Effect of Tripterine on Notch Signaling Pathway in IgA Nephropathy Rats

The objective of the study was to investigate the effect of tripterine on the Notch signaling pathway in renal tissue of IgA nephropathy rats.SD male rats were divided into the control group,IgA nephropathy model group,benazepril group,1 mg/kg/day tripterine intervention group,and 10 mg/kg/day tripterine intervention group according to the random number table method,with 10 rats in each group.The urinary sediment and 24-h urinary protein quantity were detected by conventional methods.The expressions of Notch1,Jagged1,Hes1,and Hey1 in renal tissue of rats were detected by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction.IgA nephropathy model was successfully established.The hematuria and proteinuria in model group were higher than those of control group(P<0.05).The expressions of Notch1,Jagged1,Hes1,and hey1 in kidney tissue of IgA nephropathy rats were significantly increased(P<0.05).Compared with the model group,hematuria and proteinuria in the tripterine intervention group were alleviated.The expressions of Notch1,Jagged1,Hes1,and Hey1 in rat renal tissue were decreased(P<0.05).Moreover,the expressions of Notch1,Jagged1,Hes1,and Hey1 in renal tissue of rats in 10 mg/kg/day tripterine intervention group were decreased(P<0.05).Tripterine can decrease the levels of hematuria and proteinuria in IgA nephropathy rats.The expression of the Notch signaling pathway in IgA nephropathy rats is increased by the down-regulation of tripterine,suggesting that tripterine has a certain therapeutic effect on IgA nephropathy rat.Moreover,its role may be realized through this signal pathway so as to provide a new mentality for the diagnosis and treatment of IgA nephropathy.

内生真菌对雷公藤组培苗生长、生理及药用成分含量的影响

分析了雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)11株内生真菌的促生潜力,并将11株内生真菌与雷公藤组培苗共生培养,研究了其对组培苗生长、叶片叶绿素含量和叶绿素荧光参数、主要营养元素含量以及雷公藤红素和雷公藤甲素含量的影响。结果表明:雷公藤11株内生真菌均具有分泌吲哚乙酸、产铁载体和溶磷能力,其中,菌株NS6、NS7、NS14和NS32的吲哚乙酸分泌量较大(大于17.00 mg·L^(-1)),菌株NS1、NS4、NS6、NS25和NS33的产铁载体能力很高〔80%<铁载体相对产量(SP)≤100%〕,菌株NS1、NS4、NS6、NS13和NS31溶磷量较大(大于0.70 mg·L^(-1))。与对照相比,菌株NS1、NS6、NS31、NS32和NS33总体显著(P<0.05)增加雷公藤组培苗的单株鲜质量和干质量,其中,菌株NS6、NS32和NS33显著增加组培苗株高,菌株NS1和NS6显著促进组培苗最长根长,菌株NS6显著增加组培苗单株叶片数。与对照相比,除菌株NS13外,其余10株菌株均显著提高组培苗叶片叶绿素含量;菌株NS1、NS7、NS18、NS31和NS32显著提高组培苗叶片最大荧光,菌株NS14显著提高组培苗叶片PSⅡ最大光化学效率。与对照相比,菌株NS1、NS7、NS14、NS31、NS32和NS33显著提高组培苗C、P和K含量,菌株NS1、NS4、NS32和NS33显著提高组培苗N含量。与对照相比,11株内生真菌均能显著提高组培苗根和茎中雷公藤红素含量,仅菌株NS33显著提高叶片中雷公藤红素含量;与11株内生真菌共生培养的组培苗茎和叶片中未检出雷公藤甲素,菌株NS6、NS7、NS13、NS25、NS32和NS33显著提高根中雷公藤甲素含量。综合研究认为,菌株NS1、NS6、NS31、NS32和NS33具有多种促生潜力且能改善雷公藤组培苗生长,促进根和茎中雷公藤红素积累;菌株NS6、NS32和NS33促进根中雷公藤甲素积累,具有较好的应用潜力。

