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Classical bovine spongiform encephalopathy and chronic wasting disease:two sides of the prion coin
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作者 Nicholas J.Haley Juergen A.Richt 《Animal Diseases》 CAS 2024年第1期1-18,共18页
Transmissible spongiform encephalopathies(TSEs)are a group of progressive and ultimately fatal neurologic diseases of man and animals,all resulting from the propagated misfolding of the host's normal cellular prio... Transmissible spongiform encephalopathies(TSEs)are a group of progressive and ultimately fatal neurologic diseases of man and animals,all resulting from the propagated misfolding of the host's normal cellular prion protein.These diseases can be spontaneous,heritable,anthropogenic/iatrogenic,or in some cases horizontally transmissible,and include such notable TSEs as bovine spongiform encephalopathy(BSE)of cattle and chronic wasting disease(CWD)of cervids.Although they are both unequivocally protein misfolding disorders,they differ markedly in their pathogenesis,transmissibility,and zoonotic potential.While the BSE epidemic has largely abated over the past three decades following global feed bans on ruminant meat and bone meal,CWD,which is readily transmitted through various forms of excreta,has rapidly expanded from its original endemic zone to encompass much of North America,along with recently identified foci in Scandinavia.Most importantly,although the classical form of BSE has proven transmissible to humans consuming contaminated beef or beef products,so far there have been no conclusive reports on the zoonotic transmission of cWD to humans.The underlying basis for these differences-whether host or agent directed-are not well understood,though may be due to inherent differences in the three-dimensional structure of the misfolded BSE or CWD prion proteins or the expression levels and tissue distribution of respective cellular prion proteins.With the uncontrolled geographic spread of CWD,it is imperative that we improve our understanding of the factors governing prion disease pathogenesis,transmission,and zoonotic potential. 展开更多
关键词 PRION Bovine spongiform encephalopathy Chronic Wasting Disease transmissION PATHOGENESIS ZOONOSIS
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Progress on low susceptibility mechanisms of transmissible spongiform encephalopathies 被引量:1
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作者 Li-Li QING Hui ZHAO Lin-Lin LIU 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期436-445,共10页
