时转染ECV304,可抑制PKB、AP1、NF-κB P65亚单位和IL-8的表达增加;PAR2的抗体可抑制PKB的磷酸化,但不能阻断PKB表达。结论在ECV304细胞tryptase经其膜受体PAR2通过PI3K促进PKB的磷酸化而激活之,通过其下游途径促进趋化因子IL-8、转录因子AP-1、NF-κB P65亚单位和PKB本身的表达增加。 展开更多
关键词 类胰蛋白酶 蛋白激酶b 转录因子 白细胞介素8
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Hepatitis B virus,HBx mutants and their role in hepatocellular carcinoma 被引量:29
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作者 Ashraf Ali Hany Abdel-Hafiz +7 位作者 Mohd Suhail Amany Al-Mars Mohammad Khalid Zakaria Kaneez Fatima Sultan Ahmad Esam Azhar Adeel Chaudhary Ishtiaq Qadri 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第30期10238-10248,共11页
Hepatocellular carcinoma(HCC)is one of the leading causes of death induced by cancer in the modern world and majority of the cases are related to chronic hepatitis B virus(HBV)infection.HBV-encoded X protein(HBx)is kn... Hepatocellular carcinoma(HCC)is one of the leading causes of death induced by cancer in the modern world and majority of the cases are related to chronic hepatitis B virus(HBV)infection.HBV-encoded X protein(HBx)is known to play a pivotal role in the pathogenesis of viral induced HCC.HBx is a multifunctional protein of17 kDa which modulates several cellular processes by direct or indirect interaction with a repertoire of host factors resulting in HCC.HBX might interfere with several cellular processes such as oxidative stress,DNA repair,signal transduction,transcription,protein degradation,cell cycle progression and apoptosis.A number of reports have indicated that HBx is one of the most common viral ORFs that is often integrated into the host genome and its sequence variants play a crucial role in HCC.By mutational or deletion analysis it was shown that carboxy terminal of HBx has a likely role in protein-protein interactions,transcriptional transactivation,DNA repair,cell,signaling and pathogenesis of HCC.The accumulated evidence thus far suggests that it is difficult to understand the mechanistic nature of HBx associated HCC,and HBx mediated transcriptional transactivation and signaling pathways may be a major determinant.This article addresses the role of HBx in the development of HCC with particular emphasis on HBx mutants and their putative targets. 展开更多
关键词 HEPATITIS b VIRUS HEPATOCELLULAR carcinoma Transcr
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pVHL/HIF通路与PI3K/PKB/FOXO通路在肾透明细胞癌发生、发展中的作用