雷公藤对肾脏的毒性与保护作用及机制的研究进展

传统中药雷公藤药理作用强大,广泛用于治疗糖尿病肾病、肾病综合征、肾小球肾炎等多种肾病。但同时雷公藤也会对肾脏造成损伤,严重者会导致肾衰竭甚至死亡。雷公藤对肾脏的这种毒、效双向作用机制有待阐明。因此本文从毒与效两方面综述了雷公藤对肾脏的作用和机制,以期为其减毒增效研究提供参考。

Effects of Tripterine on mRNA Expression of Oncogene c-myc and Platelet-Derived Growth Factor of Vascular Smooth Muscle Cells in Rats

Objective: To observe the effects of tripterine on mRNA expression of oncogene c-myc and platelet-derived growth factor (PDGF) in vascular smooth muscle cells (VSMCs) of rats.Methods: The fifth to tenth passage culture of VSMCs was used, tripterine and 20% fetal calf serum added into the medium of cultured VSMCs at concentration of 0.1 mg/L, 0.2 mg/L and 0.3 mg/L after serum-free cultivation for 24 hours. The general RNA was isolated from VSMCs at 6 and 12 hours after the drug addition for detection of oncogene c-myc and PDGF mRNA respectively by dot blot hybridization. The cDNA probes were labeled by digoxin.Results: Tripterine inhibited the expression of PDGF mRNA of VSMCs, and decreased expression of oncogene cmyc mRNA in a dose-dependent manner, either vs. control.Conclusion: Tripterine can inhibit expression of oncogene c-myc and PDGF-A mRNA in VSMCs, therefore it would inhibit overproliferation of VSMCs.

雷公藤红素联合槲皮素体外抗癌增效作用

目的 探讨雷公藤红素联合槲皮素体外对人肺癌A549和食管癌Eca9706细胞的抗癌增效作用。方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测试雷公藤红素配伍槲皮素前后对人肺癌A549和食管癌Eca9706细胞增殖抑制率影响,并计算半数抑制浓度(IC50)及30%抑制浓度(IC30),通过配伍槲皮素前后雷公藤红素对两种癌细胞抑制作用的分析,从单体配伍层面评价抗癌增效作用。结果 配伍IC30槲皮素后,雷公藤红素在0.25、1.25μmol/L使人肺癌A549细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),而在其他更高浓度时,配伍槲皮素后抑制率无统计学差异(P>0.05);配伍IC30槲皮素后,雷公藤红素在0.25、1.25及2.50μmol/L时使人食管癌Eca9706细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01,P<0.05),而在其他更高浓度时,配伍槲皮素后抑制率均无显著差异(P>0.05)。此外,配伍槲皮素使雷公藤红素对A549、Eca9706细胞的IC50值分别降低至2.064、2.040μmol/L、IC30值分别降低至0.337、0.408μmol/L。结论 雷公藤红素联合槲皮素对肺癌和食管癌细胞均有抗癌增效作用,并均呈现出一定量效关系。

雷公藤红素对人多发性骨髓瘤H929细胞凋亡的诱导作用及分子机制研究

目的:观察雷公藤红素诱导人多发性骨髓瘤H929细胞凋亡的效果,并分析诱导凋亡的分子机制。方法:取培养48 h后处于平台期的H929细胞,按照1.0×10^(9)/L细胞密度接种于6孔细胞培养板中,分为对照组、雷公藤红素组(0.5 mg/L、1.0 mg/L和5.0 mg/L),各浓度雷公藤红素组分别加入对应浓度的雷公藤红素,对照组加入等体积二甲亚砜(DMSO)溶液。比较不同浓度雷公藤红素组H929细胞活力抑制率,比较各组H929细胞凋亡率及H929细胞培养物中P53、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(cleaved PARP-1)、bax、bcl-2表达水平。结果:H929细胞活力抑制率随着雷公藤红素处理浓度升高而升高,不同浓度雷公藤红素组H929细胞活力抑制率两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,不同浓度雷公藤红素组H929细胞凋亡率均较高(P<0.05)。H929细胞凋亡率随着雷公藤红素处理浓度增加而增加,不同浓度雷公藤红素组H929细胞凋亡率两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,不同浓度雷公藤红素组H929细胞培养物中P53、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1、bax表达水平均较高(P<0.05),bcl-2表达水平均较低(P<0.05)。H929细胞培养物中P53、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1、bax表达水平随着雷公藤红素处理浓度升高而升高,bcl-2表达水平随着雷公藤红素处理浓度升高而降低,不同浓度雷公藤红素组H929细胞培养物中P53、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1、bax、bcl-2表达水平两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:雷公藤红素对人多发性骨髓瘤H929细胞具有活力抑制和凋亡诱导作用,且有一定的剂量效应,这一作用可能与线粒体凋亡途径有关。