Transmissible spongiform encephalopathies (TSEs), also known as prion diseases, are a group of fatal neurodegenerative diseases detected in a wide range of mammalian species. The "protein-only" hypothesis of TSE s... Transmissible spongiform encephalopathies (TSEs), also known as prion diseases, are a group of fatal neurodegenerative diseases detected in a wide range of mammalian species. The "protein-only" hypothesis of TSE suggests that prions are transmissible particles devoid of nucleic acid and the primary pathogenic event is thought to be the conversion of cellular prion protein (PrPc) into the disease-associated isoform (prpSc). According to susceptibility to TSEs, animals can be classified into susceptible species and low susceptibility species. In this review we focus on several species with low susceptibility to TSEs: dogs, rabbits, horses and buffaloes. We summarize recent studies into the characteristics of low susceptibility regarding protein structure, and biochemical and genetic properties. 展开更多
关键词 transmissible spongiform encephalopathy Low susceptibility DOG Rabbit HORSE BUFFALO PRNP SPRN
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Towards unfolding the prion misfolding mystery: Protein free radical chemistry in transmissible spongiform encephalopathies
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作者 YANG Chi-Ming( Neurochemlstry Group, College of Chemistry, Nankai University, Tianjin 300071 Institute for Life Sciences & Health, La Jolla (San Diego), CA 92039-2035, USA) 《Nuclear Science and Techniques》 SCIE CAS CSCD 2003年第3期199-205,共7页
Owing to the high oxygen-respiration in the brain of mammals, oxidative damage to prion protein hasbeen suggested to be an additional factor. A large body of intriguing features of scrapie and prion diseases haveprovi... Owing to the high oxygen-respiration in the brain of mammals, oxidative damage to prion protein hasbeen suggested to be an additional factor. A large body of intriguing features of scrapie and prion diseases haveprovided multiple lines of indirect chemistry evidence, suggesting that the infectious agents may be putative forms ofsequence-specific prion radicals (SSPR) and/or their immediate precursors in the transmissible spongiform encepha-lopathies (TSE). Here a molecular mechanism corresponding to the self-replication of scrapie protein mediated byprion free-radical processes, consonant with "protein-only" hypotheses is proposed. This new theory may not onlyaid our understanding of the occurrence of prions, but also provides new insight into the possible chemistry principlesunderlying the neurodegenerative disorders. It is anticipated that future studies based on this suggestion and chem-istry principles of genetic diseases may allow us to determine an effective approach to stop mad cow disease and itshuman version, new variant of Creutzfeldt-Jakob disease (v CJD). 展开更多