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作者 何春锋 刘永 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第11期2231-2234,共4页
肿瘤抑制基因vonHipple-Lindau(简称VHL基因)的突变失活导致肿瘤细胞中缺氧诱导因子的累积,进而调节其下游靶基因的转录和表达,促进肿瘤内新生血管形成及细胞增殖,从而促进肾透明细胞癌的发生、发展。磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B通路异常... 肿瘤抑制基因vonHipple-Lindau(简称VHL基因)的突变失活导致肿瘤细胞中缺氧诱导因子的累积,进而调节其下游靶基因的转录和表达,促进肿瘤内新生血管形成及细胞增殖,从而促进肾透明细胞癌的发生、发展。磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B通路异常活化,在肾细胞肿瘤的发生、发展、转移中发挥重要作用。上述两通路存在着错综复杂的联系。本文通过分析两通路在肾肿瘤发生,发展中的作用,为探寻肾癌治疗的新靶点提供理论依据。 展开更多
关键词 肾肿瘤 VHL基因 缺氧诱导因子 磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶b FOXO转录因子 信号通路
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FSH-PI3K/AKT/NF-κB蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及作用机制 被引量:3
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作者 路晓琳 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第9期1477-1481,共5页
目的探究卵泡雌激素(FSH)-磷脂酞肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)/核转录因子κB(NF-κB)蛋白对上皮性卵巢癌的影响。方法选取邯郸市中心医院手术切除的上皮性卵巢癌组织(32例)、卵巢交界性肿瘤组织(32例)、卵巢良性肿瘤组织(32例)、正... 目的探究卵泡雌激素(FSH)-磷脂酞肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)/核转录因子κB(NF-κB)蛋白对上皮性卵巢癌的影响。方法选取邯郸市中心医院手术切除的上皮性卵巢癌组织(32例)、卵巢交界性肿瘤组织(32例)、卵巢良性肿瘤组织(32例)、正常卵巢组织(32例),对比不同卵巢组织中FSHR、p-AKT、NF-κB蛋白阳性表达率,分析各蛋白之间相关性,并分析FSH对SKOV-3、3AO细胞生长、侵袭促进作用。结果上皮性卵巢癌组织FSHR、p-AKT、NF-κB蛋白阳性表达率:卵巢交界性肿瘤组织>卵巢良性肿瘤组织>正常卵巢组织,差异有统计学意义(P<0.05);上皮性卵巢癌组织中FSHR、p-AKT、NF-κB蛋白之间呈正相关(P<0.05);SKOV-3细胞于FSH浓度40 mIU/ml作用48 h时细胞增殖率最大,不同浓度,比较差异有统计学意义(P<0.05),不同时间点,差异无统计学意义(P>0.05);3AO细胞于FSH浓度40 mIU/mL作用24 h时细胞的增殖率最大,不同浓度、不同时间点,比较差异有统计学意义(P<0.05);SKOV-3细胞中,与对照组相比,FSH组p-AKT蛋白表达增加,LY294002组、FSH/LY294002组p-AKT蛋白表达减少(P<0.05);FSH组NF-κB蛋白表达高于LY294002组(P<0.05);3AO细胞中,LY294002组、FSH/LY294002组p-AKT蛋白表达少于对照组(P<0.05),FSH组p-AKT蛋白表达高于对照组、LY294002组、FSH/LY294002组(P<0.05);FSH组胞核中NF-κB蛋白表达高于对照组、LY294002组、FSH/LY294002组(P<0.05);4组SKOV-3、3AO细胞中AKT1/2蛋白表达无明显差异(P>0.05);对照组、LY294002组、FSH/LY294002组两种细胞穿过小室的细胞数少于FSH组(P<0.05)。结论 FSH可能是经由PI3K/Akt通路上调卵巢癌细胞株SKOV-3、3AO中NF-κB蛋白表达,促进肿瘤细胞增殖、侵袭。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 卵泡刺激素 磷脂酞肌醇3激酶/蛋白激酶b 核转录因子Κb
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Oct4B1基因沉默通过调控AKT/GSK-3β/β-catenin通路对膀胱癌T24细胞上皮间质转化的影响及机制研究
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作者 甄洪涛 王朝亮 《实用癌症杂志》 2022年第8期1219-1223,1228,共6页
