TRIM44蛋白在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨三结构域蛋白44(TRIM44)在前列腺增生与前列腺癌中的表达差异,分析其表达与前列腺癌的临床病理及预后的关系。方法采用免疫组织化学染色的方法检测96例前列腺癌和60例前列腺增生组织中TRIM44蛋白的表达,并分析TRIM44表达与前列腺癌临床病理参数以及预后的关系。结果前列腺癌组中TRIM44的阳性表达率(64.16%)明显高于前列腺增生组织(20.00%),差异有显著性(χ^(2)=25.591,P<0.05);T3~T4分期、N1分期前列腺癌组织TRIM44高表达率明显高于T1~T2分期、N0分期(χ^(2)=5.629~5.721,P<0.05);前列腺特异性抗原(PSA)>20μg/L前列腺癌中的TRIM44高表达率明显高于PSA≤20μg/L组(χ^(2)=10.532,P<0.05);Gleason高评分组的前列腺癌组织中TRIM44的高表达率高于Gleason低评分组(χ^(2)=6.097,P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,TRIM44高表达病人的总生存率明显低于TRIM44低表达病人(χ^(2)=5.494,P<0.05);单因素生存分析显示,T分期、N分期、M分期、Gleason评分以及TRIM44表达与前列腺癌病人的不良预后相关(HR=1.968~7.416,95%CI=1.099~13.342,P<0.05);Cox多因素回归分析显示,TRIM44高表达是前列腺癌病人的独立预后因素(HR=1.873,95%CI=1.051~3.337,P=0.033)。结论TRIM44在前列腺癌组织中高表达,其表达与前列腺癌病人的临床分期、Gleason评分以及不良预后密切相关。

TRIM44沉默对肝癌细胞增殖的影响及分子机制研究

目的:研究三结构域蛋白44(tripartite motif-containing protein 44,TRIM44)对肝癌细胞增殖的影响并探讨其分子机制。方法:RT-q PCR和Western blot法分别检测TRIM44在正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织,以及永生化肝细胞和肝癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平;在肝癌细胞中转染靶向沉默TRIM44的shRNA,Western blot实验检测对TRIM44的沉默效果;MTS实验分析TRIM44沉默对肝癌细胞活力的影响,Ed U标记实验检测TRIM44沉默对肝癌细胞DNA合成能力的影响;软琼脂集落形成实验检测TRIM44沉默对肝癌细胞锚定非依赖生长能力的影响;Western blot法检测TRIM44沉默对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)总蛋白及磷酸化水平的影响;用m TOR激活剂MHY1485处理TRIM44沉默的肝癌细胞,并通过MTS实验分析肝癌细胞的活力。结果:TRIM44的mRNA和蛋白水平在肝癌组织中高于癌旁组织和正常肝组织,TRIM44的mRNA和蛋白水平在肝癌细胞系中高于永生化肝细胞;TRIM44沉默可抑制肝癌细胞的活力、DNA合成能力及锚定非依赖生长能力;TRIM44沉默可降低m TOR磷酸化水平,MHY1485拮抗TRIM44沉默对肝癌细胞活力的抑制作用。结论:TRIM44沉默可能通过下调m TOR活性抑制肝癌细胞增殖。