HPLC法测定雷公藤及其片剂中雷公藤红素

目的建立雷公藤及其片剂中雷公藤红素的HPLC测定方法.方法 HPLC外标法.Agilent Zorbax SC-C18柱为色谱柱,甲醇-1%醋酸溶液(87:13)为流动相,检测波长为425 nm,体积流量为1.0 mL/min.结果雷公藤红素线性范围为40.96～204.8μg/mL(r=0.999 6),药材的平均回收率为98.37%,RSD为1.01%(n=9),制剂的平均回收率为98.59%,RSD为1.18%(n=9).结论本方法操作简便、准确,可作为雷公藤类药物中雷公藤红素的定量分析方法.

雷公藤红素对HMC-1细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 :探讨雷公藤红素诱导人肥大细胞系 HMC- 1细胞凋亡的基因调节机制。 方法 :雷公藤红素 (0 .5μmol/ L )与HMC- 1细胞共育不同时间 (4、8或 12 h)后 ,用 RT- PCR、免疫组化方法检测 bcl- 2家族、c- m yc、白细胞介素 1β转换酶 (ICE)基因在 m RNA和蛋白质水平表达的变化 ,并分析它们在细胞凋亡中的作用。 结果 :HMC- 1细胞本已存在 Bcl- 2、Bax、C- myc蛋白表达 ;雷公藤红素作用后 ,Bcl- 2蛋白表达受到抑制 ,Bax、C- m yc蛋白表达增加。 HMC- 1细胞能自发表达 bcl- 2、bax、 bcl- XL 和ICE的 m RNA,在雷公藤红素作用下 ,bcl- 2、bax、bcl- XL 的 m RNA表达水平均下降 (以 bcl- 2下降最为明显 ) ,而 ICE m RNA 3次检测 2次上升 ,1次下降。 结论 :雷公藤红素诱导 HMC-

雷公藤红素诱导人鼻息肉肥大细胞凋亡及机制

目的 :探讨雷公藤红素对鼻息肉肥大细胞凋亡的诱导作用及机制。方法 :雷公藤红素 (2μm ol/ L )与鼻息肉组织块在体外共育 ,应用 TUNEL 标记检测凋亡细胞情况 ,免疫组化检测凋亡相关蛋白的表达。结果 :未加药对照组 6和 12 h(n=10 ) 10个相邻高倍视野 TU NEL 阳性细胞数培养分别为 (7.8± 7.7)和 (10 .6± 4.5 )个 ,雷公藤红素组 (n=10 )分别为 (6 2 .3±42 .7)和 (76 .3± 39.3)个 ,二者相比有显著性差异 (P<0 .0 5 )。甲胺蓝染色明确显示肥大细胞呈凋亡形态改变 ,包括核浓缩、凋亡小体形成等 ,少见上皮细胞和成纤维细胞呈凋亡形态改变。雷公藤红素组促凋亡相关蛋白 Fas、C- myc、Bax表达增加 ,抑凋亡相关蛋白 bcl- 2表达下降。 结论 :雷公藤红素能诱导鼻息肉肥大细胞凋亡 ,凋亡的发生与其上调促凋亡基因的表达和下调抑凋亡基因的表达有关。

Fas可能是雷公藤红素诱导HMC-1细胞凋亡的途径之一

目的：探讨雷公藤红素对ＨＭＣ１细胞表达Ｆａｓ、ＦａｓＬ的影响及与凋亡的关系。方法：用流式细胞仪检测细胞凋亡和Ｆａｓ、ＦａｓＬ的表达。结果：ＨＭＣ１细胞能自发表达Ｆａｓ，不表达ＦａｓＬ。经雷公藤红素作用，Ｆａｓ呈先升后降的变化，ＦａｓＬ低水平表达。Ｆａｓ阳性率下降与凋亡率增加相关。