目的探讨Oct4B1基因沉默通过蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β/β-连环素(AKT/GSK-3β/β-catenin)通路对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法Oct4B1-shRNA质粒和阴性对照质粒转入T24细胞,为shRNA组、shRNA-NC组,转染后AKT激动剂处理,... 目的探讨Oct4B1基因沉默通过蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β/β-连环素(AKT/GSK-3β/β-catenin)通路对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法Oct4B1-shRNA质粒和阴性对照质粒转入T24细胞,为shRNA组、shRNA-NC组,转染后AKT激动剂处理,为shRNA+AKT激动剂组、shRNA-NC+AKT激动剂组。检测4组侵袭、迁移及E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、p-AKT、p-GSK-3β及β-catenin蛋白表达。结果与shRNA组比较,shRNA+AKT激动剂组、shRNA-NC组、shRNA-NC+AKT激动剂组穿膜细胞数、迁移率、E-cadherin蛋白表达量较高(P<0.05),且shRNA+AKT激动剂组<shRNA-NC组<shRNA-NC+AKT激动剂组(P<0.05)。与shRNA组比较,shRNA+AKT激动剂组、shRNA-NC组、shRNA-NC+AKT激动剂组Vimentin、N-cadherin、p-AKT、p-GSK-3β、β-catenin蛋白表达量较低(P<0.05),且shRNA+AKT激动剂组>shRNA-NC组>shRNA-NC+AKT激动剂组(P<0.05)。结论沉默Oct4B1可抑制膀胱癌细胞侵袭、转移及EMT过程,其机制可能与AKT/GSK-3β/β-catenin有关。 展开更多
关键词 膀胱癌 上皮间质转化 八聚体结合转录因子4 b1 蛋白激酶b 糖原合成酶激酶3Β Β-连环素
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长链非编码RNA对耐药非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响 被引量:1
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作者 贾瑞 王超 李健 《新乡医学院学报》 CAS 2023年第5期416-420,共5页
目的探讨转录失调的长链非编码RNA(LncRNA)对耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生物学特性的影响及作用机制。方法选择2019年4月至2021年2月秦皇岛市第一医院收治的对化学治疗药物耐药的NSCLC患者61例为研究对象。采用经皮肺穿刺的方法获取... 目的探讨转录失调的长链非编码RNA(LncRNA)对耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生物学特性的影响及作用机制。方法选择2019年4月至2021年2月秦皇岛市第一医院收治的对化学治疗药物耐药的NSCLC患者61例为研究对象。采用经皮肺穿刺的方法获取患者的肺癌组织和癌旁组织,并采用转录组测序及LncRNA表达定量分析方法筛选出2种组织中差异表达的LncRNA。将肺癌组织和癌旁组织中LncRNA表达量比较差异有统计学意义的HOXA11-AS转染A549/DDP细胞(HOXA11-AS转染组),另取A549/DDP细胞转染空载体作为对照组。采用噻唑蓝法检测2组细胞的增殖能力,划痕愈合实验检测2组细胞的迁移能力,Transwell法检测2组细胞的侵袭能力,Western blot法测定2组细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白的表达。结果共筛选出311个差异表达LncRNA,共表达最多的前10个LncRNA中,HOXA11-AS在肺癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。培养1 d时,2组细胞的增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);培养2、3、4、5 d时,HOXA11-AS转染组细胞的增殖能力显著高于对照组(P<0.05)。培养0 h时,2组细胞的迁移率比较差异无统计学意义(P>0.05);培养24 h时,HOXA11-AS转染组细胞的迁移率显著高于对照组(P<0.05)。HOXA11-AS转染组穿过基底膜的细胞数显著多于对照组(P<0.05)。HOXA11-AS转染组细胞中PI3K、AKT蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。结论转录失调的LncRNA中的HOXA11-AS参与了NSCLC患者对顺铂耐药的发生与发展。HOXA11-AS可促进耐药细胞株A549/DDP细胞的增殖、迁移和侵袭,机制可能与PI3K/AKT信号通路激活有关。 展开更多
关键词 转录失调 长链非编码RNA 非小细胞肺癌 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b信号通路
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黄芪莪术药对调控Akt/FoxO3a信号通路对胃癌前病变的影响研究
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作者 黄柳向 何凡应 李玲 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第13期1767-1772,1777,共7页
