白斑综合症病毒实时荧光LAMP检测方法的建立及应用

研究利用ESE-Quant tube scanner检测平台,建立了一套基于环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)的实时荧光检测方法,用于白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的检测;并在此基础上,与巢式PCR、Real-time PCR和其他已发表的4种LAMP方法在检测灵敏度、实际应用方面进行比较。结果显示,研究建立的实时荧光LAMP检测方法在63℃恒温反应30min可检测到最低为105倍稀释的基因组DNA模板,与Real-time PCR检测方法的灵敏度相当,高于巢式PCR和其他已发表的4种LAMP方法的检测灵敏度;而且特异性较好,与传染性皮下及造血组织坏死病毒等5种常见对虾病原DNA均无交叉反应。通过构建质粒进一步进行灵敏度测试显示,本研究建立的实时荧光LAMP检测方法最低检测限度为24个拷贝质粒DNA,检出时间亦为30min。通过对66份待检样品的检测结果显示,实时荧光LAMP检测方法的检出阳性率为7.57%,准确率为100%,高于其他WSSV的检测方法。因此,研究建立的WSSV实时荧光LAMP检测方法,操作简单,反应速度快,特异性好,灵敏度高,成本低廉,可以直观、实时地观察反应的进行情况,适合对虾养殖现场及诊断实验室的WSSV快速检测。

管壳式换热器设计要点综述

管壳式换热器属于多腔容器,且因含管板计算,因此设计复杂。文中通过对管壳式换热器设计要点分类分析,对一些不容易把握的设计问题,提出了建议。文中提出的问题,均来自多年的设计案例。文中还简要介绍了引进设备设计改造的注意事项。文中示例有助于对设计所涉及问题的处置。

EDR软件在管壳式换热器设计中振动分析的运用

管壳式换热器的振动设计在工程设计中经常被忽略,造成换热管破裂并给生产带来不利影响。通过分析诱发换热管振动的机理,换热器壳程横流速度的增加,将引起换热管较大振动甚至共振。由此带来不同程度的磨损甚至断裂。理论参数组成的用于检测换热管振动的振动判据是考量换热器是否承载振动的基础。利用Aspen EDR软件的振动分析功能,有目的地对管壳式换热器设备结构中最可能遭受振动破坏的区段进行分析,解读报告,是一种在设计之初有效避免和消除振动影响的方法。并且可以给出防治换热器振动的多项措施,包括确定多种工况,开停车分析,U型管设计,进料管尺寸,入口环形分布器设置,入口速度限制,压应力检测等等。

番茄红素对人内皮祖细胞增殖、迁移、成管能力的影响观察及其机制探讨

目的 观察番茄红素(Lyc)对人内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、成管能力的影响,并探讨其作用机制。方法 取EPCs,培养24 h后分为4组;A组加入含10%胎牛血清的培养基和ox-LDL(10 mg/L)的培养基培养24 h后弃去上清,再加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养24 h;B组加入含10%胎牛血清和ox-LDL(100 mg/L)的培养基培养48 h;C组加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养48 h;D组加入含10%胎牛血清的培养基培养48 h;比较各组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量。另取EPCs,培养24 h后分为4组;E组首先加入含10%胎牛血清和AMPK抑制剂小分子化合物C(CC)的培养基温箱孵育30 min,然后加入含10%胎牛血清和ox-LDL(10 mg/L)的培养基培养24 h后弃去上清,最后再加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养24 h;F组加入含10%胎牛血清的培养基和ox-LDL(10 mg/L)的培养基培养24 h后弃去上清,再加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养24 h;G组加入含10%胎牛血清和ox-LDL(100 mg/L)的培养基培养48 h;H组加入含10%胎牛血清的培养基培养48 h;比较各组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量。结果 与B组比较,A组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量增加,p62、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量减小(P均<0.05);与B组比较,D组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量增加,p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量减小(P均<0.05)。与F组比较,E组和G组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径减小(P均<0.05);与G组比较,E组p62蛋白相对表达量增加,E组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量和H组p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量减小(P均<0.05)。结论 Lyc可以促进EPCs增殖、迁移和成管能力并增强自噬,其作用机制可能是上调AMPK磷酸化水平,下调mTOR的磷酸化水平,进而抑制mTOR信号通路。