雷公藤红素对大鼠血管平滑肌细胞c-myc和血小板源性生长因子的mRNA的影响

目的 :观察雷公藤红素对大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)中原癌基因 (c myc)和血小板源性生长因子 (PDGF)的mRNA表达水平的影响。方法 :分别将所培养的第 5～ 1 0代VSMC同步化培养 2 4h后 ,加入 2 0 %胎牛血清 (FCS)和不同剂量的雷公藤红素 (0 1、0 2和0 3mg/L) ,共同孵育 6h和 1 2h后 ,分别提取VSMC胞浆总RNA ,通过地高辛标记探针 ,采用斑点杂交方法检测c myc和PDGF的mRNA表达。 结果 :经雷公藤红素作用后 ,VSMC的c myc和PDGF的mRNA表达较对照组明显降低 ,c mycmRNA表达水平的降低具有一定的药物剂量依赖性关系。结论 :雷公藤红素可能是通过抑制VSMC的c myc和PDGF的mRNA的表达 ,而引起抑制VSMC的过度增殖。

雷公藤红素对小鼠的免疫抑制作用及其对IL-6 mRNA表达影响的研究

目的:研究雷公藤红素对小鼠的免疫抑制作用及对细胞因子IL-6 mRNA表达的影响。方法:采用碳粒廓清、迟发型变态反应、血清溶血素测定和T淋巴细胞转化实验,观察雷公藤红素对小鼠免疫功能的影响;运用RT-PCR半定量法研究雷公藤红素对小鼠肝脏IL-6 mRNA表达影响。结果:雷公藤红素能抑制小鼠血清溶血素水平(400μg/kg),且与剂量呈依赖关系;小鼠耳廓肿胀度研究表明,雷公藤红素能使迟发型变态反应程度减轻(400μg/kg);雷公藤红素剂量在0.25μg/mL时,可以明显抑制植物血凝素(PHA)诱导的细胞增殖;雷公藤红素800μg/kg能对抗CCl4引起的急性肝损伤小鼠肝脏IL-6 mRNA含量的升高。结论:雷公藤红素在一定程度上能抑制小鼠的免疫功能,能抑制炎症细胞因子IL-6基因的过度表达。

超临界流体萃取雷公藤中有效成分的工艺优化

为了对雷公藤药物进行减毒增效,采用超临界流体萃取技术对雷公藤有效成分的萃取进行了研究．实验以有效成分雷公藤甲素、雷公藤生物总碱以及毒性成分雷公藤红素的收率以及在浸膏中的质量分数为指标,分别对夹带剂种类与组成、萃取温度、萃取压力、静态浸泡时间等因素进行了考察．结果表明,当75％乙醇水溶液为夹带剂,萃取温度为43℃,萃取压力为25 MPa,静态萃取时间为3 h,进行超临界流体萃取时,有利于有效成分雷公藤甲素以及生物总碱的萃取．所得结果与传统方法进行比较,超临界流体萃取雷公藤甲素收率是传统方法的3．49倍．超临界流体萃取可以有效萃出主要有效成分雷公藤甲素．

雷公藤红素抑制抗体形成及抗炎作用

雷公藤红素是雷公藤主妻活性成分之一,本支报道它在试管内及整体均明显抑制小鼠脾细胞溶血空斑细胞的形成,此作用与浓度呈依赖关系。对手大鼠实验性棉球肉芽肿的形成,小鼠二硝基氧苯。(DNCB)所致迟发型超敏反应均有明显抑制作用,回时还观察到它能延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间。

雷公藤红素对IL-1和IL-2活性及PGE_2释放的抑制作用

雷公藤红素0.1～1.0μg/ml在试管内能降低LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞外和细胞内白细胞介素-1(IL-1)的活性,也能抑制ConA诱导的小鼠脾细胞产生白细胞介素-2(IL-2).动态观察表明,雷公藤红素经预处理8h和3h后已能分别抑制IL-1和IL-2的产生。此外,雷公藤红素能降低A23187刺激家兔滑膜细胞释放前列腺素E_2(PGE_2)。