目的 基于蛋白激酶B(Akt)/叉头状转录因子O亚族3(FoxO3a)通路探究黄芪-莪术药对逆转胃癌前病变的机制。方法 取48只雄性Wistar大鼠,随机选择12只作为正常组,其余大鼠采用甲基硝基亚硝胍(MNNG)复合造模法建立胃癌前病变模型。将造模成功... 目的 基于蛋白激酶B(Akt)/叉头状转录因子O亚族3(FoxO3a)通路探究黄芪-莪术药对逆转胃癌前病变的机制。方法 取48只雄性Wistar大鼠,随机选择12只作为正常组,其余大鼠采用甲基硝基亚硝胍(MNNG)复合造模法建立胃癌前病变模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、黄芪-莪术组、叶酸组,每组10只。正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,黄芪-莪术组给予黄芪-莪术水煎浓缩液3.6 g/kg灌胃,叶酸组给予叶酸1.8 mg/kg灌胃,均1次/d,连续灌胃10周。观察大鼠日常生活情况、体重、精神状态,HE染色观察胃黏膜组织病理形态,RT-PCR法检测胃组织中Akt1、FoxO3a、Beclin1、LC3-Ⅱ、p62 mRNA表达情况,Western blot法检测胃组织中Akt1、FoxO3a、LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠体重、食量、活力下降,精神变差;胃黏膜见腺体增大,腺体间细胞增生,少量炎症细胞浸润;胃组织中Akt1、p62 mRNA相对表达量和Akt1、LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),Beclin1、FoxO3a、LC3-ⅡmRNA相对表达量和FoxO3a蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。与模型组比较,黄芪-莪术组和叶酸组大鼠精神、食量及活力均有好转;胃黏膜腺体细胞排列较为整齐紧密,未见出血、炎症细胞浸润;胃组织中Akt1、p62 mRNA相对表达量和Akt1、LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),Beclin1、FoxO3a、LC3-ⅡmRNA相对表达量和FoxO3a蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。结论 黄芪-莪术药对可一定程度逆转大鼠胃癌前病变,其可能是通过影响Akt/FoxO3a信号通路,激活增强体内自噬系统从而清除胃癌前病变细胞实现的。 展开更多
关键词 胃癌前病变 黄芪-莪术 蛋白激酶b 叉头状转录因子O亚族3
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蒲公英多糖通过下调LncRNA CCAT1表达抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 刘晓燕 龙凤 +5 位作者 黄勇 赵玉 周旋 潘靖宇 李雪 叶海琳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1145-1157,共13页
目的通过观察蒲公英多糖(dandelion polysaccharide,DP)联合小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)靶向沉默长链非编码RNA(LncRNA)结肠癌相关转录因子1(colon cancer-associated transcript 1,CCAT1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增... 目的通过观察蒲公英多糖(dandelion polysaccharide,DP)联合小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)靶向沉默长链非编码RNA(LncRNA)结肠癌相关转录因子1(colon cancer-associated transcript 1,CCAT1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探究DP抗乳腺癌可能的分子机制。方法在线数据工具分析CCAT1在乳腺癌组织中的差异表达,qRT-PCR分别检测CCAT1在乳腺癌细胞系中的差异表达、DP(100、200μg/mL)对MCF-10A、MCF-7、MDA-MB-231细胞中CCAT1表达的影响以及siCCAT1对MDA-MB-231细胞中CCAT1表达的影响;CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验分别检测DP联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;在线数据工具预测CCAT1下游靶基因及靶基因富集的信号通路;Western blotting检测DP联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞EMT相关蛋白及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)/细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)/周期蛋白依赖性激酶6(cyclin-dependent kinases 6,CDK6)信号通路中关键蛋白表达的影响。