关键词 蛋白感染素 蛋白质 海绵状脑病 遗传性疾病 克劳伊氏病
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朊蛋白基因家族及其在传染性海绵样脑病(TSEs)中的作用 被引量:2
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作者 彭坤 张少丽 +2 位作者 魏振宇 李洁 蓝贤勇 《家畜生态学报》 北大核心 2018年第9期77-82,共6页
朊蛋白基因家族包括4个基因:PRNP(PrP的编码基因),PRND(Doppel的编码基因),PRNT(Prt的编码基因)和SPRN(Shadoo的编码基因)。其中,PRNP,PRND和PRNT3个基因位于同一个55kb的区域内(PRNP-20kb-PRND-3kb-PRNT),而SPRN基因位于另一条染色体... 朊蛋白基因家族包括4个基因:PRNP(PrP的编码基因),PRND(Doppel的编码基因),PRNT(Prt的编码基因)和SPRN(Shadoo的编码基因)。其中,PRNP,PRND和PRNT3个基因位于同一个55kb的区域内(PRNP-20kb-PRND-3kb-PRNT),而SPRN基因位于另一条染色体上。这4个基因被称为"朊蛋白基因复合体"(Prion gene complex),在不同种属之间相当保守。传染性海绵样脑病(TSEs)的发生不仅受到PRNP基因的调控,朊蛋白基因家族的其它3个基因在定位、结构、表达及其编码产物上与PRNP基因存在很多相似性,提示其它3个基因很可能作为TSEs研究的候选基因。文章从朊蛋白基因家族的结构特征、编码产物的结构及其相互关系、朊蛋白基因家族在TSEs中发挥的作用等三方面进行综述,以期为研究TSEs致病机制提供新的思路。 展开更多
关键词 朊蛋白基因复合体 朊蛋白基因 叠朊蛋白基因 睾丸特异性基因 类朊蛋白基因 传染性海绵样脑病
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Inducing prion protein shedding as a neuroprotective and regenerative approach in pathological conditions of the brain:from theory to facts 被引量:1
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作者 Andreu Matamoros-Angles Behnam Mohammadi +5 位作者 Feizhi Song Mohsin Shafiq Santra Brenna Berta Puig Markus Glatzel Hermann C.Altmeppen 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第9期1869-1875,共7页
In the last decades,the role of the prion protein(PrP) in neurodegenerative diseases has been intensively investigated,initially in prion diseases of humans(e.g., Creutzfeldt-J akob disease) and animals(e.g.,scrapie i... In the last decades,the role of the prion protein(PrP) in neurodegenerative diseases has been intensively investigated,initially in prion diseases of humans(e.g., Creutzfeldt-J akob disease) and animals(e.g.,scrapie in sheep,chronic wasting disease in deer and elk,or "mad cow disease" in cattle).Templated misfolding of physiological cellular prion protein(PrPC) into an aggregation-prone isoform(termed PrP "Scrapie"(PrPSc)),self-re plication and spreading of the latter inside the brain and to peripheral tissues,and the associated formation of infectious proteopathic seeds(termed "prions")are among the essential pathogenic mechanisms underlying this group of fatal and transmissible spongiform encephalopathies.Late r,key roles of the correctly folded PrPCwere identified in more common human brain diseases(such as Alzheimer s