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向日葵FAD2-1基因克隆与功能分析
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作者 周菲 王文军 +4 位作者 马军 王静 谢鹏远 刘岩 黄绪堂 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期954-964,共11页
为解析向日葵Δ12脂肪酸脱氢酶基因的功能,根据前期转录组测序结果,采用RT-PCR方法克隆了向日葵Δ12脂肪酸脱氢酶基因HaFAD2-1的开放阅读框(ORF)序列,其核苷酸序列长度为1137 bp,编码378个氨基酸,生物信息学预测表明HaFAD2-1编码蛋白为... 为解析向日葵Δ12脂肪酸脱氢酶基因的功能,根据前期转录组测序结果,采用RT-PCR方法克隆了向日葵Δ12脂肪酸脱氢酶基因HaFAD2-1的开放阅读框(ORF)序列,其核苷酸序列长度为1137 bp,编码378个氨基酸,生物信息学预测表明HaFAD2-1编码蛋白为碱性且亲水性蛋白,二级结构为α螺旋。系统进化分析发现HaFAD2-1基因与异果菊(Dimorphotheca sinuata DC.)FAD2进化关系最近。qRT-PCR分析表明HaFAD2-1基因是种子中特异高表达的基因,且在低油酸种子中表达量明显高于高油酸种子,相关性分析发现HaFAD2-1表达量与油酸含量呈显著负相关,与亚油酸含量呈显著正相关。亚细胞定位发现HaFAD2-1编码蛋白定位于细胞质中,与野生型对照相比,异源表达转HaFAD2-1拟南芥种子的总不饱和脂肪酸含量显著升高,亚油酸合成下游的大部分脂肪酸含量显著升高,而亚油酸合成上游的大部分脂肪酸含量显著降低,表明HaFAD2-1可能是参与向日葵不饱和脂肪酸合成的重要基因。 展开更多
关键词 向日葵 HaFAD2-1 脂肪酸脱氢酶 不饱和脂肪酸 转基因拟南芥 功能分析
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天山雪莲水孔蛋白基因(AQP)家族鉴定与生物信息学分析 被引量:4
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作者 夏雯雯 李锦 祝建波 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期1244-1250,共7页
为研究新疆天山雪莲水孔蛋白基因(AQP)家族并对其基因家族成员进行鉴定及分类,从雪莲转录组数据库中获得了33条天山雪莲水孔蛋白基因序列,利用生物信息学软件,将其与拟南芥中38条水孔蛋白基因序列进行分析、分类和保守序列分析,结果显... 为研究新疆天山雪莲水孔蛋白基因(AQP)家族并对其基因家族成员进行鉴定及分类,从雪莲转录组数据库中获得了33条天山雪莲水孔蛋白基因序列,利用生物信息学软件,将其与拟南芥中38条水孔蛋白基因序列进行分析、分类和保守序列分析,结果显示天山雪莲33条AQP基因家族序列与拟南芥38条AQP基因序列一样分成4个亚族,即质膜水孔蛋白(Plasma membrane intrinsic protein,PIP)基因、液泡膜内在水孔蛋白(Tonoplast intrinsic protein,TIP)基因、类Nodulin(NOD26)膜内在水孔蛋白(NOD26-like membrane intrinsic protein,NIP)基因和膜内小基本蛋白(Small and basic membrane intrinsic protein,SIP)基因。拟南芥与天山雪莲AQP基因间具有较高的保守性。对天山雪莲AQP基因家族进行了系统进化树构建,并分析了水孔蛋白氨基酸组成成分、理化性质,预测了二级结构,发现水孔蛋白不同亚族间氨基酸数目、氨基酸序列间的亲水性存在一定差异,水孔蛋白的二级结构以α螺旋、β折叠、无规则卷曲为主。从这33条AQP基因序列中克隆了3个水孔蛋白基因,测序结果证明天山雪莲转录组数据库基因序列准确率较高。 展开更多
关键词 天山雪莲 拟南芥 水孔蛋白基因家族 生物信息学
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Construction of transgenic mice producing CAT to milk by co-injection of two overlapping fragments of bovine αs1-casein-CAT gene
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作者 劳为德 刘伟 +2 位作者 成国祥 徐少甫 成勇 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1996年第6期592-599,共8页
Two αs1-casein/chloramphenicol acetyltransferase (CAT) gene constructs overlapping by 3.0kb were constructed and co-injected into murine zygotes. In 9 of 10 lines of transgenic mice obtained, based on analysis of str... Two αs1-casein/chloramphenicol acetyltransferase (CAT) gene constructs overlapping by 3.0kb were constructed and co-injected into murine zygotes. In 9 of 10 lines of transgenic mice obtained, based on analysis of structure and expression of the transgene, accurate extrachromosomal homologous recombination (ECR) between the two overlapping DNA fragments was found. Different levels of CAT activity were detected in milk from these lines. The highest CAT activity was about 25-50μg/mL milk. In some mice. CAT activity was found in salvia gland, thymus and spleen extracts. The high frequency and accuracy of ECR reported here will be applicable in the experimental manipulation for generation of relatively large transgene. 展开更多
关键词 extrachromosomal homologous recombination BOVINE a si-casein GENE chloramphenicol ACETYLTRANSFERASE transgenic mice mammary gland.
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低浓度NaHSO_3促进拟南芥PGR5/PGRL1介导的循环电子传递途径的运转 被引量:4
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作者 李娜 韦嘉励 +1 位作者 李庆华 米华玲 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1745-1751,共7页
本研究利用拟南芥两条循环电子传递途径的突变体——NDH途径的突变体crr4、PGR5/PGRL1途径的突变体pgr5以及两条途径的双突变体crr4/pgr5来研究低浓度NaHSO_3在不同循环电子传递途径中的作用机制。结果显示,低浓度NaHSO_3处理增加了光-... 本研究利用拟南芥两条循环电子传递途径的突变体——NDH途径的突变体crr4、PGR5/PGRL1途径的突变体pgr5以及两条途径的双突变体crr4/pgr5来研究低浓度NaHSO_3在不同循环电子传递途径中的作用机制。结果显示,低浓度NaHSO_3处理增加了光-暗-光转换条件下Ndh H的积累和持续光照条件下PGR5的积累。低浓度NaHSO_3明显地促进了pgr5在光-暗-光转换条件下、暗-光转换条件下和持续光照条件下crr4的循环电子传递速率,表明低浓度NaHSO_3也参与了PGR5途径的运转。与pgr5相比,低浓度的NaHSO_3处理明显提高了持续光照下crr4突变体的跨类囊体膜质子梯度的建立和热耗散能力。根据这些结果我们推测,低浓度NaHSO_3在光下通过促进PGR5蛋白的表达,增加依赖PGR5途径的跨类囊体膜质子梯度和热耗散能力,在光保护中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 NDH(P)H脱氢酶复合体 PGR5/PGRL1 循环电子传递 NAHSO3 拟南芥
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