结果与癌旁正常组织及正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,CCAT1在人乳腺癌组织和细胞中高表达(P<0.01);与对照组比较,DP呈剂量和时间相关性地抑制MDA-MB-231及MCF-7细胞活力(P<0.05、0.01),但对MCF-10A细胞活力无明显影响;与MCF-10A及MCF-7细胞相比,DP可显著下调MDA-MB-231细胞中CCAT1表达水平(P<0.01);与siNC组比较,siRNA可显著降低CCAT1在MDA-MB-231细胞中的表达(P<0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1更加显著降低了MDA-MB-231细胞中CCAT1的表达水平(P<0.01);与对照组及siNC组比较,DP(200μg/mL)和siCCAT1均能抑制MDA-MB-231细胞活力(P<0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞活力的抑制作用更为明显(P<0.01);与对照组及siNC组比较,DP(200μg/mL)和siCCAT1均能抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭(P<0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1抑制MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的作用更为明显(P<0.01);与单独用DP或siCCAT1相比,DP联合siCCAT1处理MDA-MB-231细胞中EMT进程相关蛋白E-cadherin表达上调更为显著(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达下调更为显著(P<0.01);在线生物工具预测出CCAT1靶基因共1929个,这些靶基因主要富集在RNA聚合酶II启动子转录调控、信号转导、转录调控等关键生物过程;富集的通路主要有癌症、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信号通路;与对照组及siNC组比较,DP(200μg/mL)和siCCAT1均能下调MDA-MB-231细胞中Akt/GSK-3β/Cyclin D1/CDK6信号通路关键蛋白p-PI3K、p-Akt、p-GSK-3β、Cyclin D1、CDK6蛋白表达水平(P<0.05、0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1应用时对其关键蛋白下调作用更为显著(P<0.01)。结论DP联合siCCAT1显著抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与下调MDA-MB-231细胞中CCAT1表达进而抑制Akt/GSK-3β/Cyclin D1/CDK6信号通路有关。 展开更多
关键词 蒲公英多糖 乳腺癌 结肠癌相关转录因子1 蛋白激酶b/糖原合成激酶-3β/细胞周期蛋白D1/周期蛋白依赖性激酶6信号通路 迁移 侵袭
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延胡索总碱贴片安全性和对神经病理性疼痛大鼠镇痛作用研究 被引量:2
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作者 王志成 姜明瑞 +7 位作者 岳珠珠 张婧秋 陈梦雨 王慧楠 魏晓彤 王梦琳 石双慧 王英姿 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第3期336-341,共6页
目的 探讨延胡索总碱贴片的安全性及其对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其机制。方法 (1)安全性实验:采用单次、多次给药的皮肤刺激性实验及皮肤过敏性实验,评价延胡索总碱贴片的安全性。(2)镇痛实验:取48只雄性SD大鼠,随机分为正常组... 目的 探讨延胡索总碱贴片的安全性及其对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其机制。方法 (1)安全性实验:采用单次、多次给药的皮肤刺激性实验及皮肤过敏性实验,评价延胡索总碱贴片的安全性。(2)镇痛实验:取48只雄性SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、模型组、布洛芬组、双氯芬酸钠贴片组及延胡索总碱贴片高、中、低剂量组,每组6只。除正常组和假手术组外,其余组大鼠采用坐骨神经慢性压迫损伤方法诱导神经病理性疼痛模型,术后第8天开始,布洛芬组灌胃给药,双氯芬酸钠贴片组及延胡索总碱贴片高、中、低剂量组分别给予双氯芬酸钠贴片及延胡索总碱贴片腹部贴敷,其余组腹部贴敷空白贴片,均每天1次,连续14 d。分别于术前及干预后1,3,7,10,14 d测定各组大鼠热缩足反射潜伏期;采用Western blot法检测各组大鼠干预结束后脊髓中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、信号传导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达情况。结果 (1)给予延胡索总碱贴片后,皮肤刺激反应评分均小于0.5分,致敏率为0,组织结构与正常皮肤无差异。(2)镇痛实验中,延胡索总碱贴片中、高剂量组干预后3 d和延胡索总碱贴片各剂量组干预后7,10,14 d患侧的热缩足反射潜伏期均明显长于同期模型组(P均<0.05);干预结束后,延胡索总碱贴片各剂量组大鼠脊髓中TLR4、NF-κB、p38MAPK蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05), STAT3蛋白相对表达量均明显高于模型组(P均<0.05)。结论 延胡索总碱贴片安全性良好,可抑制慢性坐骨神经挤压损伤神经病理性疼痛大鼠痛觉敏感,其机制可能与抑制脊髓中TLR4、NF-κB、p38MAPK表达并上调STAT3的表达有关。 展开更多