disease or Parkinson’s disease) associated with the misfolding and/or accumulation of other proteins(such as amyloid-β,tau or α-synuclein,respectively).PrPChas also been linked with n euro protective and regenerative functions,for instance in hypoxic/ischemic conditions such as stroke.However,despite a mixed "bouquet" of suggested functions,our understanding of pathological and,especially,physiological roles played by PrPCin the brain and beyond is ce rtainly incomplete.Interactions with various other proteins at the cell surfa ce or within intracellular compartments may account for the functional diversity linked with PrPC.Moreover,conserved endogenous proteolytic processing of PrPCgenerates seve ral defined PrPCfragments,possibly holding intrinsic functions in physiological and pathological conditions,thus making the "true and complete biology" of this protein more complicated to be elucidated.Here,we focus on one of those released PrPCfragments,namely shed PrP(sPrP),generated by a membrane-proximate ADAM10-mediated cleavage event at the cell surfa ce.Similar to other soluble PrP fragments(such as the N1 fragment representing PrP’s released N-terminal tail upon the major α-cleavage event)or expe rimentally employed recombinant PrP,sPrP is being suggested to act n euro protective in Alzheimer’s disease and other protein misfolding diseases.Seve ral lines of evidence on extracellular PrPC(fragments) suggest that induction of PrPCrelease co uld be a future therapeutic option in various brain disorders.Our recent identification of a substrate-specific approach to stimulate the shedding by ADAM 10,based on ligands binding to cell surface PrPC,may further set the stage for research into this direction. 展开更多
关键词 ADAM10 aggregation Alzheimer’s disease AMYLOID antibodies Creutzfeldt-Jakob disease enzymatic cleavage extracellular vesicles NEURODEGENERATION NEUROTOXICITY proteolytic processing stroke transmissible spongiform encephalopathies
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羊瘙痒因子263K毒株感染金黄地鼠后鼠脑组织中检出PrP-res蛋白及其神经病理学研究 被引量:26
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作者 孙宪锋 董小平 +4 位作者 张宝云 侯星生 胥爱源 赵同兴 洪涛 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期48-53,共6页
羊瘙痒病是累及山羊及绵羊的可传播海绵状脑病。为了观察羊瘙痒因子 (Scrapie)的病原特征及病理组织改变特点 ,将羊瘙痒因子 2 6 3K毒株颅内接种至金黄地鼠。经过 81~ 110天的潜伏期 ,89%的动物发病 (17/19只 )。对发病地鼠的神经病理... 羊瘙痒病是累及山羊及绵羊的可传播海绵状脑病。为了观察羊瘙痒因子 (Scrapie)的病原特征及病理组织改变特点 ,将羊瘙痒因子 2 6 3K毒株颅内接种至金黄地鼠。经过 81~ 110天的潜伏期 ,89%的动物发病 (17/19只 )。对发病地鼠的神经病理学检测发现 ,海绵状空泡变性的检出率为 5 9% ,淀粉样斑的检出率为 17 6 %。利用免疫组化和蛋白酶消化后的Westernblotting检测证实 ,10 0 %的发病地鼠的脑组织中都出现蛋白酶抗性朊蛋白 (PrP res)。17只发病地鼠脑组织提取物中 ,PrP res的泳动位置和分子量大小完全一致 ,出现两条分子量在 2 5kD~ 31kD的反应带。尝试应用快速玻片印迹法检测病变组织中的PrP res,结果显示 ,与常规固定包埋切片的免疫组化检出效果相似。这提示脑组织印片法可成为临床检测克 雅氏病 (Creutzfeldt Jacobdisease ,CJD)患者脑组织活检标本中PrP res的快速、有效的方法。羊瘙痒因子 2 6 3K成功感染金黄地鼠再次证明 ,金黄地鼠是TSE感染因子良好的动物模型 ,发病率高 ,潜伏期短 ,发病动物PrP res的检出率明显高于典型病理改变的检出率。新生成的PrP res的电泳类型与接种的TSE因子有关 ,与宿主的个体差异无关 ,提示TSE感染因子的确存在“株”的现象。 展开更多
