Box-Behnken Design响应面法优化银杏叶提取物醇提水沉工艺

目的优化银杏叶提取物的醇提水沉工艺。方法在单因素试验基础上,以总黄酮醇苷转移率、萜类内酯转移率及干物质得率为综合评价指标,通过Box-Behnken Design(BBD)响应面法对液料比、提取时间、提取次数、提取液浓缩倍数、加水倍数、冷沉时间进行考察。结果醇提水沉最佳工艺为液料比8∶1(V/m),提取时间1.0 h,提取次数3次,浓缩倍数3倍,加水倍数3倍,冷沉时间28.0 h。结论BBD响应面法优化得到的银杏叶提取物醇提水沉工艺科学、合理、稳定、可行。

不同光照强度对不同品种银杏黄酮积累的影响

在河北省唐山市滦南县林场,以高0.5~0.8 m、地径(1.5±0.2)cm的3年生银杏(Ginkgo biloba)实生苗(邳州的梅核品种)为砧木,以直径(1.0±0.1)cm的优株枝条为接穗(6个品系:13#、16#、27#、叶丰、大花穗、泰兴大佛指)进行嫁接,每个无性系各嫁接60~90株;试验采用随机区组设计,共设3个区组,作为试验的3个重复,每个区组包括6个小区,6个银杏品系随机分配在各小区;在每个小区的植株上方、距地面高2 m,搭建2种不同透光度的遮阴网(遮光率为25%、45%的遮阴),以不遮阴作为对照,试验设3个重复,每个重复包括20株苗木;以6个品系的3年生银杏嫁接苗为试验材料,测定净光合速率、酶活性、次生代谢物、总黄酮醇苷,分析不同遮阴处理对6个银杏品系叶净光合速率、酶活性、总黄酮质量分数的影响,遴选有利于银杏黄酮积累的最适光照强度、最优银杏品系。结果表明:银杏净光合速率,随着光照强度的降低而呈现降低的趋势;遮光率为25%的遮阴处理时苯丙氨酸酶(PAL)活性最高,遮光率为25%的遮阴处理、遮光率为45%的遮阴处理有利于银杏肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)活性增加,遮光率为25%的遮阴处理时泰兴大佛指苯丙氨酸酶、肉桂酸-4-羟基化酶活性最大(分别为15.79、43.80 U·g^(-1));银杏次生代谢物槲皮素、山奈酚、异鼠李素、总黄酮醇苷质量分数,在遮光率为25%的遮阴处理时较高,其中泰兴大佛指总黄酮醇苷质量分数最高(达到11.28 mg·g^(-1));相关性分析表明,苯丙氨酸酶、肉桂酸-4-羟基化酶活性,与总黄酮醇苷质量分数都呈现显著正相关。综合试验结果,泰兴大佛指最适合作为叶用品种在唐山地区栽培,并且遮光率为25%的遮阴处理更能促进其黄酮的积累。

银杏叶提取工艺正交试验研究

目的以总黄酮醇苷、萜类内酯的综合转移率为指标,确定银杏叶最佳提取工艺。方法采用正交设计方法,系统考察乙醇浓度、料液比、提取时间3个因素对银杏叶提取工艺的影响,利用高效液相色谱法测定总黄酮醇苷、萜类内酯的含量,计算转移率。结果最佳提取工艺条件为:采用85%乙醇加热回流提取3次,第1次加5倍量(V/W)溶剂提取3 h,后2次分别加入3倍量(V/W)溶剂提取2 h。结论本工艺操作简单、合理、节能、高效,适用于工业化生产。