关键词 延胡索总碱 透皮贴片 安全性 神经病理性疼痛 TOLL样受体4 核因子Κb P38丝裂原活化蛋白激酶 信号传导和转录激活因子3
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生肌玉红膏治疗糖尿病足溃疡活性成分、核心作用靶点基因的筛选及靶向结合关系预测验证
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作者 周宇 郭小英 吴标良 《山东医药》 CAS 2023年第30期29-33,共5页
目的基于数据库数据筛选生肌玉红膏治疗糖尿病足溃疡(DFU)的活性成分及其核心作用靶点基因,并进一步验证生肌玉红膏治疗DFU的活性成分及其核心作用靶点基因的靶向结合关系。方法(1)收集生肌玉红膏的活性成分及其作用靶点基因:从TCMSP、B... 目的基于数据库数据筛选生肌玉红膏治疗糖尿病足溃疡(DFU)的活性成分及其核心作用靶点基因,并进一步验证生肌玉红膏治疗DFU的活性成分及其核心作用靶点基因的靶向结合关系。方法(1)收集生肌玉红膏的活性成分及其作用靶点基因:从TCMSP、BATMAN-TCM和SuperPred数据库中检索数据,收集生肌玉红膏活性成分及其作用靶点基因。(2)收集DFU发病的靶点基因:在GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD数据库中检索并收集DFU发病的靶点基因。(3)生肌玉红膏治疗DFU的作用靶点基因筛选及其生物学功能分析:将生肌玉红膏的活性成分作用靶点基因、DFU发病的靶点基因取交集,使用Cytoscape3.8.0软件筛选生肌玉红膏治疗DFU的作用靶点基因。生肌玉红膏治疗DFU作用靶点基因的生物学功能分析:运用基因本体论(GO)和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路富集分析生肌玉红膏治疗DFU作用靶点基因的生物学功能。(4)生肌玉红膏治疗DFU核心作用靶点基因筛选及其与生肌玉红膏活性成分靶向结合关系预测及验证:通过GOSemSim包筛选生肌玉红膏治疗DFU核心作用靶点基因,预测与其有靶向结合关系的生肌玉红膏活性成分,使用AutoDock和PyMOL软件对生肌玉红膏活性成分和DFU核心作用靶点基因进行分子对接验证,分析生肌玉红膏活性成分和DFU核心作用靶点基因的靶向结合能力。结果(1)槲皮素、熊果酸、甘草查尔酮A、1-甲基-2-十二烷基-4-喹诺酮等371个成分为生肌玉红膏的活性成分,与生肌玉红膏活性成分有靶向结合关系的作用靶点基因有1762个,主要包括表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、SRC原癌基因(SRC)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)。(2)DFU发病的靶点基因有EGFR、STAT3、TGF-β_(1)、SRC、AKT1等2690个。(3)生肌玉红膏治疗DFU的作用靶点基因有EGFR、STAT3、AKT1等39个。生肌玉红膏治疗DFU的作用靶点基因主要涉及调控上皮细胞增殖、肌细胞增殖、微小核糖核酸(miRNA)转录等生物学过程,靶点基因主要参与磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、糖尿病并发症晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)、低氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路等。(4)EGFR、STAT3、TGF-β_(1)、SRC、AKT1是生肌玉红膏治疗DFU的核心作用靶点基因,有靶向结合关系的生肌玉红膏活性成分主要来源于甘草、当归及白芷。槲皮素与EGFR的对接得分为-7.9 kcal/moL,1-甲基-2-十二烷基-4-喹诺酮与EGFR对接得分为-5.9 kcal/moL,熊果酸、甘草查尔酮A与STAT3对接得分分别为-8.0、-6.3 kcal/moL。结论生肌玉红膏治疗DFU的活性成分主要有槲皮素、熊果酸及甘草查尔酮A等。生肌玉红膏治疗DFU的核心作用靶点基因主要有EGFR、STAT3及AKT1等。生肌玉红膏的主要活性成分与关键作用靶点基因的靶向结合能力较好。生肌玉红膏治疗DFU的关键作用靶点基因可通过影响PI3K/AKT、AGE-RAGE及HIF-1等信号通路,参与促进上皮细胞增殖、抑制晚期糖基化终末产物生成等过程,发挥DFU治疗作用。 展开更多
关键词 生肌玉红膏 糖尿病足溃疡 槲皮素 熊果酸 表皮生长因子受体 信号转导与转录激活因子3 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b信号通路
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