关键词 羊瘙羊因子263K 可传播性海棉状脑病 神经病理学分析 蛋白酶抗性朊蛋白 羊瘙痒病
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实时荧光定量PCR检测PrP基因表达标准品质粒和标准曲线的构建 被引量:12
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作者 宁章勇 赵德明 +5 位作者 杨建民 崔亚利 孟丽平 吴长德 秦秀慧 马李颖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期611-613,共3页
对金黄地鼠PrP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RTPCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,表明PrP基因... 对金黄地鼠PrP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RTPCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,表明PrP基因保守区段已经成功克隆.将107~102拷贝/反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,10次重复Ct值平均分别为17.50±0.5、21.38±0.2、25.29±0.7、29.12±0.7、31.34±0.4、33.89±0.1,系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系,回归系数为0.998.对动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,该标准曲线的灵敏度为102拷贝/反应.荧光PCR PrP基因表达检测标准品质粒和标准曲线的建立,为检测PrP基因的组织特异性表达和动物传染性海绵状脑病发生的分子机理奠定了基础. 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR PrP基因 标准曲线 重组质粒 动物传染性海绵状脑病
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牛、羊、人叠朊基因的克隆与分析 被引量:3
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作者 张杰 张鹏 +5 位作者 刘永生 陈豪泰 姜海霞 路伟 朱小玲 谢庆阁 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期194-198,共5页
为了解我国哺乳动物叠朊基因Prnd的生物信息,本实验采用PCR方法克隆了秦川黄牛、甘肃土种绵羊和汉族人的Prnd,运用分子生物学软件对这些序列进行了分析比较。结果表明,获得的三种哺乳动物的Prnd均位于1个单一的外显子内,与GenBank登录... 为了解我国哺乳动物叠朊基因Prnd的生物信息,本实验采用PCR方法克隆了秦川黄牛、甘肃土种绵羊和汉族人的Prnd,运用分子生物学软件对这些序列进行了分析比较。结果表明,获得的三种哺乳动物的Prnd均位于1个单一的外显子内,与GenBank登录的相应序列具有高度同源性。秦川黄牛与甘肃土种绵羊Prnd的同源性为96.8%,推导氨基酸序列同源性为93.3%。汉族人Prnd与秦川黄牛和甘肃土种绵羊Prnd的同源性均为80%,推导的氨基酸序列同源性均为76.3%。氨基酸一级结构分析显示3种Prnd编码的叠朊均由氨基端的信号肽、中间的成熟蛋白和羧基端的GPI锚结合区组成。二级结构预测表明,3种Prnd编码的叠朊均由3个α-螺旋和2个β-片层组成。本研究获得的这3种主要哺乳动物的Prnd信息为一进步研究叠朊的结构与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性海绵状脑病 叠朊 朊蛋白 叠朊基因 朊蛋白基因
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BAT3过表达缓解由PrP106-126毒性多肽诱导的神经元凋亡 被引量:3
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作者 宋志琦 赵文杰 +5 位作者 杨利峰 王运盛 朱婷 程广宇 周向梅 赵德明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期841-848,共8页
