TRIM28在胃癌中表达的临床意义及对胃癌细胞侵袭和迁移的影响

目的分析三结构域蛋白28(tripartite motif-containing protein 28,TRIM28)在胃癌中的表达及与胃癌患者临床预后的关系;探讨TRIM28对胃癌细胞侵袭迁移的影响及机制。方法结合TCGA数据库和实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR),分析胃癌中TRIM28的表达。结合Kaplan-Meier Plotter,探究TRIM28与胃癌患者预后的关系。应用AGS胃癌细胞系,以siRNA干扰TRIM 28表达后,以Transwell和划痕愈合试验探究TRIM28对AGS侵袭和迁移的影响;并用Western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白变化。结果TRIM28在胃癌组织及细胞中异常高表达;且高表达的胃癌患者预后差。Transwell和划痕愈合试验结果显示,敲低TRIM28表达的AGS细胞侵袭和迁移能力均下降,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。Western blotting检测结果显示,干扰TRIM28使β-catenin和c-Myc蛋白的表达明显下降。结论TRIM28在胃癌中的表达增加且其表达与胃癌不良预后明显相关,TRIM28促进胃癌细胞的侵袭和迁移。

三结构域蛋白28在肿瘤中的研究进展

三结构域蛋白28(TRIM28)是一种具有E3泛素连接酶的大分子蛋白,属于TRIM蛋白家族的重要成员,作为新型分子生物标志物受到了广泛关注。TRIM28在多种恶性肿瘤中存在高表达,并且与临床病理特征密切相关,还与肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为相关,TRIM28可能是肿瘤临床诊断和预后评判的潜在标志和治疗靶点。本研究就TRIM28的结构、生物学作用及其与恶性肿瘤的关系及其信号传导通路分子机制做一综述。

PAK2磷酸化激活TRIM28在前列腺癌进展中的作用机制研究

目的:研究P21蛋白活化酶2(p21-activated protein kinase 2,PAK2)在前列腺癌(prostate cancer,PCa)中的表达水平,并分析PAK2与PCa患者临床资料及PCa进展的相关性,进一步研究及分析PAK2磷酸化激活KRAB相关蛋白1即三重基序蛋白28(tripartite motif-containing 28,TRIM28)促进PCa进展的相关性,阐明PAK2在去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)进展中的作用关系,探讨PAK2磷酸化激活TRIM28通路在PCa进展中扮演的角色,为治疗CRPC提供方法和思路。方法:使用ONCOMINE数据库预测PAK2在PCa组织和癌旁正常组织中的表达差异。分别采用Western Blot和RT-qPCR检测PAK2在收集的临样本(癌旁正常组织和PCa组织)中的表达差异。采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测PAK2在前列腺增生(BPH)组织、激素性前列腺癌(androgen dependent prostate cancer,HNPC)组织和CRPC组织中的表达差异,通过癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库预测PAK2的不同表达水平对患者疾病无进展的影响差异。使用医学统计学方法收集、整理、分析统计140例PCa患者的临床病理特征与PAK2的关系。利用GEPIA数据库预测TRIM28与PAK2在PCa中的相关性。采用Western Blot方法检测PAK2表达水平的不同对TRIM28的磷酸化水平的影响。结果:在数据库ONCOMINE中显示,PCa组织中PAK2的表达水平高于其在癌旁正常组织中的表达水平,与我们收集的临床组织中的检测结果一致。PAK2在PCa组织中的RNA表达水平高于癌旁正常组织的表达水平。同样PAK2在PCa组织中的蛋白表达水平高于癌旁组织的表达水平。IHC结果显示PAK2在BPH组织、HNPC组织和CRPC组织中的表达水平逐渐升高。TCGA数据库显示,PCa患者中PAK2低表达水平较高表达水平有一个较长的疾病无进展生存期。患者临床资料统计分析得出PAK2的表达水平与患者的PSA水平、Gleason评分、临床分期、病理分级、转移、总生存期及疾病的生化复发情况密切相关,患者的PSA水平越高,Gleason评分越高,临床分期及病理分期越高,PAK2的表达水平越高,患者越容易发生转移及生化复发,患者的生存期越短,反之亦然。GEPIA数据库显示,PAK2与TRIM28呈正向相关性。荧光素酶报告基因实验显示,只转染PAK2过表达组的SOX2启动子区活性最高。而转染PAK2过表达及敲低TRIM28组的SOX2启动子区活性低于只转染PAK2过表达组,但是明显高于对照组。结论:PAK2在PCa中表达水平显著高于癌旁正常组织,在CRPC中表达水平最高,并且PAK2的表达水平与患者的PSA水平、Gleason评分、临床分期、病理分级、转移、总生存期及疾病的生化复发情况密切相关,与患者年龄无关。PAK2表达水平可以影响SOX2的表达水平,说明PAK2可能调节肿瘤细胞的干性来影响疾病进展,PAK2可以磷酸化激活TRIM28,活化的TRIM28可以增强SOX2启动子区的活性,使肿瘤细胞的细胞学行为更为活跃。

三结构域蛋白28对人肝癌细胞Hep3B增殖的影响

目的观察敲低三结构域蛋白28(TRIM28)对Hep3B肝癌细胞增殖及下游靶蛋白β-连环蛋白(β-catenin)的作用,探讨TRIM28对Hep3B肝癌细胞中增殖的影响。方法采用免疫组织化学检测慢病毒稳定敲低Hep3B细胞株TIRM28以及细胞克隆法检测TRIM28稳定敲低后Hep3B细胞增殖。结果TRIM28敲低后,β-catenin的蛋白水平均明显下调,相对于对照组β-catenin/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为0.78,干扰序列1(KD1)组和干扰序列2(KD2)组β-catenin/GAPDH分别降至0.28和0.25,其差异有统计学意义(P<0.05),且Hep3B肝癌细胞增殖受到显著抑制(P<0.05)。结论TRIM28对Hep3B肝癌细胞的增殖具有促进作用。

三结构域蛋白28在肝癌组织的表达及其临床意义

目的观察三结构域蛋白28(TRIM28)基因及蛋白在肝癌组织及癌旁肝组织中的表达,探讨其与肝癌患者临床病理特征之间的相关性。方法收集20例在广州红十字会医院手术切除的肝癌与相应癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测TRIM28基因在这些标本中的表达水平,记录相关结果并加以统计学分析;收集广州红十字会医院近年手术切除的肝癌石蜡标本40例,并记录该40例肝细胞癌(HCC)患者的临床病理特征,每例患者分别选取2张石蜡切片(肝癌组织与相应的癌旁肝组织)以免疫组织化学方法检测TRIM28蛋白的表达水平,整理相关结果并分析TRIM28蛋白的表达上调与HCC患者临床病理特征之间的相关性。结果TRIM28在肝癌组织中的表达量明显上调(肝癌组织16.25±7.39对比癌旁组织5.83±5.00,P<0.01);肝癌组织中TRIM28阳性表达率(86%)高达明显高于癌旁组织(32%);TRIM28可能参与肝癌的侵袭转移过程(χ^2=5.090,P<0.05)。结论TRIM28在肝癌组织中表达上调,其表达上调与肝癌的TNM分期的侵袭转移潜能相关。