雷公藤红素抑制血管内皮细胞株增殖的体外研究

目的探讨雷公藤红素抑制血管内皮细胞体外增殖的机理。方法通过生长曲线、HE染色以及流式细胞仪分析雷公藤红素抑制血管内皮细胞株ECV304体外增殖状况。结果在体外雷公藤红素能够明显抑制内皮细胞株ECV304增殖,低浓度(5μg/ml、10μg/ml和15μg/ml)的雷公藤红素主要引起血管内皮细胞S期受阻,高浓度(20μg/ml)同时还表现为细胞毒作用,引起血管内皮细胞坏死。结论雷公藤红素通过阻碍DNA合成及细胞毒作用抑制血管内皮细胞的体外增殖。

雷公藤红素对三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎的保护作用

背景:传统药物对炎症性肠病疗效不甚理想,寻找新型而有效的药物一直是该领域的研究热点。目的:观察雷公藤红素对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠结肠炎的保护作用,并初步探讨其可能机制。方法:以TNBS诱导大鼠结肠炎模型,将动物随机分为正常对照组、模型组、助溶剂对照组以及雷公藤红素低剂量组(每天0.5mg/kg)和高剂量组(每天1mg/kg)。以大体和组织学评分评价结肠炎症程度。以免疫组化方法检测结肠组织核因子(NF)-κBp65的表达,以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA的表达。结果:高、低剂量雷公藤红素均能显著改善结肠组织大体和组织学评分,降低NF-κBp65以及IL-1β、TNF-αmRNA的表达。结论:雷公藤红素对TNBS诱导的大鼠结肠炎具有显著保护作用,抑制促炎细胞因子的产生可能是其主要作用机制之一。

雷公藤红素对狼疮鼠肾组织Ⅲ型胶原和层粘素的影响

目的 :研究雷公藤红素 (Tripterine)对狼疮小鼠肾小球硬化的防治作用。 方法 :在不同发病时间、用不同剂量的雷公藤红素对BWF1小鼠进行腹腔注射。每 2周测鼠 2 4h尿蛋白量及血清抗dsDNA抗体水平。 2 0周后检测鼠肾组织Ⅲ型胶原 (collagentypeⅢ ,ColⅢ )、层粘素 (laminin ,LM)、基质金属蛋白酶 (MMP) 1及其组织抑制剂 (TIMP) 1、转化生长因子 (transforminggrowthfactor,TGF) β1mRNA的表达。 结果 :①雷公藤红素抑制小鼠蛋白尿及血清抗dsDNA抗体水平 ,增加肾局部MMP 1而减少ColⅢ、LM、TIMP 1及TGF β1mRNA的表达 ,改善鼠肾组织学病变。②蛋白尿发生前使用雷公藤红素较蛋白尿发生后使用疗效更显著。③蛋白尿发生前使用雷公藤红素 3mg/ (kg·wk)和 6mg/ (kg·wk)的疗效无统计学差异。 结论 :雷公藤红素对该狼疮模型的肾小球硬化具有保护作用。其降低肾脏ColⅢ及LM沉积可能是通过增加小鼠肾局部MMP 1而抑制TGF β1及TIMP

雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡及其机制的研究

探讨雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用及其机制．采用台盼蓝染色法、透射电镜和流式细胞术，分别检测不同浓度和作用时间下，雷公藤红素诱导HL一60细胞凋亡以及对细胞Fas、FasL和NF-κBP65表达的影响．结果表明：0．5～2．5μmol·L^-1浓度雷公藤红素作用24h，HL-60细胞凋亡率均明显高于不加药物的对照组（P〈0．05）．当雷公藤红素浓度为1．5μmol·L^-1时，细胞凋亡率最高并呈时间依赖效应．雷公藤红素作用的HL-60细胞，可呈现典型的细胞凋亡形态学改变．1．5μmol·L^-1雷公藤红素可明显提高Fas和FasL阳性HL-60细胞百分率（P〈0．05），但抑制细胞NF—κBP65的表达（P〈0．05）．从而得出结论：雷公藤红素可有效地诱导HL-60细胞凋亡，其机制与雷公藤红素可上调Fas、FasL基因及下调NF—κB基因表达有关．