拟检测BAT3蛋白过表达对由PrP106-126毒性多肽引起的神经元凋亡现象的影响。首先通过免疫荧光、CCK8细胞活性检测试剂盒和免疫印迹检测带FITC标签的PrP106-126-FITC毒性多肽的生物学毒性。分别用PrP106-126-FITC和PrP106-126神经毒性多... 拟检测BAT3蛋白过表达对由PrP106-126毒性多肽引起的神经元凋亡现象的影响。首先通过免疫荧光、CCK8细胞活性检测试剂盒和免疫印迹检测带FITC标签的PrP106-126-FITC毒性多肽的生物学毒性。分别用PrP106-126-FITC和PrP106-126神经毒性多肽处理原代神经元和Neuro2a细胞,通过免疫荧光技术和免疫印迹方法分别检测受刺激后的原代神经元和Neuro2a细胞中BAT3表达的变化情况。通过脂质体转染方法将已经构建好的pcDNA-3.1-HA-BAT3质粒转染进入原代神经元,用CCK8检测细胞活性;以同样方式将质粒转染进入小鼠神经瘤细胞系Neuro2a,用TUNEL凋亡检测试剂盒分析经BAT3转染或对照组的N2a细胞的凋亡水平;Western blot检测PrP106-126神经毒性多肽处理前后,胞质内细胞色素C和Bcl-2的变化,进一步了解BAT3在神经元凋亡中发挥作用的机制。结果显示,PrP106-126-FITC和PrP106-126神经毒性多肽具有相似的神经毒性。受到多肽刺激之后,无论在原代神经元还是传代细胞系Neuro2a中,BAT3都发生核输出现象,BAT3从细胞核转移进入细胞质。BAT3的过表达使受到PrP106-126毒性多肽刺激的神经元的细胞活性有所提高,Neuro2a的细胞凋亡现象减轻,同时抑制了由PrP106-126毒性多肽引起的细胞色素C的过度释放并且维持细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的稳定。BAT3蛋白的表达缓解PrP106-126毒性多肽对神经细胞造成的凋亡现象,为进一步阐释该蛋白质对朊病毒引起的神经元损失的治疗作用机制提供了依据。 展开更多
关键词 BAT3 PrP106-126毒性多肽 神经凋亡 传染性海绵状脑病 原代神经元
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传染性海绵状脑病的诊断进展和存在的问题 被引量:2
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作者 吴长德 赵德明 +1 位作者 杨建民 周向梅 《现代生物医学进展》 CAS 2006年第7期57-59,56,共4页
传染性海绵状脑病是由朊病毒引起的人和多种哺乳动物以神经退行性变化为主要特征的一种慢性致死性传染病。引起这类疾病的病原因子是一种编码宿主蛋白的PrPC转变为异常的PrPSC沉积在大脑,导致传染性海绵状脑病的发生。本文从临床症状识... 传染性海绵状脑病是由朊病毒引起的人和多种哺乳动物以神经退行性变化为主要特征的一种慢性致死性传染病。引起这类疾病的病原因子是一种编码宿主蛋白的PrPC转变为异常的PrPSC沉积在大脑,导致传染性海绵状脑病的发生。本文从临床症状识别、组织病理学诊断、致病性朊蛋白检测、生物学测定以及毒株鉴定等几个方面作一回顾和总结,为揭示朊病毒疾病致病机理和诊断研究提供借鉴。 展开更多
关键词 传染性海绵状脑病 诊断 进展
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利用PMCA技术实验不同剂量MCT联合DTT对PrP^(sc)转化的抑制效应 被引量:1
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作者 毕昊 陆华新 +2 位作者 王先广 卢艳军 刘志国 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期879-884,共6页
蛋白质错误折叠循环扩增(protein misfolding cyclic amplification,PMCA)技术,是一种具有感染性的朊蛋白(PrPsc)体外扩增的技术,可用于抑制细胞型朊蛋白(PrPc)向PrPsc转化药物的筛选.本研究在Saborio等提供的方法基础上,成功优化了最... 蛋白质错误折叠循环扩增(protein misfolding cyclic amplification,PMCA)技术,是一种具有感染性的朊蛋白(PrPsc)体外扩增的技术,可用于抑制细胞型朊蛋白(PrPc)向PrPsc转化药物的筛选.本研究在Saborio等提供的方法基础上,成功优化了最佳扩增时间,利用优化的PMCA技术实验了不同剂量氮芥(mechlorethamine,MCT)联合二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)对PrPsc转化的抑制效应.结果发现,MCT联合DTT能体外抑制PrPc向PrPsc的转化,抑制作用具有明显的量效关系.利用针对人PrPc不同结构域的抗体发现,MCT联用DTT可使抗体6H4的抗原表位隐蔽,该表位位于PrPc第1个α螺旋区内,是构象转化的主要部位.对其机制的深入探讨,将有助于新一类可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathy,TSE)治疗药物的研发. 展开更多
关键词 蛋白质错误折叠循环扩增 氮芥 二硫苏糖醇 可传播性海绵状脑病
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毛细管电泳及其在朊病毒检测中的应用 被引量:1
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作者 郑妍鹏 颜鲁婷 洪涛 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期404-407,共4页
本文简单介绍了毛细管电泳(CE)的发展前景,较详细地综述了毛细管电泳在朊病毒(PrPSc)检测方面的应用。CE作为1990年代末期发展最快的分析化学领域,已经在可传播性海绵状脑病(TSEs)的诊断检测方面显示了特有的优越性,成为目前唯一可以检... 本文简单介绍了毛细管电泳(CE)的发展前景,较详细地综述了毛细管电泳在朊病毒(PrPSc)检测方面的应用。CE作为1990年代末期发展最快的分析化学领域,已经在可传播性海绵状脑病(TSEs)的诊断检测方面显示了特有的优越性,成为目前唯一可以检测血中PrPSc的方法,为实现TSEs的生前诊断提供了新的思路。 展开更多