弥散加权成像和TRIM44在诊断子宫内膜癌及病理分期中的应用

本文探讨弥散加权成像(DWI)参数联合三结构域蛋白44(TRIM44)基因在子宫内膜癌(EC)病理分期中的诊断价值。本次研究共纳入140例子宫内膜病变患者,均行DWI检查,根据手术病理结果,83例患者确诊为EC(EC组),57例患者确诊为子宫内膜良性病变(良性组)。通过qRT-PCR检测患者血清TRIM44 mRNA水平。结果显示,与良性组比较,EC组的平均表观扩散系数(ADCmean)和最小表观扩散系数(ADCmin)均显著降低,而血清TRIM44 mRNA相对表达量显著升高(P<0.001)。ADCmean、ADCmin与血清TRIM44负相关(r=-0.305、-0.325,P<0.001)。与FIGOⅠ期组比较,Ⅱ~Ⅳ期组的ADCmean显著降低,而血清TRIM44 mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。ROC曲线分析显示,ADCmean、ADCmin和血清TRIM44 mRNA相对表达量诊断EC的AUC分别为0.808、0.830和0.818,联合诊断的AUC(0.936)高于单独诊断;ADCmean、ADCmin和血清TRIM44 mRNA相对表达量诊断FIGOⅡ~Ⅳ期的AUC分别为0.657、0.632和0.733,联合诊断的AUC(0.769)和特异性(87.50%)高于单独诊断。DWI参数(ADCmean、ADCmin)联合血清TRIM44可提高诊断EC及FIGO分期的准确性。

TRIM44基因对子宫内膜癌细胞生长及放疗敏感性的影响

目的探究三结构域蛋白44(TRIM44)对子宫内膜癌(EC)细胞生长和放疗敏感性的调控机制。方法①通过免疫组化检测30例EC患者的癌组织和临近癌旁组织中TRIM44的表达水平。通过qRT-PCR检测癌旁组织以及不同FIGO分期、不同组织学分级、淋巴结转移/未转移的EC患者癌组织中TRIM44 mRNA水平。②将人子宫内膜癌细胞系(HEC-1A)分为对照组、siRNA-NC组、siRNA-TRIM44组、LV-NC组和LV-TRIM44组,根据分组情况,使用Lipofectamine 2000试剂将阴性对照siRNA(siRNA-NC)、靶向TRIM44的siRNA(siRNA-TRIM44)、阴性对照慢病毒(LV-NC)和TRIM44过表达慢病毒(LV-TRIM44)转染到对应分组的HEC-1A细胞中,对照组细胞不进行转染,通过qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中TRIM44的mRNA和蛋白表达水平。③将HEC-1A细胞分为siRNA-NC组、siRNA-TRIM44组、LV-NC组、LV-TRIM44组、8 Gy+siRNA-NC组、8 Gy+siRNA-TRIM44组、8 Gy+LV-NC组、8 Gy+LV-TRIM44组。根据分组情况,使用Lipofectamine 2000试剂转染细胞,并采用直线加速器6-MV X射线照射细胞(8 Gy)。通过CCK-8测定细胞增殖,AnnexinⅤ-FITC凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,qRT-PCR和Western blot检测TRIM44、p62、细丝蛋白A(FLNA)和RAD51的表达。结果与癌旁组织相比,癌组织中TRIM44的mRNA表达水平显著升高(t=8.906,P<0.001)。与FIGO分期Ⅰ+Ⅱ期相比,Ⅲ+Ⅳ期癌组织中TRIM44的mRNA表达水平显著升高(t=3.943,P<0.001)。与组织学分级G1级相比,G2+G3级癌组织中TRIM44的mRNA表达水平显著升高(t=4.046,P<0.001)。与淋巴结未转移的患者相比,转移患者癌组织中TRIM44 mRNA表达水平显著升高(t=4.576,P<0.001)。与siRNA-NC组相比,siRNA-TRIM44组相对细胞活力、迁移和侵袭细胞数量均降低,而凋亡率升高(P<0.05)。与siRNA-NC组相比,siRNA-TRIM44组和8 Gy+siRNA-NC组细胞核P62蛋白相对表达量均升高,而细胞核FLNA和RAD51蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。与8 Gy+siRNA-NC组相比,8 Gy+siRNA-TRIM44组细胞核P62蛋白相对表达量升高,而细胞核FLNA和RAD51蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。结论TRIM44的高表达促进了EC细胞的增殖和转移,TRIM44的高表达抑制了p62的核转位,从而无法降解细胞核内FLNA和RAD51,导致DNA修复增加、癌细胞活性和放疗抗性升高。