抗草甘膦转基因大豆ZH10-6对几种除草剂的耐受性检测

为明确抗除草剂转基因大豆ZH10-6对靶标除草剂草甘膦及几种常见除草剂的耐受性水平,在温室隔离条件下培养ZH10-6及其受体大豆中黄10,分别对其喷施不同浓度的茎叶处理剂草甘膦、乙羧氟草醚、精喹禾灵、2,4-滴二甲胺盐和土壤处理剂乙草胺,并对其药害症状、株高、干重等指标进行检测。结果表明:转基因大豆ZH10-6对靶标除草剂草甘膦具有较高的耐受性,在3600 g a.i./hm^(2)处理后28 d,株高、干重与对照无显著差异。而受体大豆中黄10在草甘膦900 g a.i./hm^(2)处理后14 d全部死亡。ZH10-6对大豆田常用除草剂乙羧氟草醚、精喹禾灵和乙草胺也有良好的耐受性,耐受性水平与中黄10无显著差异。转基因大豆ZH10-6及其受体大豆中黄10对2,4-滴二甲胺盐均表现敏感。

转基因大豆‘ZH 10-6’数字PCR精准定量检测方法的建立

为实现转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’转化体成分的精准定量检测,以转基因大豆‘ZH 10-6’的5′端边界序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针浓度进行优化,经特异性测试,建立了耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’的微滴式数字PCR检测方法。结果表明:1)特异性良好:只有以转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’基因组为模板才有扩增信号;2)灵敏度高:在相对标准偏差≤25%的情况下,方法的检出限(LOD)为13.0个拷贝;定量限(LOQ)为66.0个拷贝;3)PCR扩增反应模板含量与样品拷贝数之间线性相关系数R^(2)>0.99,DNA含量线性范围为0.08%~100.00%。综上,本研究建立的转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’转化体定量方法特异性强、稳定性好、准确度和灵敏度高,可用于对转基因大豆品种‘ZH 10-6’的定量检测。

转基因耐除草剂大豆ZH10-6实时荧光定量PCR检测方法的建立

转基因耐除草剂大豆ZH10-6是含有G2-EPSPS基因和GAT基因耐除草剂大豆新品系,对广谱型除草剂草甘膦具有耐受性,在中国具有重要产业化应用前景。本研究以其转化体特异性序列为靶标,建立了基于Taqman水解探针的实时荧光定量PCR检测方法。该方法能特异、定量检测出转基因耐除草剂大豆ZH10-6转化体成分,线性度大于0.995,RSD为0.17%~2.07%,定量限达0.16%,检测限达到0.032%。该方法为转基因耐除草剂大豆ZH10-6的精准定量检测提供了一种新的技术手段,为农业转基因监管提供技术支撑。