关键词 毛细管电泳(CE) 可传播性海绵状脑病(tses) 朊病毒(PrP^Sc)
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羊痒病诊断方法研究进展 被引量:1
13
作者 赵柏林 宋晓晖 +4 位作者 胡冬梅 曲萍 孙雨 孔冬妮 王功民 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第4期110-112,共3页
羊痒病是传染性海绵状脑病的原模型,主要感染绵羊、山羊和欧洲盘羊,羊痒病至今还没有有效的治疗措施。因此,快速、敏感、特异性的诊断方法对羊痒病的监测和防控有着极其重要的意义。世界动物卫生组织推荐的羊痒病诊断方法包括免疫印迹... 羊痒病是传染性海绵状脑病的原模型,主要感染绵羊、山羊和欧洲盘羊,羊痒病至今还没有有效的治疗措施。因此,快速、敏感、特异性的诊断方法对羊痒病的监测和防控有着极其重要的意义。世界动物卫生组织推荐的羊痒病诊断方法包括免疫印迹、组织病理学、免疫组化及毒株鉴定。2012年,我国将羊痒病列入重大外来动物疫病监测计划。与其他的朊蛋白病一样,羊痒病是一种渐进性、致死性的中枢神经系统变性疾病。目前认为传染性海绵状脑病的病原因子是一种编码宿主蛋白的PrPC转变为异常细胞型PrPSC沉积在大脑,导致疾病。论文对羊痒病诊断技术的研究进展做一概述,为该病的进一步研究及防控提供参考。 展开更多
关键词 传染性海绵状脑病 诊断 绵羊和山羊
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羊痒病研究进展 被引量:1
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作者 张太翔 张丽萍 +4 位作者 田国华 田国宁 王炳军 张金玲 韩亮 《动物医学进展》 CSCD 2008年第11期80-83,共4页
痒病是一类引起绵羊和山羊的神经退行性脑病,是目前世界上研究的热点问题之一。引起该病的病原是一种朊蛋白,它与宿主自身的正常朊蛋白在一级结构上是相同的,只是二级结构的构象有所不同。论文针对目前人们研究中发现羊痒病的病毒存在... 痒病是一类引起绵羊和山羊的神经退行性脑病,是目前世界上研究的热点问题之一。引起该病的病原是一种朊蛋白,它与宿主自身的正常朊蛋白在一级结构上是相同的,只是二级结构的构象有所不同。论文针对目前人们研究中发现羊痒病的病毒存在不同的毒株型,以及不同毒株型的分子特性做一综述。 展开更多
关键词 痒病 传染性海绵状脑病 毒株型 分子特性
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鲈鱼蛋白质感染因子蛋白基因的克隆和结构分析
15
作者 张之文 廖梅杰 +4 位作者 杨官品 孙修勤 邹桂伟 危起伟 汪登强 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期76-80,共5页
采用RT-PCR方法分离了鲈鱼蛋白质感染因子蛋白编码基因序列,并进行了结构分析.研究证明,该感染因子蛋白由507个氨基酸组成,与红鳍东方、大西洋鲑蛋白质感染因子蛋白的平均相似性为67.9%,预测分子量约54kD,具有信号肽、短肽顺接重复、疏... 采用RT-PCR方法分离了鲈鱼蛋白质感染因子蛋白编码基因序列,并进行了结构分析.研究证明,该感染因子蛋白由507个氨基酸组成,与红鳍东方、大西洋鲑蛋白质感染因子蛋白的平均相似性为67.9%,预测分子量约54kD,具有信号肽、短肽顺接重复、疏水区、糖基化位点、二硫键、糖基缩醛磷肌醇锚定位点等蛋白质感染因子蛋白的主要特征结构域.鲈鱼蛋白质感染因子蛋白编码基因序列的分离,为蛋白质感染因子的进化、功能研究以及可能存在的鱼类传染性海绵样脑病研究奠定了基础. 展开更多
关键词 鲈鱼 蛋白质感染因子蛋白 传染性海绵样脑 蛋白基因 结构分析 蛋白质 因子 感染 鲈鱼 RT-PCR方法 传染性海绵样脑病 克隆
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人、牛和羊叠朊基因的表达及牛叠朊蛋白抗血清的制备
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作者 刘永生 唐江山 +4 位作者 路伟 陈豪泰 孙德惠 才学鹏 张杰 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期14-18,共5页
叠朊(Dpl)是朊蛋白(PrP)的横向同源物,两者的功能密切相关。本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系。根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋... 叠朊(Dpl)是朊蛋白(PrP)的横向同源物,两者的功能密切相关。本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系。根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a(+)上,将重组表达载体转入E.coliBL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔,制备牛Dpl的抗血清,SDS-PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E.coli中获得了高效表达。用Ni-NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物,ELISA和West-blot分析表明,制备的牛Dpl抗血清与重组人、牛和羊的Dpl以及牛和羊睾丸组织的Dpl发生了特异性反应,却不与重组人、牛和羊的PrP发生反应。上述结果表明制备的Dpl抗血清可以作为人、牛和羊Dpl的检测试剂和研究材料。 展开更多
