山羊HSV-1特异转移因子活性组分的高效液相色谱纯化和鉴定

作者应用反相高效液相色谱(RP-HPLC)C_(18)柱,对亲和色谱分离的Ⅰ型单疱病毒(HSV-1)特异转移因子(TF_(HSV-1)活性组分进行纯化;分别收集RP-HPLC分离的各组分,用^(51)Cr标记的白细胞粘附抑制试验逐一检测其TF活性;再对其中具有TF活性的组分进行等电聚焦电泳,分析其纯度和等电点.结果显示,RP-HPLC分离的TF第2组分能诱导正常小鼠脾细胞产生对HSV-1的特异粘附抑制效应,具有TF_(HSV-1)抗原特异活性的特征,且此活性与TF_(HSV-1)粗提物产生的活性效应比较,提高约10000倍;该组分经高敏感银染色,在等电聚焦电泳呈现一条电泳区带,其等电点为pH4.48.这些结果表明,经RP-HPLC纯化已得到TF_(HSV-1)的单一活性成分.