关键词 传染性海绵状脑病 叠朊 朊蛋白 基因表达 抗血清
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PrP106-126对大脑皮质神经元和星形胶质细胞朊蛋白基因表达的影响
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作者 宁章勇 赵德明 +4 位作者 杨建民 周向梅 于博 孔小明 尹晓敏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期58-62,共5页
采用实时荧光定量RT-PCR的方法,对PrP106-126处理的大脑皮质神经元和星形胶质细胞模型进行了朊蛋白基因表达相对定量的研究。大脑皮质神经元经PrP106-126处理后,与SCR处理组和对照组相比,基因表达量明显下降。PrP106-126处理的星形胶质... 采用实时荧光定量RT-PCR的方法,对PrP106-126处理的大脑皮质神经元和星形胶质细胞模型进行了朊蛋白基因表达相对定量的研究。大脑皮质神经元经PrP106-126处理后,与SCR处理组和对照组相比,基因表达量明显下降。PrP106-126处理的星形胶质细胞与对照组和SCR处理组相比,朊蛋白基因的表达量显著升高。该试验结果为深入了解TSEs的分子致病机制和正常朊蛋白的功能提供了基础数据。 展开更多
关键词 PrP106-126 大脑皮质神经细胞 星形胶质细胞 基因表达 传染性海绵状脑病
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多肽PrP106-126对小脑颗粒神经元凋亡相关基因表达的影响
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作者 童双 吴新涛 +4 位作者 黄志强 于梦 刘荣昌 王衡 宁章勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期34-38,共5页
试验旨在研究多肽PrP106-126对小脑颗粒神经元凋亡相关基因表达的影响。本研究利用多肽PrP106-126作用于小脑颗粒神经细胞,对该多肽影响小脑颗粒神经细胞凋亡基因的表达进行了检测。结果表明:bax、caspase-3和myc基因在PrP106-126多肽... 试验旨在研究多肽PrP106-126对小脑颗粒神经元凋亡相关基因表达的影响。本研究利用多肽PrP106-126作用于小脑颗粒神经细胞,对该多肽影响小脑颗粒神经细胞凋亡基因的表达进行了检测。结果表明:bax、caspase-3和myc基因在PrP106-126多肽作用后表达显著增加,而bcl-2基因表达明显下降,进一步验证了bax、caspase-3和myc基因具有诱导凋亡作用,而bcl-2基因则具有抑制凋亡作用。 展开更多
关键词 传染性海绵体脑病 朊蛋白 小脑颗粒神经细胞 细胞凋亡
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非典型牛海绵状脑病研究进展
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作者 李炎鑫 马贵平 +3 位作者 刘全国 史喜菊 李冰玲 徐立伟 《中国动物检疫》 CAS 2016年第11期56-61,共6页
非典型牛海绵状脑病为新发现的一种朊病毒病,通常发生于老牛,与典型牛海绵状脑病在病理表型、分子表型和生物表型方面不同。本文结合已发表的文献,对非典型牛海绵状脑病的发现、病原特性、流行病学、检测、发病机理、动物模型研究和实... 非典型牛海绵状脑病为新发现的一种朊病毒病,通常发生于老牛,与典型牛海绵状脑病在病理表型、分子表型和生物表型方面不同。本文结合已发表的文献,对非典型牛海绵状脑病的发现、病原特性、流行病学、检测、发病机理、动物模型研究和实验感染等方面的最新研究进展进行了概述,以期增强人们对该病的认识,并为我国防控该病提供借鉴。 展开更多
关键词 非典型牛海绵状脑病 流行病学 检测 发病机理 传染性
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人外周血单核细胞释放PrP^C与其分泌Exosomes相关性研究
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作者 王桂花 周向梅 +3 位作者 尹晓敏 杨利峰 杨建民 赵德明 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第6期877-881,共5页
为探求人外周血单核细胞是否分泌exosomes以及exosomes的分泌与细胞外环境中PrP^C的关系。采用密度梯度离心的方法从人外周血单核细胞系的培养基中提取exosomes,并利用电镜技术和免疫印迹分析对其形态学和生物学特征进行鉴定。结果显示... 为探求人外周血单核细胞是否分泌exosomes以及exosomes的分泌与细胞外环境中PrP^C的关系。采用密度梯度离心的方法从人外周血单核细胞系的培养基中提取exosomes,并利用电镜技术和免疫印迹分析对其形态学和生物学特征进行鉴定。结果显示所提取的exosomes主要分布在1.13~1.16 g/ml的密度层中,平均直径在30~100 nm之间,呈杯状,这与相关报道关于其他细胞分泌的exosomes特征分析的结果相一致;与exosomes相关的分子Tsg101、flotillin-1、Hsp70、PrP^C均为阳性标记,而作为内质网标志蛋白的钙连接蛋白在exosomes上没有检测到。以上结果说明人外周血单核细胞分泌的exosomes没有被细胞器污染,而且细胞向培养基中释放PrP^C与其分泌exosomes有关。 展开更多
关键词 传染性海绵状脑病 细胞型朊蛋白 EXOSOMES flotillin-1 TSG101
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